專利名稱：治療高血脂癥的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療高血脂癥的新的組合物，特別是含有阿昔莫司和匹伐他汀鈣及藥用輔料的組合物。
背景技術(shù)：
隨著醫(yī)藥科學(xué)的不斷發(fā)展，人們認(rèn)識(shí)到膽固醇、脂肪等含量過(guò)高是發(fā)生心血管疾病的基本病因，高血脂是發(fā)生冠心病及高血壓的主要危險(xiǎn)因素。因此，人們開(kāi)始把血脂調(diào)節(jié)藥的開(kāi)發(fā)作為防治心血管疾病的重點(diǎn)。自20世紀(jì)80年代末起，降血脂藥物大量推出，其中他汀類藥物受到人們好評(píng)，其臨床療效之佳是其它各類調(diào)節(jié)血脂藥物所不能相比的。十多年來(lái)，幾個(gè)國(guó)際大規(guī)模冠心病防治試驗(yàn)的完成，證實(shí)他汀類藥物可以降低冠心病的發(fā)病率和死亡率，而且能使已經(jīng)形成的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊發(fā)展減緩，甚至減退，從而打破了冠心病不可逆轉(zhuǎn)的傳統(tǒng)觀念，由“他汀”引發(fā)的一場(chǎng)血脂革命正在全球興起。目前，醫(yī)藥界對(duì)調(diào)脂藥在防治心血管疾病方面的作用充滿信心，調(diào)脂療法將成為21世紀(jì)預(yù)防心血管疾病的主要方法。
匹伐他汀(Pitavastatin)是第一個(gè)全合成的羥甲戊二酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑類調(diào)血脂新藥，無(wú)需代謝轉(zhuǎn)化而直接具有藥理活性。本品在體內(nèi)競(jìng)爭(zhēng)性地抑制膽固醇合成過(guò)程中的限速酶羥甲戊二酰輔酶A還原酶，使膽固醇的合成減少，繼而使低密度脂蛋白受體合成增加，從而加強(qiáng)了由受體介導(dǎo)的低密度脂蛋白膽固醇的分解和清除，本品還抑制極低密度脂蛋白膽固醇的合成從而減少低密度脂蛋白膽固醇的生成。以上主要作用部位在肝臟，結(jié)果使血膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇水平降低，由此對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病的防治產(chǎn)生作用。最近的研究顯顯示，匹伐他汀可以通過(guò)誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞中NO合酶的活性，增加NO的生成，對(duì)由炎癥誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞損傷產(chǎn)生顯著的保護(hù)作用[1]。本品還可中度降低血甘油三酯水平和輕度升高血高密度脂蛋白膽固醇水平。臨床主要用于治療高膽固醇血癥和混合型高脂血癥，最大降脂作用在4周內(nèi)達(dá)到。經(jīng)大量臨床研究證實(shí)，本品具有優(yōu)良的效益/風(fēng)險(xiǎn)比率，毒性低，副作用少而輕微，患者耐受性良好，是安全有效的降脂藥物。上市的是其鈉鹽。
阿昔莫司(Acipimox)是一種人工合成的煙酸衍生物，能抑制脂肪組織的分解，減少游離脂肪酸自脂肪組織釋放，從而降低甘油三酯(TG)在肝臟中的合成，并通過(guò)抑制極低密度脂蛋白(VLDL)和低密度脂蛋白(LDL)的合成，使血清中甘油三酯(TG)和總膽固醇(TC)的濃度下降。本品還可抑制肝臟脂肪酶的活性，減少高密度脂蛋白(HDL)的分解。該藥口服吸收迅速，藥后2小時(shí)內(nèi)血藥濃度即達(dá)峰值，半衰期為2小時(shí)。該藥不與血漿蛋白結(jié)合，不被代謝，主要以原形經(jīng)尿排出。在臨床上，阿昔莫司可有效治療高甘油三酯癥(Ⅳ型)、高膽固醇血癥(IIa型)及高甘油三酯合并高膽固醇血癥(IIb型)，是一種安全、有效、耐受性好的調(diào)血脂藥。
目前，該領(lǐng)域的研究趨勢(shì)是將兩種不同作用機(jī)制的調(diào)血脂藥制成復(fù)方制劑，從而使降脂作用更加全面，同時(shí)還可發(fā)揮協(xié)同作用，增強(qiáng)療效，減少毒副作用。
美國(guó)專利US5260305A公開(kāi)了HMG-CoA還原酶抑制劑普伐他汀和煙酸及其衍生物的組合物，具體公開(kāi)了規(guī)格為普伐他汀5mg、10mg、20mg、40mg和阿昔莫司750mg的組合物的制備，但沒(méi)有公開(kāi)其有益效果及最佳配比的藥理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，更沒(méi)有涉及到匹伐他汀和阿昔莫司的聯(lián)合用藥問(wèn)題。
中國(guó)專利申請(qǐng)CN1425374A公開(kāi)了阿昔莫司和洛伐他汀組合物，公開(kāi)的比例是阿昔莫司和洛伐他汀的重量比為25～50∶1，優(yōu)選的比例是25∶1或37.5∶1，但沒(méi)有涉及阿昔莫司和匹伐他汀復(fù)方的最佳配比及相應(yīng)藥理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
