專利名稱：地榆總皂苷提取物的新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥提取物的用途，具體地說，涉及一種地榆總皂苷提取物在制備治療或預防人白細胞減少癥的藥物制劑中的用途。
背景技術(shù)：
從世界人口譜、疾病譜來看，腫瘤對于人類健康危害極大，其發(fā)病率呈逐年上升趨勢，而其死亡率則居眾多疾病之首位。在腫瘤的治療方法中，以放療、化療為主的藥物綜合治療仍然是目前腫瘤治療的主要手段和方法。然而放療、化療自身存在難以克服的明顯毒副作用，主要毒副作用首先是骨髓造血功能的抑制，表現(xiàn)為外用血白細胞及血小板的明顯降低，這一毒副作用嚴重制約放、化療順利進行和療效發(fā)揮。
目前針對放化療所導致白細胞減少癥主要采用各類藥物治療，包括各種中藥制劑，如人參、當歸、黃芪、阿膠、白術(shù)、補骨脂、刺五加枸杞子等組成的單味及復方制劑[中國中醫(yī)藥信息雜志.2001，8(5)18]；西藥制劑，如鯊肝醇、白血生、利血生、肌苷、維生素B4(新編藥物學.人民衛(wèi)生出版社.14版，402)，但上述中、西藥物的臨床療效都較為有限。近年來，新的生物制劑如粒細胞集落刺激因子(G-CSF)，粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)開始應(yīng)用于臨床，其升白作用顯著，但價格昂貴。目前，針對腫瘤放、化療所致的白細胞減少癥，以及其他原因引起的白細胞減少癥，臨床仍然缺乏療效顯著、價格低廉、使用方便的治療藥物。
地榆屬Sanguisorba I..系薔薇科多年生草本植物，生長在山地灌木叢、草原、山坡、田岸。我國有7種，南北均有分布，主要品種有地榆Sanguisorbaofficinalis，長葉地榆S.longifolia，矮地榆S.filiformis，小白花地榆S.parviflora，細葉地榆S.tenuifolia，小地榆S.minor，高山地榆S.alpinaBge.，白花地榆S.sitchensis。據(jù)2000版《中國藥典》(一部)和《中華本草》(上?？茖W技術(shù)出版社，1999年9月第1版，第四卷.281)記載，中藥地榆為薔薇科植物地榆(Sanguisorba officinalis L.)或長葉地榆(Sanguisorba officinalis L.var.Longifolia(Bettol.)Yüet Li)的根。全國大部分地區(qū)均產(chǎn)，春秋季采挖，除去地上莖葉，洗凈曬干。其根呈圓柱形，略扭曲狀彎曲，表面棕褐色，具明顯縱皺。質(zhì)堅，稍脆，折斷面平整，略具粉質(zhì)。氣微，味微苦澀。地榆為常用中藥，其功能主治為涼血止血，清熱解毒，消腫斂瘡。主治吐血、咯血、衄血、尿血、便血、痔血、血痢、崩漏、赤白帶下、瘡癰腫痛、濕疹、陰癢、水火燙傷、蛇蟲咬傷。
現(xiàn)代研究表明，地榆主要含多種鞣質(zhì)、三帖及其苷、黃酮類、糖類和無機微量元素，其中含鞣質(zhì)達17-25％，皂苷2.5-4％[地榆屬植物研究進展.中草藥.1996，27(增刊)213；中藥化學.上海人民出版社.1975]。地榆具有止血、抗炎、促進傷口愈合、抗菌、鎮(zhèn)吐等多方面藥理活性，毒理研究表明地榆水提液及醇提液的毒性極小。進一步研究已發(fā)現(xiàn)，地榆所含鞣質(zhì)及多元酚具有較強的止血作用，但現(xiàn)有研究對地榆皂苷類成分及其活性研究較少，尚無地榆總皂苷提取物及其治療白細胞減少癥的有關(guān)文獻記載或研究報道。
