一種滴眼液及其制備方法與用途的制作方法

專利名稱：一種滴眼液及其制備方法與用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥品技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種滴眼液，尤其是涉及一種治療干眼、瞼緣炎、瞼板腺功能障礙等眼表炎癥性疾病的滴眼液及其制備方法與用途。
背景技術(shù)：
干眼是因淚液質(zhì)和(或)量的異常以及淚液動力學(xué)異常引起的眼部不適、眼表損害的一類疾病的總稱，是最為常見的眼表疾病之一。干眼不但影響人們生活質(zhì)量，嚴(yán)重的干眼還可引起角膜炎、角膜新生血管、角膜潰瘍等而嚴(yán)重危害視力，因而近十余年來干眼已受到了前所未有的關(guān)注。干眼傳統(tǒng)的藥物治療為使用人工淚液及促進淚液分泌，效果均不佳。
干眼的發(fā)生與瞼緣炎和瞼板腺功能障礙有密切的關(guān)系。研究發(fā)現(xiàn)，瞼板腺中含有大量的棒狀桿菌、凝固酶陰性葡萄球菌及丙酸桿菌。已知丙酸桿菌可以產(chǎn)生蠟脂酶及甘油三酯酶，凝固酶陰性葡萄球菌還可以產(chǎn)生膽固醇酯酶。這些酶的存在可以改變瞼板腺脂質(zhì)的成分，一方面可導(dǎo)致瞼板腺分泌物的熔點上升，使得瞼板腺脂質(zhì)的粘稠度增加，引起瞼板腺導(dǎo)管狹窄甚至阻塞，導(dǎo)致瞼板腺功能障礙；另一方面，可產(chǎn)生游離脂肪酸，破壞淚膜的穩(wěn)定性，引起干眼。鹽酸強力霉素具有廣譜的抗菌作用，口服鹽酸強力霉素能有效地抑制引起慢性瞼緣炎及瞼板腺功能障礙的細(xì)菌的生長，而且能有效地抑制凝固酶陰性葡萄球菌及丙酸桿菌脂酶的產(chǎn)生及其活性，因而對慢性瞼緣炎及瞼板腺功能障礙均具有良好的治療效果，從而起到治療干眼的作用。
隨著對干眼研究的深入，人們認(rèn)識到炎癥是各類干眼共有的病理生理，一旦干眼形成，干眼與炎癥互為因果，形成干眼與炎癥的惡性循環(huán)。Sjgren綜合癥患者的淚腺有大量的B淋巴細(xì)胞和Th淋巴細(xì)胞浸潤；干眼患者結(jié)膜組織T淋巴細(xì)胞浸潤，眼表表達IL-1(Invest Opthalmol Vis Sci.2001；V422283)、CD54(ICAM-1)等炎癥因子明顯增加，表明炎癥在干眼的發(fā)病機制中具有極其重要的作用。因此，抗炎成為目前干眼治療的新方向。人工淚液是一種淚液替代療法，可用于治療輕度干眼，但未針對干眼的炎癥進行治療。而對于中重度干眼，單純使用人工淚液效果不佳。國外學(xué)者在使用人工淚液同時聯(lián)合皮質(zhì)類固醇激素或環(huán)孢霉素A、FK506等抗炎療法治療中重度干眼取得了較好的效果。但是，長期使用上述三種眼液有引起局部免疫力下降，繼而發(fā)生感染性角膜潰瘍的危險性。皮質(zhì)類固醇眼液還可引起青光眼、白內(nèi)障等并發(fā)癥。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種鹽酸強力霉素滴眼液，用于治療干眼、瞼緣炎、瞼板腺功能障礙等眼表炎癥性疾病。
本發(fā)明所述的一種滴眼液，含有滲透壓緩沖劑、蒸餾水，還含有鹽酸強力霉素。
所述的鹽酸強力霉素的濃度為0.01％～1％，最佳濃度為0.1％～0.5％。
所含的滲透壓緩沖劑包括滴眼液的常規(guī)使用的氯化鈉，磷酸氫二鈉，磷酸二氫鈉，硼酸，硼砂等電解質(zhì)類，還包括甘油、葡萄糖等非電解質(zhì)類。
所述的滴眼液還含有增稠劑；所述的增稠劑選自羥丙基甲基纖維素、透明質(zhì)酸鈉、羧甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯醇、卡波姆、硫酸軟骨素、右旋糖酐、殼聚糖的一種或一種以上的組合。
所述的滲透壓緩沖劑及增稠劑的用量參照眼科制劑標(biāo)準(zhǔn)。
所述的滴眼液，以10毫升計，含有鹽酸強力霉素0.001克，氯化鈉0.075克，pH值為5.5～6.0。還可含有透明質(zhì)酸鈉0.01克，或者羥丙基甲基纖維素0.05克。
所述的滴眼液，以10毫升計，含有強力霉素0.01克，氯化鈉0.075克，pH值為5.5～6.0。還可含有透明質(zhì)酸鈉0.01克，或者羥丙基甲基纖維素0.05克。