發(fā)明目的本發(fā)明的目的是通過(guò)一系列科學(xué)的篩選實(shí)驗(yàn)，提供一種新的治療高脂血癥的藥物組合物，其優(yōu)點(diǎn)是作用全面和增強(qiáng)、毒副作用低和使用方便。本藥物含有特定比例的阿昔莫司和匹伐他汀鹽，由于兩藥作用機(jī)制不同，組成組合物后降脂作用將更加全面，并且兩藥合用有協(xié)同作用，其降脂作用明顯優(yōu)于相同劑量的單方；此外，通過(guò)合理選擇組合物中匹伐他汀鹽的用量，使組合物在有效降低血脂水平的同時(shí)又無(wú)明顯的毒副作用，同時(shí)本組合物一日只需用藥一次，用藥方便，這將大大提高患者的順應(yīng)性。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的組合物由阿昔莫司和匹伐他汀鈣以及藥用輔料組成，其中阿昔莫司和以游離酸計(jì)的匹伐他汀鈣的重量比為50～800∶1，優(yōu)選的比例的是100～400∶1，進(jìn)一步優(yōu)選的比例的是200∶1。該組合物的藥物制劑的劑型，包括片劑、膠囊、顆粒劑、丸劑、滴丸等固體制劑，可以按照本領(lǐng)域公知的一般制劑方法制備，阿昔莫司含量相當(dāng)于在將組合物給藥時(shí)約200～750mg的日劑量，匹伐他汀鹽含量以游離酸計(jì)相當(dāng)于0.25～2mg的日劑量。匹伐他汀鹽包括鈉鹽、鉀鹽等堿金屬鹽或鎂、鈣等堿土金屬鹽，優(yōu)選鈉鹽。
本發(fā)明的組合物在制成固體制劑，如片劑或膠囊時(shí)，為達(dá)到持久的治療效果，優(yōu)選地將有效量的阿昔莫司制成緩釋部分，再與有效量的匹伐他汀鹽共同制成緩釋制劑，如緩釋片、緩釋膠囊等。相應(yīng)地，可藥用的輔料包括稀釋劑，如淀粉、乳糖、甘露醇、預(yù)膠化淀粉、糊精、微晶纖維素；崩解劑，如羧甲基淀粉鈉、羥丙基淀粉、低取代羥丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉；緩釋劑，如乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素-4M、羥丙基甲基纖維素-15M；優(yōu)特奇RS-100、RL100、RS30D、RL30D、NE30D，以及蘇麗絲(Surelease，乙基纖維素的水分散體)粘合劑，如聚乙烯吡咯烷酮，交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮，潤(rùn)滑劑，如硬脂酸鎂、滑石粉、微粉硅膠等。
本發(fā)明的組合物通過(guò)藥理方面的研究工作，表明當(dāng)采用本發(fā)明的組合物，尤其是采用優(yōu)選的配比時(shí)，與單獨(dú)應(yīng)用有效量的阿昔莫司或匹伐他汀鹽相比，本發(fā)明的組合物給出令人吃驚的更好效果，同時(shí)毒性沒(méi)有增加，因而安全劑量范圍大，療效持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，綜合效果好，使用方便。本發(fā)明的組合物可以每日1～2次給藥，優(yōu)選為每日1次。
本發(fā)明中匹伐他汀可以為任何一種可以藥用的鹽，即合適的匹伐他汀生理可接受的鹽，包括衍生自無(wú)機(jī)的和有機(jī)的堿所形成的鹽，為鈉鹽、鈣鹽、鉀鹽、鎂鹽、鋅鹽、鐵鹽；也可以為任何一種匹伐他汀可以藥用的酯，即合適的匹伐他汀生理可接受的酯，包括衍生自脂肪醇、芳香醇、雜環(huán)醇所形成的酯，為甲酯、乙酯、烯丙酯、苯酯。
具體實(shí)施例方式
現(xiàn)通過(guò)如下實(shí)例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的內(nèi)容，但本發(fā)明的應(yīng)用范圍不限于下列實(shí)例。
實(shí)例1a、阿昔莫司200g空白丸芯250g7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇) 200g制備工藝將阿昔莫司過(guò)120目篩，處方量稱取，倒入下料斗中。開(kāi)造粒包衣機(jī)，入風(fēng)壓力0.5bar，入風(fēng)溫度30℃，噴槍壓力(CYL)3bar，霧化壓力(CAP1)0.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵12％，轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)速145rpm，噴7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)。造粒結(jié)束，50℃烘干，出料。
b、匹伐他汀鈣 0.5g(以匹伐他汀游離酸計(jì))空白丸芯30g7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇) 30g制備工藝將匹伐他汀鈣過(guò)120目篩，處方量稱取，倒入下料斗中。開(kāi)造粒包衣機(jī)，入風(fēng)壓力0.5bar，入風(fēng)溫度30℃，CYL3bar，CAP10.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵6％，轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)速160rpm，噴7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)。造粒結(jié)束，45℃烘干，出料。
