專利名稱：一種由紅花與山楂葉制成的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種用于治療心腦血管疾病的主要由紅花或其提取物與山楂葉或其提取物制成的藥物組合物以及含有該藥物組合物的制劑及其制備方法。
2、背景技術(shù)心腦血管疾病一直號稱威脅人類健康的頭號殺手，如腦卒中、冠心病、心絞痛等是人類死亡的主要原因之一。近年來，隨著我國逐漸步入老齡化社會，人民生活水平提高，生活節(jié)奏加快，飲食習(xí)慣向高熱、高脂化發(fā)展，人群中心臟病、腦卒中等心腦血管系統(tǒng)疾病已成為危害人類健康及生命的嚴(yán)重疾病之一。因此，如何有效防治也就引起人們的高度重視。心絞痛、心肌梗死、缺血性心臟病等共同的病理基礎(chǔ)都是心肌缺血，心肌供血供氧不足導(dǎo)致心肌代謝紊亂，能量供應(yīng)不足，心肌收縮功能下降，血液輸出量降低，進而影響整個機體的功能，乃至引起心肌細(xì)胞死亡。腦缺血再灌注是臨床上腦血管疾病治療的關(guān)鍵。心腦缺血后影響能量代謝，繼發(fā)乳酸堆積、鈣超載、自由基損傷等多種變化；多靶點逆轉(zhuǎn)或改善這些變化，提高綜合療效是藥物治療的重要目標(biāo)。
紅花為菊科植物紅花(Cacthamus tinctonus.L)的干燥花，研究表明紅花的主要有效成分存在于其水溶性部分，紅花黃色素是含有多種查耳酮類的水溶性混合物，藥理實驗表明其是紅花的主要有效活性成分，具有擴張冠狀動脈、改善心肌血供，降低血壓、擴張血管、改善器官供血，抗凝血，抑制血栓形成，耐缺氧、抗炎等多種藥理學(xué)功效。紅花黃色素中羥基紅花黃色素A含量較高，具有藥理效應(yīng)代表性。
山楂葉為薔薇科植物山里紅(Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br)或山楂(Crataeguspinnatifida Bge.)的干燥葉。山楂葉中的黃酮類化合物如蘆丁、金絲桃甙、槲皮素、牡荊素等，是其主要有效成分，具有促使血管擴張、增加冠狀動脈血流量、保護缺血心肌等多種藥理活性，具有降壓、降血脂和強心作用，能改善心臟活力和興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)等。大量研究表明，山楂葉總黃酮還具有抗氧化功能，對血管內(nèi)皮細(xì)胞的氧化損傷具有明顯的保護作用。研究還表明，黃酮類成分中牡荊素化合物具有良好的抗癌作用。
目前利用紅花或其提取物及山楂葉或其提取物的相互作用，配伍組方用于治療心腦血管疾病，還未見報道。
3、發(fā)明內(nèi)容為了滿足臨床需要，更好的治療心腦血管疾病，提高人民的健康水平，本發(fā)明提供了一種新的用于治療心腦血管疾病的藥物組合物及其制備方法，該藥物組合物主要由紅花或其提取物及山楂葉或其提取物制備而成，在用于制備治療心腦血管疾病方面，產(chǎn)生了意想不到的效果。
本發(fā)明藥物組合物主要由紅花和山楂葉制備而成，其原料藥的重量份數(shù)為紅花0.5～15份、山楂葉0.1～10份；優(yōu)選為紅花1～5份、山楂葉1～4份；最優(yōu)為紅花2.5份、山楂葉2份。
上文所述的藥物組合物中的紅花和山楂葉可以用適宜的溶劑和方法單提或混提制備得到提取物，總提取物再與藥學(xué)上可接受的輔料混合制成任一制劑。其中所述的提取溶劑優(yōu)選水或乙醇，提取方法可以為浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法或連續(xù)提取法。得到的總提取物的主要的有效成分為紅花黃色素和山楂葉總黃酮，提取物中主要有效成分的總含量不低于20％。
本發(fā)明提供了紅花的優(yōu)選提取工藝(以紅花黃色素為主要有效成分)，具體如下取干燥紅花藥材粗粉，于70℃用pH為3的酸水溫浸提取三次，每次均為50倍量的酸水，每次1.5小時。合并提取液，濾過，收集濾液，放冷，調(diào)pH值至中性，減壓濃縮至相對密度1.05～1.10，加乙醇至醇濃度為70％，冷藏(10℃以下)放置24小時，濾過得沉淀。將沉淀用水溶解，加于已處理好的大孔吸附樹脂HPD100柱色譜(藥材與樹脂比例為1∶10(W/V))，先用去離子水以1～2.5ml/cm2/min的流速洗脫兩個柱床體積，然后用60％的乙醇以1～2.5ml/cm2/min的流速洗脫五個柱床體積。60％醇洗脫部分，減壓濃縮至密度為1.10左右，然后在70℃左右減壓真空干燥或減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后冷凍干燥，即得紅花黃色素。通過本工藝得到的紅花黃色素得率為1～3％，其中羥基紅花黃色素A的含量不低于50％。
紅花黃色素還可以根據(jù)由下述方法制得，但不僅限于下述方法方法一將紅花用水冷浸24小時或煎煮回流提取50～90分鐘，然后過濾，濾液濃縮至相對密度為1.10～1.25，濃縮液中加入乙醇至含醇量80％，并不斷攪拌，在4℃沉淀24小時，過濾除去沉淀，取上清液，揮凈乙醇并濃縮至相對密度為1.15～1.20；濃縮液中加入5～10倍的水，在4℃沉淀12～24小時，離心除去沉淀，濾液回收乙醇至稠膏狀，噴霧干燥即得。通過本工藝得到的提取物得率為3～5％，其中羥基紅花黃色素A的含量不低于25％。
方法二取紅花生藥藥粉，每次加5倍量水室溫下溫浸48小時，其間不時攪拌，共提取兩次，合并兩次水提液，過濾除去藥渣，50～90℃減壓濃縮至相對密度1.10～1.25得濃縮液，將濃縮液上預(yù)先已處理好的聚酰胺柱，分別用水和90％乙醇洗脫，水洗液棄去，收集90％乙醇洗脫液，回收乙醇至相對密度為1.18～1.25，噴霧干燥即得。通過本工藝得到的提取物得率為2～4％，其中羥基紅花黃色素A的含量不低于40％。
山楂葉總黃酮已經(jīng)有生產(chǎn)上市，可以購買上市原料，也可利用現(xiàn)有技術(shù)的制備方法獲得，還可自行摸索制備工藝獲得。本發(fā)明提供了一種山楂葉總黃酮的優(yōu)選制備方法。