發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有的治療白細胞減少癥治療藥物的缺陷，本發(fā)明提供一種具有升高白細胞作用的地榆總皂苷提取物及其制備方法，該提取物可作為升白藥物應(yīng)用于人類白細胞減少癥的治療及預防。
本發(fā)明的技術(shù)方案是提供一種地榆總皂苷提取物，其含有地榆總皂苷，其重量百分比為10～90％。更進一步，其含有重量百分比為40～90％的地榆總皂苷。
本發(fā)明所述的地榆總皂苷提取物中，含有一種或幾種具有以下化學結(jié)構(gòu)的三萜類皂苷
地榆皂苷-I3-O-α-L-阿拉伯糖基-19α-羥基烏索-12烯-28-羧酸-28-O-β-D-葡萄糖基酯(ziyu-glycoside I)。
地榆皂苷-II19α-羥基烏索-12烯-28-羧酸-3-α-O-L-阿拉伯糖苷(ziyu-glycoside II)。
3β[(α-L-阿拉伯糖)羥基]烏索-12，19(29)-二烯-28-羧酸-28-O-β-D-葡萄糖基。
2α，3α，19α-三羥基烏索-12烯-28-羧酸-28-O-β-D-葡萄糖基酯。
所述的地榆總皂苷提取物，是由地榆屬(Sanguisorba)植物提取獲得的。更具體的，是從地榆[Sanguisorba officinalis L.]或長葉地榆[Sanguisorbaofficinalis L.var.Longifolia(Bettol.)Yüet Li]中提取獲得，最優(yōu)選的提取物是自中藥地榆提取獲得的。
本發(fā)明還提供上述地榆總皂苷提取物的制備方法，包括以下步驟a、將原藥材經(jīng)過適當粉碎后，用水、甲醇或乙醇，或含水醇類，室溫或加熱(包括回流)提取1～3小時，可重復提取1～3次，然后濾去藥渣，濾液在常壓或減壓下濃縮至一定濃度，靜置備用。
b、將上述提取濃縮液用聚酰胺柱吸附，然后用濃度為30-90％的乙醇洗脫柱子，洗脫液減壓回收后，可重復用聚酰胺柱吸附1～3次，得浸膏，經(jīng)真空或冷凍干燥成干粉。
其中，提取溶劑以50～90％乙醇溶液較好。乙醇溶液用量為藥材重量的6～12倍，8倍為佳。洗脫液為60～90％乙醇，以70％為佳。以上制備的干粉，為淺黃色固體物質(zhì)，味微苦。其中所含總皂苷為總重量的10％～90％。
以上制備的干粉，即地榆總皂苷提取物，為淺黃色固體物質(zhì)，味微苦。其中所含地榆總皂苷為總重量的10％-90％。地榆總皂苷提取物參照文獻[Triterpene glycosides from the roots Sanguisorbaofficindis，Phytochenistry，57(5)，773-779，2001]可分離鑒定和制備得到地榆皂苷-I3-O-α-L-阿拉伯糖基-19α-羥基烏索-12烯-28-羧酸-28-O-β-D-葡萄糖基酯(ziyu-glycoside I)；地榆皂苷-II19α-羥基烏索-12烯-28-羧酸-3-α-O-L-阿拉伯糖苷(ziyu-glycoside II)；3β[(α-L-阿拉伯糖)羥基]烏索-12，19(29)-二烯-28-羧酸-28-O-β-D-葡萄糖基；2α，3α，19α-三羥基烏索-12烯-28-羧酸-28-O-β-D-葡萄糖基酯等多種皂苷成分。
上述地榆總皂苷提取物，用于制備治療或預防人白細胞減少癥的藥物制劑中，該藥物制劑中含有上述地榆總皂苷或為含有地榆總皂苷的復方，即配伍有其他升高白細胞的西藥或中藥活性成分。所述制劑是口服片劑、膠囊、口服液或注射液。
