專利名稱：一種腦肽口服劑及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種腦肽口服劑及其制備方法，更具體地說是一類記憶增強肽口服劑及其制備方法。
背景技術：
有關影響記憶的多肽的研究及應用在醫(yī)學等領域用途廣泛，但有關的報道較少。
中國發(fā)明專利93112493.X(記憶增強肽及其應用)公開了一種能促進學習和記憶功能的合成多肽，即記憶增強肽(MEP)。經(jīng)過化學模擬設計，分子動力學推算和結合合成肽的活性動能測定，該合成肽可制成各種形式的藥物和飲料食品，用于保健或治療學習記憶障礙，例如促進大腦早期發(fā)育，加強成年學習記憶和治療老年病癡呆癥等。
中國發(fā)明專利00116876.2(一類記憶增強肽和它們的用途)在上述專利的基礎上，繼續(xù)對合成多肽的結構進行改造，進行藥理試驗，改進已有多肽存在的缺陷；該多肽可通過固相多肽合成法或液相多肽合成法制得，合成步驟如下
反應過夜。
反應過夜。
同上1，2處理。
該專利公開的新記憶增強肽結構簡單、生產(chǎn)便利、藥理作用更強，并能在臨床上對未成年兒童智力發(fā)育、成年人智力障礙及健忘癥、人的記憶功能改善起到促進作用。
發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是提供一種使用方便、吸收利用快、效果好的腦肽口服劑。
本發(fā)明的另一目的是提供上述口服劑的制備方法。
本發(fā)明所述的腦肽口服劑中包含有溶于藥用溶劑的有效量的記憶增強肽，該記憶增強肽的化學結構式為 其中，所述的X為Ala、Leu、Ile、Cys、Phe、Tyr或Val；所述的R1為PyroGlu或H；所述的R2為S-S-C(CH3)3或S-C(CH3)3。
本發(fā)明所述的腦肽口服劑中，記憶增強肽的用量按無水醋酸鹽計。
所述的腦肽口服劑，可以為口服液；該口服液中還可以含有矯味劑、穩(wěn)定劑。
所述的腦肽口服劑，可以為片劑。
所述的腦肽口服劑，可以為顆粒劑。
本發(fā)明所述的腦肽口服劑是將所述記憶增強肽溶于可藥用的溶劑中得到。
上述的腦肽口服液的制備方法中還可以進一步增加將藥用穩(wěn)定劑、防腐劑加入的步驟；得到的記憶增強肽溶液應使用緩沖液進行pH的調整，pH應調至4.0-7.5。
所述的腦肽口服片劑的制備方法，可以是將所述記憶增強肽與矯味劑、穩(wěn)定劑、防腐劑及藥用制片輔劑按一般藥用制片工藝混合壓片。
所述的腦肽口服劑的制備方法，可以是將所述記憶增強肽與矯味劑、穩(wěn)定劑、防腐劑及藥用輔劑按一般藥用制粒生產(chǎn)工藝混合制粒。
上述的腦肽口服劑包括口服液、片劑、顆粒劑，對黏膜均無刺激性。
經(jīng)動物口服給藥試驗表明，能改善該類記憶受障動物學習易化和提高記憶保存率，且雌雄相近。
臨床研究表明1、在記憶增強肽口服液促進兒童智力、記憶力發(fā)展雙盲對照中就試驗前后兒童智力測驗，記憶增強肽口服液組受試者的韋氏兒童智力各分量表分、操作智商、言語智商、總智商均有提高，除算術分量表外，差異有顯著性；言語、操作及總智商在試驗后分別平均提高了18.7分、17.6分、19.0分，而安慰劑組受試者韋氏兒童智力測驗各量表分除填圖和排列外改變均不明顯，甚至個別分量表有降低的趨勢，試驗前后差異無顯著性，安慰劑組受試者的言語、操作及總智商在試驗后分別平均提高8.9分、11.2分、9.9分。兩組比較，記憶增強肽組明顯高于安慰劑組，差異有高度顯著性。
