專利名稱：一種芳香化酶抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及動(dòng)物性別研究領(lǐng)域，具體地說是關(guān)于來曲唑作為芳香化酶抑制劑在誘導(dǎo)斜帶石斑魚提前性逆轉(zhuǎn)中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
斜帶石斑魚(Epinephelus coioides)，屬鱸形目、鮨科、石斑魚亞科，石斑魚屬。其肉質(zhì)鮮美，營養(yǎng)豐富，為餐桌中的上等佳肴。其生長快、市場價(jià)格高且穩(wěn)定，是目前我國沿海地區(qū)重要的海水養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)魚類。斜帶石斑魚是一種雌性先熟的雌雄同體魚類，開始為雌性，在體長為500～750mm時(shí)發(fā)生性逆轉(zhuǎn)，雄性需6齡左右才成熟，在人工繁殖時(shí)常會(huì)遇到難以同時(shí)得到功能性雄性和雌性親魚的問題，給種苗生產(chǎn)造成很大困難。因此，如何使斜帶石斑魚提早性轉(zhuǎn)變，盡早獲得功能性的雄魚顯得非常重要。目前，在誘導(dǎo)斜帶石斑魚提前性逆轉(zhuǎn)的研究中，主要還是應(yīng)用性類固醇激素，如甲基睪酮(MT)。但MT是一種禁藥，不易購買，而且使用后可能會(huì)造成環(huán)境激素污染。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)來曲唑也能夠作為芳香化酶抑制劑，能夠誘導(dǎo)斜帶石斑魚提前性逆轉(zhuǎn)。目前，來曲唑主要用于治療婦女的乳腺癌，而用于控制魚類性別還無報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種購買容易、使用方便、副作用小的芳香化酶抑制劑。
芳香化酶是動(dòng)物體內(nèi)催化雄激素向雌激素轉(zhuǎn)化的一個(gè)關(guān)鍵酶，通過抑制芳香化酶活性可降低體內(nèi)雌激素的水平，從而提高動(dòng)物體內(nèi)雄激素與雌激素的比例，誘導(dǎo)動(dòng)物向雄性方向發(fā)展。
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)來曲唑(1etrozole)能夠作為芳香化酶抑制劑，能夠有效抑制雌激素的產(chǎn)生，但對(duì)腎上腺類固醇激素的代謝無影響，因此，這是一個(gè)選擇性很強(qiáng)的芳香化酶抑制劑。
本發(fā)明應(yīng)用投喂來曲唑以誘導(dǎo)斜帶石斑魚提前性逆轉(zhuǎn)的方法，操作簡單方便，可供人工養(yǎng)殖，效果顯著，有很大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。另外，來曲唑不是一種性激素，不會(huì)對(duì)環(huán)境造成激素污染。
圖1為實(shí)驗(yàn)進(jìn)行20天，來曲唑組中一條斜帶石斑魚的性腺切片圖；圖2為實(shí)驗(yàn)進(jìn)行20天，空白對(duì)照組中一條斜帶石斑魚的性腺切片圖；圖3為實(shí)驗(yàn)進(jìn)行40天，來曲唑組中一條斜帶石斑魚的性腺切片圖；圖4為實(shí)驗(yàn)進(jìn)行40天，空白對(duì)照組中一條斜帶石斑魚性腺切片圖；圖5為實(shí)驗(yàn)進(jìn)行60天，來曲唑組中一條已完成性逆轉(zhuǎn)的斜帶石斑魚的性腺切片圖；圖6為實(shí)驗(yàn)進(jìn)行60天，來曲唑組中一條已處在性逆轉(zhuǎn)后期的斜帶石斑魚的性腺切片圖；
圖7為實(shí)驗(yàn)進(jìn)行60天，空白對(duì)照組中一條斜帶石斑魚的性腺切片圖。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1從廣東省大亞灣附近水域漁排網(wǎng)箱購買2齡斜帶石斑魚40尾，體重0.6～1Kg，暫養(yǎng)于大亞灣水產(chǎn)試驗(yàn)中心漁排網(wǎng)箱(5*5*3m)。暫養(yǎng)2周后，斜帶石斑魚隨機(jī)分為兩組，每組20尾，分養(yǎng)于兩個(gè)網(wǎng)箱，其中一個(gè)箱為來曲唑組，另外一個(gè)箱為空白對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)在2003年5～8月間進(jìn)行，平均水溫26.5～29.6℃。
投喂方法如下把冰鮮魚打成魚漿，再添加適當(dāng)比例的配合餌料、高質(zhì)魚油、水制作餌料?？瞻讓?duì)照組只投喂餌料，來曲唑組則在餌料中添加來曲唑，按每公斤餌料添加2mg來曲唑的比例添加。每天定時(shí)投喂2次，投餌量約為魚體重的5％，未吃完的殘餌及時(shí)清除。
