專利名稱：L－肉堿、乙酰l－肉堿和丙酰l－肉堿治療精子減少精子活力不足畸形精子的聯(lián)合應(yīng)用的制作方法
在此描述的發(fā)明涉及聯(lián)合使用L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿制備用于治療任何起因的精子減少精子活力不足畸形精子(oligoasthenoteratospermia)的藥物炎性、特發(fā)性、激素性或與精索靜脈曲張相關(guān)。
所有這些形式的不育癥的最終共同途徑是局部積聚氧自由基(Pasqualotto F.E.等，F(xiàn)ertil.Steril.73459-464，1999)。為了對抗這種積聚，可使用抗氧化藥物。
大多數(shù)目前在藥物市場上可得到的抗氧化劑(維生素E、谷胱甘肽、NADH)的作用方式與三羧酸循環(huán)無關(guān)，因此，其作用方式僅僅與藥物劑量而不與細(xì)胞代謝相關(guān)。
人類精子發(fā)生的實質(zhì)上的局部解剖和時間的異質(zhì)性(在相同睪丸內(nèi))(Silber S.J.，Ciin.Obstet.Gynaecol.43843-888，1999)使得不可能建立抗氧化劑的“固定”劑量，因為這會導(dǎo)致服藥過量和不足。
過度降低氧自由基導(dǎo)致對頂體和精子的獲能反應(yīng)的抑制(Ochenforf F.R.，Hum.Reprod.Update.5399-402，1999)，而太高的濃度則導(dǎo)致精子本身的形態(tài)異常(Gattuccio F.等，Varicocele 2000，Cofese Editore，Palermo 2000)。
在Human Reprod.133090-3093，1998中，提出了基于US多普勒結(jié)果區(qū)分阻塞性和非阻塞性精子缺乏的半定量評分體系。
在Human.Reprod.152554-2558，2000中，報道了在非阻塞性精子缺乏患者中跨縱隔的睪丸動脈的抵抗力指數(shù)顯著大于對照和精子減少精子活力不足患者。
在Fertil.Steril.751088-1094，2001中，報道了在阻塞性精子缺乏中睪丸動脈的搏動指數(shù)高于非阻塞性精子缺乏。
在J.Urol.163135，2000中，報道了在患有精子發(fā)生成熟停滯(也就是說患有生殖細(xì)胞發(fā)育不良)的對象中，睪丸內(nèi)血流和血流速率顯著降低。
精子在睪丸中產(chǎn)生，并在附睪中經(jīng)歷性腺后成熟，以獲得其受精能力。
在血漿中，高分子量蛋白質(zhì)和小分子如游離肉堿促進(jìn)配子成熟成為有能力的功能性細(xì)胞。
來自血漿的附睪L-肉堿對精子具有有益的作用。其通過被動擴(kuò)散進(jìn)入精子，并且只在成熟精子中被乙酰化。
游離和乙酰化肉堿的內(nèi)源性庫與精子活力的累進(jìn)百分比之間的關(guān)系表明與鞭毛運動相關(guān)的更為重要的代謝功能。
因此，在附睪中精子活動的開始可能不依賴于肉堿系統(tǒng)，而乙酰L-肉堿的能量特性在“能量危機(jī)”情形中有關(guān)。
游離肉堿在成熟精子的胞質(zhì)中的積聚不得不被認(rèn)為是線粒體代謝的一種保護(hù)形式，其對這些分離細(xì)胞的存活有用。
已知L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿的聯(lián)合應(yīng)用。
在歐洲專利EP 0 973 415中，描述了一種飲食營養(yǎng)組合物，其由L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿組成，用于經(jīng)受強(qiáng)體力勞動的運動員，或者用于衰弱的個體。
在專利申請WO 99/17623中，描述了一種飲食營養(yǎng)組合物，其由L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿組成，用于治療酒精戒斷綜合征。
還已知L-肉堿和烷?；鵏-肉堿用于治療男性不育癥的用途。
在Drugs Exptl.Clin.Res.XXI(4)157-159，1995中，報道了在患有特發(fā)性精子活力不足的一組患者中施用L-肉堿在所治療的47名患者中的37名患者中改善精子活力并增加精子計數(shù)。
在Dermatol.Monatschr.169572-575，1983中，證實了相同的結(jié)果。
在Andrologia，26155-159，1994中，報道了在不育癥患者中施用L-肉堿使精子活力在量和質(zhì)上都有顯著改善。
在Fertilitt 41-4，1988中，報道了在不育癥患者中L-肉堿治療使精子中的肉堿水平升高并且同時增加精子活力和精子計數(shù)。