本發(fā)明提供了一種山楂葉的優(yōu)選提取制備工藝(以山楂葉總黃酮為主要有效成分)，具體如下取山楂葉，加75％乙醇回流提取三次，每次1.5小時，合并提取液，濾過，濾液減壓回收乙醇至無醇味后，加等量水稀釋，用1/2量的石油醚脫脂后，棄去石油醚液，再用乙酸乙酯萃取，萃取液減壓回收乙酸乙酯并濃縮至干，加入適量水使溶解，加于已處理好的聚酰胺柱上(粒度30～60目，用95％乙醇濕法裝柱，先用3倍柱體積的95％乙醇洗脫，后用3倍柱體積的水洗脫至無醇味，備用)，先用2倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，然后用3倍柱體積的80％乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇并濃縮至相對密度約1.02～1.08(60℃)的濃縮液，噴霧干燥，得山楂葉總黃酮。通過上述工藝制備的山楂葉總黃酮得率為1～3％，總黃酮的含量以無水蘆丁(C27H30O16)計，不低于50.0％；金絲桃苷(C21H20O12)的含量不低于0.20％。
山楂葉總黃酮除可以根據(jù)由下述方法制得，但不僅限于下述方法方法一取山楂葉，加75％乙醇回流提取三次，每次1.5小時，合并提取液，濾過，濾液減壓回收乙醇至無醇味后，加入適量水使溶解，加于已處理好的聚酰胺柱上，分別用水和80％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇并濃縮至相對密度約1.13～1.15(60℃)的濃縮液，噴霧干燥，即得。通過上述工藝制備的提取物得率為3～5％，總黃酮的含量以無水蘆丁(C27H30O16)計，不低于30.0％；金絲桃苷(C21H20O12)的含量不低于0.10％。
方法二取山楂葉，加75％乙醇回流提取二次，每次1小時，合并提取液，濾過，濾液減壓回收乙醇至無醇味后，加等量水稀釋，用1/2量的石油醚脫脂后，棄去石油醚液，再用乙酸乙酯萃取，萃取液減壓回收乙酸乙酯并濃縮至干，加入適量水使溶解，加于已處理好的D101大孔吸附樹脂柱上，先用2倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，然后用3倍柱體積的80％乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇并濃縮至相對密度約1.15～1.18(60℃)的濃縮液，噴霧干燥，得山楂葉總黃酮。通過上述工藝制備的提取物得率為2～4％，總黃酮的含量以無水蘆丁(C27H30O16)計，不低于40.0％；金絲桃苷(C21H20O12)的含量不低于0.12％。
本發(fā)明藥物組合物除可用上述藥材直接投料制得外，還可以由紅花黃色素和山楂葉總黃酮投料制成，紅花黃色素中羥基紅花黃色素A的含量不低于25％，最好不低于50％，山楂葉總黃酮中含總黃酮以無水蘆丁(C27H30O16)計不低于30％，最好不低于50％，含金絲桃苷(C21H20O12)不低于0.10％，最好不低于0.2％。按照提取物相對于藥材的得率計算，其重量份數(shù)為紅花黃色素5～450份、山楂葉總黃酮1～300份；優(yōu)選紅花黃色素10～150份、山楂葉總黃酮10～120份；最優(yōu)選紅花黃色素25～100份、山楂葉總黃酮20～60份。
以上組成是按重量比作為配比的，在生產(chǎn)時可按照相應(yīng)比例增大或減小，如大規(guī)模生產(chǎn)可以以千克為原料，或以噸為單位，小規(guī)模生產(chǎn)也可以以克為單位，重量可以增大或者減小，但各組成之間重量配比的比例不變。
以上重量配比的比例是經(jīng)過科學(xué)篩選得到的，對于特殊病人，可以相應(yīng)調(diào)整組成的比例，增加或者減少不超過100％。
本發(fā)明藥物組分的用量是經(jīng)過發(fā)明人進行大量摸索總結(jié)得出的，各組分用量在上述重量份范圍內(nèi)都具有較好療效。
本發(fā)明提供了一種用于制備治療心腦血管疾病方面的藥物組合物，主要用于治療腦血栓、冠心病、心絞痛、脈管炎、心肌梗塞及高脂血癥等方面疾病。
本發(fā)明藥物組合物可以加一種或多種藥學(xué)上可接受的載體，以口服或腸胃外給藥的方式施用于需要這種治療的患者。用于口服時，可將其制成常規(guī)的固體制劑，如片劑、膠囊、分散片、口服液、顆粒、咀嚼片、口崩片、滴丸、緩釋片、緩釋膠囊、控釋片、控釋膠囊，制成液體制劑如水或油懸浮劑或其它液體制劑如糖漿等；用于腸胃外給藥時，可將其制成注射用的溶液、水或油懸浮劑等，如水針、凍干粉針、無菌粉針、輸液等。優(yōu)選的形式是注射劑、片劑和膠囊。
本發(fā)明藥物組合物可采用現(xiàn)有制藥領(lǐng)域中的常規(guī)方法生產(chǎn)，需要的時候可以添加各種藥學(xué)上可接受的載體。所述的載體包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體、潤滑劑等。
本發(fā)明藥物組合物在制成注射劑時，為了增加其溶解度，可以加入吐溫-80等增溶劑。輸液中可以加入用于調(diào)節(jié)滲透壓的等滲調(diào)節(jié)劑，例如，氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、乳酸鈉、葡萄糖、木糖醇、山梨醇和右旋糖苷等，優(yōu)選氯化鈉或葡萄糖。粉針中可加入賦形劑，例如，甘露醇、葡萄糖等。
本發(fā)明藥物組合物具有以下優(yōu)點(1)提供了一種新的用于治療心腦血管疾病的藥物組合物及其制備方法，滿足了臨床急需。
(2)首次對本發(fā)明藥物組合物的相互作用和配伍組方進行了藥效學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)了該藥物組合物具有顯著抗血小板聚集；顯著延長大鼠頸動脈內(nèi)血栓形成時間；降低PLA2活性，改善腦循環(huán)，減輕腦缺血再灌注損傷；增加冠脈血流量，增加心肌供血，降低左室舒張末期壓，降低心臟前負(fù)荷等，明顯改善犬血液流動力學(xué)；對家兔腦缺血再灌注損傷具有明顯的保護等作用；且試驗結(jié)果表明本發(fā)明藥物組合物注射液療效明顯優(yōu)于單用紅花或山楂葉。提示，紅花與山楂葉配伍應(yīng)用具有協(xié)同增效的作用，其結(jié)果是本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員所意想不到的。
(3)對本發(fā)明組合物各配比進行了藥效學(xué)研究，得出了本發(fā)明組合物的最優(yōu)配比。