所述的滴眼液，以10毫升計，含有強力霉素0.05克，氯化鈉0.075克，pH值為5.5～6.0。還可含有透明質(zhì)酸鈉0.01克，或者羥丙基甲基纖維素0.05克。
所述的滴眼液，以10毫升計，還含有強力霉素0.1克，氯化鈉0.075克，pH值為5.5～6.0。還可含有透明質(zhì)酸鈉0.01克，或者羥丙基甲基纖維素0.05克。
鹽酸強力霉素是廣譜抗生素，通過制成滴眼液可用于治療瞼緣炎、瞼板腺功能障礙，同時可預(yù)防干眼發(fā)生感染。鹽酸強力霉素能抑制淋巴母細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，從而降低自身免疫反應(yīng)的程度，抑制淋巴細(xì)胞的浸潤及炎癥反應(yīng)的發(fā)生，從而減少眼表細(xì)胞的凋亡。鹽酸強力霉素對白細(xì)胞介素1具有明顯的抑制作用(Invest Opthalmol Vis Sci.2000；V412544)。白細(xì)胞介素1是重要的致炎因子，能刺激T細(xì)胞的活化與增殖，促進B細(xì)胞功能，提高機體的防御功能，促進多種免疫分子的基因表達，增加NK細(xì)胞的殺傷活性，以及特異性地作用于單核細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞以進一步增加白細(xì)胞介素1及白細(xì)胞介素6的合成。鹽酸強力霉素通過抑制白細(xì)胞介素1，可以有效地控制干眼的眼表炎癥，阻斷干眼與炎癥的惡性循環(huán)，從而起到治療干眼的作用。眼液中加入的增稠劑可以延長眼液的眼表作用時間，增強藥效；還可以保護、濕潤眼表，減少淚液的蒸發(fā)，改善干眼的癥狀。
本發(fā)明的另一目的在于提供所述的滴眼液的制備方法。
第一種制備方法，包括以下步驟a)將鹽酸強力霉素、滲透壓調(diào)節(jié)劑均勻溶解于蒸餾水中；b)補加蒸餾水至所需體積，調(diào)節(jié)pH值為5.5～6.0；膜過濾除菌，即得本滴眼液。
所述的滴眼液的制備方法，還可在步驟a中補充加入增稠劑，溶解于蒸餾水中。
第二種制備方法，包括以下步驟a)將鹽酸強力霉素制成無菌微粉；b)將滲透壓調(diào)節(jié)劑溶解于蒸餾水中，調(diào)節(jié)pH值為5.5～6.0；膜過濾除菌；c)將鹽酸強力霉素粉溶于步驟b所得的蒸餾水溶液中；即得本滴眼液。
所述的滴眼液的制備方法，還可進一步補充加入增稠劑，于步驟b溶解于蒸餾水中。
本發(fā)明所述的滴眼液具有以下優(yōu)點(1)以鹽酸強力霉素為藥效成分制成滴眼液直接應(yīng)用于眼表，減少了用藥量，提高了藥物的使用效率。鹽酸強力霉素口服劑量為50～100mg/日，而制成眼液后每日使用1ml已足夠，按0.1％濃度計算，每日用藥量僅為1mg。(2)通過滴眼用藥方式，減少了鹽酸強力霉素全身使用中可能帶來的毒副作用。(3)使用本滴眼液，可避免使用FK506、環(huán)孢霉素A、皮質(zhì)類固醇所引起的副作用。(4)眼液中的增稠劑不但可以起潤滑保濕作用，還可延長藥物的眼表滯留時間，增強藥物作用。
本發(fā)明的另一目的在于提供鹽酸強力霉素在制備治療眼表炎癥性疾病的滴眼液制劑中的應(yīng)用，特別是提供鹽酸強力霉素在制備治療干眼、瞼緣炎、瞼板腺功能障礙的滴眼液制劑中的應(yīng)用。
眼表發(fā)生炎癥時，結(jié)膜上皮細(xì)胞表達IL-1(白細(xì)胞介素1)增多。IL-1在眼表炎癥的病理過程起重要的作用。IL-1是機體中一類非常重要的炎癥介質(zhì)，為T細(xì)胞的共同刺激因子，能促進T細(xì)胞的活化與增殖、促進B細(xì)胞功能、加強機體的防御功能、促進多種免疫分子的基因表達、增加NK細(xì)胞的殺傷活性以及能特異性地作用于單核細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞以進一步增加白細(xì)胞介素1及白細(xì)胞介素6的合成。炎癥是干眼共有的病理過程。干眼患者眼表和淚液中IL-1的濃度顯著增高。干眼患者眼表的炎癥程度與IL-1的水平成明顯的正相關(guān)，而IL-1的上升可明顯加重炎癥反應(yīng)以及加速細(xì)胞的凋亡。