在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行到20、40和60天時(shí)從各組隨機(jī)抽取5尾魚，解剖取其性腺樣品。性腺樣品用波恩氏固定液液(Bouin’s)固定，石蠟包埋，連續(xù)切片，切片厚度為5～8μM，哈利氏蘇木精-伊紅染色，Olympus BX40型顯微鏡下觀察性腺發(fā)育狀況，并拍照。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果(1)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行到20天時(shí)，從來曲唑組取樣5條魚，組織切片觀察，發(fā)現(xiàn)其中一條魚出現(xiàn)初級(jí)精母細(xì)胞，如圖1所示，其余4條在切片中未發(fā)現(xiàn)初級(jí)精母細(xì)胞。因此，處理20天時(shí)，來曲唑組有20％的魚發(fā)生性逆轉(zhuǎn)；而空白對(duì)照組魚性腺與實(shí)驗(yàn)開始時(shí)無明顯變化，性腺仍處在II期卵巢，如圖2所示。
(2)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行到40天時(shí)，從來曲唑組取樣5條魚，組織切片觀察，發(fā)現(xiàn)所有的魚的性腺切片圖中都出現(xiàn)了精巢組織，其中4條魚的性腺切片中出現(xiàn)了大量的精巢組織，已處在性逆轉(zhuǎn)后期，如圖3所示。而空白對(duì)照組性腺與實(shí)驗(yàn)開始時(shí)一樣無明顯變化，性腺仍處在II期卵巢，如圖4所示。
(3)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行到60天時(shí)，從來曲唑組中取樣5條魚，組織切片觀察，發(fā)現(xiàn)其中有3條魚完成了性逆轉(zhuǎn)，如圖5所示；另外兩條存在少量退化的初級(jí)卵母細(xì)胞，如圖6所示。因此，處理60天時(shí)，有60％的斜帶石斑魚完成了性逆轉(zhuǎn)，其余處在性逆轉(zhuǎn)后期。而空白對(duì)照組性腺切片顯示其性腺仍處在II期卵巢，如圖7所示。
從上面的結(jié)果看出投喂來曲唑(2mg/Kg飼料)20天時(shí)，有部分2齡斜帶石斑魚(20％)開始了性逆轉(zhuǎn)；投喂40天后，大部分2齡斜帶石斑魚(80％)處在性逆轉(zhuǎn)的后期；投喂60天后，大部分2齡斜帶石斑魚(60％)完成了性逆轉(zhuǎn)，性腺由卵巢變成了精巢。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，空白對(duì)照組斜帶石斑魚性腺變化不明顯，一直處在II期卵巢。這些結(jié)果表明給2齡斜帶石斑魚投喂來曲唑(2mg/Kg飼料)，經(jīng)過60天的處理，能有效地誘導(dǎo)其提前性逆轉(zhuǎn)。
權(quán)利要求
1.一種芳香化酶抑制劑，其特征在于所述的芳香化酶抑制劑為來曲唑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芳香化酶抑制劑，其特征在于所述的來曲唑在誘導(dǎo)動(dòng)物雄性化中的應(yīng)用。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的芳香化酶抑制劑，其特征在于所述的來曲唑在誘導(dǎo)雌雄同體魚類提前性逆轉(zhuǎn)中的應(yīng)用。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的芳香化酶抑制劑，其特征在于所述的來曲唑在誘導(dǎo)斜帶石斑魚提前性逆轉(zhuǎn)中的應(yīng)用。
全文摘要
一種芳香化酶抑制劑。芳香化酶是動(dòng)物體內(nèi)催化雄激素向雌激素轉(zhuǎn)化的一個(gè)關(guān)鍵酶，通過抑制芳香化酶活性可降低體內(nèi)雌激素的水平，從而提高動(dòng)物體內(nèi)雄激素與雌激素的比例，誘導(dǎo)動(dòng)物向雄性方向發(fā)展。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)來曲唑能夠作為芳香化酶抑制劑，在誘導(dǎo)斜帶石斑魚提前性逆轉(zhuǎn)中，操作簡單方便，效果顯著，有很大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。另外，來曲唑不是一種性激素，不會(huì)對(duì)環(huán)境造成激素污染。
文檔編號(hào)A61K31/4196GK1628659SQ20041005119
公開日2005年6月22日 申請(qǐng)日期2004年8月24日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月24日
發(fā)明者張為民, 張勇, 張利紅, 林浩然 申請(qǐng)人:中山大學(xué)