(4)本發(fā)明可以以原料或提取物投料，制備工藝簡單，不同批次藥品間質(zhì)量差異小，藥品質(zhì)量更均勻穩(wěn)定。
(5)進行的急性毒性實驗表明本發(fā)明藥物組合物注射液的最大耐受量相當(dāng)于60kg體重人日最大用量20ml的120倍，表明了本發(fā)明藥物組合物低毒，安全性高。
(6)進行的穩(wěn)定性實驗表明本發(fā)明藥物組合物注射液各項指標(biāo)均比較穩(wěn)定，保證了臨床用藥的安全。
(7)本發(fā)明組合物兩藥配伍用藥療效確切，且減小了相對用藥劑量，具有廣泛的應(yīng)用前景。
以下通過實驗例來進一步闡述本發(fā)明所述藥物組合物的有益效果。下列實驗例中紅花、山楂葉的組合物以下簡稱HS組合物。試驗例中所用的紅花根據(jù)實施例1制備，山楂葉根據(jù)實施例2制備。
試驗例1 本發(fā)明組合物合并用藥藥效學(xué)的研究-HS組合物對大鼠實驗性心肌梗塞范圍的影響受試動物Wistar大鼠，雄性，體重208～230g，120只，每組10只，隨機分為12組。
供試品 生理鹽水對照組0.9％生理鹽水注射液，市購；紅花組紅花注射液，自制，規(guī)格5ml相當(dāng)于原藥材2.5g；山楂葉組山楂葉注射液，自制，規(guī)格5ml相當(dāng)于原藥材2g；HS組合物組HS注射液，自制，制備方法參見實施例3水針劑的制備。
試驗方法 將大鼠隨機分為12組生理鹽水對照組；紅花組；山楂葉組；HS組紅花+山楂葉(1g+1g、1g+2g、1g+4g、2.5g+1g、2.5g+2g、2.5g+4g、5g+1g、5g+2g、5g+4g)。各藥物均以生理鹽水稀釋至所需濃度，尾靜脈注射給藥。
大鼠實驗性心肌梗死模型動物戊巴比妥腹腔注射麻醉(45mg/kg)仰位固定。氣管插管，在胸骨左側(cè)作2cm的縱切口，近胸骨側(cè)剪斷第3、第4肋軟骨，打開胸腔后，連接人工呼吸機(通氣量2ml/100g，50次/min)。剪開心包膜，暴露心臟，冠狀動脈左前降支根部穿線以備結(jié)扎，記錄標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)聯(lián)心電圖，穩(wěn)定10分鐘，結(jié)扎冠狀動脈左前降支，關(guān)閉胸腔。用針筒吸出動物喉部分泌物，使動物恢復(fù)自主呼吸。結(jié)扎冠狀動脈15min后，靜脈給藥。結(jié)扎冠狀動脈4小時后，摘取心臟，在結(jié)扎線以下橫切5片，進行氯化硝基四氮唑藍(lán)(N-BT)染色，計算心肌梗死區(qū)面積占心室及心臟面積的百分比，并進行統(tǒng)計學(xué)處理(t檢驗)。
表1HS組合物對大鼠實驗性心肌梗塞范圍的影響(x±s)
注與生理鹽水對照組相比，*p＜0.05，**p＜0.01；與紅花相比，ap＜0.05；與山楂葉組相比，bp＜0.05。
試驗結(jié)果與結(jié)論 試驗結(jié)果見表1。
(1)與生理鹽水對照組相比，紅花組、山楂葉組與HS組合物各劑量組均具有明顯的抗心肌缺血作用(p＜0.05，p＜0.01)。
(2)分別與紅花組、山楂葉組相比，HS組合物各劑量都具有明顯的抗心肌缺血作用(p＜0.05)。
試驗結(jié)果表明，紅花與山楂葉配伍的組合物的療效優(yōu)于單用紅花或山楂葉，提示兩藥配伍有協(xié)同增效的作用；其中以紅花+山楂葉(2.5g+2g)組，療效最為顯著。
試驗例2 HS組合物的抗血小板聚集作用受試動物 Wistar大鼠，雄性，體重201～225g，60只，每組10只，隨機分為6組。
供試品 生理鹽水對照組0.9％生理鹽水注射液，市購；紅花組紅花注射液，自制，規(guī)格5ml相當(dāng)于原藥材2.5g；山楂葉組山楂葉注射液，自制，規(guī)格5ml相當(dāng)于原藥材2g；HS組合物組HS注射液，自制(處方和制備方法參見實施例3水針劑處方1的制備)，分為低、中、高三個劑量組。
試驗方法 將大鼠隨機分為6組，每組10只，分別為生理鹽水對照組、紅花組、山楂葉組、HS組合物低、中、高三個劑量組。各組動物腹腔注射給藥，每日一次，連續(xù)給藥7天，末次給藥后1小時，動物麻醉后自腹主動脈取血，抗凝劑采用3.28％枸櫞酸鈉，與血液以1∶9比例混合。將抗凝全血在20℃條件下1500r.min-1離心5min獲得富血小板血漿(PPR)。留取定量PPR后，將剩余PPR再次以3000r.min-1離心10min，獲得自身對照貧血小板血漿(PPP)。以PPP調(diào)節(jié)PPR濃度，使各PPR濃度相同。將PPR在37℃的恒溫孔中預(yù)熱后，加入ADP(終濃度為3μmol.L-1)引起血小板聚集，記錄最大聚集率。
表2抗血小板聚集作用(X±SD)
注與生理鹽水對照組相比，*p＜0.05，**p＜0.01；與紅花組相比ap＜0.05，bp＜0.01；與山楂葉組相比，cp＜0.05，dp＜0.01。
試驗結(jié)果與結(jié)論 試驗結(jié)果見表2。
(1)與生理鹽水對照組相比，紅花組、山楂葉組可使大鼠的血栓形成時間明顯延長(p＜0.05)，HS組合物低、中、高劑量組均使大鼠的血栓形成時間顯著延長(p＜0.01)。
(2)與紅花組相比，HS組合物注射液低劑量組均能使實驗大鼠的血栓形成時間明顯延長(p＜0.05)，HS組合物中、高劑量組均使大鼠的血栓形成時間顯著延長(p＜0.01)。
(3)與山楂葉組相比，HS組合物注射液低劑量組均能使實驗大鼠的血栓形成時間明顯延長(p＜0.05)，HS組合物中、高劑量組均使大鼠的血栓形成時間顯著延長(p＜0.01)。
試驗結(jié)果表明，紅花組、山楂葉組和HS組合物均具有抗血栓作用，其中HS組合物注射液療效優(yōu)于單用紅花或山楂葉，提示兩藥配伍有協(xié)同增效作用。
試驗例3 HS組合物對大鼠頸動脈內(nèi)血栓形成的影響受試動物 Wistar大鼠，雄性，體重203～228g，60只，每組10只，隨機分為6組。
供試品 生理鹽水對照組0.9％生理鹽水注射液，市購；紅花組紅花注射液，自制，規(guī)格5ml相當(dāng)于原藥材2.5g；山楂葉組山楂葉注射液，自制，規(guī)格5ml相當(dāng)于原藥材2g；HS組合物組HS注射液，自制(處方和制備方法參見實施例3水針劑處方1的制備)，分為低、中、高三個劑量組。