因此，阻斷IL-1的表達成為治療眼表炎癥及干眼的關(guān)鍵。本發(fā)明首先通過細(xì)胞培養(yǎng)證實，鹽酸強力霉素能夠抑制結(jié)膜上皮細(xì)胞表達IL-1及炎癥因子CD54，從而對眼表炎癥及干眼起到治療作用。其次，通過動物模型證實鹽酸強力霉素眼液對瞼緣炎、瞼板腺功能障礙及干眼的治療作用。本發(fā)明通過燒灼瞼板腺開口，造成瞼緣炎癥，瞼緣的炎癥及燒灼造成的瞼板腺開口堵塞引起瞼板腺功能障礙，瞼板腺脂質(zhì)分泌異常，繼而導(dǎo)致干眼。通過滴用鹽酸強力霉素眼液，可以減少眼瞼的中性粒細(xì)胞浸潤，減輕瞼緣炎及瞼板腺功能障礙的發(fā)展，同時減少結(jié)膜下中性粒細(xì)胞浸潤和結(jié)膜杯狀細(xì)胞的丟失，從而起到治療干眼的作用。


圖1為鹽酸強力霉素與地塞米松對CD54與HLA-DR的表達的實驗結(jié)果示意圖；圖2為鹽酸強力霉素與地塞米松對IL-1β的表達的實驗結(jié)果示意圖；圖3為干眼模型分組實驗的結(jié)果示意圖；圖4為干眼模型分組實驗的另一結(jié)果示意圖。
具體實施例方式
實施例一本發(fā)明所述的滴眼液，以10毫升滴眼液計，含鹽酸強力霉素0.001克，氯化鈉0.075克，pH5.5～6.0。
制備方法一取鹽酸強力霉素0.01克，氯化鈉0.75克，加50ml蒸餾水使均勻溶解，補加蒸餾水至100毫升，過程中調(diào)整pH值為5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌，分裝為10毫升/支，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
制備方法二取鹽酸強力霉素0.001克制成無菌微粉，密封于無菌小瓶中；將氯化鈉0.075克，溶于10ml蒸餾水中，調(diào)整pH值至5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌、封口，即可得到本發(fā)明所述滴眼液的溶解液。使用前，將鹽酸強力霉素微粉溶于溶解液中，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
實施例二本發(fā)明所述的滴眼液，以10毫升滴眼液計，含鹽酸強力霉素0.001克，透明質(zhì)酸鈉0.01克，氯化鈉0.075克，pH5.5～6.0。
制備方法一取鹽酸強力霉素0.01克，透明質(zhì)酸鈉0.1克，氯化鈉0.75克，加50ml蒸餾水使均勻溶解，補加蒸餾水至100毫升，過程中調(diào)整pH值為5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌，分裝為10毫升/支，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
制備方法二取鹽酸強力霉素0.001克制成無菌微粉，密封于無菌小瓶中；取透明質(zhì)酸鈉0.01克、氯化鈉0.075克，溶于10ml蒸餾水中，調(diào)整pH值至5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌、封口，即可得到本發(fā)明所述滴眼液的溶解液。使用前，將鹽酸強力霉素微粉溶于溶解液中，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
實施例三本發(fā)明所述的滴眼液，以10毫升滴眼液計，含鹽酸強力霉素0.001克，氯化鈉0.075克，羥丙基甲基纖維素0.05克，pH5.5～6.0。
制備方法一取鹽酸強力霉素0.01克，氯化鈉0.75克，羥丙基甲基纖維素0.5克，加50ml蒸餾水使均勻溶解，補加蒸餾水至100毫升，過程中調(diào)整pH值為5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌，分裝為10毫升/支，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