①片劑包括普通片、薄膜片、腸溶片等。用上述總皂苷干粉，加入適量稀釋劑如淀粉、糊精、甘露醇、微晶纖維等，適量的粘合劑如水、乙醇、淀粉漿、明膠、纖維素等，適量的崩解劑如干淀粉、羧甲基淀粉鈉、海藻酸鈉等，以及適量的潤滑劑如硬脂酸鎂、滑石粉、聚乙二醇等，按常規(guī)濕法制粒，干燥后整?；蚋煞ㄖ屏：髩浩?。如是包薄膜衣片，可用成膜材料如纖維素類、聚乙二醇類等，按常規(guī)包衣，分裝入密閉瓶或鋁塑板中。
②膠囊劑包括普通膠囊劑、腸溶膠囊劑等。將上述總皂苷干粉加入適量輔料如淀粉、碳酸鈣、甘露醇、氧化鎂、微粉硅膠等，適量潤滑劑如滑石粉、硬脂酸鎂、乙二醇酯，聚硅酮類等，以及適量的黏合劑如礦物油、食油等，混合成干粉或制成顆粒，填充入膠囊，分裝如密閉鋁塑包裝中。以上各劑型可加入適量甜味劑，如D-木糖，木糖醇、麥芽糖醇、甜葉菊素、天冬甜母等。
③口服液口服液制備過程中，用上述地榆總皂苷干粉加入藥用添加劑，如懸浮劑(如山梨醇糖漿、纖維素衍生物、葡萄糖/蔗糖糖漿、明膠、硬脂酸鋁膠或氫化食用脂肪)；乳化劑(例如卵磷脂、阿拉伯膠或失水山梨醇-油酸酯)；非水載體(例如杏仁油、油狀酯、乙醇或精煉植物油)；以及防腐劑(例如對羥基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯或山梨酸)。根據(jù)需要，液體制劑還可以含有已知的緩沖劑、矯味劑和芳香成分、染料和甜味劑。
④注射液用上述地榆總皂苷干粉，加入藥用輔劑，如懸浮劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑和/或調(diào)節(jié)溶液滲透壓的試劑，可配制成注射劑，優(yōu)選肌肉、靜脈注射液。
本發(fā)明還提供一種藥物組合物，其含有所述的地榆總皂苷提取物，或者含有所述的地榆總皂苷提取物與其他升高白細胞的西藥或中藥活性成分配伍成的復方。
按照本發(fā)明，可以將上述地榆總皂苷提取物與其他中藥和/或其他化學藥物共同組成中藥復方或中西藥復方制劑，并按照常規(guī)方法制成口服片劑、膠囊、口服液、注射液等多種劑型。
本發(fā)明的有益效果是由于地榆總皂苷提取物具有良好的升高白細胞作用，可將其制成口服片劑、膠囊等多種劑型，適用于不明原因的原發(fā)性白細胞減少癥，尤其是腫瘤放、化療引起白細胞減少癥，以及其他藥物所致白細胞減少癥的治療，具有療效顯著、價格低廉、使用方便等優(yōu)勢特點。
顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
以下通過實施例形式的具體實施方式
，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進一步的詳細說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
具體實施例方式
實施例1地榆總皂苷提取物的制備地榆1000g，粉碎后加70％乙醇溶液8L，加熱回流提取1.5小時，濾渣再加6L70％乙醇溶液，加熱回流提取1小時，過濾。合并兩次濾液，濃縮至一定濃度，靜置備用。取聚酰胺裝柱，將上述提取液用聚酰胺柱吸附，然后用濃度為70％的乙醇洗脫柱子，收集洗脫液，洗脫液減壓回收乙醇得浸膏后，加水加熱溶解，再重復用聚酰胺柱吸附1次，最后得浸膏，真空干燥成干粉，得24g地榆總皂苷提取物，其地榆總皂苷含量為總重量的55％。
實施例2地榆總皂苷提取物對60Co-γ所致小鼠骨髓損傷的保護作用昆明種小鼠60只，雌雄各半，分為6組正常對照組、模型對照組、地榆總皂苷提取物(為實施例1所得地榆總皂苷提取物)高、中、低劑量組，鯊肝醇組。以上6組動物，除正常對照組動物外，其余5組動物均在給藥前1天用60Co-γ射線照射一次，劑量為4Gy，24小時后再隨機分為5組，除正常對照組和模型對照組灌胃蒸餾水0.4ml/只，其余各組按不同劑量灌胃給藥，每日1次，連續(xù)7日。末次給藥24小時，拔除小鼠眼球取血，檢測血中WBC(白細數(shù)總數(shù))、RBC(紅細胞數(shù))、PLT(血小板數(shù))，結(jié)果見表1。