試驗方法 將大鼠隨機分為6組，每組10只，分別為生理鹽水對照組、紅花組、山楂葉組、HS組合物注射液低、中、高三個劑量組。尾靜脈注射給藥。生理鹽水對照組給予等容積生理鹽水，給藥20分鐘后開始試驗。動物用2.5％戊巴比妥鈉(25mg/kg)腹腔注射麻醉，將大鼠仰臥位固定，分離右側(cè)頸總動脈，采用電流損傷頸動脈內(nèi)膜法，用BT87-3實驗性體內(nèi)血栓形成儀測定不同組別動物頸動脈血栓形成時間。將電極置放在頸動脈上對其進行電刺激(2mA，7min)，以感應(yīng)電極連續(xù)測量動脈遠(yuǎn)端表面溫度，觀察動脈溫度突降時間。記錄電刺激開始至主動脈溫度突降的時間，該時間定為頸動脈血栓形成時間(超過3000秒者以3000秒計)。
表3HS組合物對大鼠頸動脈內(nèi)血栓形成的影響
注與生理鹽水對照組相比，*p＜0.05，**p＜0.01；與紅花組相比，ap＜0.05，bp＜0.01；與山楂葉組相比，cp＜0.05，dp＜0.01。
試驗結(jié)果與結(jié)論 試驗結(jié)果見表3。
(1)與生理鹽水對照組相比，紅花組、山楂葉組可使大鼠頸動脈內(nèi)血栓形成的時間明顯延長(p＜0.05)，HS組合物低、中、高劑量組可使大鼠頸動脈內(nèi)血栓形成的時間顯著延長(p＜0.01)。
(2)與紅花組相比，HS組合物低劑量組可使大鼠頸動脈內(nèi)血栓形成的時間明顯延長(p＜0.05)，HS組合物中、高劑量組可使大鼠頸動脈內(nèi)血栓形成的時間顯著延長(p＜0.01)。
(3)與山楂葉組相比，HS組合物低劑量組可使大鼠頸動脈內(nèi)血栓形成的時間明顯延長(p＜0.05)，HS組合物中、高劑量組可使大鼠頸動脈內(nèi)血栓形成的時間顯著延長(p＜0.01)。
試驗結(jié)果表明，紅花組、山楂葉組和HS組合物組均可使大鼠頸動脈內(nèi)血栓形成的時間延長，且HS組合物組的療效優(yōu)于單用紅花或山楂葉，提示兩藥配伍有協(xié)同增效的作用。
試驗例4 HS組合物對兔腦缺血再灌注損傷的保護作用受試動物 家兔，78只，體重2.1～2.6kg，隨機分為5組。
供試品 生理鹽水對照組0.9％生理鹽水注射液，市購；紅花組紅花注射液，自制，規(guī)格5ml相當(dāng)于原藥材2.5g；山楂葉組山楂葉注射液，自制，規(guī)格5ml相當(dāng)于原藥材2g；HS組合物組HS注射液，自制(處方和制備方法參見實施例3水針劑處方1的制備)。
試驗方法 將兔隨機分為缺血再灌注組(I/R組)、HS組合物組、紅花組、山楂葉組和假手術(shù)對照組(SOC組)。(1)缺血再灌注組(I/R組)18只，用25％的氨基甲酸乙脂溶液1g/kg體重耳緣靜脈麻醉，頸部正中切口分離氣管插入氣管套管，暴露兩側(cè)頸總動脈，以動脈夾兩側(cè)夾閉20min，造成腦缺血，松夾分別再灌注1h、6h和12h，三個時間點各6只。分別在松夾10min后，耳緣靜脈推注生理鹽水5ml/kg體重。(2)HS組合物組18只，手術(shù)方法同I/R組，三個時間點各6只，分別在松夾10min后，耳緣靜脈推注HS組合物注射液10mg/kg。(3)紅花組18只，手術(shù)方法同I/R組，三個時間點各6只，分別在松夾10min后，耳緣靜脈推注紅花黃色素注射液30mg/kg。(4)山楂葉組18只，手術(shù)方法同I/R組，三個時間點各6只，分別在松夾10min后，耳緣靜脈推注紅景天提取物注射液20mg/kg。(5)假手術(shù)對照組(SOC組)6只，動物僅行麻醉和動脈分離術(shù)而不夾閉，1h后處死。上述各組實驗結(jié)束后即斷頭，在冰浴中剝出大腦，冰盤上解剖出雙側(cè)海馬區(qū)組織，用錫紙包裹放在4℃冰箱中儲存，備用。應(yīng)用pH酸度計檢測海馬組織PLA2的活性；采用干濕重法、TTC染色法測定皮層腦組織含水量、梗死面積；光鏡下觀察腦組織病理變化。
試驗結(jié)果與結(jié)論(1)對海馬組織PLA2活性的影響I/R組再灌注1h、6h和12h后，海馬組織PLA2活性較SOC明顯增高(p＜0.01)，且隨灌注時間延長，PLA2活性呈遞減趨勢，但各時間點間比較差異不顯著(p＞0.05)；HS組合物組(1h、6h、12h)PLA2活性明顯降低，與SOC組和I/R各相應(yīng)時間點比較具有顯著性差異(p＜0.01，p＜0.001)，且隨再灌時間延長，PLA2活性逐漸向正常水平恢復(fù)；紅花組和山楂葉組(1h、6h、12h)PLA2活性降低，與SOC組和I/R各相應(yīng)時間點比較具有明顯差異(p＜0.05)。(2)對皮層組織含水量(％)和梗死面積(％)的影響I/R組各時間點腦含水量均增高；HS組合物組各時間點腦水含量與I/R組相比明顯減輕(p＜0.001)，腦梗死面積與I/R組相比明顯縮小(p＜0.01)；紅花組和山楂葉組各時間點腦水含量與I/R組相比均減輕(p＜0.01)，腦梗死面積與I/R組相比均縮小(p＜0.05，p＜0.01)。(3)腦組織病理改變SOC組無梗死灶，神經(jīng)元結(jié)構(gòu)形態(tài)正常，無間質(zhì)水腫；I/R組有梗死灶，梗死灶周神經(jīng)元腫脹，細(xì)胞輪廓不清，間質(zhì)水腫明顯；HS組合物組、紅花組與山楂葉組梗死灶面積均縮小，梗死灶周神經(jīng)元腫脹不明顯，間質(zhì)水腫明顯減輕；且HS組合物組作用更明顯。
上述試驗結(jié)果表明，HS組合物、紅花、山楂葉均可通過降低PLA2活性，改善腦循環(huán)，減輕腦缺血再灌注損傷，而發(fā)揮腦保護作用。且HS組合物在各項指標(biāo)中均優(yōu)于單用紅花或山楂葉的效果，提示兩藥具有協(xié)同增效的作用。
試驗例5 HS組合物對麻醉開胸犬血流動力學(xué)的影響受試動物 雜種犬，20只，體重11.1～13.4kg，隨機分為4組，每組5只。
供試品 生理鹽水對照組0.9％生理鹽水注射液，市購；紅花組紅花注射液，自制，規(guī)格5ml相當(dāng)于原藥材2.5g；山楂葉組山楂葉注射液，自制，規(guī)格5ml相當(dāng)于原藥材2g；HS組合物組HS注射液，自制(處方和制備方法參見實施例3水針劑處方1的制備)。