制備方法二取鹽酸強力霉素0.001克制成無菌微粉，密封于無菌小瓶中；將氯化鈉0.075克，羥丙基甲基纖維素0.05克，溶于10ml蒸餾水中，調(diào)整pH值至5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌，即可得到本發(fā)明所述滴眼液的溶解液。使用前，將鹽酸強力霉素微粉溶于溶解液中，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
實施例四本發(fā)明所述的滴眼液，以10毫升滴眼液計，含鹽酸強力霉素0.01克，氯化鈉0.075克，pH5.5～6.0。
制備方法一取鹽酸強力霉素0.1克，氯化鈉0.75克，加50ml蒸餾水使均勻溶解，補加蒸餾水至100毫升，過程中調(diào)整pH值為5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌，分裝為10毫升/支，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
制備方法二取鹽酸強力霉素0.01克制成無菌微粉，密封于無菌小瓶中；將氯化鈉0.075克，溶于10ml蒸餾水中，調(diào)整pH值至5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌、封口，即可得到本發(fā)明所述滴眼液的溶解液。使用前，將鹽酸強力霉素微粉溶于溶解液中，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
實施例五本發(fā)明所述的滴眼液，以10毫升滴眼液計，含鹽酸強力霉素0.01克，透明質(zhì)酸鈉0.01克，氯化鈉0.075克，pH5.5～6.0。
制備方法一取鹽酸強力霉素0.1克，透明質(zhì)酸鈉0.1克，氯化鈉0.75克，加50ml蒸餾水使均勻溶解，補加蒸餾水至100毫升，過程中調(diào)整pH值為5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌，分裝為10毫升/支，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
制備方法二取鹽酸強力霉素0.01克制成無菌微粉，密封于無菌小瓶中；取透明質(zhì)酸鈉0.01克、氯化鈉0.075克，溶于10ml蒸餾水中，調(diào)整pH值至5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌、封口，即可得到本發(fā)明所述滴眼液的溶解液。使用前，將鹽酸強力霉素微粉溶于溶解液中，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
實施例六本發(fā)明所述的滴眼液，以10毫升滴眼液計，含鹽酸強力霉素0.01克，氯化鈉0.075克，羥丙基甲基纖維素0.05克，pH5.5～6.0。
制備方法一取鹽酸強力霉素0.1克，氯化鈉0.75克，羥丙基甲基纖維素0.5克，加50ml蒸餾水使均勻溶解，補加蒸餾水至100毫升，過程中調(diào)整pH值為5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌，分裝為10毫升/支，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
制備方法二取鹽酸強力霉素0.01克制成無菌微粉，密封于無菌小瓶中；將氯化鈉0.075克，羥丙基甲基纖維素0.05克，溶于10ml蒸餾水中，調(diào)整pH值至5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌，即可得到本發(fā)明所述滴眼液的溶解液。使用前，將鹽酸強力霉素微粉溶于溶解液中，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
實施例七本發(fā)明所述的滴眼液，以10毫升滴眼液計，含鹽酸強力霉素0.05克，氯化鈉0.075克，pH5.5～6.0。
制備方法一取鹽酸強力霉素0.5克，氯化鈉0.75克，加50ml蒸餾水使均勻溶解，補加蒸餾水至100毫升，過程中調(diào)整pH值為5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌，分裝為10毫升/支，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