就試驗前后兒童智力測驗，記憶增強肽口服液組受試者的韋氏兒童記憶各分量表分、記憶商均有提高，除積累分量表外，差異均有顯著性，記憶商在試驗后平均提高了19.6分，而安慰劑組受試者韋氏兒童記憶各量表分，試驗前后差異均無顯著性，甚至個別分量表有降低的趨勢，記憶商在試驗后平均提高7.0分。兩組比較，記憶增強肽組明顯高于安慰劑組，差異有高度顯著性。
且未發(fā)現(xiàn)記憶增強肽口服液有任何毒副作用，服用安全。
2、記憶增強肽口服液治療腦器質性記憶障礙的雙盲對照研究中記憶增強肽口服液能明顯提高器質性記憶障礙患者的記憶能力，在治療結束后，記憶增強肽口服液組患者的記憶商平均提高14.0分，其各分量表也有不同程度的提高，治療前后除再生、理解和背數(shù)分量表外，其它分量表分差異均有顯著性；安慰劑組僅提高不到4分。兩組相比，差異有高度顯著性。
記憶增強肽口服液組改善記憶障礙的有效率和顯效率分別為20.8％和54.2％，總有效率為75.0％，安慰劑組改善記憶障礙的有效率和顯效率分別為20.0％和6.7％，總有效率為26.7％，兩組間差異有高度顯著性(X2＝10.75，P＜0.01)。
未發(fā)記憶增強肽現(xiàn)口服液有任何毒副作用，服用安全。
本發(fā)明所用腦肽，可由已公開發(fā)明專利申請“一類記憶增強肽和它們的用途(00116876.2)”中所述方法制得。
下面通過實施例的方式進一步說明本發(fā)明，并不因此將本發(fā)明限制在所述的實施例范圍之中。
具體實施例方式
實施例1口服液制備規(guī)格0.2mg(按無水無醋酸鹽計)/10ml/瓶(1)稱取20g穩(wěn)定劑混合氨基酸，加入無菌蒸餾水1000ml，加熱使溶解；(2)取所述記憶增強肽2g，加入無菌蒸餾水1000ml，攪拌使溶解；(3)取所述的矯味劑單糖漿20g，加入(2)中所得溶液，并攪拌均勻；(4)將(1)中所得溶液與(3)中所得溶液混合，并加無菌蒸餾水至溶液為1001，然后攪拌均勻；(5)將(4)中所得溶液用1mol/LHCl和lmol/LnaOH溶液調節(jié)pH至4.5-6.5；(6)將(5)中所得溶液以無菌漏斗過濾后分裝于滅菌瓶中，每瓶10ml，即得。
實施例2片劑制備
規(guī)格0.015mg(按無水無醋酸鹽計)/150mg/片將下述原料，在GMP許可環(huán)境條件下，按一般制片的粉碎、過篩、混合、壓片工藝，制得記憶增強肽片劑腦肽0.45g矯味劑氨基酸75g乳糖1.35kg甘露醇1.8kg薄荷腦4.5g阿斯巴甜4.5g其他輔料麥芽糊精0.8kg膠化淀粉0.4kg羧甲淀粉鈉135g硬脂酸鎂45g共制得30000片，每片重0.15g。
實施例3顆粒劑制備將下述原料，按一般制粒的粉碎、過篩、混合、制粒、分裝工藝，制得記憶增強肽顆粒劑腦肽0.35g矯味劑氨基酸55g乳糖1.2kg甘露醇1.3kg阿斯巴甜5.1g其他輔料麥芽糊精0.6kg膠化淀粉0.4kg羧甲淀粉鈉123g
硬脂酸鎂38g實施例4動物有效性試驗所用腦肽口服液為實施例1中所制。
口服給藥(1)正常成年大鼠，光亮分辨回避行為(BD)的學習效能和記憶保存能力都因口服MEP而增強。40只動物均分兩組各喂MEP421溶液(55微克)或水25ml，連續(xù)3周后在Y型迷宮中進行訓練(學習)，再30天后作測試(記憶)。訓練和測試時記錄行為達標前的實際次數(shù)(T)，并作生物學統(tǒng)計記憶保存率(R)＝(T2-T1)÷T2×100％