表1地榆總皂苷提取物對60Co照射損傷小鼠血液學的影響(X±SD)
注模型組與正常對照組比較，ΔΔp＜0.01藥物治療組與模型組比較，*p＜0.05，**p＜0.01表1結(jié)果顯示，地榆總皂苷提取物各劑量與模型對照組比較有極顯著性或顯著性差異，即地榆總皂苷提取物對60Co-γ照射所致外用血白細胞減少有明顯保護作用，大、中劑量組療效優(yōu)于陽性對照藥鯊肝醇組。
實施例3地榆總皂苷提取物對環(huán)磷酰胺致小鼠白細胞減少的治療作用昆明種小鼠67只，雌雄各半，隨機分為6組，即正常對照組，環(huán)磷酰胺模型對照組(Cy組)，Cy+地榆總皂苷提取物(為實施例1所得地榆總皂苷提取物)高、中、低劑量組，Cy+鯊肝醇組。除正常對照組外，其余各組小鼠均腹腔注射環(huán)磷酰胺(Cy)150mg/kg造成白細胞減少癥模型。于注射Cy當日開始按正常組和Cy模型對照組分別按20ml/kg給予蒸餾水。其余各組按不同劑量分別給予不同藥物，每日1次，灌胃給藥，連續(xù)10天。末次給藥后24小時后，摘眼球取血，并檢測血中白細胞總數(shù)WBC，結(jié)果見表2。
表2結(jié)果顯示，地榆總皂苷提取物各劑量與模型對照組比較有極顯著性或顯著性差異，即地榆總皂苷提取物對環(huán)磷酰胺所致外周血白細胞減少有明顯保護作用。
表2地榆總皂苷對環(huán)磷酰胺致小鼠白細胞減少的影響(X±SD)
注模型組與正常對照組比較，ΔΔp＜0.01藥物治療組與模型組比較，*p＜0.05，**p＜0.01通過以上藥理實驗可以證明，本發(fā)明的地榆總皂苷提取物，對骨髓損傷及白細胞減少有明顯的治療作用。
實施例4片劑的制備片劑組成地榆總皂苷提取物0.5gHPMCLV10030g乳糖70g硬脂酸鎂1g(共制成1000片)地榆總皂苷、HPMC、乳糖混勻，以75％乙醇為粘合劑制濕顆粒，過22目篩，50℃干燥3h，22目篩整粒，加入硬脂酸鎂混勻壓片，每片重0.1g，用于白細胞減少癥患者，口服，每日三次，每次1片，一月為一療程。
實施例5膠囊劑的制備膠囊組成地榆總皂苷提取物 0.5g淀粉 100g硬脂酸鎂 1g(共制成1000粒)地榆總皂苷提取物、淀粉、硬脂酸鎂，混勻，裝膠囊。每粒裝100mg，用于白細胞減少癥患者，口服，每日三次，每次1片，一月為一療程。
實施例6注射液的制備注射液組成地榆總皂苷提取物 0.5g吐溫80 10ml氯化鈉 8g(共制成1000ml)地榆總皂苷提取物，加10％Na2CO3調(diào)PH至7.0-7.5，冷藏濾過，加吐溫-80，NaCl，加注射用水至1000ml，G3垂熔漏斗(玻璃)濾過，分裝，灌封，100℃流通蒸氣滅菌30min即得。
實施例7復方片劑的制備用地榆總皂苷提取物制備復方制劑，取地榆總皂苷提取物0.5g，人參總皂甙200g，黃芪總皂苷200g，按常規(guī)方法，加入相應(yīng)輔料，制成片劑或膠囊。每粒裝200mg，用于白細胞減少癥患者，口服，每日三次，每次1片，一月為一療程。
權(quán)利要求