Loumbakis P.等(European Association of Urology第12次會議，Paris，1-4 September，1996)報道了初步的數(shù)據(jù)，表明施用L-肉堿對精子質(zhì)量可能具有積極作用。
在Acta Eur.Fertil.23(5)221-224，1992中，報道了在患有特發(fā)性精子減少精子活力不足的患者中使用乙酰L-肉堿對精子密度沒有作用，但誘導(dǎo)精子活力的進(jìn)行性增加。
在US 6,090,848中，報道了L-肉堿和乙酰L-肉堿的組合可用于治療精子減少精子活力不足畸形精子。
上面提及的已知的化合物無疑被認(rèn)為是好的治療劑，但仍然表現(xiàn)出一些缺點。
事實上，如上所述，在Drugs Exptl.Clin.Res.XXI(4)157-159，1995中，報道了向患有特發(fā)性精子減少精子活力不足畸形精子的一組患者施用L-肉堿在47名治療患者中的37名患者中改善精子計數(shù)并增加精子活力，而在Acta Eur.Fertil.23(5)221-224，1992中，報道了在患有特發(fā)性精子減少精子活力不足的患者中使用乙酰L-肉堿對精子密度沒有影響。
在US 6,090,848中描述的組合被認(rèn)為是迄今為止已知的最好一種組合，其在研究本發(fā)明組合物的活性期間被用作參照化合物。所獲得的結(jié)果報道于下文，證實了在US 6,090,848中描述的組合物的活性，但也令人驚奇和出人意料之外地證實了本發(fā)明的組合比US 6,090,848中描述的組合物更具活性。
在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，仍然強(qiáng)烈感到需要獲得用于治療精子減少精子活力不足畸形精子的組合物，其不表現(xiàn)出上述已知化合物的缺點，或者其改進(jìn)用目前使用的已知組合物中最好的組合物所獲得的結(jié)果。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合使用L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿或其可藥用鹽之一被證實在對所有形式的精子減少精子活力不足畸形精子的治療中能發(fā)揮驚人的協(xié)同作用。
因此，本發(fā)明的一個目的是L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿內(nèi)鹽或其可藥用鹽用于制備治療精子減少精子活力不足畸形精子的藥物的用途。
本發(fā)明的另一目的是L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿內(nèi)鹽或其可藥用鹽用于制備治療精子減少的藥物的用途。
本發(fā)明的另一目的是L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿內(nèi)鹽或其可藥用鹽用于制備治療精子活力不足的藥物的用途。
本發(fā)明的另一目的是L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿內(nèi)鹽或其可藥用鹽用于制備治療畸形精子的藥物的用途。
本發(fā)明的另一目的是L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿或其可藥用鹽用于制備治療精子減少精子活力不足畸形精子的營養(yǎng)組合物的用途。
本發(fā)明的另一目的是L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿或其可藥用鹽用于制備治療精子減少的營養(yǎng)組合物的用途。
本發(fā)明的另一目的是L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿或其可藥用鹽用于制備治療精子活力不足的營養(yǎng)組合物的用途。
本發(fā)明的另一目的是L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿或其可藥用鹽用于制備治療畸形精子的營養(yǎng)組合物的用途。
已發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的組合比上面提及的L-肉堿與乙酰L-肉堿的組合在改善男性精子計數(shù)和精子活力方面更具活性。
L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿可以是適于對男性進(jìn)行口服或胃腸外給藥的任何形式。