結論兩組分別與其對照組比較均有極顯著的差異，表明MEP421能使動物學習易化和記憶保存明顯。
(2)記憶障礙動物模型，胚胎期缺血性缺氧大鼠懷孕的Wistar母鼠6只，19天時結扎兩側子宮動脈15分鐘。34只幼鼠在產(chǎn)后18天斷奶后隨機分兩組，分別喂以MEP421(44微克)溶液或水。一月后學習訓練，再服一月后測試，方法同例2。
結論兩組分別與其對照組比較均有極顯著的差異，表明MEP421能改善該類記憶受障動物學習易化和提高記憶保存率。
(3)記憶障礙動物模型之二，電休克(失憶)大鼠70只19天齡大鼠，隨機分兩組，每天上下午分別接受兩次電休克處理(80V).實驗期間分組喂服0.5升含或不含MEP421(4.4μg/ml)的水溶液。電休克結束后休息三天依上法進行訓練和檢測。
結論四組分別與其對照組比較均有極顯著的差異，表明MEP421能改善該類記憶受障動物學習易化和提高記憶保存率，且雌雄相近。
實施例5臨床有效性試驗所用腦肽口服液為實施例1中所制。所用腦肽口服液在以下臨床試驗中稱為“強記憶泰口服液”。
強憶泰口服液促進兒童智力、記憶發(fā)展雙盲對照研究湖南醫(yī)科大學精神衛(wèi)生研究所目的按《新藥審批方法》中新藥臨床研究技術要求，開展強憶泰口服液臨床試驗工作，通過臨床研究，以驗證強憶泰口服液是否有提高少年兒童智力及記憶能力的作用以及可能的毒副作用，并對其作用和安全性作出評價。
方法按隨機數(shù)碼表編號受試藥品和安慰劑對照品，雙盲隨機將受試者分為試驗組和安慰劑對照組，安慰劑外觀及口味與受試藥品一致。受試藥品和安慰劑按1∶0.7匹配。
對象選擇在長沙縣暮云鎮(zhèn)北塘中心小學，隨機選取三年級一個班學生共47名，隨機分為試驗組(強憶泰組)和對照組(安慰劑組)，受試者和評定者均不知道所服的是試驗藥物還是安慰劑。
用法、劑量強憶泰口服液每次1支(10ml)，每日1次，共6周，安慰劑用法與此相同。在服藥期間不得使用其它促進兒童、青少年智力及記憶藥物。
強憶泰口服液由麗珠中藥廠提供，規(guī)格10ml/支，批號940901，安慰劑亦由麗珠中藥廠提供，規(guī)格10ml/支。
觀察項目1.一般資料2.智力測驗和記憶測驗采用國內外通用的修訂韋氏兒童智力測驗量表和記憶測驗量表。為了減少前次記憶測驗對后次記憶測驗的影響，第一次記憶測驗使用甲式，第二次測驗使用乙式。
3.副作用隨時記錄試驗過程中出現(xiàn)的各種副作用，并判斷此副作用與本藥的關系。
研究程序1.研究前集中培訓，包括研究者對研究目的、程序方法的了解、并對記憶測驗實施者進行培訓和一致性檢驗。
2.向受試者、家長老師說明本研究的目的及意義，自愿參加本研究。
3.記錄每一個受試者的一般社會人口學資料。
4.服用試驗藥物及安慰劑，每日一次，每次一支，連續(xù)6周。
5.在服藥過程中，隨時記錄藥物副作用，判斷該副作用與本品的關系。
6.服藥后第6周后再次做韋氏兒童智力及記憶測驗。智力及記憶評定標準以智商或記憶商提高率為評定指標無效智商或記憶商提高＜12％；提高智商或記憶商提高12-19.9％；顯著提高智商或記憶商提高≥20％；總提高率提高率+顯著提高率。
智商或記憶商提高率＝(試驗后智商或記憶商-試驗前智商或記憶商)/試驗前智商或記憶商×100％資料分析用FoxPro建立數(shù)據(jù)庫，統(tǒng)計分析在SPSSPC4.0進行。
