專利名稱：復凝聚法制備枸櫞酸他莫昔芬微膠囊的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬防治乳腺癌藥物制劑制備領域，特別是涉及枸櫞酸他莫昔芬微膠囊的制備方法。
背景技術：
近年來，乳腺癌的發(fā)病率急劇增長。在西方國家，乳腺癌已成為女性頭號死亡原因。 而我國最近幾年來，乳腺癌發(fā)病率也在不斷上升中。據(jù)衛(wèi)生部門的最新報道，我國的上海、 天津、北京、哈爾濱、武漢等特大型城市里，乳腺癌發(fā)病率亦已成為女性的第一或第二號 腫瘤疾病，而在廣大農村地區(qū)，乳腺癌仍排在腫瘤疾病的第9位。近幾年我國每年新增腫 瘤病人約160萬-180萬人，腫瘤病人總數(shù)約為450萬-600萬人。目前乳腺癌的治療主要手段包括手術治療，放射治療，化學治療和內分泌治療。其 中內分泌治療是乳腺癌的重要治療手段，其療效己得到廣泛的認可。乳腺癌內分泌治療已有一百多年的歷史，早在1896年英國學者Beastson首先報道卵巢切除成功地控制絕經前 乳腺癌的進展，成為乳腺癌內分泌治療的第一個里程碑。盡管從20世紀30年代即開始使 用內分泌藥物治療乳腺癌，但效果不那么理想。直到1971年，第一個抗雌激素藥物枸橡 酸他莫昔芬研制成功，成為乳腺癌內分泌治療的第二個里程碑。但到目前為止，枸櫞酸他 莫昔芬的劑型主要是片劑，它有藥物釋放時間短，對胃腸刺激大等缺點。 發(fā)明內容本發(fā)明的目的是提供一種復凝聚法制備枸櫞酸他莫昔芬微膠囊的方法，該方法反應條 件簡單，方便，便于工業(yè)化。本發(fā)明的復凝聚法制備枸櫞酸他莫昔芬微膠囊的方法，包括下列步驟(1) 精確稱量一定量的枸櫞酸他莫昔芬，溶于95%乙醇中，超聲溶解，然后加入阿拉伯膠溶液 于水浴超聲，再加入等量的明膠ZK溶液，7K浴攪拌，控制好囊心囊材質量比；(2) 在攪拌過程中，用10。/。的乙酸將pH值調到4.(M.3，加入一定量的蒸餾7jC進fi^釋，高速 攪拌半小時，置冰浴中急速降溫至(MO'C，再加入交聯(lián)劑固化0.5~1小時；(3) 用20%NaOH溶液將pH值調到8~9，在(K10'C高速攪拌，固化3~4小時，離心，洗 滌，冷凍減壓干燥，得到枸櫞酸他莫昔芬微膠囊。所述的明膠是B型，等電點是4.7-5.0;所述步驟(1)中的明膠和阿拉伯膠溶液的質量百分比濃度是3%~5%。 所述步驟(1)中的7K浴,是4(K55'C。
所述步驟(1)中的攪拌速度是300~500轉/分。所述步驟(1)中的囊心(枸櫞酸他莫昔芬)、囊材(明膠、阿拉伯膠)的質量比是1:2 1:5。 所述步驟(2)中的蒸餾水用量為原溶液的1 2倍。 所述步驟(2)中的攪拌速度是1500-3000轉/分。 所述步驟(2)中的交聯(lián)劑是戊二醛、甲醛。 本發(fā)明的有益效果(1) 本發(fā)明的制備方法簡單，原料來源方便，便于工業(yè)化；(2) 制備的微膠囊在光學顯微鏡觀察具有很好的圓形形態(tài)，微膠囊的平均包封率為 67.35%、平均藥物含量為11.61%、平均粒徑尺寸為22.6nm;(3) 制備的微膠囊在體外釋放符合一級動力學釋放規(guī)律，藥物完全釋放時間可達12h以 上，比普通片劑釋放時間延長了一倍以上，可以作為防治乳腺癌的藥物緩釋劑型。
圖1是制備的枸橡酸他莫昔芬微膠囊的顯微鏡照片； 圖2是制備的枸櫞酸他莫昔芬微膠囊的掃描電鏡照片； 圖3是枸櫞酸他莫昔芬的紅外圖譜；圖4是明膠的紅外圖譜；圖5是阿拉伯膠的紅外圖譜；圖6是枸櫞酸他莫昔芬微膠囊的紅外圖譜；圖7是枸櫞酸他莫昔芬微膠囊的體外釋放曲線；圖8是市售他莫昔芬片劑的體外釋放曲線。
具體實施方式