制備方法二取鹽酸強力霉素0.05克制成無菌微粉，密封于無菌小瓶中；將氯化鈉0.075克，溶于10ml蒸餾水中，調(diào)整pH值至5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌、封口，即可得到本發(fā)明所述滴眼液的溶解液。使用前，將鹽酸強力霉素微粉溶于溶解液中，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
實施例八本發(fā)明所述的滴眼液，以10毫升滴眼液計，含鹽酸強力霉素0.05克，透明質(zhì)酸鈉0.01克，氯化鈉0.075克，pH5.5～6.0。
制備方法一取鹽酸強力霉素0.5克，透明質(zhì)酸鈉0.1克，氯化鈉0.75克，加50ml蒸餾水使均勻溶解，補加蒸餾水至100毫升，過程中調(diào)整pH值為5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌，分裝為10毫升/支，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
制備方法二取鹽酸強力霉素0.05克制成無菌微粉，密封于無菌小瓶中；取透明質(zhì)酸鈉0.01克、氯化鈉0.075克，溶于10ml蒸餾水中，調(diào)整pH值至5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌、封口，即可得到本發(fā)明所述滴眼液的溶解液。使用前，將鹽酸強力霉素微粉溶于溶解液中，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
實施例九
本發(fā)明所述的滴眼液，以10毫升滴眼液計，含鹽酸強力霉素0.05克，氯化鈉0.075克，羥丙基甲基纖維素0.05克，pH5.5～6.0。
制備方法一取鹽酸強力霉素0.5克，氯化鈉0.75克，羥丙基甲基纖維素0.5克，加50ml蒸餾水使均勻溶解，補加蒸餾水至100毫升，過程中調(diào)整pH值為5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌，分裝為10毫升/支，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
制備方法二取鹽酸強力霉素0.05克制成無菌微粉，密封于無菌小瓶中；將氯化鈉0.075克，羥丙基甲基纖維素0.05克，溶于10ml蒸餾水中，調(diào)整pH值至5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌，即可得到本發(fā)明所述滴眼液的溶解液。使用前，將鹽酸強力霉素微粉溶于溶解液中，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
實施例十本發(fā)明所述的滴眼液，以10毫升滴眼液計，含鹽酸強力霉素0.1克，氯化鈉0.075克，pH5.5～6.0。
制備方法一取鹽酸強力霉素1.0克，氯化鈉0.75克，加50ml蒸餾水使均勻溶解，補加蒸餾水至100毫升，過程中調(diào)整pH值為5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌，分裝為10毫升/支，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
制備方法二取鹽酸強力霉素0.1克制成無菌微粉，密封于無菌小瓶中；將氯化鈉0.075克，溶于10ml蒸餾水中，調(diào)整pH值至5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌、封口，即可得到本發(fā)明所述滴眼液的溶解液。使用前，將鹽酸強力霉素微粉溶于溶解液中，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
實施例十一本發(fā)明所述的滴眼液，以10毫升滴眼液計，含鹽酸強力霉素0.1克，透明質(zhì)酸鈉0.01克，氯化鈉0.075克，pH5.5～6.0。
