專利名稱：一種用于癌性疼痛鎮(zhèn)痛的中藥注射液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于癌性疼痛鎮(zhèn)痛的藥物，具體是涉及一種中藥注射液。
目前，癌痛尚屬于一種難于征服的病癥。世界衛(wèi)生組織對(duì)癌性疼痛的治療，推薦使用三階梯療法。輕度疼痛，使用非阿片類止痛藥，如撲熱息痛，阿司匹林及布洛芬、萘普生、炎痛喜康等；中度疼痛，則使用弱阿片類鎮(zhèn)痛藥，如可待因、氨酚待因，或加入非阿片類鎮(zhèn)痛藥及輔助性藥物等；重度疼痛，則采用強(qiáng)阿片類藥，如嗎啡、二氫嗎啡酮、美沙酮等。這些強(qiáng)阿片類藥，可使患者解決暫時(shí)痛苦，并使精神得到適當(dāng)休息，但連續(xù)使用易產(chǎn)生蓄積毒性和依賴性等副作用。如果使用不當(dāng)，失之管理，更會(huì)危害人身健康和社會(huì)安定。近年來，這類藥呂的濫用和依賴性的產(chǎn)生明顯增加，以及由此而帶來的嚴(yán)重社會(huì)問題日益突出，使這類藥品的臨床應(yīng)用受到嚴(yán)格限制，導(dǎo)致許多癌痛患者至今仍未得到良好治療，對(duì)癌痛的處理仍然是醫(yī)生們所而臨的一個(gè)棘手的問題。
本發(fā)明提供的用于癌性疼痛鎮(zhèn)痛的中藥注射液，該注射液由下述方法制備獲得以白屈菜為原料，將白屈菜切成0.3～10cm段，加4～12倍量的55～95％乙醇，加熱回流提取1～6次，每次0.5～5小時(shí)，合并醇提取液，減壓回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度為1.05～1.28，用0.5～1.5mol/L磷酸溶液調(diào)pH值至1.5～4.5，于5～10℃冷藏16～72小時(shí)，濾過，濾液用5～40％氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至9～11.5，用等量氯仿提取2～8次，合并氯仿液，回收氯仿，殘留物真空干燥，得總生物堿提取物，然后加注射用水，攪拌使溶解，用0.5～1.5mol/L磷酸溶液調(diào)pH值至3.0～5.0，濾過，濾液加吐溫-80，苯甲醇，氯化鈉，混勻，用0.3～0.45μm微孔濾膜濾過，補(bǔ)加注射用水，灌封，滅菌，即得。
白屈菜(Chelidonium majus L.)，味苦、辛，性微溫，有毒，為罌粟科植物，主產(chǎn)于我國(guó)東北、內(nèi)蒙古、河北、河南、山東、山西、江蘇、江西、浙江等地。白屈菜的根、莖、葉主含白屈菜堿，其中含白屈菜堿0.2～0.4％，原阿片堿0.04～0.12％，α-別隱品堿0.01～0.06％，其余尚含有少量的白屈菜紅堿、血根堿及隱品堿等，此外，還含有膽堿、組織胺、酪胺、皂甙、黃酮醇、白屈菜醇和維生素C、胡蘿卜素等。由白屈菜為原料制成的本發(fā)明中藥注射液，對(duì)癌性疼痛具有明顯的鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、催眠和抗炎作用。
下面結(jié)合具體實(shí)施例及主要藥效學(xué)試驗(yàn)對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。
取白屈菜3000g，將其切成1cm段，加6倍量85％乙醇，加熱回流提取二次，每次2小時(shí)，合并醇提取液，減壓回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度為1.10(50℃)，用1mol/L磷酸溶液調(diào)pH值至2.0，于10℃冷藏24小時(shí)，濾過，濾液用20％氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至10.5，用等量氯仿提取4次，合并氯仿液，回收氯仿，殘留物真空干燥，得總生物堿提取物，然后加注射用水800ml，攪拌使溶解，用1mol/L磷酸溶液調(diào)pH值至4.0，濾過，濾液加吐溫-80 10ml，苯甲醇10ml，氯化鈉3.45g，混勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，補(bǔ)加注射用水至1000ml，灌封，滅菌，即得本發(fā)明中藥注射液。
