干酪乳桿菌在免疫刺激肽中的應(yīng)用的制作方法

專利名稱：干酪乳桿菌在免疫刺激肽中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及乳酸菌加強(qiáng)抗傳染性物質(zhì)的特異免疫反應(yīng)的用途。
乳酸菌(LABs)通常用于生產(chǎn)發(fā)酵食品，尤其是乳制品。
Metchnikoff的研究(The prolongation of life.第1版，NewYorkGP Putman’s Sons，1908)最初提示了乳酸菌對健康的作用，并從此成為許多研究的主題。
現(xiàn)在通常承認(rèn)各種乳酸菌可發(fā)揮有益于健康的作用。這些細(xì)菌也稱作“益生菌”-表示當(dāng)它們被足量攝取時(shí)，除了常規(guī)的營養(yǎng)作用外，還對健康發(fā)揮積極作用的活微生物的名稱。在屬于乳桿菌屬、雙歧桿菌屬、鏈球菌屬和乳球菌屬的種中已特別描述了益生菌，一般用于乳品工業(yè)。
認(rèn)為益生菌通過妨礙病原微生物的發(fā)展，和/或更直接作用于免疫系統(tǒng)來特別干預(yù)腸道菌群的水平。例如，已經(jīng)觀察到益生菌或含這些細(xì)菌的發(fā)酵食品如酸乳酪的攝入導(dǎo)致病原細(xì)菌減少；在免疫系統(tǒng)方面，已經(jīng)報(bào)道了各種作用活化參與特異性或非特異性免疫反應(yīng)的細(xì)胞，如淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，免疫球蛋白，尤其是IgA水平增加；免疫系統(tǒng)活化細(xì)胞因子水平增加等。(綜述，參見例如MEYDANI和HA(Am JClin Nutr，71，861-7217，2000)。
總之，對各種益生乳酸菌進(jìn)行的研究趨向總結(jié)出有些種，或至少這些種的有些株具有免疫刺激性能。另一方面，這些性能所基于的機(jī)制，和潛在參與的免疫系統(tǒng)成分仍未確定。因此看來有必要闡明這些方面，尤其是為了提出益生菌各種種或株的更好的目標(biāo)應(yīng)用。
在人和動(dòng)物中實(shí)施的幾個(gè)研究提示，干酪乳桿菌(Lactobacilluscasei)種的細(xì)菌對健康具有有益作用，特別是對免疫系統(tǒng)有積極作用。
已經(jīng)表明在小鼠中，攝入含干酪乳桿菌株DN-114 001的發(fā)酵牛奶可增加抵抗鼠傷寒桿菌的感染[PAUBERT-BRAQUET等.Int JImmunother，4153，(1995)]；同時(shí)觀察到巨噬細(xì)胞活化和循環(huán)IgAs增加。
菌株DN-114 001已于1994年12月30日保藏在巴黎，25 rue duDocteur Roux，Institut Pasteur的CNCM(Collection Nationale deCultures de Microorganismes)[國立微生物保藏中心]，保藏號(hào)為I-1518；在PCT申請WO 96/20607(申請人為COMPAGNIE GERVAISDANONE)中描述了這個(gè)株，和其酸乳酪發(fā)酵組合用于制備發(fā)酵乳制品。
在人中進(jìn)行的最近研究也報(bào)道了含干酪乳桿菌株DN-114 001的發(fā)酵牛奶的攝入促使加強(qiáng)抵抗鼠傷寒桿菌。這個(gè)作用歸功于對非特異性先天免疫的作用[YOON等，Iht J Immunother；15，79-89(1999)]。
發(fā)明人研究了干酪乳桿菌是否也對適應(yīng)性免疫有作用，它與先天免疫不同，引起對抗給定病原物的特異性免疫反應(yīng)。