c、將a和b制得的小丸采用硬膠囊藥物填充機(jī)按照每?jī)闪Ｄz囊中含阿昔莫司與匹伐他汀鈣(以游離酸計(jì))的量分別為200mg和0.5mg進(jìn)行填充，即可。
實(shí)例2a、阿昔莫司 200g乳糖 30g羧甲基淀粉鈉 30g微晶纖維素18g
6％PVP的無(wú)水乙醇溶液100g硬脂酸鎂2g制備工藝阿昔莫司過(guò)100目篩，乳糖、羧甲基淀粉鈉、微晶纖維素過(guò)80目篩，稱取處方量的阿昔莫司和乳糖、羧甲基淀粉鈉、微晶纖維素混合均勻，加入6％PVP無(wú)水乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。
b、匹伐他汀鈣 1g(以匹伐他汀游離酸計(jì))羥丙基纖維素 30g預(yù)膠化淀粉 20g6％PVP的無(wú)水乙醇溶液 30g山榆酸甘油酯 1g制備工藝匹伐他汀鈣過(guò)100目篩，羥丙基纖維素、預(yù)膠化淀粉過(guò)80目篩，稱取處方量的匹伐他汀鈣和羥丙基纖維素、預(yù)膠化淀粉混合均勻，加入6％PVP的無(wú)水乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的山榆酸甘油酯。
c、將上述a，b兩種組分采用雙層壓片機(jī)沖壓片即得雙層片，每片含阿昔莫司與匹伐他汀鈣(以游離酸計(jì))的量分別為200mg和1mg。
實(shí)例3a、阿昔莫司 200g乳糖 30g羧甲基淀粉鈉 30g微晶纖維素 18g6％PVP的無(wú)水乙醇溶液 100g硬脂酸鎂 2g制備工藝阿昔莫司過(guò)100目篩，乳糖、羧甲基淀粉鈉、微晶纖維素過(guò)80目篩，稱取處方量的阿昔莫司和乳糖、羧甲基淀粉鈉、微晶纖維素混合均勻，加入6％PVP無(wú)水乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。
b、匹伐他汀鈣 1.5g(以匹伐他汀游離酸計(jì))羥丙基纖維素 50g預(yù)膠化淀粉 40g6％PVP的無(wú)水乙醇溶液 50g山榆酸甘油酯 2g制備工藝匹伐他汀鈣過(guò)100目篩，羥丙基纖維素、預(yù)膠化淀粉過(guò)80目篩，稱取處方量的匹伐他汀鈣和羥丙基纖維素、預(yù)膠化淀粉混合均勻，加入6％PVP的無(wú)水乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的山榆酸甘油酯。
c、將上述a，b兩種組分采用雙層壓片機(jī)沖壓片即得雙層片，每片含阿昔莫司與匹伐他汀鈣(以游離酸計(jì))的量分別為200mg和1.5mg。
實(shí)例4a、阿昔莫司 200g乳糖 30g羧甲基淀粉鈉 30g微晶纖維素18g6％PVP的無(wú)水乙醇溶液 100g硬脂酸鎂 2g制備工藝阿昔莫司過(guò)100目篩，乳糖、羧甲基淀粉鈉、微晶纖維素過(guò)80目篩，稱取處方量的阿昔莫司和乳糖、羧甲基淀粉鈉、微晶纖維素混合均勻，加入6％PVP無(wú)水乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。
b、匹伐他汀鈣2g(以匹伐他汀游離酸計(jì))羥丙基纖維素 75g預(yù)膠化淀粉60g6％PVP的無(wú)水乙醇溶液 50g山榆酸甘油酯 2g制備工藝匹伐他汀鈣過(guò)100目篩，羥丙基纖維素、預(yù)膠化淀粉過(guò)80目篩，稱取處方量的匹伐他汀鈣和羥丙基纖維素、預(yù)膠化淀粉混合均勻，加入6％PVP的無(wú)水乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的山榆酸甘油酯。
c、將上述a，b兩種組分采用雙層壓片機(jī)沖壓片即得雙層片，每片含阿昔莫司與匹伐他汀鈣(以游離酸計(jì))的量分別為200mg和2mg。
實(shí)例5a、阿昔莫司 300g羥丙基甲基纖維素-4M40g微晶纖維素 30g8％PVP的無(wú)水乙醇溶液 150g硬酯酸鎂 2g制備工藝阿昔莫司過(guò)100目篩，羥丙基纖維素-4M、微晶纖維素過(guò)80目篩，稱取處方量的阿昔莫司和羥丙基纖維素-4M、微晶纖維素混合均勻，加入8％PVP無(wú)水乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。
b、匹伐他汀鈣 1g(以匹伐他汀游離酸計(jì))羧甲基纖維素鈉 30g乳糖 20g6％PVP的95％乙醇溶液 50g硬酯酸鎂 2g制備工藝匹伐他汀鈣過(guò)100目篩，羧甲基纖維素鈉、乳糖過(guò)80目篩，稱取處方量的匹伐他汀鈣和羧甲基纖維素鈉、乳糖混合均勻，加入6％PVP的95％乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。
c、將上述a，b兩種組分采用雙層壓片機(jī)沖壓即得雙層片，每片含阿昔莫司與匹伐他汀鈣(以游離酸計(jì))的量分別為300mg和1mg。