結果一般資料兩組學生共47例，強憶泰口服液組27例(男18例，女9例)，安慰劑組20例(男10例，女10例)，強憶泰組平均年齡為9.7歲(SD0.6)，安慰劑組平均年齡為9.3歲(SD1.2)，兩組病人在性別、年齡方面無明顯差異，說明兩組可比性好。
試驗前智商及記憶商比較如表1所示，試驗前兩組智商、記憶商均無明顯差異，說明兩組在試驗前有相似的智力及記憶水平。
表1試驗前兩組智商及記憶商比較
試驗前后韋氏兒童智力測驗結果如表2所示，強憶泰口服液組受試者的韋氏兒童智力各分量表分、操作智商、言語智商、總智商均有提高，除算術分量表外，差異有顯著性；言語、操作及總智商在試驗后分別平均提高了18.7分、17.6分、19.0分，而安慰劑組受試者韋氏兒童智力測驗各量表分除填圖和排列外改變均不明顯，甚至個別分量表有降低的趨勢，試驗前后差異無顯著性，安慰劑組受試者的言語、操作及總智商在試驗后分別平均提高8.9分、11.2分、9.9分。兩組比較，強憶泰組明顯高于安慰劑組，差異有高度顯著性。
試驗前后韋氏兒童記憶測驗結果如表3所示，強憶泰口服液組受試者的韋氏兒童記憶各分量表分、記憶商均有提高，除積累分量表外，差異均有顯著性，記憶商在試驗后平均提高了19.6分，而安慰劑組受試者韋氏兒童記憶各量表分，試驗前后差異均無顯著性，甚至個別分量表有降低的趨勢，記憶商在試驗后平均提高7.0分。兩組比較，強憶泰組明顯高于安慰劑組，差異有高度顯著性。
(五)結果分析如表4、表5所示，強憶泰口服液組總智商提高率和顯著提高率分別為37.0％和44.5％，總提高率為81.5％；安慰劑組總智商提高率和顯著提高率分別為25.0％和0.0％，總提高率為25.0％，兩組差異有高度顯著性(X2＝18.02，P＝0.0012)。強憶泰口服液組記憶商提高率和顯著提高率分別為22.2％和59.3％，總提高率為81.5％；安慰劑組記憶商提高率和顯著提高率分別為30.0％和5.0％，總提高率為35.0％，兩組差異有高度顯著性(X2＝15.20，P＝0.005)。
(六)不良反應在試驗過程中受試者無特殊不良主訴，說明該藥安全度很高。
小結本研究按嚴格的雙盲對照設計，采用了國際國內通用的檢測工具及標準化評定量表，得出以下結論√強憶泰口服液能明顯促進兒童智力及記憶能力的提高，在試驗結束后，強憶泰口服液組受試者的總智商平均提高了19.0分、記憶商平均提高了19.6，其各分量表分也有不同程度的提高，與安慰劑組(總智商和記憶商分別平均提高僅9.9分和7.0分)相比，差異有高度顯著性。
√強憶泰口服液組兒童總智商提高率和顯著提高率分別為37.0％和44.5％，總提高率為81.5％，記憶商提高率和顯著提高率分別為22.2％和59.3％，總提高率為81.5％，與安慰劑組相比，差異有高度顯著性。
√未發(fā)現(xiàn)強憶泰口服液有任何毒副作用，服用安全。
表2試驗前后韋氏智力測驗結果
*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001表3試驗前后韋氏記憶測驗結果
*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001表4總智商提高率
X2＝18.02292，P＝0.0012表5記憶商提高率
X2＝15.19976，P＝0.005實施例6
本例為本發(fā)明口服液治療腦器質性記憶障礙的雙盲對照研究。