L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿可以配制在一起，作為混合物，或者可以分別單獨配制(分別單獨包裝)，采用已知的方法。L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿可以配制成混合物或配制成單獨包裝而施用于個體。
基于各種不同的因素，諸如活性成分的濃度或患者的一般情況，本發(fā)明的組合可以上市作為健康食物補(bǔ)充劑、營養(yǎng)補(bǔ)充劑或作為需要或不需要醫(yī)學(xué)處方而出售的治療產(chǎn)品。
根據(jù)本發(fā)明，L-肉堿與乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿或其可藥用鹽之一的摩爾比范圍從2.48∶0.098∶0.092-0.186∶0.98∶0.92。
可供選擇的摩爾比包括范圍從2.48∶0.49∶0.46-0.62∶0.49∶0.46的摩爾比。
可供選擇的摩爾比包括范圍從2.48∶0.98∶0.92-1.24∶0.49∶0.23的摩爾比。
根據(jù)本發(fā)明的組合制劑，當(dāng)為單位劑型時，含有4.0g-0.30g的L-肉堿內(nèi)鹽，0.20-2.0g的乙酰L-肉堿內(nèi)鹽和0.20g-2.0g的丙酰L-肉堿內(nèi)鹽，或等摩爾量的其可藥用鹽之一。
單位劑型的優(yōu)選的組合制劑含有2g的L-肉堿內(nèi)鹽，1g的乙酰L-肉堿內(nèi)鹽和0.5g的丙酰L-肉堿內(nèi)鹽，或等摩爾量的其可藥用鹽之一。
但是，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，盡管待施用的上述活性成分的日劑量取決于患者的年齡、體重和一般情況，采用專業(yè)經(jīng)驗通?？山ㄗh以單劑或以多劑施用大約0.3-4.0g/天的L-肉堿、大約0.20-2.0g/天的乙酰L-肉堿和大約0.20-2.0g/天的丙酰L-肉堿，或等摩爾量的其可藥用鹽之一。
由于所述活性成分的毒性極低，可以施用更大的劑量。
下文報道的是為評價與用L-肉堿加上乙酰L-肉堿進(jìn)行的聯(lián)合治療相比本發(fā)明的組合是否改善精子活力而進(jìn)行的臨床試驗。
征募的患者必須滿足以下入選/排除標(biāo)準(zhǔn)。
入選標(biāo)準(zhǔn)年輕的不育癥男性患者，患有精子活力不足-活精子存在，認(rèn)為其是之前至少2年期間不育癥的唯一原因；在至少兩份樣本中必須滿足的精液標(biāo)準(zhǔn)是精子濃度(M/ml)從10-20，活力(％)在2小時＞20＜40，快速線性行進(jìn)(％)在2小時＜20。對患者取病史，進(jìn)行雙側(cè)陰囊回聲-彩色多普勒，體檢，激素測定(游離和總睪酮，F(xiàn)SH，LH，17β雌二醇，孕酮，催乳素)和精子發(fā)生圖(WHO 1999)。
排除標(biāo)準(zhǔn)急性生殖器炎癥，精子濃度＜5,000,000/ml。所有患者對參與該開放試驗知情同意。總共被檢查的患者為8名精索靜脈曲張患者(6名II級，2名III級)，12名性腺慢性炎癥患者，12名精索靜脈曲張(8名II級，4名III級)+性腺慢性炎癥患者，25名原因不明的精子減少精子活力不足患者，2名促性腺激素不足性性腺功能減退患者，1名高催乳素血癥患者，4名手術(shù)史(3例單側(cè)隱睪，1例雙側(cè)隱睪)患者，和2名雙側(cè)睪丸外傷患者。
在禁欲至少4天之后通過手淫獲得精液。在射精1小時之內(nèi)對精液樣本分析所有參數(shù)，采用WHO(1987)推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法。對至少兩份樣本采用計算機(jī)化活動性分析儀研究精子活力。
在用研究化合物治療之前和用其進(jìn)行4個月治療之后，進(jìn)行精液分析和活力評價。
以2g/天(2×500mg片劑，每天2次，午餐后)的劑量施用L-肉堿4個月；以1g/天的劑量施用乙酰L-肉堿4個月；以500mg/天的劑量施用丙酰L-肉堿4個月。
與用L-肉堿加上乙酰L-肉堿組合治療相比，本發(fā)明的組合顯著增加精子濃度和活力以及具有快速線性行進(jìn)的精子的百分比，不論精子減少精子活力不足畸形精子的原因為何，甚至在激素異常患者中也是如此。
在后者中，與文獻(xiàn)中報道的數(shù)據(jù)相比，本發(fā)明的組合使得促性腺激素和抗催乳素血癥藥物的劑量減小。
在此描述的本發(fā)明的藥物可通過將活性成分(L-肉堿內(nèi)鹽，乙酰L-肉堿內(nèi)鹽和丙酰L-肉堿內(nèi)鹽或其可藥用鹽之一)與對于配制腸道(特別是口服)或胃腸外(特別是肌內(nèi)或靜脈內(nèi))給藥的組合物而言合適的賦形劑相混合而制備。藥學(xué)技術(shù)的專家熟悉所述賦形劑。