實(shí)例6a、阿昔莫司 300g空白丸芯 250g7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)200g制備工藝將阿昔莫司過(guò)120目篩，處方量稱取，倒入下料斗中。開(kāi)造粒包衣機(jī)，入風(fēng)壓力0.5bar，入風(fēng)溫度30℃，CYL3bar，CAP10.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵12％，轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)速145rpm，噴7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)。造粒結(jié)束，50℃烘干，出料。
b、a中制得的含阿昔莫司小丸Surelease 90g滑石粉1g純水 50g制備工藝將a中制得的含阿昔莫司小丸倒入轉(zhuǎn)盤(pán)，開(kāi)造粒包衣機(jī)，入風(fēng)壓力1.0bar，入風(fēng)溫度30℃，CYL3bar，CAP11.5bar，蠕泵5％，轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)速180rpm，噴入Surelease的純水溶液。包衣結(jié)束，50℃烘干，出料。
c、按照實(shí)例1中b的要求制得匹伐他汀鈣小丸，與本例b中制得的阿昔莫司小丸采用硬膠囊藥物填充機(jī)按照每?jī)闪Ｄz囊中含阿昔莫司與匹伐他汀鈣(以游離酸計(jì))的量分別為300mg和0.5mg進(jìn)行填充，即可。
實(shí)例7a、阿昔莫司 300g空白丸芯 300g7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇) 200g制備工藝將阿昔莫司過(guò)120目篩，處方量稱取，倒入下料斗中。開(kāi)造粒包衣機(jī)，入風(fēng)壓力0.5bar，入風(fēng)溫度30℃，CYL3bar，CAP10.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵12％，轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)速145rpm，噴入7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)。造粒結(jié)束，50℃烘干，出料。
b、a中制得的含阿昔莫司小丸乙基纖維素 40g
硬脂酸70g聚乙二醇-6000 6g滑石粉12g95％乙醇 1000g制備工藝將a中制得的含阿昔莫司小丸倒入下料斗中。開(kāi)造粒包衣機(jī)，入風(fēng)溫度30℃，入風(fēng)壓力0.5bar，入風(fēng)溫度30℃，CYL3bar，CAP11.0bar，蠕泵6％，轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)速175rpm，噴入乙基纖維素、硬脂酸和聚乙二醇-6000的95％乙醇溶液。包衣結(jié)束，50℃烘干，出料。
c、匹伐他汀鈣 1.5g(以匹伐他汀游離酸計(jì))空白丸芯 90g7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇) 30g制備工藝將匹伐他汀鈣過(guò)120目篩，處方量稱取，倒入下料斗中，開(kāi)造粒包衣機(jī)，入風(fēng)壓力0.5bar，入風(fēng)溫度30℃，CYL3bar，CAP10.8bar，倒入空白丸芯，造粒。下料速度4rpm，蠕泵12％，轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)速120rpm，噴入7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)。造粒結(jié)束，45℃烘干，出料。
d、將b與c制得的小丸采用硬膠囊藥物填充機(jī)按照每?jī)闪Ｄz囊中含阿昔莫司與匹伐他汀鈣(以游離酸計(jì))的量分別為300mg和1.5mg進(jìn)行填充，即可。
實(shí)例8a、阿昔莫司 400g甘露醇 10g乳糖 40g微晶纖維素 20g6％PVP的95％乙醇溶液 120g硬酯酸鎂 2g制備工藝阿昔莫司過(guò)100目篩，甘露醇、乳糖、微晶纖維素過(guò)80目篩，稱取處方量的阿昔莫司和甘露醇、乳糖、微晶纖維素混合均勻，加入6％PVP的95％乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。
b、匹伐他汀鈣 0.5g(以匹伐他汀游離酸計(jì))預(yù)膠化淀粉 50g甘露醇 50g乳糖40g6％PVP的95％乙醇溶液100g微粉硅膠5g制備工藝匹伐他汀鈣過(guò)100目篩，預(yù)膠化淀粉、甘露醇、乳糖過(guò)80目篩，稱取處方量的匹伐他汀鈣和預(yù)膠化淀粉、甘露醇、乳糖混合均勻，加入6％PVP的95％乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。
c、將上述a，b兩種組分采用雙層壓片機(jī)沖壓即得雙層片，每片含阿昔莫司與匹伐他汀鈣(以游離酸計(jì))的量分別為400mg和0.5mg。