以下第4～14頁(yè)記載的為本發(fā)明的主要藥效學(xué)試驗(yàn)，其中本發(fā)明中藥注射液稱為白屈菜注射液。
白屈菜注射液的主要藥效學(xué)試驗(yàn)摘要 鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)顯示白屈菜注射液低劑量(小鼠3g/kg，大鼠2g/kg)對(duì)各疼痛實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ途驯憩F(xiàn)有不同程度的鎮(zhèn)痛作用，鎮(zhèn)痛特點(diǎn)是起效快(15min起效)、持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)、劑量依賴性明顯；鎮(zhèn)靜實(shí)驗(yàn)表明白屈菜(3-8g/kg)使小鼠自由活動(dòng)減少，可協(xié)同巴比妥鈉的鎮(zhèn)靜催眠作用，抑制苯丙胺的興奮作用；抗炎實(shí)驗(yàn)證明白屈菜明顯抑制二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹及蛋清所致的大鼠足跖腫脹，抑制率達(dá)40％以上。上述結(jié)果表明白屈菜注射液有明顯的鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、催眠、抗炎作用。
試驗(yàn)?zāi)康挠^察白屈菜注射液鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、催眠和抗炎作用，評(píng)價(jià)其效果，為該藥的臨床應(yīng)用提供藥理學(xué)依據(jù)。
受試藥物白屈菜注射液，規(guī)格6.0g生藥/ml，批號(hào)000312，青海圣域醫(yī)藥科技有限公司提供。配制方法(每批實(shí)驗(yàn)都新鮮配制)小鼠(1)高濃度取10ml白屈菜注射液加注射用水27.5ml(南京金陵藥業(yè)集團(tuán)公司提供，批號(hào)991002)稀釋成1.6g生藥/ml的工作液，4℃保存。
(2)中濃度取配好的高濃度液17.5ml加注射用水10.5ml稀釋成1.0g生藥/ml的工作液，4℃保存。
(3)低濃度取配好的中濃度液10ml加注射用水6.7ml稀釋成0.6g生藥/ml的工作液，4℃保存。
每次使用時(shí)分裝所需要量，每只小鼠后腿上部外側(cè)肌肉注射量均為0.1ml。
大鼠(1)高濃度取10ml白屈菜注射液加注射用水6ml稀釋成3.75g生藥/ml的工作液，4℃保存。
(2)中濃度取配好的高濃度液8ml加注射用水5ml稀釋成2.3g生藥/ml的工作液，4℃保存。
(3)低濃度取配好的中濃度液5ml加注射用水3ml稀釋成1.4g生藥/ml的工作液，4℃保存。
每次使用時(shí)分裝所需要量，每只大鼠后腿上部外側(cè)肌肉注射量均為0.2ml。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 昆明種小鼠，體重18～22g，動(dòng)物合格證第98-022號(hào)；Wistar種大鼠，體重200±20g，動(dòng)物合格證第98-037號(hào)，均由南京軍區(qū)總醫(yī)院藥理科提供。動(dòng)物進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室后，雌雄分開，小鼠每籠5只，大鼠每籠3只，實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)性飼養(yǎng)3天。動(dòng)物室光照充足，通風(fēng)，光照時(shí)間為12h/天，室溫控制在20～25℃，濕度為50-70％，按常規(guī)定期消毒。
給藥途徑 肌肉注射，與擬推薦的臨床用藥途徑一致。
試驗(yàn)對(duì)照 空白對(duì)照等體積注射用水；陽(yáng)性對(duì)照鹽酸曲馬多注射液(小鼠50mg/kg，大鼠25mg/kg)。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以x±s表示，所有數(shù)據(jù)由SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析及組間檢驗(yàn)。