試驗方法 將犬隨機分為4組，每組5只，分別為生理鹽水對照組、紅花組、山楂葉組、HS組合物組。犬用戊巴比妥鈉(30mg/kg)靜脈注射麻醉后，采取右側(cè)臥位正壓人工呼吸下，于左4～5脅間開胸，于距迷走神經(jīng)2cm處打開心包，壁層做懸床將其縫合于胸壁，使心臟充分暴露。分離主動脈，在主動脈根部套入電磁流量計探頭(10～12mm)，測量心輸出量(CO)；在冠狀動脈左前降支根部，分離心外膜，分離出約1cm冠狀動脈，套入電磁流量計探頭(2～3mm)，測量冠脈流量(CBF)；將此二探頭連于LMTC-621型電磁流量計上，分離一側(cè)頸動脈，插管，連接壓力換能器，記錄動脈血壓(AP)及平均動脈壓(MAP)；將內(nèi)徑為1.5mm的心導(dǎo)管從心尖插入左心室，通過YZ-1型壓力換能器經(jīng)載波放大左室內(nèi)壓(LVP)，LVP電訊號經(jīng)直流放大器放大10倍，記錄左室舒張末期壓(LVEDP)，以LVP電訊號再經(jīng)BMI型微分器微分記錄左室內(nèi)壓變化速率(dp/dtmax)，用針型電極插入受試動物四肢皮下，記錄標(biāo)II導(dǎo)聯(lián)心電圖(EGG-II)，以測量心率(HR)。上述指標(biāo)變化均同步記錄于RM-6300生理多導(dǎo)儀。
分離股動脈抽動脈血，經(jīng)頸外動脈插管至冠狀靜脈竇抽取靜脈血，根據(jù)CY-2測氧儀使用說明書，用新鮮配制的無氧溶液(0.01M)硼砂溶液加入無水亞硫酸鈉結(jié)晶配制成2％的亞硫酸鈉溶液調(diào)零，用與空氣平衡溫度恒定的蒸餾水作靈敏度調(diào)節(jié)。待儀器穩(wěn)定后用測氧儀測定血氧含量。試驗結(jié)束后計算心肌耗氧量。
手術(shù)結(jié)束后，觀察上述各項指標(biāo)，穩(wěn)定后將記錄值作為給藥前的指標(biāo)，靜脈給藥后于1、3、5、10、20、30min，采集上述各項指標(biāo)，并以給藥后各時間點的各項指標(biāo)變化率(％)，與對照組各對應(yīng)時間點的各項指標(biāo)變化率(％)做組間顯著性成對資料的t-test處理。
試驗結(jié)果及結(jié)論 HS組合物組注射液、紅花注射液、山楂葉注射液對受試犬心率(HR)，平均動脈壓(MBP)、左室內(nèi)壓(LVP)及心室肌收縮力(dp/dtmax)、心肌耗氧量均有降低作用。尤其是HS組合物注射液，降低幅度均明顯大于紅花組和山楂葉組，心肌耗氧量于給藥后2分鐘左右開始降低，最大值為26.2％，作用時間達(dá)30分鐘以上，與對照組比較有非常顯著的療效p＜0.01。
試驗結(jié)果表明，HS組合物的作用對受試犬心率、平均動脈壓、左室內(nèi)壓及心室肌收縮力、心肌耗氧量的降低作用明顯強于單用紅花或山楂葉，提示兩藥配伍應(yīng)用具有協(xié)同增效的作用。
實驗例6 小鼠注射給藥急性毒性實驗(1)實驗方法供試品HS組合物注射液，規(guī)格2ml(處方和制備方法參見實施例3水針劑處方1的制備)。
受試動物小鼠，每組雌雄各5只，雄性體重25～28g，雌性體重21～24g。
給藥途徑靜脈注射、腹腔注射。
觀察項目死亡數(shù)、一般狀態(tài)、體重、剖檢、半數(shù)致死量。
(2)實驗結(jié)果按照急性毒性實驗要求進行預(yù)試，腹腔注射及靜脈注射兩給藥途徑皆無法測出藥物的半數(shù)致死量，也未見明顯的毒性反應(yīng)，故進行一日內(nèi)最大給藥量實驗。給藥劑量尾靜脈注射0.2ml/10g，腹腔注射0.2ml/10g，一日2次。
死亡數(shù)未出現(xiàn)死亡。
一般狀態(tài)未見異常變化。
體重于給藥前1天，給藥日，給藥后1、3、7、14天測量；未見異常變化。
剖檢心、肝、肺、腎等組織未見異常變化。
(3)結(jié)論本實驗中未出現(xiàn)死亡，推測HS組合物注射液對雌雄小鼠靜脈和腹腔注射給藥的最大耐受量均為0.4ml/10g，相當(dāng)于60kg體重人日最大用量20ml的120倍。表明本品低毒，安全性高。
試驗例7 HS組合物注射液穩(wěn)定性試驗供試品HS組合物注射液，處方和制備方法參見實施例3水針劑處方1的制備。
考察項目性狀、pH值、澄明度長期穩(wěn)定性試驗方法及結(jié)果將本品置溫度25℃±2℃、相對濕度60％±10％的條件下放置6個月、12個月，各項指標(biāo)均無明顯變化，實驗結(jié)果表明本發(fā)明組合物注射液長期放置基本穩(wěn)定。
具體實施方式
以下通過實施例形式的具體實施方式
，對本發(fā)明的上述內(nèi)容作進一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實施例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。以下實施例中各劑型的輔料可以用藥學(xué)上可接受的輔料替換，或者減少、增加。實施例3～10中所用的紅花黃色素取自實施例1中的第二批，山楂葉總黃酮取自實施例2中的第二批。
實施例1 紅花黃色素的制備取干燥紅花藥材粗粉，于70℃溫度用pH為3的酸水溫浸提取三次，每次均為50倍量的酸水，每次1.5小時。合并提取液，濾過，收集濾液，放冷，調(diào)pH值至中性，減壓濃縮至相對密度1.05～1.10，加乙醇至醇濃度為70％，冷藏(10℃以下)放置24小時，濾過得沉淀。將沉淀用水溶解，加于已處理好的大孔吸附樹脂HPD100柱色譜(藥材與樹脂比例為1∶10(W/V))，先用去離子水以1～2.5ml/cm2/min的流速洗脫兩個柱床體積，然后用60％的乙醇以1～2.5ml/cm2/min的流速洗脫五個柱床體積。60％醇洗脫部分，減壓濃縮至密度為1.10左右，然后在70℃左右減壓真空干燥或減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后冷凍干燥，即得紅花黃色素。
紅花黃色素的鑒別分別精密稱定羥基紅花黃色素A和紅花黃色素1.0mg至1ml的量瓶中，用水溶解并定容至刻度。分別吸取上述兩種溶液，點于薄層硅膠GF254板，以丙酮∶甲醇∶水(10∶2.5∶1.5)為展開劑，在紫外燈下254nm處觀察可看到相應(yīng)熒光斑點。
紅花黃色素含量測定系統(tǒng)適用性試驗 采用Diamonsil C18-ODS(150×46mm)柱，以甲醇-乙腈-2％醋酸水溶液(26∶2∶72)為流動相，流速為1.0ml/min，柱溫為25℃。
供試品溶液的制備 精密稱取所得紅花黃色素1.5mg，至50ml量瓶中，水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