實(shí)例9a、阿昔莫司400g乳糖30g羥丙基甲基纖維素-15M20g8％PVP的95％乙醇溶液150g山榆酸甘油酯2g制備工藝阿昔莫司過(guò)100目篩，乳糖、羥丙基甲基纖維素-15M過(guò)80目篩，稱取處方量的阿昔莫司和乳糖、羥丙基甲基纖維素-15M混合均勻，加入8％PVP的95％乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的山榆酸甘油酯。
b、匹伐他汀鈣 1g(以匹伐他汀游離酸計(jì))羥丙基纖維素75g糊精70g6％PVP的95％乙醇溶液50g滑石粉 2g制備工藝匹伐他汀鈣過(guò)100目篩，羥丙基纖維素、糊精過(guò)80目篩，稱取處方量的匹伐他汀鈣和羥丙基纖維素、糊精混合均勻，加入6％PVP的95％乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的滑石粉。
c、將上述a，b兩種組分采用雙層壓片機(jī)沖壓即得雙層片，每片含阿昔莫司與匹伐他汀鈣(以游離酸計(jì))的量分別為400mg和1mg。
實(shí)例10阿昔莫司和匹伐他汀鈣復(fù)方治療大鼠高血脂癥的復(fù)方篩選摘要本試驗(yàn)的目的在于通過(guò)篩選確定毒性低、作用強(qiáng)、使用方便的阿昔莫司和匹伐他汀鈣復(fù)方制劑的組成。采用高脂飼料誘發(fā)大鼠高脂血癥模型，給模型大鼠連續(xù)灌服阿昔莫司(100～400mg/kg)和(或)匹伐他汀鈣(0.25～2mg/kg，以游離酸計(jì)，下述匹伐他汀鈣的劑量均以匹伐他汀游離酸計(jì))14天。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，阿昔莫司和匹伐他汀鈣伍用對(duì)高脂飼料所致的大鼠高脂血癥有明顯的治療作用，降脂效果與兩種藥物的劑量相關(guān)，阿昔莫司200～400mg/kg與匹伐他汀鈣0.5～2mg/kg組成的復(fù)方可不同程度地降低大鼠血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇水平(LDL-C)，升高高密度脂蛋白膽固醇水平(HDL-C)。其中阿昔莫司300mg/kg和匹伐他汀鈣1.5mg/kg聯(lián)合用藥組效果最顯著，對(duì)TC和LDL-C水平均表現(xiàn)出協(xié)同作用，并且對(duì)高血脂模型大鼠血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和肌酸激酶的水平影響較小，優(yōu)選阿昔莫司300mg/kg和匹伐他汀鈣1.5mg/kg組成的復(fù)方。在本實(shí)驗(yàn)劑量范圍內(nèi)，聯(lián)合用藥組對(duì)與肝臟和肌肉毒性相關(guān)的血清酶活性無(wú)明顯影響。
1試驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^(guò)篩選確定阿昔莫司和匹伐他汀鈣復(fù)方制劑的組成，以達(dá)到復(fù)方制劑毒副作用低、作用全面和增強(qiáng)、使用方便之目的。
2受試藥物2.1煙酸衍生物藥品名稱阿昔莫司(Acipimox)
批號(hào)0308002純度大于99.7％生產(chǎn)單位魯南制藥股份有限公司保存條件陰涼干燥處保存，有效期1年半。
配制方法臨用前用1％羧甲基纖維素鈉(CMC)混勻，配成試驗(yàn)所需濃度。
2.2他汀類藥物藥品名稱匹伐他汀鈣(Pitavastatin calcium)批號(hào)0309002純度大于99.0％提供單位山東新時(shí)代藥業(yè)有限公司保存條件陰涼干燥處保存，有效期2年。
配制方法臨用前用1％CMC混勻，配成試驗(yàn)所需濃度。
3動(dòng)物3.1品系和來(lái)源Wistar大鼠，軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心繁殖，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量許可證號(hào)為醫(yī)動(dòng)字D01-3039。
3.2體重和性別年齡9周～10周，體重180-220g，雄性。
3.3飼養(yǎng)條件動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室空氣定時(shí)排風(fēng)、光照良好，常溫。每籠飼養(yǎng)5只動(dòng)物，飼以本院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心專門(mén)為大鼠配制的膨化飼料，自由飲水。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)條件合格證號(hào)為醫(yī)動(dòng)字D01-2051。試驗(yàn)開(kāi)始前，觀察動(dòng)物進(jìn)食、活動(dòng)及糞便等1周，選擇健康動(dòng)物進(jìn)入試驗(yàn)。
4大鼠高脂血癥模型制備[2]大鼠高脂血癥模型采用高脂飼料致高脂血癥法。高脂飼料配方如下基礎(chǔ)飼料86.3％、膽固醇3％、豬油10％、甲基硫氧嘧啶0.2％、豬膽鹽0.5％，保證l成分混合均勻。連續(xù)2周。給藥期間隔天給予高脂飼料。