一.白屈菜注射液鎮(zhèn)痛試驗(yàn)劑量設(shè)置用小鼠熱板法作預(yù)試驗(yàn)，每組3只，找出所有小鼠對(duì)熱刺激都沒有反應(yīng)的最小藥物劑量為10.5g生藥/kg，所有小鼠對(duì)熱刺激都有反應(yīng)的最大藥物劑量為1.25g生藥/kg。在此有效劑量范圍內(nèi)，我們分別取3、5、8g生藥/kg作為白屈菜注射液小鼠低、中、高劑量。按“人與各種動(dòng)物以及各種動(dòng)物之間用藥劑量換(估)算方案”[1]，可算出大鼠低、中、高劑量分別約為2.1、3.5、5.6g生藥/kg。
實(shí)驗(yàn)材料鹽酸曲馬多針劑千帆醫(yī)藥有限公司，批號(hào)A302J，生產(chǎn)日期3/1998，規(guī)格100mg/2ml。配制方法小鼠取2ml加注射用水8ml，稀釋成10mg/ml的工作液，4℃保存。使用時(shí)取0.1ml于小鼠后腿上部外側(cè)肌肉注射。
大鼠取2ml加注射用水4ml，稀釋成16.7mg/ml的工作液，4℃保存。使用時(shí)取0.3ml于大鼠后腿上部外側(cè)肌肉注射。
實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果1.小鼠熱板法鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)[2]1.1方法 將小鼠放在55±1℃的熱板上，以小鼠舔后足時(shí)間作為正常痛閾值。重復(fù)測(cè)定二次，取平均值為正常痛閾值(給藥前痛閾值)，篩選痛閾值在5-30s內(nèi)的小鼠供實(shí)驗(yàn)用。選出合格小鼠60只，隨機(jī)分組。肌肉注射不同劑量白屈菜注射液(共3個(gè)劑量組)、等溶量生理鹽水(空白對(duì)照組)、曲馬多注射液(陽(yáng)性對(duì)照組)，然后各組按相應(yīng)劑量給藥。各組均于給藥后15、60、120、240min分別測(cè)定痛閾值一次。小鼠在熱板上停留60s仍不舔后足時(shí)，則立即取出小鼠，以防湯傷，其痛閾值以60s計(jì)算。按下式計(jì)算痛閾提高百分率，然后以時(shí)間為橫坐標(biāo)，痛閾提高百分率為縱坐標(biāo)，繪制時(shí)程曲線。 1.2結(jié)果 由表1可見，白屈菜注射液鎮(zhèn)痛作用在給藥后15min起效，2h后鎮(zhèn)痛作用達(dá)高峰，4h后尚有鎮(zhèn)痛作用。與曲馬多相比，白屈菜鎮(zhèn)痛強(qiáng)度雖然比曲馬多弱，但鎮(zhèn)痛持續(xù)時(shí)間比曲馬多長(zhǎng)。
表1 白屈菜注射液對(duì)小鼠熱板法不同時(shí)間痛閾的影響(n＝10，x±s)劑量 給藥前給藥后不同時(shí)間痛閾(s)組 別g生藥/kg 痛閾(s) 15min60min 120min240min對(duì)照 -18.6±3.8 19.4±4.020.2±4.2 20.5±4.8 19.6±3.6白屈菜 3.00 20.3±3.4 23.5±5.024.6±5.6 29.5±7.2**25.8±8.75.00 19.4±4.2 24.2±4.7*29.2±7.1**35.7±10.3**27.6±7.3**8.00 19.6±4.5 29.8±8.2**34.6±9.1**40.4±11.5**31.2±8.6**曲馬多 0.05 18.8±4.0 32.6±9.6**45.6±12.0**34.5±5.5**21.2±4.4與給藥前比較*p＜0.05，**p＜0.01。
2.小鼠醋酸扭體實(shí)驗(yàn)[2]2.1方法 小鼠50只，雌雄各半。分組和給藥方法同1.1。各組小鼠均于給藥后1h腹腔注射0.6％醋酸0.2ml，10分鐘后觀察并記錄15分鐘內(nèi)小鼠的扭體次數(shù)(以腹部收縮、后肢伸展或臀部抬高為扭體反應(yīng)陽(yáng)性)。并按下式計(jì)算扭體反應(yīng)抑制率 2.2結(jié)果 白屈菜注射液3、5、8g生藥/kg可顯著抑制醋酸引起的小鼠扭體反應(yīng)，抑制率分別為51.2％、68.5％、78.9％，具有一定的量效關(guān)系(見表2)。