1.地榆總皂苷提取物在制備治療或預防人白細胞減少癥的藥物制劑中的用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于所述的地榆總皂苷提取物中含有地榆總皂苷，其重量百分比為10～90％。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于所述的地榆總皂苷提取物中含有地榆總皂苷，其重量百分比為40～90％。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的用途，其特征在于所述的地榆總皂苷提取物中含有一種或幾種具有以下化學結(jié)構(gòu)的三萜類皂苷 地榆皂苷-I3-O-α-L-阿拉伯糖基-19α-羥基烏索-12烯-28-羧酸-28-O-β-D-葡萄糖基酯； 地榆皂苷-II19α-羥基烏索-12烯-28-羧酸-3-α-O-L-阿拉伯糖苷； 3β[(α-L-阿拉伯糖)羥基]烏索-12，19(29)-二烯-28-羧酸-28-O-β-D-葡萄糖基； 2α，3α，19α-三羥基烏索-12烯-28-羧酸-28-O-β-D-葡萄糖基酯。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項所述的用途，其特征在于所述的地榆總皂苷提取物是由地榆屬Sanguisorba植物提取獲得。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于所述的地榆總皂苷提取物是從地榆Sanguisorba officinalis L.或長葉地榆Sanguisorba officinalis L. var.Longifolia(Bettol.)Yüet Li中提取獲得。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項所述的用途，其特征在于所述的地榆總皂苷提取物的制備方法包括以下步驟a、將原藥材經(jīng)過適當粉碎后，用水、甲醇或乙醇，或含水醇類，室溫或加熱提取1～3小時，可重復提取1～3次，然后濾去藥渣，濾液在常壓或減壓下濃縮至一定濃度，靜置備用；其中，加熱方法包括回流加熱；b、將上述提取濃縮液用聚酰胺柱吸附，然后用濃度為30-90％的乙醇洗脫柱子，洗脫液減壓回收后，可重復用聚酰胺柱吸附1～3次，得浸膏，經(jīng)真空或冷凍干燥成干粉。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項所述的用途，其特征在于所述的藥物是以地榆總皂苷提取物為活性成分，加上藥學上可接受的輔料或輔料性成分制備而成的藥物制劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于所述的藥物制劑中還配伍有其他升高白細胞的西藥或中藥活性成分。
10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的用途，其特征在于所述的藥物制劑是口服片劑、膠囊、口服液或注射液。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種地榆總皂苷提取物的新用途。具體地，是在制備治療或預防人白細胞減少癥的藥物制劑中。本發(fā)明的有益效果是由于地榆總皂苷提取物具有良好的升高白細胞作用，可將其制成口服片劑、膠囊等多種劑型，適用于不明原因的原發(fā)性白細胞減少癥，尤其是腫瘤放、化療引起白細胞減少癥，以及其他藥物所致白細胞減少癥的治療，具有療效顯著、價格低廉、使用方便等優(yōu)勢特點。
文檔編號A61P35/00GK1935147SQ200610152370
公開日2007年3月28日 申請日期2003年11月25日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月2日
發(fā)明者鄒文俊, 劉忠榮, 付鐵軍, 劉豫, 及元喬, 王若竹, 喻凱 申請人:成都地奧制藥集團有限公司