專利名稱：金槍魚頭免疫活性物質(zhì)及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物技術(shù)應(yīng)用及魚類資源綜合利用領(lǐng)域，特別是一種金槍魚頭 免疫活性物及其制備方法。
背景技術(shù)：
金槍魚(Tunas)，也稱鮪魚、吞拿魚，分布在太平洋、大西洋和印度洋 的廣闊水域，屬大洋性高度洄游魚類，魚體大而重，成魚可達數(shù)十到上百公斤。 大多數(shù)金槍魚棲息在100 400米深的海域，其洄游范圍限于鹽度高的外洋，較 少接觸到污染較嚴(yán)重的近海和沿岸水域，其肉質(zhì)受到近海的污染程度非常低， 因此金槍魚作為一種深海魚類，素來以營養(yǎng)價值高、純天然、無污染而享譽國 際市場并有"海洋黃金"之稱的金槍魚。金槍魚是世界遠(yuǎn)洋漁業(yè)的重要資源， 世界金槍魚年產(chǎn)量近年來維持在350—400萬噸水平，產(chǎn)值達300億美元，是國際 水產(chǎn)貿(mào)易中的第三大種類。金槍魚除少部分冰鮮銷售外，大部分用于罐頭、生 魚片的加工，在加工過程中產(chǎn)生的下腳料大約占總重量的50% 70%，這些下腳 料包括魚頭、內(nèi)臟、鰓、魚皮等，下腳料中含有大量的蛋白質(zhì)，脂肪、礦物質(zhì)及多種生物活性物質(zhì)，是值得開發(fā)利用的資源。目前，a:、缺乏有效的加工利用方法，國內(nèi)外有很多企業(yè)將金槍魚下腳料加工成飼料魚粉，還有不少企業(yè)直接 將其作為廢物處理，既浪費資源，又造成環(huán)境污染。如何深度開發(fā)這些下腳料 生產(chǎn)高附加值產(chǎn)品，不僅對于金槍魚的綜合利用和保護環(huán)境有重要意義，而且 可以提高金槍魚的利用率和提高企業(yè)的競爭力。海洋生物中不但蛋白質(zhì)含量豐富，而且在長期特異閉鎖環(huán)境中進化的蛋白 質(zhì)組成、結(jié)構(gòu)與功能與陸地動植物有較大差異，因此是生產(chǎn)功能性活性物質(zhì)很 好的特定的蛋白質(zhì)資源。日本、歐美等國把海洋生物中功能性活性物質(zhì)系列產(chǎn) 品的研究與開發(fā)作為發(fā)展海洋保健食品和藥物的一個重要方向。酶水解蛋白質(zhì) 具有反應(yīng)條件溫和、水解過程易控制、安全性高等優(yōu)點。酶水解魚蛋白不僅含有豐富的必需氨基酸、小肽、微量元素、維生素等多種小分子營養(yǎng)成分，具有 生物利用率高等優(yōu)點，而且也含有?；撬帷⑸锘钚噪牡榷喾N活性成分，具有 顯著的保健功效，能滿足人們對營養(yǎng)與保健的雙重追求。它還可廣泛用作海鮮 調(diào)味料、膨化食品和方便、保健食品的基料，除滿足一般消費者家庭需要外， 還適合生長期的嬰幼兒、病后體質(zhì)虛弱者及高血壓患者作飲食佐料，其產(chǎn)品能 以粉狀、液體和糊狀等多種形態(tài)存在，便于按照不同生理狀態(tài)人群、不同作業(yè) 條件下人群的營養(yǎng)特征和市場需求情況，與其它食品物料充分混合在一起，重 新加工成豐富多彩的海洋工程食品，具有很好的發(fā)展前景，市場潛力巨大。免疫功能是人體重要的防御功能，時刻保護了機體不受病菌的侵害，維持 著自身內(nèi)部系統(tǒng)的穩(wěn)定。