目的按《新藥審批方法》中新藥臨床研究技術要求，開展強憶泰口服液臨床試驗工作，通過臨床研究，以驗證麗珠中藥廠生產(chǎn)的強憶泰口服液是否有改善腦器質性記憶障5的作用以及可能的毒副作用，并對其療效和安全性作出評價。
方法按隨機數(shù)碼表編號受試藥品和安慰劑對藥品，隨機雙盲將受試者分為試驗組和安慰劑對照組，安慰劑外觀及口味與受試藥品一致。受試藥品和安慰劑按1∶0.7匹配。
病例選擇病人以記憶力下降為主訴之一，符合CCMD-2腦器質精神障礙的診斷標準，年齡、性別、種族不限，記憶商在90及以下。
用法、劑量強憶泰口服液每次1支(10ml)，每日1次，睡前服，連續(xù)8周，安慰劑用法與此相同。在治療原發(fā)疾病的時候，試驗組和對照組的用藥一致，且沒有采用諸如腦激活劑、腦賦形劑等治療。
強憶泰口服液由麗珠中藥廠提供，規(guī)格10ml/支，批號940901，安慰劑亦由麗珠中藥廠提供，規(guī)格10ml/支。
觀察項目1.一般資料2.記憶測驗采用國內外通用的修訂成人韋氏記憶量表，為了減少前次記憶測驗對后次記憶測驗的影響作用，第一次記憶測驗使用A式，第二次測驗使用B式。
3.實驗室檢查試驗前及試驗第4周、第8周后均做血常規(guī)、肝腎功能、心電圖檢查。
4.副作用記錄試驗過程中出現(xiàn)的各種副作用，并判斷此副作用與本藥的關系。
研究程序1.研究前集中培訓，包括研究者對研究目的、程序方法的了解、并對記憶測驗實施者進行培訓和一致性檢驗。
2.向符合入組受試者說明本研究的目的及意義，自愿參加本研究。
3.記錄每一個受試者的一般社會人口學資料及實驗室結果。
4.試驗前記憶測驗。
5.服用試驗藥物及安慰劑，每日一次，每次一支，連續(xù)8周，睡前服。
6.在試驗過程中，隨時記錄藥物副作用，判斷該副作用與本品的關系。
7.服藥后第4周、第8周后，再次記錄實驗室結果，第8周后再做記憶測驗。療效評定標準
以記憶商提高率和臨床療效評定作為療效評定指標無效主訴記憶改善不明顯，記憶商提高＜12％；有效主訴記憶有改善，記憶商提高率12-19.9％；顯效主訴記憶明顯改善，記憶商提高率≥20％；總有效率有效率+顯效率。
記憶商提高率＝(治療后記憶商-治療前記憶商)/治療前記憶商×100％資料分析用FoxPro建立數(shù)據(jù)庫，統(tǒng)計分析在SPSSPC4.0進行。
結果一般資料兩組病人共39例，強憶泰口服液組24例，安慰劑組15例，兩組病人在性別、年齡、病程、嚴重程度等方面無明顯差異，見表1，說明兩組可比性好。
表1一般資料比較
(二)治療前后韋氏記憶測驗結果比較如表2所示，治療8周后強憶泰口服液組的韋氏記憶各分量表分和記憶商均有明顯的提高，除再生、理解和背數(shù)分量表外，差異均有顯著性，記憶商在治療后平均提高了14.0分，而安慰劑組韋氏記憶各量表分改變不明顯，治療前后差異無顯著性，記憶商在治療前后盡管有差異，但平均提高不到4分。
表2韋氏記憶測驗結果比較(X±SD)
P＜0.05**P＜0.01***P＜0.001(三)療效等級分析如表3所示，強憶泰口服液組改善記憶障礙的有效率和顯效率分別為20.8％和54.2％，總有效率為75.0％，安慰劑組改善記憶障礙的有效率和顯效率分別為20.0％和6.7％，總有效率為26.7％，兩組間差異有高度顯著性(X2＝10.75，P＜0.01)。
表3記憶障礙有效率