為了這個(gè)目的，發(fā)明人研究了體內(nèi)口服給予干酪乳桿菌對響應(yīng)各種普通病原物的代表性抗原細(xì)菌抗原(破傷風(fēng))；真菌抗原(念珠菌)和病毒抗原(流感)的T細(xì)胞增殖離體刺激的作用。
他們觀察到對于每個(gè)測試的抗原，干酪乳桿菌攝入導(dǎo)致T細(xì)胞，特別是CD3+亞群響應(yīng)所述抗原活化的增殖能力增加。這個(gè)作用尤其表現(xiàn)在流感抗原的情況下。
本發(fā)明的主題是干酪乳桿菌物種的菌株在制備可口服給藥來加強(qiáng)抗病原微生物的特異性全身免疫反應(yīng)的組合物中的應(yīng)用。
這種免疫反應(yīng)的加強(qiáng)是由對所述病原微生物抗原特異性的T細(xì)胞增殖能力增加而產(chǎn)生的。
根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，所述微生物是空氣傳播病原體，特別是呼吸道病原體。
有關(guān)的病原體特別是細(xì)菌或病毒；在后者中，將提到，例如，鼻病毒、呼吸道合胞病毒(RSV)和粘液病毒(正粘病毒如流感病毒)(甲、乙、或丙型流感)，或副粘病毒，尤其是副流感病毒)。
本發(fā)明的實(shí)施方案中，所述干酪乳桿菌可單獨(dú)或與干酪乳桿菌物種或其它物種的其它乳酸菌聯(lián)合使用。有利地，它可與酸乳酪酵素，即保加利亞乳桿菌(Lactobacillus bulgaricus)和唾液鏈球菌嗜熱亞種(Streptococcus thermophilus)組合使用。
它也可以以完整細(xì)菌的形式使用，可以是或可以不是活的，也可以以細(xì)菌溶菌產(chǎn)物的形式，或以細(xì)菌級(jí)分的形式使用。
優(yōu)選，在根據(jù)本發(fā)明的應(yīng)用中制備的組合物中每毫升含有至少105，優(yōu)選至少106，通常在1×108和1.5×109之間的干酪乳桿菌細(xì)胞。
當(dāng)干酪乳桿菌與酸乳酪酵素組合使用時(shí)，所述組合物中每毫升也有利地含至少107，優(yōu)選2×108和1×109之間的唾液鏈球菌嗜熱亞種細(xì)胞，和每毫升至少5×105，優(yōu)選4×106和2×107之間的保加利亞乳桿菌細(xì)胞。
尤其最適合用于本發(fā)明的干酪乳桿菌株是CNCM株I-1518。
根據(jù)本發(fā)明制備的組合物可以以食品或食品添加物的形式給予。它們可以是例如，乳制品，特別是發(fā)酵乳制品，它們至少含所述干酪乳桿菌株，任選與其它乳酸菌組合，例如與酸乳酪酵素組合。
根據(jù)本發(fā)明制備的組合物可用于傳染起源，特別是病毒起源，尤其是流感起源的病理情況的預(yù)防和治療。優(yōu)選，為了獲得最佳的效果，它們將以相當(dāng)于吸收至少107，優(yōu)選至少108，通常在109和1012之間的干酪乳桿菌細(xì)胞的量給藥至少一周，優(yōu)選至少10天。
在隨后的進(jìn)一步描述的幫助下，將更清楚地理解本發(fā)明，該描述是指闡明干酪乳桿菌株加強(qiáng)對微生物抗原的特異性反應(yīng)的性質(zhì)的非限制性實(shí)施例。
實(shí)施例1干酪乳桿菌對響應(yīng)抗原刺激的T細(xì)胞增殖的作用為了檢測攝入含干酪乳桿菌菌株DN-114 001(CNCM I-1518)的發(fā)酵乳制品對響應(yīng)抗原刺激的T細(xì)胞增殖的作用，實(shí)施與安慰劑相比的雙盲實(shí)驗(yàn)。
該研究的條件如下個(gè)體募集華盛頓醫(yī)院中心傳染病科(華盛頓特區(qū))的88個(gè)健康個(gè)體，18至50歲。有肝炎或腎病，心血管功能紊亂，免疫或胃腸道疾病，嚴(yán)重哮喘或糖尿病病史的個(gè)體，在開始研究前少于3個(gè)月，用抗生素或免疫抑制劑治療的個(gè)體，有酗酒或酒精依賴性病史的個(gè)體，已知對乳制品不耐受或過敏的個(gè)體，低卡路里飲食的個(gè)體，前季期間已接種抗流感疫苗的個(gè)體，和孕婦或哺乳婦女從本研究中排除。