制備方法一取鹽酸強力霉素1.0克，透明質(zhì)酸鈉0.1克，氯化鈉0.75克，加50ml蒸餾水使均勻溶解，補加蒸餾水至100毫升，過程中調(diào)整pH值為5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌，分裝為10毫升/支，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
制備方法二取鹽酸強力霉素0.1克制成無菌微粉，密封于無菌小瓶中；取透明質(zhì)酸鈉0.01克、氯化鈉0.075克，溶于10ml蒸餾水中，調(diào)整pH值至5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌、封口，即可得到本發(fā)明所述滴眼液的溶解液。使用前，將鹽酸強力霉素微粉溶于溶解液中，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
實施例十二本發(fā)明所述的滴眼液，以10毫升滴眼液計，含鹽酸強力霉素0.1克，氯化鈉0.075克，羥丙基甲基纖維素0.05克，pH5.5～6.0。
制備方法一取鹽酸強力霉素1.0克，氯化鈉0.75克，羥丙基甲基纖維素0.5克，加50ml蒸餾水使均勻溶解，補加蒸餾水至100毫升，過程中調(diào)整pH值為5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌，分裝為10毫升/支，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
制備方法二取鹽酸強力霉素0.1克制成無菌微粉，密封于無菌小瓶中；將氯化鈉0.075克，羥丙基甲基纖維素0.05克，溶于10ml蒸餾水中，調(diào)整pH值至5.5～6.0，再用0.2um的微孔濾膜過濾除菌，即可得到本發(fā)明所述滴眼液的溶解液。使用前，將鹽酸強力霉素微粉溶于溶解液中，即得到本發(fā)明所述的滴眼液。
實施例十三鹽酸強力霉素在抑制眼表炎癥及治療瞼緣炎、瞼板腺功能障礙及干眼的實驗研究(1)鹽酸強力霉素抑制人結(jié)膜上皮細(xì)胞炎癥因子表達的實驗研究目的 了解強力霉素對體外培養(yǎng)的人結(jié)膜上皮細(xì)胞細(xì)胞黏附分子1(ICAM-1，CD54)、人類白細(xì)胞抗原DR(HLA-DR)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)表達的影響。
方法 混合消化液培養(yǎng)法培養(yǎng)人結(jié)膜上皮細(xì)胞，在細(xì)胞培養(yǎng)液中分別加入γ干擾素(IFN-γ)0U/ml、IFN-γ300U/ml、IFN-γ300U/ml+強力霉素(doxycycline)10μg/ml、IFN-γ300U/ml+強力霉素20μg/ml、IFN-γ300U/ml+強力霉素40μg/ml、IFN-γ300U/ml+地塞米松(dexamethasone)100μg/ml，培養(yǎng)24h后收集細(xì)胞，流式細(xì)胞學(xué)檢測CD54、HLA-DR及IL-1β的表達，Western blotting檢測CD54的表達。
結(jié)果 培養(yǎng)的正常人結(jié)膜上皮細(xì)胞可以表達少許CD54及IL-1β，加入IFN-γ后表達明顯增加。強力霉素及地塞米松均可抑制CD54及IL-1β的產(chǎn)生。強力霉素對CD54及IL-1β的抑制呈劑量依賴性。
結(jié)論 強力霉素可抑制培養(yǎng)的正常人結(jié)膜上皮細(xì)胞CD54及IL-1β等重要炎癥因子的產(chǎn)生，提示強力霉素可用于治療干眼或眼表其它炎癥性疾病。