上述活性成分的可藥用鹽包括通過向L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿內(nèi)鹽加入酸而制備的，并且不產(chǎn)生不想要的毒性作用或副作用的所有可藥用鹽。通過酸加成形成鹽在藥學(xué)技術(shù)領(lǐng)域中是廣為人知的。
這種鹽的實例為(盡管不只有這些)氯化物、溴化物、乳清酸鹽、天冬氨酸鹽、酸式天冬氨酸鹽、檸檬酸鹽、酸式檸檬酸鹽、檸檬酸鎂、磷酸鹽、酸式磷酸鹽、富馬酸鹽、酸式富馬酸鹽、富馬酸鎂、甘油磷酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽和酸式馬來酸鹽、粘酸鹽、草酸鹽、酸式草酸鹽、雙羥萘酸鹽、酸式雙羥萘酸鹽、硫酸鹽、酸式硫酸鹽、葡萄糖磷酸鹽、酒石酸鹽、酸式酒石酸鹽、酒石酸鎂、2-氨基乙磺酸鹽、2-氨基乙磺酸鎂、甲磺酸鹽、膽堿酒石酸鹽、三氯乙酸鹽和三氟乙酸鹽。
權(quán)利要求
1.L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿內(nèi)鹽或其可藥用鹽用于制備治療精子減少精子活力不足畸形精子的藥物的用途。
2.權(quán)利要求1的用途，用于制備治療精子減少的藥物。
3.權(quán)利要求1的用途，用于制備治療精子活力不足的藥物。
4.權(quán)利要求1的用途，用于制備治療畸形精子的藥物。
5.L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿或其可藥用鹽用于制備治療精子減少精子活力不足畸形精子的營養(yǎng)組合物的用途。
6.權(quán)利要求5的用途，用于制備治療精子減少的營養(yǎng)組合物。
7.權(quán)利要求5的用途，用于制備治療精子活力不足的營養(yǎng)組合物。
8.權(quán)利要求5的用途，用于制備治療畸形精子的營養(yǎng)組合物。
9.權(quán)利要求1或5的用途，其中所述可藥用鹽選自氯化物、溴化物、乳清酸鹽、天冬氨酸鹽、酸式天冬氨酸鹽、檸檬酸鹽、酸式檸檬酸鹽、檸檬酸鎂、磷酸鹽、酸式磷酸鹽、富馬酸鹽、酸式富馬酸鹽、富馬酸鎂、甘油磷酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽和酸式馬來酸鹽、粘酸鹽、草酸鹽、酸式草酸鹽、雙羥萘酸鹽、酸式雙羥萘酸鹽、硫酸鹽、酸式硫酸鹽、葡萄糖磷酸鹽、酒石酸鹽、酸式酒石酸鹽、酒石酸鎂、2-氨基乙磺酸鹽、2-氨基乙磺酸鎂、甲磺酸鹽、膽堿酒石酸鹽、三氯乙酸鹽和三氟乙酸鹽。
10.前述權(quán)利要求任一項的用途，其中L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿內(nèi)鹽或其可藥用鹽為混合物或分別單獨包裝。
11.權(quán)利要求10的用途，其中L-肉堿與乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿或其可藥用鹽的摩爾比范圍從2.48∶0.098∶0.092-0.186∶0.98∶0.92。
12.權(quán)利要求10的用途，其中L-肉堿與乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿或其可藥用鹽的摩爾比范圍從2.48∶0.49∶0.46-0.62∶0.49∶0.46。
13.權(quán)利要求10的用途，其中L-肉堿與乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿或其可藥用鹽的摩爾比范圍從2.48∶0.98∶0.92-1.24∶0.49∶0.23。
14.權(quán)利要求11的用途，其中單位劑型所述藥物或營養(yǎng)組合物含有4.0g-0.30g的L-肉堿內(nèi)鹽，0.20-2.0g的乙酰L-肉堿內(nèi)鹽，和0.20g-2.0g的丙酰L-肉堿內(nèi)鹽，或等摩爾量的其可藥用鹽。
15.權(quán)利要求14的用途，其中所述單位劑型含有2g的L-肉堿內(nèi)鹽，1g的乙酰L-肉堿內(nèi)鹽和0.5g的丙酰L-肉堿內(nèi)鹽或等摩爾量的其可藥用鹽。
全文摘要
本發(fā)明描述了L－肉堿、乙酰L－肉堿和丙酰L－肉堿或其可藥用鹽之一用于制備治療任何起因的精子減少精子活力不足畸形精子的藥物的用途。
文檔編號A61K31/205GK1638754SQ03805093
公開日2005年7月13日 申請日期2003年4月8日 優(yōu)先權(quán)日2002年4月9日
發(fā)明者G·卡瓦里尼, G·比亞喬蒂, A·科沃里奇, F·薩德利 申請人:希格馬托制藥工業(yè)公司