下面結合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明 而不用f限制本發(fā)明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內容之后，本領域技術 人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限 定的范圍。實施例1(1)枸櫞酸他莫昔芬微膠囊的制備稱取枸櫞酸他莫昔芬500mg，用20mL95。/。乙醇超聲溶解，加入3%的阿拉伯膠水溶液 40mL，控溫在4(TC 45'C攪拌，攪拌速度是400轉/分，再加入40mL3n/。的明膠水溶液。攪 拌過程中緩慢滴加10n/。的冰醋酸將pH調至4.22，再加入35'C左右的蒸餾水100mL，高速
攪拌，攪拌速度3000轉/分，待溶液自然降溫至3(TC以下時，置冰浴急速降至l(TC后，加 入37。/。甲醛2mL，固化0.5h，用20%NaOH調至pH8~9，在冰浴中繼續(xù)攪拌，固化3h，離 心，用水洗凈至無甲醛，冷凍減壓干燥，得到成品微膠囊。(2) 微膠囊的形態(tài)和粒徑尺寸 通過光學顯微鏡和掃描電鏡拍攝的微膠囊照片(圖l，圖2)，可以看到，研究所得的微囊具有很好的圓形形態(tài)。用校正過的帶目鏡測微尺的顯微鏡測微囊的粒徑大小，發(fā)現(xiàn)所 得微膠囊的直徑在15 25jtm， 500個微膠囊的平均粒徑為22.6pm。(3) 紅外光譜鑒定用NEXUS-670型紅外一拉曼儀對純枸櫞酸他莫昔芬、純明膠、純阿拉伯膠以及所得 的微膠囊進行的紅外掃描。從圖中可以看出，枸櫞酸他莫昔芬的苯環(huán)在1610 cnT1、 1513 cm'1、 1170cm"和704cm"的吸收峰(圖3)，明膠和阿拉伯膠的羥基、羰基吸收峰(圖4， 圖5)，都出現(xiàn)在了微膠囊的紅外圖譜中(圖6)，這說明微膠囊中含有枸櫞酸他莫昔芬， 明膠和阿拉伯膠。并且可以看到，微膠囊中的枸櫞酸他莫昔芬的苯環(huán)在上述位置的吸收強 度(1553 cm"、 1443 cm"、 1074 cm"和701 cm")都比純枸櫞酸他莫昔芬的低，這說明微 膠囊中的枸櫞酸他莫昔芬是被明膠和阿拉伯膠包裹著的。(4) 枸櫞酸他莫昔芬含量及包封率測定① 枸櫞酸他莫昔芬最大吸收波長的測定 為確定用紫外分光光度法測定枸櫞酸他莫昔芬含量的測定波長，研究中用UV-2102PC型紫外可見分光光度計對枸櫞酸他莫昔芬的最大吸收波長進行了測定，測定步驟為精密 稱取20mg枸櫞酸他莫昔芬，用95%的乙醇溶液溶解，以95%的乙醇溶液為空白，在200 400nm間作紫外掃描，便可得到最大吸收波長為276nm。② 標準曲線制備精密稱取50mg枸櫞酸他莫昔芬，用95%的乙醇溶液溶解，轉移至50mL容量瓶中定 容，得1.000mg/mL的枸櫞酸他莫昔芬對照液。精密吸取對照液0.05、 0.1、 0.15、 0.2、 0.25、 0.3mL,在試管中分別用95Q/。的乙醇定容至5mL。按照分光光度法在枸櫞酸他莫昔芬的最 大吸收波長處測定吸光度。并以枸櫞酸他莫昔芬濃度為縱坐標、吸光度為橫坐標作圖得到 枸櫞酸他莫昔芬乙醇溶液的標準曲線。通過線性回歸得到枸櫞酸他莫昔芬濃度C對吸光度 A的回歸方程為C=0.0446A-0.0065 (R2=0.9994, RSD=0.0518%， n=6, PO.OOOl)。 ③含量及包封率的計算精密稱取50mg枸櫞酸他莫昔芬，并加5mL蒸餾水于試管中，置IOO'C水浴加熱破壞
lh后，轉移至25mL容量瓶中，用95%乙醇定容。用微孔濾膜抽濾，精密吸取濾液lmL， 用95%乙醇定容至20mL。以95%乙醇為空白，在276nm處測得吸光度A，代入回歸方程 并計算，便可得到枸櫞酸他莫昔芬含量為11.61%。然后根據(jù)公式便可以計算得到微膠囊制 備過程中枸櫞酸他莫昔芬的包封率是67.35%。(5) 回收率實驗制備空白的微膠囊，向其中加入枸櫞酸他莫昔芬溶液并使枸櫞酸他莫昔芬的質量濃度 分別為O.l、 0.15、 0.2、 0.25、 0.3mg/mL，按上述藥物含量的測定方法，測定所得溶液的枸 櫞酸他莫昔芬含量，并根據(jù)公式計算得到回收率為99.6%，這表明枸櫞酸他莫昔芬微膠囊 的囊材明膠和阿拉伯膠不干擾枸櫞酸他莫昔芬的測定。