圖1為CD54的流式細(xì)胞儀檢查結(jié)果，顯示為HLA-DR、CD54平均熒光強度的直方圖，圖中，AIFN-γ0U/ml，BIFN-γ300U/ml，CIFN-γ300U/ml+DXM100μg/ml，DIFN-γ300U/ml+Doxy10μg/ml，EIFN-γ300U/ml+Doxy20μg/ml，F(xiàn)IFN-γ300U/ml+Doxy40μg/ml，如圖1所示，A組培養(yǎng)結(jié)膜上皮細(xì)胞少表達CD54，B組加入γ干擾素后CD54表達顯著增高，而地塞米松組C組及鹽酸強力霉素組D組、E組、F組可以抑制CD54的表達，說明鹽酸強力霉素與地塞米松同樣具有抑制CD54表達的作用。鹽酸強力霉素抑制CD54表達的作用呈劑量依賴性。HLA-DR表達不受γ干擾素、地塞米松及鹽酸強力霉素的影響。
圖2為IL-1β的流式細(xì)胞儀檢查結(jié)果，顯示為IL-1β平均熒光強度的直方圖，圖中，AIFN-γ0U/ml，BIFN-γ300U/ml，CIFN-γ300U/ml+DXM100μg/ml，DIFN-γ300U/ml+Doxy10μg/ml，EIFN-γ300U/ml+Doxy20μg/ml，F(xiàn)IFN-γ300U/ml+Doxy40μg/ml，如圖2所示，A組培養(yǎng)結(jié)膜上皮細(xì)胞低表達IL-1β，B組加入γ干擾素后IL-1β表達顯著增高，而地塞米松組C組及鹽酸強力霉素組D組、E組、F組可以抑制IL-1β的表達，說明鹽酸強力霉素與地塞米松同樣具有抑制IL-1β表達的作用。鹽酸強力霉素抑制IL-1β表達的作用呈劑量依賴性。
(2)鹽酸強力霉素治療瞼緣炎、瞼板腺功能障礙及干眼的實驗研究目的 研究局部滴用強力霉素滴眼液對兔瞼緣炎、瞼板腺功能障礙及干眼的治療效果。
方法 健康新西蘭大白兔16只，燒灼瞼板腺開口制作瞼緣炎、瞼板腺功能障礙及干眼模型，然后隨機分為四組，每組四只八眼。第一組不滴藥；第二組滴用生理鹽水；第三組滴用0.1％地塞米松溶液；第四組滴用0.1％強力霉素溶液，滴藥自術(shù)后第二天開始，4次/天。術(shù)前，術(shù)后第1、2、4天，第1、2、3、4、5、6周檢查瞼緣腫脹、瞼緣充血、瞼緣痂皮、瞼板腺開口數(shù)目、結(jié)膜充血、角膜熒光素染色、虎紅染色、Schirmer II試驗(從術(shù)后第四天開始)并評分。術(shù)后第2、4、6周結(jié)膜印跡細(xì)胞取材查杯狀細(xì)胞密度。術(shù)后45天處死家兔，取眼瞼、結(jié)膜及角膜組織行病理切片檢查。
結(jié)果 術(shù)后第一天，兔眼出現(xiàn)眼瞼腫脹，瞼緣充血，大量黃白色痂皮。滴用強力霉素及地塞米松組術(shù)后第4至7天上述反應(yīng)明顯減輕，部分瞼板腺開口在術(shù)后第7至9天重新開放；未滴藥組及滴用生理鹽水組術(shù)后第7至9天眼瞼腫脹、瞼緣充血等反應(yīng)開始明顯減輕，瞼板腺開口基本無復(fù)通現(xiàn)象。各組角膜熒光素染色、虎紅染色積分自第四周開始積分較術(shù)前明顯升高，但滴用強力霉素及地塞米松組比未滴藥及滴用生理鹽水組程度更輕(P＜0.05)。各組術(shù)前術(shù)后Schirmer II試驗均無差異(P＞0.05)。未滴藥組及滴用生理鹽水組術(shù)后第六周結(jié)膜杯狀細(xì)胞密度與術(shù)前同一時間滴用強力霉素及地塞米松組相比更低(P＜0.05)，病理檢查未滴藥組及滴用生理鹽水組有7只兔11眼的眼瞼及結(jié)膜下可見較多中性粒細(xì)胞浸潤，而滴用地塞米松及強力霉素組未見類似改變(P＞0.05)。
結(jié)論 局部滴用強力霉素滴眼液可以減輕眼表炎癥反應(yīng)，減輕瞼緣炎、瞼板腺功能障礙的發(fā)展，從而起到治療干眼的作用。
圖3為兔瞼板腺開口燒灼術(shù)前術(shù)后虎紅染色積分的情況，如圖3所示，燒灼瞼板腺開口后不滴藥組及滴生理鹽水組的虎紅染色積分明顯高于滴0.1％地塞米松溶液組和滴0.1％強力霉素溶液組，說明鹽酸強力霉素與地塞米松一樣具有治療干眼的作用。
圖4為兔瞼板腺開口燒灼術(shù)前術(shù)后熒光素染色積分的情況，如圖4所示，燒灼瞼板腺開口后不滴藥組及滴生理鹽水組的熒光素染色積分明顯高于滴0.1％地塞米松溶液組和滴0.1％強力霉素溶液組，說明鹽酸強力霉素與地塞米松一樣具有治療干眼的作用。
權(quán)利要求