環(huán)境污染的不斷加劇，現(xiàn)代疾病發(fā)病率的上升，愛滋 病的危害，使人們對免疫缺損的嚴(yán)重后果有了更深刻的認(rèn)識，因此尋找具有良好 免疫調(diào)節(jié)作用的保健食品與藥物越來越受到世界各國科學(xué)工作者的關(guān)注。在功 能食品和保健食品中，免疫強化食品是重要組成部分，長期以來，增強免疫功 能食品一直受廣大消費者歡迎，其銷量一直呈穩(wěn)定增長勢頭。尋找具有良好免 疫調(diào)節(jié)作用的活性物質(zhì)，研究開發(fā)免疫功能增強食品，對增強機體免疫機能及 有關(guān)病人的體質(zhì)恢復(fù)具有重要意義。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種金槍魚頭免疫活性物質(zhì)及其制備方法，用兩種蛋 白酶同時水解金槍魚頭蛋白，經(jīng)離心分離、超濾得到富含肽等具有免疫活性的 蛋白水解液，水解液進一步可加工成口服液、膠囊、片劑等，同時還可得到富 含多不飽和脂肪酸的魚油，達到變廢為寶、綜合、高效利用金槍魚頭的目的。為實現(xiàn)上述發(fā)明目的本發(fā)明采取的技術(shù)方案是金槍魚頭免疫活性物質(zhì)的制 備方法，按以下步驟(1) 前處理金槍魚頭清洗后，經(jīng)80 90。C水煮10 15分鐘后取肉攪碎；(2) 蛋白酶水解采用中性蛋白酶與木瓜蛋白酶雙酶同時水解，肉與水按重量比為1:1.5 1 : 2,pH6.8 7. 0，溫度50 55。C,時間2.5 3小時，中性蛋白酶1400IU/g原料， 木瓜蛋白酶1100KJ/g,水解結(jié)束后升溫至85 9(TC滅酶10分鐘；(3)油水分離:水解液經(jīng)離心去渣,濾液經(jīng)離心進行油水分離，分別得到蛋水解液及魚油；(4)分級分離用超濾膜分離蛋白水解液，得到免疫活性物質(zhì)。所述步驟(3)制得的金槍魚水解蛋白液中加入調(diào)配物，按常規(guī)制得口服液、 膠囊或片劑；所述油相為金槍魚頭魚油。一種金槍魚頭免疫活性物質(zhì)，它是對金槍魚頭進行中性蛋白酶與木瓜蛋白 酶雙酶同時水解經(jīng)離心、超濾分離制備所得。該金槍魚頭免疫活性物質(zhì)，其分子量范圍在12000 3000道爾頓之間。本發(fā)明具有以下優(yōu)點1、 本發(fā)明工藝科學(xué)合理，利用生物酶法水解制備免疫活性物質(zhì)，反應(yīng)過程 溫和、易于控制，安全性高；2、 本發(fā)明制備的金槍魚頭免疫活性物質(zhì)明顯促進小鼠體液免疫、非特異性 免疫功能，提高或明顯促進小鼠細(xì)胞免疫功能；3、 本發(fā)明制備的金槍魚頭水解蛋白是天然魚蛋白經(jīng)過生物酶降解得到的產(chǎn) 物，營養(yǎng)豐富，易于吸收，可廣泛用作營養(yǎng)保健食品、海鮮調(diào)味料、膨化食品 等，也可作為病人的康復(fù)食品。4、 本發(fā)明制備的魚油也可進一步處理成為富含DHA和EPA保健魚油，可開 發(fā)成具有預(yù)防和治療心血管疾病、健腦益智等功能性產(chǎn)品，具有廣闊的市場前 景。
具體實施方式