表2 白屈菜注射液對(duì)小鼠醋酸刺激痛(扭體法)的影響(n＝10，x±s)組 別劑量(g生藥/kg) 扭體次數(shù) 抑制率(％) P值對(duì)照 -33.8±12.6 0-白屈菜 3.00 16.6±6.5 51.2＜0.015.00 10.8±5.7 68.5＜0.018.00 7.3±3.6 78.9＜0.01曲馬多 0.05 4.3±2.2 88.6＜0.013.白屈菜注射液對(duì)大鼠三叉神經(jīng)痛的作用[3]3.1方法 取大鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只，按表3大鼠給藥劑量肌注給藥(0.2ml/100g體重)。給藥后1h乙醚麻醉動(dòng)物，剪毛后切開頭頸部皮膚，分離肌肉，暴露枕骨及第一頸椎間的硬腦膜，在大鼠的腦閂左下方約1mm處(相當(dāng)于三叉神經(jīng)脊束核尾側(cè)部)，緩慢微量注射25萬(wàn)u/ml的青霉素G鉀鹽3μ1后縫合切口，置籠內(nèi)觀察。以大鼠尖叫、甩頭及左右肢快速抓同側(cè)面部的次數(shù)之和為總發(fā)作次數(shù)，記錄大鼠翻正反射恢復(fù)后40min內(nèi)總發(fā)作次數(shù)作為鎮(zhèn)痛效果評(píng)價(jià)指標(biāo)。
3.2結(jié)果 白屈菜注射液對(duì)大鼠三叉神經(jīng)痛有明顯的抑制作用。由低到高劑量，發(fā)作次數(shù)分別為158.3±24.7，106.2±22.8，88.5±26.6(見表3)。
表3 白屈菜注射液對(duì)大鼠三叉神經(jīng)痛的影響(n＝10，x±s)組 別劑量(g生藥/kg)總發(fā)作次數(shù) P值對(duì)照 - 246.7±58.2 -白屈菜2.100 158.3±24.7＜0.053.500 106.2±22.8＜0.015.600 88.5±26.6 ＜0.01曲馬多0.025 50.7±21.3 ＜0.014.電刺激法4.1方法 將大鼠放入大鼠固定器，露出鼠尾，用75％酒精清潔尾部后，涂以導(dǎo)電膠并按置刺激電極，用藥理生理多用儀進(jìn)行方波電刺激(電壓10v，頻率1Hz，波寬10ms)。連續(xù)電刺激二次(間隔5min)皆有嘶叫反應(yīng)者為合格大鼠。選出合格小鼠60只，隨機(jī)分組。肌肉注射不同劑量白屈菜注射液(共3個(gè)劑量組)、等溶量生理鹽水(空白對(duì)照組)、曲馬多注射液(陽(yáng)性對(duì)照組)，然后各組按設(shè)計(jì)的劑量給藥。給藥60min后，重復(fù)電刺激大鼠，連續(xù)2次刺激不嘶叫者，為鎮(zhèn)痛藥有效，按下式計(jì)算鎮(zhèn)痛有效率 4.2結(jié)果 白屈菜注射液3、5、8g生藥/kg可顯著抑制電刺激引起的大鼠嘶叫反應(yīng)，抑制率分別為41.6％、58.3％、66.7％(見表4)。
表4 白屈菜注射液大鼠電刺激法鎮(zhèn)痛結(jié)果(n＝12，x±s)組 別 劑量(g生藥/kg)鎮(zhèn)痛動(dòng)物數(shù) 鎮(zhèn)痛百分率(％) P值對(duì)照 -0 0-白屈菜 3.00 5 41.6＜0.055.00 7 58.3＜0.018.00 8 66.7＜0.01曲馬多 0.05 10 83.3＜0.01
二、白屈菜注射液鎮(zhèn)靜試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)劑量設(shè)定通過預(yù)試驗(yàn)，我們發(fā)現(xiàn)白屈菜注射液在發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的同時(shí)，還有很好的鎮(zhèn)靜作用，而且，隨著鎮(zhèn)痛作用劑量的增加，鎮(zhèn)靜作用明顯增強(qiáng)?？紤]該藥鎮(zhèn)痛作用是其主要作用，因此，本試驗(yàn)給藥劑量采用鎮(zhèn)痛作用的試驗(yàn)劑量。