5阿昔莫司和匹伐他汀鈣對(duì)正常大鼠血脂水平的影響5.1劑量設(shè)置依據(jù)臨床上阿昔莫司的劑量為250mg/次(按人體重60kg計(jì)算，上述劑量為4.2mg/kg)，2～3次/日，每日量最大不超過(guò)1200mg[3]。按體表面積為單位的劑量等效原則推算，上述人常用劑量換算成大鼠劑量約為50mg/kg/day。結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道[4]，將本試驗(yàn)中阿昔莫司的劑量設(shè)定為100、200、300、400mg/kg。
臨床上匹伐他汀鈣的劑量為1～2mg/次，按人體重60kg計(jì)算，上述劑量為0.165～0.33mg/kg，1次/日，每日量最大不超過(guò)4mg。按體表面積為單位的劑量等效原則推算，上述人常用劑量換算成大鼠劑量約為0.0425mg/kg。參考文獻(xiàn)報(bào)道，將本試驗(yàn)中匹伐他汀鈣的劑量設(shè)定為0.25、0.5、1、1.5、2mg/kg。
5.2組別設(shè)置依據(jù)上述劑量設(shè)置，按血清總膽固醇水平均衡原則，將正常動(dòng)物隨機(jī)分為(1)正常對(duì)照組；(2)阿昔莫司100mg/kg組；(3)阿昔莫司200mg/kg組；(4)阿昔莫司300mg/kg組；(5)阿昔莫司400mg/kg組；(6)匹伐他汀鈣0.25mg/kg組；(7)匹伐他汀鈣0.5mg/kg組；(8)匹伐他汀鈣1mg/kg組；(9)匹伐他汀鈣1.5mg/kg組；(10)匹伐他汀鈣2mg/kg組；(11)阿昔莫司200mg/kg和匹伐他汀鈣0.5mg/kg組；(12)阿昔莫司200mg/kg和匹伐他汀鈣1mg/kg組；(13)阿昔莫司200mg/kg和匹伐他汀鈣1.5mg/kg組；(14)阿昔莫司200mg/kg和匹伐他汀鈣2mg/kg組；(15)阿昔莫司300mg/kg和匹伐他汀鈣0.5mg/kg組；(16)阿昔莫司300mg/kg和匹伐他汀鈣1mg/kg組；(17)阿昔莫司300mg/kg和匹伐他汀鈣1.5mg/kg組；(18)阿昔莫司400mg/kg和匹伐他汀鈣0.5mg/kg組；(19)阿昔莫司400mg/kg和匹伐他汀鈣1mg/kg組。每組10只。
5.3給藥臨床擬用的給藥途徑為口服，故本試驗(yàn)采用灌胃法給藥，連續(xù)灌胃4天。灌胃均在動(dòng)物進(jìn)食后進(jìn)行。每天1次。給藥體積為0.3ml/100g體重。
5.4檢測(cè)指標(biāo)血清化學(xué)指標(biāo)包括總膽固醇(TC)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、肌酸激酶(CK)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-L)。其中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、肌酸激酶(CK)檢測(cè)試劑采用北京中生生物工程高技術(shù)公司產(chǎn)品，用SABA/18全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定；其余試劑采用曰本羅氏試劑公司產(chǎn)品，用日立7020自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。測(cè)定方法參照試劑說(shuō)明書(shū)取血樣前禁食16小時(shí)。
6阿昔莫司和匹伐他汀鈣對(duì)高脂血癥大鼠血脂水平的影響6.1劑量設(shè)置依據(jù)同5.1正常大鼠實(shí)驗(yàn)。
6.2組別設(shè)置依據(jù)上述劑量設(shè)置，按血清總膽固醇水平均衡原則，將模型大鼠隨機(jī)分為(1)正常對(duì)照組；(2)模型對(duì)照組；(3)阿昔莫司100mg/kg組；(4)阿昔莫司200mg/kg組；(5)阿昔莫司300mg/kg組；(6)阿昔莫司400mg/kg組；(7)匹伐他汀鈣0.25mg/kg組；(8)匹伐他汀鈣0.5mg/kg組；(9)匹伐他汀鈣1mg/kg組；(10)匹伐他汀鈣1.5mg/kg組；(11)匹伐他汀鈣2mg/kg組；(12)阿昔莫司200mg/kg和匹伐他汀鈣0.5mg/kg組；(13)阿昔莫司200mg/kg和匹伐他汀鈣1mg/kg組；(14)阿昔莫司200mg/kg和匹伐他汀鈣1.5mg/kg組；(15)阿昔莫司200mg/kg和匹伐他汀鈣2mg/kg組；(16)阿昔莫司300mg/kg和匹伐他汀鈣10mg/kg組；(17)阿昔莫司300mg/kg和匹伐他汀鈣1mg/kg組；(18)阿昔莫司300mg/kg和匹伐他汀鈣1.5mg/kg組；(19)阿昔莫司400mg/kg和匹伐他汀鈣0.5mg/kg組；(20)阿昔莫司400mg/kg和匹伐他汀鈣1mg/kg組。每組10只。
6.3給藥臨床擬用的給藥途徑為口服，故本試驗(yàn)采用灌胃法給藥，連續(xù)灌胃14天。灌胃均在動(dòng)物進(jìn)食后進(jìn)行。每天1次。給藥體積為0.3ml/100g體重。
6.4檢測(cè)指標(biāo)同5.4正常大鼠實(shí)驗(yàn)。