根據(jù)上述制備方法制得三批紅花黃色素，其得率和含量測定結(jié)果見表4。
表4紅花黃色素含量測定結(jié)果和得率
實施例2 山楂葉總黃酮的制備取山楂葉，加75％乙醇回流提取三次，每次1.5小時，合并提取液，濾過，濾液減壓回收乙醇至無醇味后，加等量水稀釋，用1/2量的石油醚脫脂后，棄去石油醚液，再用乙酸乙酯萃取，萃取液減壓回收乙酸乙酯并濃縮至干，加入適量水使溶解，加于已處理好的聚酰胺柱上(粒度30～60目，用95％乙醇濕法裝柱，先用3倍柱體積的95％乙醇洗脫，后用3倍柱體積的水洗脫至無醇味，備用)，先用2倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，然后用3倍柱體積的80％乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇并濃縮至相對密度約1.02～1.08(60℃)的濃縮液，噴霧干燥，得山楂葉總黃酮。
山楂葉總黃酮的鑒別取本品50mg，加乙醇5ml，搖勻，超聲處理5分鐘，濾過，取濾液作為供試品溶液。另取蘆丁對照品、金絲桃苷對照品，分別加乙醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(附錄VI B)試驗，吸取上述三種溶液各1μl，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以乙醇-丙酮-水(7∶5∶6)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，吹干，放置1小時后，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的熒光。
山楂葉總黃酮的含量測定對照品溶液的制備 精密稱取在120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品25mg，置50ml量瓶中，加乙醇適量，超聲處理(功率300W，頻率50kHz)使溶解，放冷，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml中含無蘆丁0.2mg)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密量取對照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml，分別置25ml量瓶中，各加水至6ml，加5％硝酸鋁溶液1ml，使混勻，放置6分鐘，加10％硝酸鋁溶液1ml，搖勻，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液10ml，再加水至刻度，搖勻，放置15分鐘，以相應(yīng)的試劑為空白，照紫外-可見分光光度法，在500nm的波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)、濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
測定法 取本品0.15g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇25ml，密塞，搖勻，超聲處理5分鐘，放置3小時以上，濾過，精密量取續(xù)濾液2ml，置25ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。精密量取供試品溶液2ml，至25ml量瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項下的方法，自“加水至6ml”起，依法測定吸光度，同時精密量取供試品溶液2ml，置25ml容量瓶中，加水至刻度，搖勻，作為空白溶液。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的量，計算，即得。
金絲桃苷含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性 以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-四氫呋喃-0.5％醋酸溶液(1∶1∶19.4∶78.6)為流動相；檢測波長為363nm。理論塔板數(shù)按金絲桃苷峰計算應(yīng)不低于3000。
對照品溶液的制備 取金絲桃苷對照品適量，精密稱定，加稀乙醇制成每1ml含25μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備 取本品0.15g，精密稱定，研細(xì)，取約0.5g，精密稱定，置50ml量瓶中，加稀乙醇40ml，超聲處理(功率300W，頻率50kHz)30分鐘，放冷，用稀乙醇稀釋至刻度，搖勻，離心(每分鐘12000轉(zhuǎn))10分鐘或用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取上清液或續(xù)濾液，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
按上述工藝分別制得三批山楂葉總黃酮，得率以及含量測定結(jié)果見表5。
表5山楂葉總黃酮得率及含量測定結(jié)果
實施例3 HS組合物水針劑的制備1、處方處方1紅花黃色素 53.25g(相當(dāng)于原藥材2.5kg)山楂葉總黃酮45.20g(相當(dāng)于原藥材2.0kg)注射用水加至2000ml共制備 1000支處方2紅花黃色素 106.50g(相當(dāng)于原藥材5.0kg)山楂葉總黃酮90.40g(相當(dāng)于原藥材4.0kg)注射用水加至5000ml共制備 1000支2、制法1)提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)稱取處方量的紅花黃色素和山楂葉總黃酮。
3)將紅花黃色素和山楂葉總黃酮加入配液量70％的注射用水中加熱攪拌溶解完全。
4)補加注射用水至全量。
5)加入配液量0.05％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
6)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值。