實(shí)驗(yàn)材料鹽酸氯丙嗪，江蘇金壇市制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)9803201。用注射用水配成1.56mg/ml的工作液備用，使用時(shí)20g小鼠肌注0.1ml；苯丙胺，天豐制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)970715，用注射用水配成0.5mg/ml的工作液，使用時(shí)20g小鼠腹腔注射0.2ml；戊巴比妥鈉，上海第四制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)980874，用注射用水稀釋成2.5mg/ml備用。
實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果1.白屈菜注射液對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)的影響1.1方法 以小鼠一般精神狀態(tài)和自發(fā)活動(dòng)為指標(biāo)評(píng)價(jià)白屈菜注射液對(duì)小鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響。實(shí)驗(yàn)前篩選2分鐘內(nèi)抬舉雙前肢15～30次的正常小鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分為空白對(duì)照組及白屈菜注射液低、中、高劑量組。采用小動(dòng)物記錄裝置(仿抖籠法)，記錄各組小鼠給藥前的活動(dòng)情況。然后各動(dòng)物按各組劑量分別肌肉注射白屈菜注射液。給藥后1h、2h、3h記錄各組小鼠2min內(nèi)的自發(fā)活動(dòng)次數(shù)。
1.2結(jié)果 白屈菜注射液三個(gè)劑量組均能明顯抑制小鼠的自發(fā)活動(dòng)(與給藥前相比，P＜0.05和P＜0.01)，而空白對(duì)照組無明顯變化(見表5)。抑制作用1h后最明顯，3h后基本消失。小鼠未見流涎、肌顫等現(xiàn)象。
表5 白屈菜注射液對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)的影響(n＝10，x±s)劑量給藥前 給藥后活動(dòng)次數(shù)(次/min)組別(g生藥/kg)(次/min) 1h2h3h空白對(duì)照 - 125.8±14.4 130.2±17.7 127.5±15.6124.8±20.5白屈菜低劑量3.0 122.0±13.6 108.7±12.0*113.4±11.2118.7±10.5中劑量5.0 118.2±10.4 96.8±8.8**106.5±10.6*112.5±11.9高劑量8.0 125.5±13.7 82.8±8.3**108.5±12.5**116.7±15.8與空白對(duì)照組比較*p＜0.05，**p＜0.01。
2.白屈菜注射液對(duì)戊巴比妥鈉催眠作用的影響[4-5]2.1對(duì)戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量誘導(dǎo)小鼠入睡的影響2.1.1方法 小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組12只模型對(duì)照組，白屈菜注射液低、中、高劑量組及氯丙嗪陽(yáng)性對(duì)照組。各組按表5給藥劑量im給藥。給藥1h后給每只小鼠ip戊巴比妥鈉25mg/kg，記錄15min內(nèi)小鼠翻正反射消失超過1min的小鼠個(gè)數(shù)。
2.1.2結(jié)果 結(jié)果表明，對(duì)照組(注射用水+戊巴比妥鈉)12只小鼠只有2只入睡(表現(xiàn)為翻正反射消失)，而氯丙嗪對(duì)照組(氯丙嗪+戊巴比妥鈉)12只小鼠全部入睡，表明造模成功。白屈菜注射液的低、中、高劑量組翻正反射消失的小鼠數(shù)依次為5、8、10，經(jīng)x2檢驗(yàn)，白屈菜注射液低、中、高劑量組與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.01)。表明白屈菜注射液可以使戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量所致入睡小鼠數(shù)目明顯增加(見表6)。