7阿昔莫司和匹伐他汀鈣復(fù)方不同組分相互影響試驗(yàn)7.1組別設(shè)置從療效較顯著的阿昔莫司和匹伐他汀鈣劑量組中，確定阿昔莫司和匹伐他汀鈣復(fù)方的劑量(1)正常對(duì)照組；(2)模型對(duì)照組；(3)阿昔莫司300mg/kg；(4)匹伐他汀鈣1.5mg/kg；(5)阿昔莫司300mg/kg和匹伐他汀鈣1.5mg/kg組復(fù)方組。每組10只。分組前測(cè)定血清總膽固醇水平，按均衡原則隨機(jī)分組。每組10只。
7.2給藥和檢測(cè)指標(biāo)同前述6.3和5.4。
8試驗(yàn)結(jié)果8.1阿昔莫司和匹伐他汀鈣對(duì)正常大鼠血脂水平的影響正常大鼠給藥4天后，阿昔莫司、匹伐他汀鈣和聯(lián)合用藥組的總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇均有所降低，高密度脂蛋白膽固醇水平有所升高，給藥后血清甘油三酯略有下降。其中，阿昔莫司200mg/kg與匹伐他汀鈣2mg/kg、阿昔莫司300mg/kg與匹伐他汀鈣1mg/kg和阿昔莫司300mg/kg與匹伐他汀鈣1.5mg/kg三個(gè)聯(lián)用組總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇與正常對(duì)照組比較有顯著下降，見(jiàn)表1。
表1 阿昔莫司和匹伐他汀鈣及復(fù)方對(duì)正常大鼠血脂的影響
注1、與正常對(duì)照組比較，*P＜0.05 2、阿代表阿昔莫司，匹代表匹伐他汀鈣，下同。
8.2阿昔莫司和匹伐他汀鈣對(duì)模型大鼠血脂水平的影響大鼠飼以高脂飼料14天后分組給藥。阿昔莫司的劑量范圍為100～400mg/kg，匹伐他汀鈣的劑量范圍為0.25～2mg/kg，組成聯(lián)合用藥組。給藥14天后，與模型對(duì)照組比較，阿昔莫司和匹伐他汀鈣各劑量組血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇均有不同程度的下降，高密度脂蛋白膽固醇水平均有所升高。其中阿昔莫司300mg/kg與匹伐他汀鈣1.5mg/kg聯(lián)用組大鼠血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇水平顯著降低，高密度脂蛋白膽固醇水平顯著升高。與相同劑量的單方比較，阿昔莫司和匹伐他汀鈣各聯(lián)合用藥組上述指標(biāo)均有相應(yīng)的變化，其中阿昔莫司300mg/kg與匹伐他汀鈣1.5mg/kg聯(lián)用組大鼠血清總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇水平下降程度十分顯著，表現(xiàn)出協(xié)同作用。
表2 阿昔莫司和匹伐他汀鈣及復(fù)方對(duì)模型大鼠血脂的影響
注與正常對(duì)照組比較，###P＜0.001；與模型對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.0018.3阿昔莫司和匹伐他汀鈣對(duì)模型大鼠血清酶活性的影響本實(shí)驗(yàn)通過(guò)測(cè)定用藥14天后高血脂模型大鼠血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和肌酸激酶的水平，來(lái)評(píng)價(jià)阿昔莫司和匹伐他汀鈣及復(fù)方對(duì)模型大鼠肝臟功能和骨骼肌組織的影響。結(jié)果表明，與模型對(duì)照組相比，阿昔莫司各劑量(100～400mg/kg)組模型大鼠血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和肌酸激酶水平均無(wú)顯著差異(P＞0.05)；匹伐他汀鈣各劑量(0.25～2mg/kg)組模型大鼠血清中上述指標(biāo)亦未見(jiàn)顯著差異(P＞0.05)，匹伐他汀鈣和阿昔莫司各聯(lián)合用藥組大鼠血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和血清肌酸激酶均無(wú)明顯變化(P＞0.05)，見(jiàn)表3。
表3 阿昔莫司和匹伐他汀鈣及復(fù)方對(duì)模型大鼠血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和肌酸激酶的影響
8.4阿昔莫司和匹伐他汀鈣復(fù)方中不同組分相互影響試驗(yàn)高血脂模型大鼠連續(xù)給藥14天后，與模型對(duì)照組相比，阿昔莫司300mg/kg和匹伐他汀鈣1.5mg/kg聯(lián)合用藥組均能明顯降低模型大鼠血清中總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇水平以及明顯升高高密度脂蛋白膽固醇水平。
與相同劑量的單方相比，阿昔莫司300mg/kg和匹伐他汀鈣1.5mg/kg聯(lián)合用藥組明顯降低模型大鼠血清中總膽固醇及低密度脂蛋白膽固醇水平，下降程度十分顯著，表現(xiàn)出協(xié)同作用。見(jiàn)表4。
綜合上述試驗(yàn)結(jié)果，優(yōu)選阿昔莫司300mg/kg和匹伐他汀鈣1.5mg/kg組成的復(fù)方。
表4 阿昔莫司和匹伐他汀鈣復(fù)方中不同組分治療大鼠高脂血癥的效果