7)經(jīng)0.45μm的微孔濾膜精濾。
8)檢查溶液的澄明度，半成品化驗。
9)將溶液灌封于玻璃安瓿中。
10)100℃流通蒸汽滅菌30分鐘。
11)趁熱將樣品放入0.01％的亞甲藍(lán)溶液中檢漏。
12)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
實施例4 HS組合物粉針劑的制備1、處方處方1紅花黃色素53.25g(相當(dāng)于原藥材2.5kg)山楂葉總黃酮 45.20g(相當(dāng)于原藥材2.0kg)甘露醇300g無菌注射用水 加至3000ml共制備1000支處方2紅花黃色素106.50g(相當(dāng)于原藥材5.0kg)山楂葉總黃酮 90.40g(相當(dāng)于原藥材4.0kg)甘露醇600g無菌注射用水 加至5000ml共制備1000支2、制法1)首先將配液用的容器具及抗生素玻璃瓶，膠塞等進行無菌處理。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)將紅花黃色素和山楂葉總黃酮加入配液量40％無菌注射用水中加熱溶解完全。甘露醇加配液量30％的無菌注射用水加熱攪拌溶解完全，合并上述溶液，補加無菌注射用水至全量。
4)加入配液量0.05％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值。
6)經(jīng)0.22μm的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗。
8)分裝于抗生素玻璃瓶中，半壓塞。將樣品放入凍干機中冷凍干燥。按以下凍干工藝進行凍干①預(yù)凍降溫至-35℃，保持溫度5小時；②低溫升華-35℃保溫，開真空泵抽真空保持2小時，然后緩慢升溫，30小時左右將溫度省至0℃；③高溫干燥2小時內(nèi)升溫至25℃，保溫至2小時；④停機凍干結(jié)束。
9)壓塞，軋蓋。
10)成品全檢，包裝入庫。
實施例5 HS組合物氯化鈉注射液的制備1、處方處方1紅花黃色素53.25g(相當(dāng)于原藥材2.5kg)山楂葉總黃酮 45.20g(相當(dāng)于原藥材2.0kg)氯化鈉900g注射用水 加至100000ml共制備1000瓶處方2紅花黃色素106.50g(相當(dāng)于原藥材5.0kg)山楂葉總黃酮 90.40g(相當(dāng)于原藥材4.0kg)氯化鈉900g注射用水 加至100000ml共制備1000瓶2、制法
1)提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)將紅花黃色素和山楂葉總黃酮加入配液量40％注射用水加熱攪拌溶解完全，將氯化鈉用配液量20％的注射用水溶解完全。
3)合并上述溶液，補加注射用水至全量。
4)加入配液量0.05％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值。
6)經(jīng)0.45μm的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗。
8)灌裝于100ml的輸液瓶中。
9)115℃熱壓滅菌30分鐘。
10)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
實施例6 本發(fā)明組合物葡萄糖注射液的制備處方1、處方1紅花黃色素53.25g(相當(dāng)于原藥材2.5kg)山楂葉總黃酮 45.20g(相當(dāng)于原藥材2.0kg)葡萄糖5000g注射用水 加至100000ml共制備1000瓶處方2紅花黃色素106.50g(相當(dāng)于原藥材5.0kg)山楂葉總黃酮 90.40g(相當(dāng)于原藥材4.0kg)葡萄糖5000g注射用水 加至100000ml共制備1000瓶2、制法1)提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)將紅花黃色素和山楂葉總黃酮加入配液量40％注射用水中加熱攪拌溶解完全，將葡萄糖用配液量20％的注射用水溶解完全，加熱煮沸15分鐘。
3)合并上述溶液，補加注射用水至全量。
4)加入配液量0.05％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值。
6)經(jīng)0.45μm的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗。
8)灌裝于100ml的輸液瓶中。
9)115℃熱壓滅菌30分鐘。
10)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
實施例7 HS組合物片劑的制備1、處方處方1紅花黃色素 53.25g(相當(dāng)于原藥材2.5kg)山楂葉總黃酮45.20g(相當(dāng)于原藥材2.0kg)淀粉120g預(yù)膠化淀粉 40g微晶纖維素 40g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂1.5g羧甲淀粉鈉 3g共制備 1000片處方2紅花黃色素 106.50g(相當(dāng)于原藥材5.0kg)山楂葉總黃酮90.40g(相當(dāng)于原藥材4.0kg)淀粉240g預(yù)膠化淀粉 40g微晶纖維素 80g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂3g羧甲淀粉鈉 6g共制備 1000片2、制法1)將紅花黃色素和山楂葉總黃酮粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2％的水溶液備用。
4)將紅花黃色素、山楂葉總黃酮、淀粉、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2％HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。
5)過20目篩制顆粒。
6)顆粒在55℃的條件下烘干。
7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂和羧甲淀粉鈉，過18目篩整粒，混合均勻。
8)取樣，半成品化驗。
9)按照化驗確定的片重壓片。
10)成品全檢，包裝入庫。