WHC研究委員會(huì)批準(zhǔn)了本研究的方案和條件，管理對人實(shí)施研究的機(jī)構(gòu)審查部也批準(zhǔn)。
所選個(gè)體隨機(jī)分成2組-47個(gè)個(gè)體的一組(26個(gè)女性和21個(gè)男性)接受每天100ml含2％脂肪的發(fā)酵乳制品，包括酸乳酪酵素(保加利亞乳桿菌和唾液鏈球菌嗜熱亞種)和干酪乳桿菌菌株DN-114 001，由DANONE以ACTIMEL商標(biāo)銷售。
-41個(gè)個(gè)體的一組(22個(gè)女性和19個(gè)男性)接受28天安慰劑每天100ml用水稀釋(1/5，v/v)的補(bǔ)充糖以給予與ACTIMEL等同卡路里值的牛奶。
要求2個(gè)組的個(gè)體在研究期間避免食用酸乳酪或其它發(fā)酵乳制品。
ACTIMEL組和安慰劑組的個(gè)體平均(圓括號(hào)中指出標(biāo)準(zhǔn)差)年齡分別是36(7.3)和32.7(7.4)。
為了確定基礎(chǔ)值，在ACTIMEL或安慰劑開始攝入前，從2個(gè)組的每個(gè)個(gè)體抽取血液樣品(55ml)。在9、18和28天給予個(gè)體控制隨訪，完成有關(guān)他們健康、可能的副作用以及任何可能干擾結(jié)果解釋的疾病發(fā)展的短調(diào)查表。為了免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)，每次隨訪期間抽取血液樣品。
對于每個(gè)個(gè)體的血液樣品，進(jìn)行完整血細(xì)胞計(jì)數(shù)和血液化學(xué)分析。此外，用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行白細(xì)胞及其亞群(T細(xì)胞和亞群，B細(xì)胞，單核細(xì)胞和NK細(xì)胞)的表型分析。
細(xì)胞增殖的測定通過如下所述測定3HTdR摻入來離體確定ACTIMEL組個(gè)體和安慰劑組個(gè)體，有關(guān)三個(gè)微生物抗原念珠菌、破傷風(fēng)和流感的T細(xì)胞增殖反應(yīng)。
細(xì)胞制備所取的每個(gè)樣品的30ml肝素化血液處理如下將管以1500rpm離心10分鐘。小心地將血漿轉(zhuǎn)移到標(biāo)記的冷凍管中并在70℃保存[原文如此]。血液轉(zhuǎn)移到15ml離心管中并用PBS稀釋到1∶3。將10mlFicoll-hypaque加入到50ml離心管中并覆蓋30ml稀釋的血液。管以2000rpm在室溫下離心2分鐘。棄去PBS上層，混合單個(gè)核細(xì)胞并轉(zhuǎn)移到15ml離心管中。加入10ml HBSS，渦旋并以1500rpm離心10分鐘；棄去上清，沉淀重懸于2-3ml HBSS。加入8ml HBSS，將管以1500rpm離心6分鐘。這個(gè)方案重復(fù)兩次，回收的細(xì)胞重懸于1-2mlPBS然后渦旋。計(jì)數(shù)細(xì)胞，臺(tái)盼藍(lán)排除法檢查它們的活力，其濃度調(diào)整到2×108/ml。
制備抗原破傷風(fēng)抗原實(shí)驗(yàn)當(dāng)天制備。PBS中將破傷風(fēng)類毒素(CONNAUGHTLABORATORY，Willowdale，加拿大)稀釋到1∶1000制備原液。
白色念珠菌(Candida albicans)抗原PBS中將白色念珠菌抗原(BAYER CO，ELKERT，IN)稀釋到1∶1000制備原液。
流感抗原PBS中將流感病毒抗原(NIBSC，Herts，英國)稀釋到1∶125制備原液。