注與正常對(duì)照組比較，###P＜0.001，##P＜0.01，#P＜0.05與模型對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001與阿昔莫司300mg/kg組比較，!!!P＜0.001，!!P＜0.01與匹伐他汀鈣1.5mg/kg組比較，@P＜0 05，@@P＜0.01，@@@P＜0.0019結(jié)論阿昔莫司和匹伐他汀鈣伍用對(duì)高脂飼料所致的大鼠高脂血癥有明顯的治療作用，降脂效果與兩種藥物的劑量相關(guān)，阿昔莫司200～400mg/kg與匹伐他汀鈣0.5～2mg/kg組成的復(fù)方可不同程度地降低大鼠血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇水平(LDL-C)，升高高密度脂蛋白膽固醇水平(HDL-C)。其中阿昔莫司300mg/kg和匹伐他汀鈣1.5mg/kg聯(lián)合用藥組效果最顯著，對(duì)TC和LDL-C水平均表現(xiàn)出協(xié)同作用，并且對(duì)高血脂模型大鼠血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和肌酸激酶的水平影響較小，優(yōu)選阿昔莫司300mg/kg和匹伐他汀鈣1.5mg/kg組成的復(fù)方。在本實(shí)驗(yàn)劑量范圍內(nèi)，聯(lián)合用藥組對(duì)與肝臟和肌肉毒性相關(guān)的血清酶活性無(wú)明顯影響。此外，目前阿昔莫司單方的臨床用法為3次/日，本實(shí)驗(yàn)證明，阿昔莫司1次/日仍有顯著的降血脂作用，且毒性小，這為阿昔莫司和匹伐他汀鈣組成復(fù)方后一日僅用藥1次提供了可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，這必將大大方便患者服用，提高患者的順應(yīng)性。
參考文獻(xiàn)[1]Takashi Tokoro，et al，The novel HMG-CoA reductase inhibitor，pitavastatin，induces a protective action in vascular endothelial cells through the productionof nitric oxide(NO).The pharmaceutical society of Japan，2004，124(3)121-126[2]徐叔云，卞如濂，陳修主編，藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法學(xué)(第三版)，人民衛(wèi)生出版社出版，2002年1月，1201-1202[3]OLBETAM(acipimox)說(shuō)明書(shū)(Pharmacia，New Zealand)[4]Scand.J.Clin.Lab.Invest.，1990，50(2)203-208
權(quán)利要求
1.一種治療高血脂癥的組合物，其特征在于所述的組合物包括(1)第一個(gè)活性成分，它是阿昔莫司(Acipimox)；(2)第二個(gè)活性成分，它選自匹伐他汀(Pitavastatin)、或其可藥用的鹽、酯或溶劑化物；(3)一種或多種其它可藥用的活性成分或者非活性成分；
2.按照權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于所述的匹伐他汀可以藥用的鹽為合適的匹伐他汀生理可接受的鹽，包括衍生自無(wú)機(jī)的和有機(jī)的堿所形成的鹽，如鈉鹽、鈣鹽、鉀鹽、鎂鹽、鋅鹽、鐵鹽。
3.按照權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于所述的匹他汀可以藥用的酯為合適的匹伐他汀生理可接受的酯，包括衍生自脂肪醇、芳香醇、雜環(huán)醇所形成的酯，如甲酯、乙酯、烯丙酯、苯酯。
4.按照權(quán)利要求1～2所述的組合物，其特征是第二個(gè)活性成分為匹伐他汀鈣。
5.按照權(quán)利要求4所述的組合物，其特征是阿昔莫司和匹伐他汀鈣(以游離酸計(jì)，下同)的重量比是(50～800)∶1。
6.按照權(quán)利要求4所述的組合物，其特征是優(yōu)選阿昔莫司和匹伐他汀鈣的重量比是(100～400)∶1。
7.按照權(quán)利要求4所述的組合物，其特征是進(jìn)一步優(yōu)選阿昔莫司和匹伐他汀鈣的重量比是200∶1。
8.按照權(quán)利要求1～7所述的組合物制成的醫(yī)療用制劑。
9.按照權(quán)利要求1～8所述的醫(yī)療用制劑為片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑、滴丸。
全文摘要
本發(fā)明提供一種新的治療高脂血癥的藥物組合物，其特征是含有有效量的阿昔莫司(Acipimox)和匹伐他汀(Pitavastatin)鈣，以游離酸計(jì)，其重量比為(50～800)∶1，優(yōu)選重量比為(100～400)∶1，進(jìn)一步優(yōu)選重量比為200∶1。其降脂作用明顯優(yōu)于相同劑量的單方，表明兩藥合用有協(xié)同作用，同時(shí)又無(wú)明顯的毒性作用。
文檔編號(hào)A61K31/4965GK1701794SQ20041004823
公開(kāi)日2005年11月30日 申請(qǐng)日期2004年6月16日 優(yōu)先權(quán)日2004年5月25日
發(fā)明者趙志全 申請(qǐng)人:魯南制藥集團(tuán)股份有限公司