表6 白屈菜注射液對(duì)戊巴比妥鈉闡下睡眠劑量誘導(dǎo)小鼠入睡的影響(n＝12)組 別 劑量(g生藥/kg) 翻正反射消失個(gè)數(shù)增加率(％) P值對(duì)照- 2--白屈菜 3.0 5 150＜0.015.0 8 300＜0.018.0 10 400＜0.01氯丙嗪 5.0(mg/kg) 12 500＜0.012.2對(duì)戊巴比妥鈉閾上睡眠劑量所致小鼠睡眠時(shí)間的影響2.2.1方法 每組鼠數(shù)為10只，分組及給藥同實(shí)驗(yàn)2.1.1。給藥后1h，各組小鼠ip戊巴比妥鈉40mg/kg，以小鼠翻正反射消失至恢復(fù)作為睡眠時(shí)間，記錄各組小鼠的睡眠時(shí)間。
2.2.2結(jié)果 對(duì)照組小鼠睡眠時(shí)間平均約1h，而氯丙嗪對(duì)照組小鼠睡眠時(shí)間平均達(dá)4.5h。白屈菜注射液的低、中、高劑量組小鼠平均睡眠時(shí)間依次為94.6min、128.3min、184.5min，經(jīng)方差分析，白屈菜注射液低、中、高劑量組與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.01)。表明白屈菜注射液能顯著延長(zhǎng)戊巴比妥鈉閾上睡眠劑量所致的睡眠時(shí)間(見表7)。
表7 白屈菜注射液閾上睡眠劑量所致小鼠睡眠時(shí)間的影響(n＝10)組 別 劑量(g生藥/kg) 睡眠時(shí)間(min)增加率(％) P值對(duì)照 - 56.8±17.4 --白屈菜 3.088.6±36.756.0＜0.055.0128.3±34.2 125.9 ＜0.018.0184.5±40.4 224.8 ＜0.01氯丙嗪 5.0(mg/kg) 276.5±46.6 386.8 ＜0.013.白屈菜注射液對(duì)苯丙胺興奮小鼠的影響3.1方法 小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為6組，每組10只。第一組為注射用水對(duì)照組；第二組為苯丙胺模型組；第三至五組為白屈菜注射液低、中、高劑量+苯丙胺組，第六組為氯丙嗪+苯丙胺陽(yáng)性對(duì)照組。各組給藥劑量和方法同前。給藥1h后，給每只小鼠ip苯丙胺5mg/kg，30min后，采用小動(dòng)物活動(dòng)記錄儀記錄小鼠2min內(nèi)的活動(dòng)次數(shù)。
3.2結(jié)果 模型組小鼠ip苯丙胺后，小鼠活動(dòng)次數(shù)比對(duì)照組小鼠活動(dòng)次數(shù)明顯增加(P＜0.01)，表明造模成功。預(yù)先給氯丙嗪，可明顯抑制苯丙胺對(duì)小鼠的興奮作用。白屈菜注射液各劑量組與模型組比較，均能明顯抑制小鼠活動(dòng)次數(shù)(P＜0.05或＜0.01)，說明白屈菜注射液對(duì)苯丙胺引起的興奮有抑制作用(見表8)。
表8 白屈菜注射液對(duì)苯丙胺致小鼠興奮作用的影響(n＝10)組 別劑量(g生藥/kg) 活動(dòng)次數(shù)(次/min) 抑制率(％) P值對(duì)照 - 112.6±17.4 - -模型 - 387.8±51.3 - -白屈菜 3.0 340.5±42.612.2 ＜0.055.0 320.3±35.017.4 ＜0.018.0 271.4±30.330.0 ＜0.01氯丙嗪 5.0(mg/kg) 83.5±11.9 78.5 ＜0.01
三、白屈菜注射液的抗炎作用實(shí)驗(yàn)材料魚腥草注射液，2g/ml，四川雅安三九藥業(yè)公司，批號(hào)980805。用注射用水配成0.2g/ml的藥液備用。二甲苯，廣州化學(xué)試劑廠，批號(hào)980108。
實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果1.對(duì)小鼠二甲苯耳廓炎癥的影響[6]1.1方法 取小鼠50只，雌雄各半。隨機(jī)均分為5組，按前述方法im給藥。陽(yáng)性對(duì)照藥為魚腥草注射液。各組給藥45min后，用棉球?qū)⒍妆?0μl/每耳涂于小鼠右耳廓前后兩側(cè)，30min后處死小鼠，以直徑5mm打孔器將小鼠左右耳廓相同部位等面積取下并稱重。以兩耳片重差值作為腫脹程度指標(biāo)，比較藥物組和對(duì)照組間的差異，并求出抑制率。
1.2結(jié)果 白屈菜注射液各實(shí)驗(yàn)劑量組對(duì)小鼠二甲苯耳廓炎癥均有明顯的抑制作用(見表9)。