使用微滴定板(96孔)。每個(gè)孔接受100μl抗原原液和100μl細(xì)胞，每孔2×105個(gè)細(xì)胞的終濃度。對照孔接受100μl PBS代替抗原原液。板在37℃，5％CO2下溫育5天；溫育結(jié)束前18小時(shí)，加入20μl的50μCi/ml3HTdR(NEW ENGLAND NUCLEAR，Boston，MA)。在濾器上收獲每個(gè)板的孔的細(xì)胞，為了測定3HTdR摻入，濾器直接在MATRIX 9600 beta-計(jì)數(shù)器(PACKARD INSTRUMENTS)中計(jì)數(shù)，以CPM(每分鐘計(jì)數(shù))表示。
對于已接受ACTIMEL的組的每個(gè)個(gè)體和已接受安慰劑的組的每個(gè)個(gè)體，根據(jù)下列公式測定刺激指數(shù)(SI)估計(jì)增殖
統(tǒng)計(jì)學(xué)分析描述性統(tǒng)計(jì)學(xué)(平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差、中值)用于總結(jié)在每個(gè)測定時(shí)間，本研究的每個(gè)組中T細(xì)胞接觸每個(gè)抗原的增殖反應(yīng)。由于增殖反應(yīng)的分布偏差，對增殖數(shù)據(jù)進(jìn)行自然對數(shù)轉(zhuǎn)換。
與基礎(chǔ)值比較增殖反應(yīng)的變異用于統(tǒng)計(jì)學(xué)建模[LITTELL等.SASSystem for Mixed Model.North CarolinaSAS Institute Inc，(1996)]。使用DIGGLE等[Analysis of Longitudinal Data.NewYorkUniversity Press Inc，1994]描述的曲線平滑技術(shù)表現(xiàn)增殖反應(yīng)與基礎(chǔ)值相比較隨時(shí)間的變化。
開發(fā)了混合線性模型以研究增殖反應(yīng)的軌跡(trajectory)。這個(gè)模型允許將研究的每組的增殖數(shù)據(jù)調(diào)整為二次曲線。
這個(gè)模型由下列等式定義Yijt＝αij+β1jT+β2jT2+εijt，i＝1，….n，j＝1，2，t＝1，2，3，4其中Yijt表示個(gè)體i在產(chǎn)品組j在時(shí)間t時(shí)，與基礎(chǔ)值相比的增殖反應(yīng)的差異；對每個(gè)變量已經(jīng)進(jìn)行自然對數(shù)轉(zhuǎn)換，Yijt＝Log(在時(shí)間t的增殖)-Log(基礎(chǔ)值)。
αij表示在產(chǎn)品組j中個(gè)體i的截距(interception)。它反應(yīng)在模型中的隨機(jī)作用。αij～MVN(O，G)，G含有對角線結(jié)構(gòu)(djagonalstructure)中方差的分量(MVN多項(xiàng)式變量分布(multinomalvariable distribution))。
β1j和β2j是產(chǎn)品組j的T和T2的回歸系數(shù)；T是測定的時(shí)刻(第0，9，18或28天)，T2是T的二次方。
εijt是誤差系數(shù)εijt～MVN(O，R)和R＝σ2In，其中In表示單位矩陣n×n。
實(shí)施了下列假說的統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)a)檢測估計(jì)的回歸系數(shù)是否是0.H0β1j＝0對H1β1j≠0 (對于線性項(xiàng))和H0β2j＝0對H1β2j≠0 (對于二次項(xiàng))如果β1j和β2j不同于0，則沒有軌跡。如果β2j與0有顯著差異，則有二次軌跡。如果只有β1j與0有顯著差異，則有線性軌跡。