本發(fā)明結(jié)合實施工藝實例做進一步說明-金槍魚頭解凍清洗后，于帶夾層的貯罐中經(jīng)80-9CTC水煮10-15分鐘，使骨 肉分離。人工將肉等可食部分與骨頭分離，經(jīng)絞肉機絞碎；在帶攪拌器的反應(yīng) 釜中按照下列條件酶解溫度5(TC，肉水按重量比為l: 2， p朋.8，中性蛋白 酶1400IU/g原料，木瓜蛋白酶1100IU/g原料，同時加入2種酶，水解2.5小時， 水解結(jié)束，升溫至85-90'C滅酶10分鐘；水解液經(jīng)三足式離心機過濾后，濾液由 離心機進行油水分離，水相即蛋白水解液經(jīng)超濾分級分離得到免疫活性物質(zhì)， 加入調(diào)配物即制得口服液、膠囊或片劑；油相即為金槍魚頭魚油。其中中性蛋 白酶為枯草芽孢桿菌中性蛋白酶。對金槍魚頭進行中性蛋白酶與木瓜蛋白酶雙酶同時水解經(jīng)超濾分離所制備的金槍魚頭免疫活性物質(zhì)，其分子量范圍在12000 3000道爾頓之間。
權(quán)利要求
1、一種金槍魚頭免疫活性物質(zhì)的制備方法，按以下步驟(1)前處理金槍魚頭清洗后，經(jīng)80～90℃水煮10～15分鐘后取肉攪碎；(2)蛋白酶水解采用中性蛋白酶與木瓜蛋白酶雙酶同時水解，肉與水按重量比為1∶1.5～1∶2，pH6.8～7.0，溫度50～55℃，時間2.5～3小時，中性蛋白酶1400IU/g原料，木瓜蛋白酶1100IU/g，水解結(jié)束后升溫至85～90℃滅酶10分鐘；(3)油水分離水解液經(jīng)離心去渣，濾液經(jīng)離心進行油水分離，分別得到蛋白水解液及魚油；(4)分級分離用超濾膜分離蛋白水解液，得到免疫活性物質(zhì)。
2、 據(jù)權(quán)利要求1所述金槍魚頭免疫活性物質(zhì)的制備方法，其特征在于所 述步驟(3)制得的金槍魚水解蛋白液中加入調(diào)配物，按常規(guī)制得口服液、膠囊 或片劑；所述油相為金槍魚頭魚油。
3、 一種金槍魚頭免疫活性物質(zhì)，其特征在于是對金槍魚進行中性蛋白酶與木瓜蛋白酶雙酶同時水解經(jīng)離心、超濾制備所得。
4、 據(jù)權(quán)利要求3所述金槍魚頭免疫活性物質(zhì)，其特征在于其分子量范圍 在12000 3000道爾頓之間。
5、 據(jù)權(quán)利要求3或4所述金槍魚頭免疫活性物質(zhì)，其特征在于明顯促進 小鼠體液免疫、非特異性免疫，提高或明顯促進小鼠細(xì)胞免疫功能。
全文摘要
一種金槍魚頭免疫活性物質(zhì)及其制備方法，其方法步驟為前處理清洗，攪碎；蛋白酶水解采用中性蛋白酶與木瓜蛋白酶雙酶同時水解，油水分離水解液經(jīng)離心去渣，濾液進行油水分離，分別得到蛋白水解液及魚油；分級分離用超濾膜分離蛋白水解液，得到金槍魚頭免設(shè)活性物質(zhì)。本發(fā)明用兩種蛋白酶同時水解金槍魚頭蛋白，經(jīng)離心分離得到富含肽等具有免疫活性的蛋白水解液，水解液進一步可加工成口服液、膠囊、片劑等，同時還可得到富含多不飽和脂肪酸的魚油，達到變廢為寶、綜合、高效利用金槍魚頭的目的。該金槍魚頭免疫活性物質(zhì)明顯促進小鼠體液免疫、非特異性免疫功能，提高或明顯促進小鼠細(xì)胞免疫功能。
文檔編號A61K9/48GK101249103SQ200710031628
公開日2008年8月27日 申請日期2007年11月19日 優(yōu)先權(quán)日2007年11月19日
發(fā)明者劉書成, 吉宏武, 靜 張, 萍 楊, 洪鵬志, 章超樺, 郝記明 申請人:廣東海洋大學(xué)