表9 白屈菜注射液對(duì)小鼠耳廓二甲苯炎癥的影響(n＝10 x±s)組 別劑量(g/kg)腫脹度(mg)-抑腫率(％) P值對(duì)照 - 6.91±2.05- -白屈菜 3.06.25±3.32 9.6 ＞0.055.05.10±1.68 26.2 ＜0.058.03.53±2.17 48.9 ＜0.01魚腥草 1.03.44±1.85 50.2 ＜0.012.對(duì)蛋清所致大鼠足跖腫脹的影響[7]2.1方法 取體重180-220g Wistar大鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)均分5組。給藥前先用排水法體積裝置測(cè)定各鼠左后足跖體積，按表5給藥劑量和上述給藥方法給藥，給藥后30min，于左后足跖皮下注射新鮮雞蛋清0.05ml/只，于1小時(shí)后再測(cè)大鼠足跖體積，按下式計(jì)算足跖腫脹百分率和抑制率 2.2結(jié)果白屈菜注射液對(duì)大鼠蛋清性足跖腫脹有顯著抑制作用(見表10)。
表10 白屈菜注射液對(duì)大鼠蛋清性足跖腫脹的影響(n＝10，x±s)組 別 劑量(g/kg)腫脹百分率(％，x±s) 抑制率(％) P值對(duì)照 69.7±15.3 --白屈菜 2.1 58.7±12.2 15.8 ＞0.053.5 53.8±11.7 22.8 ＜0.055.6 40.9±10.5 41.3 ＜0.01魚腥草 0.7 34.2±9.150.9 ＜0.01結(jié)論1.白屈菜注射液對(duì)小鼠皮膚熱刺痛、醋酸腹膜刺激痛、電刺激痛及大鼠三叉神經(jīng)痛有明顯的鎮(zhèn)痛作用。特點(diǎn)是起效快，維持時(shí)間長(zhǎng)，有劑量依賴性。2.白屈菜注射液有鎮(zhèn)靜作用，能抑制正常小鼠的自發(fā)活動(dòng)，增加戊巴比妥鈉催眠時(shí)間，對(duì)苯丙胺興奮小鼠具有抑制作用。3.白屈菜注射液還具有抗炎作用
權(quán)利要求
1.一種用于癌性疼痛鎮(zhèn)痛的中藥注射液，該注射液由下述方法制備獲得以白屈菜為原料，將白屈菜切成0.3～10cm段，加4～12倍量的55～95％乙醇，加熱回流提取1～6次，每次0.5～5小時(shí)，合并醇提取液，減壓回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度為1.05～1.28，用0.5～1.5mol/L磷酸溶液調(diào)pH值至1.5～4.5，于5～10℃冷藏16～72小時(shí)，濾過，濾液用5～40％氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至9～11.5，用等量氯仿提取2～8次，合并氯仿液，回收氯仿，殘留物真空干燥，得總生物堿提取物，然后加注射用水，攪拌使溶解，用0.5～1.5mol/L磷酸溶液調(diào)pH值至3.0～5.0，濾過，濾液加吐溫-80，苯甲醇，氯化鈉，混勻，用0.3～0.45μm微孔濾膜濾過，補(bǔ)加注射用水，灌封，滅菌，即得。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于癌性疼痛鎮(zhèn)痛的中藥注射液,該注射液由下述方法制備獲得:以白屈菜為原料,將白屈菜切成段,加乙醇,加熱回流提取,合并醇提取液,減壓回收乙醇并濃縮,用磷酸溶液調(diào)pH值至酸性,冷藏,濾過,濾液用氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至堿性,用等量氯仿提取,合并氯仿液,回收氯仿,殘留物真空干燥,得總生物堿提取物,然后加注射用水,攪拌使溶解,用磷酸溶液調(diào)pH值至酸性,濾過,濾液加吐溫－80,苯甲醇,氯化鈉,混勻,用微孔濾膜濾過,補(bǔ)加注射用水,灌封,滅菌,即得。由白屈菜為原料制成的本發(fā)明中藥注射液,對(duì)癌性疼痛具有明顯的鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、催眠和抗炎作用。
文檔編號(hào)A61K9/08GK1371741SQ0211495
公開日2002年10月2日 申請(qǐng)日期2002年3月13日 優(yōu)先權(quán)日2002年3月13日
發(fā)明者張平 申請(qǐng)人:張平