b) 比較兩組的軌跡是否相同。H0β11＝E12對H1β11≠β12(對于線性項(xiàng))和H0β21＝E22對H1β21≠β22(對于二次項(xiàng))用SAS統(tǒng)計(jì)包進(jìn)行分析。結(jié)果下表I給出了有關(guān)個(gè)體的人數(shù)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)和增殖的基礎(chǔ)值的估計(jì)。
表I
SD＝標(biāo)準(zhǔn)差T細(xì)胞對特異性微生物抗原的增殖反應(yīng)下表2給出了每組(ACTINEL和安慰劑)在各個(gè)采樣時(shí)間的外周血液單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)的離體增殖的平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和中值。
表2
SD＝標(biāo)準(zhǔn)差本研究對于三個(gè)微生物抗原的增殖反應(yīng)的基礎(chǔ)值(0天)，兩組之間沒有顯著性差異。


圖1圖解了本研究的兩組對于每個(gè)抗原在時(shí)間上的增殖反應(yīng)的變化ACTIMEL組連續(xù)線；安慰劑組虛線。
下表3提供了統(tǒng)計(jì)學(xué)建模結(jié)果。
表3
念珠菌在ACTIMEL組中，0天的基礎(chǔ)反應(yīng)3.0±3.4增加到第9天的3.2±3.5，和第18天的4.3±5.6，然后在28天降到2.3±2.6(表2)。估計(jì)的線性項(xiàng)T和二次項(xiàng)T2的系數(shù)分別是0.028和0.0012(表3)。兩個(gè)值與0有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異(分別是p＝0.030和0.013)。這些觀察結(jié)果暗示對念珠菌抗原的增殖反應(yīng)的變化具有顯著的正趨向。增殖反應(yīng)首先增加然后降低，如圖1a所示。
安慰劑組顯示本研究期間的小改變。估計(jì)的T和T2的回歸系數(shù)是0.017和0.0007。這些值與0沒有顯著差異(分別是p＝0.232和0.208)。這些觀察結(jié)果顯示對照組增殖反應(yīng)在本研究期間沒有顯著改變。如圖1a所示，安慰劑組曲線比ACTIMEL組的曲線平坦。盡管ACTIMEL組與安慰劑組相比，顯示出明顯的軌跡，兩條曲線間的差異沒有達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性的水平(T的p＝0.540和T2的p＝0.458，表3)。
破傷風(fēng)對于ACTIMEL組，反應(yīng)從基礎(chǔ)水平逐漸增加到第18天，然后下降。估計(jì)的T和T2的回歸系數(shù)分別是0.043和0.0011(表3)。這兩個(gè)值與0有顯著差異(分別是p＝0.001和0.020)。如念珠菌的情況，ACTIMEL組在本研究期間增殖反應(yīng)的正變化有顯著性。在安慰劑組，平均值從0天的7.3增加到9天的11.8，然后18天降至7.9，在28天再次增加到8.7(圖1b)。即使二次項(xiàng)T2具有非顯著系數(shù)(-0.0008，p＝0.141，表3)，T的顯著估計(jì)系數(shù)(0.034，p＝0.022，表3)顯示出軌跡作用。然而，如果ACTIMEL組與安慰劑組比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)在兩條曲線間未顯示任何顯著差異(T和T2分別是p＝0.630和0.626)。