實施例8 HS組合物膠囊劑的制備1、處方處方1紅花黃色素 53.25g(相當(dāng)于原藥材2.5kg)山楂葉總黃酮 45.20g(相當(dāng)于原藥材2.0kg)淀粉 30g預(yù)膠化淀粉 10g微晶纖維素 2g2％HPMC水溶液適量硬脂酸鎂 1g共制備 1000粒處方2紅花黃色素 106.50g(相當(dāng)于原藥材5.0kg)山楂葉總黃酮 90.40g(相當(dāng)于原藥材4.0kg)淀粉 60g預(yù)膠化淀粉 10g微晶纖維素 4g2％HPMC水溶液適量硬脂酸鎂 2g共制備 1000粒2、制法1)將紅花黃色素和山楂葉總黃酮粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2％的水溶液備用。
4)將紅花黃色素、山楂葉總黃酮、淀粉、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2％HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。
5)過20目篩制顆粒。
6)顆粒在60℃的條件下烘干。
7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂，過18目篩整粒，混合均勻。
8)取樣，半成品化驗。
9)按照化驗確定的裝量裝入膠囊。
10)成品全檢，包裝入庫。
實施例9 本發(fā)明組合物顆粒劑的制備1、處方
處方1紅花黃色素 53.25g(相當(dāng)于原藥材2.5kg)山楂葉總黃酮45.20g(相當(dāng)于原藥材2.0kg)糖粉2500g2％HPMC50％乙醇溶液 適量共制備 1000包處方2紅花黃色素 106.50g(相當(dāng)于原藥材5.0kg)山楂葉總黃酮90.40g(相當(dāng)于原藥材4.0kg)糖粉5000g2％HPMC50％乙醇溶液 適量共制備 1000包2、制法1)將蔗糖粉碎過100目篩備用。將丹參酮IIA磺酸鈉和燈盞花提取物粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)將丹參酮IIA磺酸鈉、燈盞花提取物與糖粉以等量遞加的方法混合均勻，加入2％HPMC60％乙醇溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材，4)過20目篩制顆粒。
5)顆粒在50℃的條件下烘干。
6)干顆粒過18目篩整粒。
7)取樣，半成品化驗顆粒中主藥的含量，確定裝量。
8)包裝，成品全檢，包裝入庫。
實施例10 本發(fā)明組合物軟膠囊劑的制備1、處方處方1紅花黃色素 53.25g(相當(dāng)于原藥材2.5kg)山楂葉總黃酮45.20g(相當(dāng)于原藥材2.0kg)大豆油 150g大豆磷脂40g蜂蠟15g共制備 1000粒處方2紅花黃色素 106.50g(相當(dāng)于原藥材5.0kg)山楂葉總黃酮90.40g(相當(dāng)于原藥材4.0kg)大豆油 300g大豆磷脂80g蜂蠟30g共制備 1000粒
2、制法將處方量的大豆油和大豆磷脂、蜂蠟加熱熔融，混勻，放冷，加入紅花黃色素和紅景天提取物研勻，壓制成軟膠囊即可。
權(quán)利要求
1.一種新的藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物主要由以下重量份數(shù)的中藥原料制成紅花0.5～15份、山楂葉0.1～10份。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，中藥原料的重量份數(shù)為紅花1～5份、山楂葉1～4份。
3.如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，中藥原料的重量份數(shù)為紅花2.5份、山楂葉2份。
4.如權(quán)利要求1～3所述的任一藥物組合物，其特征在于，其中的紅花和山楂葉可以用適宜的溶劑和方法單提或混提制備得到提取物，總提取物再與藥學(xué)上可接受的輔料混合制成任一制劑。
5.如權(quán)利要求4所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于，提取物的主要的有效成分為紅花黃色素和山楂葉總黃酮，提取物中主要有效成分的總含量不低于20％。
6.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，還可以由以下重量份的原料藥制成紅花黃色素5～450份、山楂葉總黃酮1～300份。
7.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，其原料藥的重量份數(shù)為紅花黃色素10～150份、山楂葉總黃酮10～120份。
8.如權(quán)利要求7所述的藥物組合物，其特征在于，其原料藥的重量份數(shù)為紅花黃色素25～100份、山楂葉總黃酮20～60份。
9.如權(quán)利要求6～8所述的任一藥物組合物，其特征在于，紅花黃色素中羥基紅花黃色素A的含量不低于25％，山楂葉總黃酮含總黃酮以無水蘆丁(C27H30O16)計不低于30％，含金絲桃苷(C21H20O12)不低于0.10％。
10.如權(quán)利要求1～3、6～8所述的任一藥物組合物，其特征在于該藥物組合物可以制成任何一種臨床或藥學(xué)上可接受的劑型。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種用于治療心腦血管疾病的藥物組合物及其制備方法，該組合物主要由紅花和山楂葉制成，其原料藥的重量份數(shù)為紅花0.5～15份、山楂葉0.1～10份；還可以以兩者的提取物紅花黃色素及山楂葉總黃酮制成，其重量份數(shù)為紅花黃色素5～450份、山楂葉總黃酮1～300份。該藥物組合物可以制成任何一種臨床上或藥學(xué)上可接受的劑型。兩藥協(xié)同作用，主要用于治療腦血栓、冠心病、心絞痛、脈管炎、心肌梗塞及高脂血癥等方面疾病。
文檔編號A61K31/352GK101049355SQ20061004341
公開日2007年10月10日 申請日期2006年4月3日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月3日
發(fā)明者黃振華 申請人:黃振華