1.一種滴眼液，含有滲透壓緩沖劑、蒸餾水，其特征在于含有鹽酸強力霉素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的滴眼液，其特征在于所述的鹽酸強力霉素的濃度為0.01％～1％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的滴眼液，其特征在于所述的鹽酸強力霉素的濃度為0.1％～0.5％。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的滴眼液，其特征在于還含有增稠劑；所述的增稠劑選自羥丙基甲基纖維素、透明質(zhì)酸鈉、羧甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯醇、卡波姆、硫酸軟骨素、右旋糖酐、殼聚糖的一種或一種以上的組合。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的滴眼液，其特征在于以10毫升計，含有鹽酸強力霉素0.001克，氯化鈉0.075克，pH值為5.5～6.0。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的滴眼液，其特征在于以10毫升計，含有鹽酸強力霉素0.01克，氯化鈉0.075克，pH值為5.5～6.0。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的滴眼液，其特征在于以10毫升計，含有鹽酸強力霉素0.05克，氯化鈉0.075克，pH值為5.5～6.0。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的滴眼液，其特征在于以10毫升計，還含有鹽酸強力霉素0.1克，氯化鈉0.075克，pH值為5.5～6.0。
9.根據(jù)權(quán)利要求5至8之一所述的滴眼液，其特征在于還含有透明質(zhì)酸鈉0.01克，或者羥丙基甲基纖維素0.05克。
10.一種滴眼液的制備方法，其特征在于，包括以下步驟a)將鹽酸強力霉素、滲透壓調(diào)節(jié)劑溶解于蒸餾水中；b)補加蒸餾水至所需體積，調(diào)節(jié)pH值為5.5～6.0；膜過濾除菌，即得所述的滴眼液。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的滴眼液的制備方法，其特征在于在步驟a中補充加入增稠劑，溶解于蒸餾水中。
12.一種滴眼液的制備方法，其特征在于，包括以下步驟a)將鹽酸強力霉素制成無菌微粉；b)將滲透壓調(diào)節(jié)劑溶解于蒸餾水中，調(diào)節(jié)pH值為5.5～6.0；膜過濾除菌；c)將鹽酸強力霉素粉溶于步驟b所得的蒸餾水溶液中，即得所述的滴眼液。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的滴眼液的制備方法，其特征在于在步驟b中補充加入增稠劑，溶解于蒸餾水中。
14.鹽酸強力霉素在制備治療眼表炎癥性疾病的滴眼液制劑中的應(yīng)用。
15.鹽酸強力霉素在制備治療干眼、瞼緣炎、瞼板腺功能障礙的滴眼液制劑中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明屬于藥品技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種滴眼液，尤其是涉及一種治療干眼、瞼緣炎、瞼板腺功能障礙等眼表炎癥性疾病的滴眼液及其制備方法與用途。本發(fā)明所述的一種滴眼液，含有滲透壓緩沖劑、蒸餾水，還含有鹽酸強力霉素。本發(fā)明所述的制備方法，包括以下步驟將鹽酸強力霉素、滲透壓調(diào)節(jié)劑均勻溶解于蒸餾水中；補加蒸餾水至所需體積，調(diào)節(jié)pH值為5.5～6.0；膜過濾除菌，即可分裝?；蛘邔Ⅺ}酸強力霉素制成無菌微粉；將滲透壓調(diào)節(jié)劑溶解于蒸餾水中，調(diào)節(jié)pH值為5.5～6.0；膜過濾除菌；將鹽酸強力霉素粉溶于該蒸餾水溶液中。
文檔編號A61P27/00GK1714795SQ20041002780
公開日2006年1月4日 申請日期2004年6月28日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月28日
發(fā)明者劉祖國, 鄒文進, 肖啟國 申請人:中山大學(xué)中山眼科中心