X2＝10.75，P＜0.01(四)不良反應在治療前和治療后第四周和第八周，做三大常規(guī)、肝功能、腎功能、心電圖等檢查，均無異常發(fā)現(xiàn)。病人在服藥過程中也無特殊不良主訴，說明該藥安全度很高。
小結本研究按嚴格的雙盲對照設計，采用了國際國內通用的檢測工具及標準化評定量表，的出以下結論強憶泰口服液能明顯提高器質性記憶障礙患者的記憶能力，在治療結束后，強憶泰口服液組患者的記憶商平均提高14.0分，其各分量表也有不同程度的提高，治療前后除再生、理解和背數(shù)分量表外，其它分量表分差異均有顯著性；安慰劑組僅提高不到4分。兩組相比，差異有高度顯著性。
強憶泰口服液組改善記憶障礙的有效率和顯效率分別為20.8％和54.2％，總有效率為75.0％，安慰劑組改善記憶障礙的有效率和顯效率分別為20.0％和6.7％，總有效率為26.7％，兩組間差異有高度顯著性(X2＝10.75，P＜0.01)。
未發(fā)現(xiàn)強憶泰口服液有任何毒副作用，服用安全。
權利要求
1.一種腦肽口服劑，其特征在于該腦肽口服劑包含有溶于藥用溶劑的有效量的記憶增強肽，記憶增強肽的化學結構式為 X為Ala、Leu、Ile、Cys、Phe、Tyr或Val；R1為PyroGlu或H；R2為S-S-C(CH3)3或S-C(CH3)3；記憶增強肽的用量按無水醋酸鹽計。
2.根據(jù)權利要求1所述的腦肽口服劑，其特征在于，所述口服劑為口服液。
3.根據(jù)權利要求2所述的腦肽口服液，其特征在于，所述口服液中還含有矯味劑、穩(wěn)定劑。
4.根據(jù)權利要求1所述的腦肽口服劑，其特征在于，所述口服劑為片劑。
5.根據(jù)權利要求1所述的腦肽口服劑，其特征在于，所述口服劑為顆粒劑。
6.權利要求1所述的腦肽口服劑的制備方法，其特征在于，所述方法是將記憶增強肽溶于可藥用的溶劑中。
7.根據(jù)權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述方法還包括將藥用穩(wěn)定劑、防腐劑加入所述記憶增強肽溶液中，并用緩沖液進行調整ph4.0-7.5。
8.根據(jù)權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述方法是將所述記憶增強肽與矯味劑、穩(wěn)定劑、防腐劑及藥用制片輔劑混合壓片。
9.權利要求6所述的腦肽口服劑的制備方法，其特征在于，所述方法是將所述記憶增強肽與矯味劑、穩(wěn)定劑、防腐劑及藥用輔劑混合制粒。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種腦肽口服劑及其制備方法。該腦肽口服劑包含有溶于藥用溶劑的有效量的記憶增強肽，記憶增強肽按無水醋酸鹽計。該口服液中還可以含有矯味劑、穩(wěn)定劑。所述的腦肽口服劑，可以為片劑。經(jīng)動物口服給藥試驗表明，能改善該類記憶受障動物學習易化和提高記憶保存率，且雌雄相近。臨床研究表明在記憶增強肽口服液促進兒童智力、記憶力發(fā)展雙盲對照研究和記憶增強肽口服液治療腦器質性記憶障礙的雙盲對照研究中，均效果明顯。
文檔編號A61K9/16GK101091790SQ20061008641
公開日2007年12月26日 申請日期2006年6月19日 優(yōu)先權日2006年6月19日
發(fā)明者杜雨蒼 申請人:上海中科英泰生物技術有限公司