(6) 體外釋放實驗利用RCZ-8A型藥物溶出度測定儀進行微膠囊的體外釋放實驗，并計算其藥物累計釋 放量。該藥物體外溶出實驗參照中華人民共和國藥典2000年版二部附錄的溶出度測定方 法一漿法進行溶出介質為經脫氣處理的磷酸鹽緩沖液(pH6.8)，轉速為100rpm，溫度為 36.5~37.5°C。將適量枸櫞酸他莫昔芬微膠囊放進250mL圓底燒瓶中，加入緩沖液，定時取 樣5mL，用微孔濾膜過濾，并補入等量介質，取濾液在276nm處測定其吸光度A，由標準 曲線査出濃度為C (g/mL)，然后公式計算出累計釋放量百分率并繪制釋放曲線。以時間為橫坐標，累計釋放百分率為縱坐標，繪制枸櫞酸他莫昔芬微膠囊及市售普通 片劑的體外釋放曲線，見圖7，圖8?？梢娖胀ㄆ瑒┰趌h之內即釋放了全部藥量的68.9W， 微膠囊需要6小時才能釋放72.3%;普通片劑3h幾乎釋放全部藥量，微膠囊中枸櫞酸他莫 昔芬接近完全釋放的時間超過12h。
權利要求
1.復凝聚法制備枸櫞酸他莫昔芬微膠囊的方法，包括下列步驟(1)精確稱量囊心枸櫞酸他莫昔芬，溶于95％乙醇中，超聲溶解，加入阿拉伯膠溶液，于水浴中超聲，再加入等量的明膠水溶液，水浴攪拌，控制好囊心囊材質量比；(2)在攪拌過程中，用10％的冰醋酸調pH值至4.0～4.3，加蒸餾水進行稀釋，高速攪拌，置冰浴中急速降溫至0～10℃，再加入交聯(lián)劑固化0.5～1小時；(3)用20％NaOH溶液調pH值至8～9，在0～10℃高速攪拌，固化3～4小時，離心，洗滌，冷凍減壓干燥，得到枸櫞酸他莫昔芬微膠囊。
2. 根據(jù)權利要求1所述的復凝聚法制備枸櫞酸他莫昔芬微膠囊的方法，其特征在于所 述的明膠是B型，等電點是4.7~5.0。
3. 根據(jù)權利要求1所述的復凝聚法制備枸櫞酸他莫昔芬微膠囊的方法，其特征在于所 述步驟(1)中的明膠和阿拉伯膠溶液濃度是3°/<^5%。
4. 根據(jù)權利要求1所述的復凝聚法制備枸櫞酸他莫昔芬微膠囊的方法，其特征在于所 述步驟(1)中的7jC浴溫度是4(K55'C。
5. 根據(jù)權利要求1所述的復凝聚法制備枸櫞酸他莫昔芬微膠囊的方法，其特征在于所述 步驟(1)中的攪拌速度是300~500轉/分。
6. 根據(jù)權利要求1所述的復凝聚法制備枸櫞酸他莫昔芬微膠囊的方法，其特征在于所述 步驟'O中的，囊心(枸櫞酸他莫昔芬)、囊材(明膠、阿拉伯膠)的質量比是1:2 1:5。
7. 根據(jù)權利要求1所述的復凝聚法制備枸櫞酸他莫昔芬微膠囊的方法，其特征在于所 述步驟(2)中的蒸餾水用量為原溶液的1 2倍。
8. 根據(jù)權利要求1所述的復凝聚法制備枸櫞酸他莫昔芬微膠囊的方法，其特征在于所 述步驟(2)中的攪拌速度是1500-3000轉/分。
9. 根據(jù)權利要求1所述的復凝聚法制備枸櫞酸他莫昔芬微膠囊的方法，其特征在于所述 步驟(2)中的交聯(lián)劑是戊二醛、甲醛。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種復凝聚法制備枸櫞酸他莫昔芬微膠囊，步驟包括(1)稱量囊心枸櫞酸他莫昔芬，溶于95％乙醇中，超聲溶解，加入阿拉伯膠溶液，于水浴中超聲，再加入明膠水溶液，水浴攪拌，控制好囊心囊材質量比；(2)在攪拌過程中，用10％的冰醋酸調pH值至4.0～4.3，加蒸餾水進行稀釋，高速攪拌，置冰浴中急速降溫至0～10℃，再加入交聯(lián)劑固化；(3)用20％NaOH溶液調pH值，在0～10℃高速攪拌，固化，離心，洗滌，冷凍減壓干燥，得到枸櫞酸他莫昔芬微膠囊。該方法簡便、安全，重現(xiàn)性好，制備的微膠囊通過透皮和體外溶出試驗表明，具有較好的緩釋作用，可以作為防治乳腺癌的藥物緩釋劑型。
文檔編號A61K9/50GK101209248SQ20071017274
公開日2008年7月2日 申請日期2007年12月21日 優(yōu)先權日2007年12月21日
發(fā)明者張曉飛, 朱利民, 樊在霞, 馬宗會 申請人:東華大學