流感ACTIMEL組比安慰劑組顯示更清晰的改變。平均值從0天的13±12.6增加到9天的19.7±17.1，保持這個(gè)水平到18天，然后在28天降至13.9±12.7(圖1c)。估計(jì)的T和T2的兩個(gè)系數(shù)與零有顯著差異(p＝0.001)。這些統(tǒng)計(jì)顯示本研究期間增殖反應(yīng)的正改變是顯著性的(表2)。
安慰劑組顯示與破傷風(fēng)觀察到的那些相似的變化。如圖1c圖示，平均值到9天增加，到18天降低，到28天再次增加。兩個(gè)估計(jì)的回歸系數(shù)與0沒有顯著差異(T和T2的p值分別是0.181和0.475)，表明對流感抗原的增殖反應(yīng)變異沒有顯著軌跡。
當(dāng)比較ACTIMEL組和安慰劑組估計(jì)的參數(shù)時(shí)，觀察到線性參數(shù)和二次方參數(shù)都有顯著差異(T的p＝0.045和T2的p＝0.027)(表3)。這些結(jié)論表明本研究的兩組間增殖反應(yīng)的變化具有顯著差異。
實(shí)施例2干酪乳桿菌對響應(yīng)流感抗原刺激的T淋巴細(xì)胞亞群增殖的作用。
體外對微生物抗原應(yīng)答的T亞群的確切性質(zhì)未知。T淋巴細(xì)胞特定亞群的任何一個(gè)，如表型CD3+CD4+，CD3+CH8+，CD3+CH25+和CD3+CD45+代表的那些，可以認(rèn)為是初級(jí)應(yīng)答者，或這些組合亞群可能有助于對激發(fā)抗原的總體增殖反應(yīng)。
假設(shè)特定淋巴細(xì)胞亞群是激發(fā)抗原的主要應(yīng)答者，為了確定ACTIMEL組和安慰劑組之間4個(gè)亞群得到的增殖反應(yīng)是否有顯著差異，使用上面實(shí)施例1所述的統(tǒng)計(jì)模型對T細(xì)胞亞群CD3+CD4+，CD3+CH8+，CD3+CH25+和CD3+CD45+進(jìn)行分析。
在這些分析中，對于每個(gè)亞群，最初基于總PBMCs的增殖反應(yīng)的值轉(zhuǎn)換為根據(jù)每個(gè)血液樣品中CD3+CD4+，CD3+CH8+，CD3+CH25+和CD3+CD45+ T細(xì)胞總頻率計(jì)算的新值。下一步，對每個(gè)亞群進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，如上面實(shí)施例1所述。
對于四個(gè)淋巴細(xì)胞亞群，每個(gè)安慰劑和ACTIMEL組的平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和中值在下表4給出。
表4
SD＝標(biāo)準(zhǔn)差本研究的兩組之間基礎(chǔ)值的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。
使用上面實(shí)施例1所述的統(tǒng)計(jì)學(xué)模型，在對流感抗原應(yīng)答中，分析四個(gè)淋巴細(xì)胞亞群中每一個(gè)的增殖相對于這些基礎(chǔ)值的變異。圖2以對數(shù)級(jí)圖示了這些亞群中的每一個(gè)和本研究兩組中的每個(gè)組的增殖的變異。
下表5給出了統(tǒng)計(jì)學(xué)建模的結(jié)果。
表5
SE＝標(biāo)準(zhǔn)誤四個(gè)淋巴細(xì)胞亞群中每一個(gè)的增殖反應(yīng)與總PBMCs觀察到的反應(yīng)一致。接觸流感抗原過程中，觀察到ACTIMEL組的四個(gè)淋巴細(xì)胞亞群有顯著變化。這些變化可以以時(shí)間的二次函數(shù)來表示。
觀察到安慰劑組的四個(gè)亞群有小的變化。
此外，兩組間的所有淋巴細(xì)胞亞群具有顯著性差異。
結(jié)論這些結(jié)果表明，對于檢測的3個(gè)抗原，抗原激發(fā)者誘導(dǎo)的增殖反應(yīng)增加，該增加在ACTIMEL組高于安慰劑組。在流感抗原的情況下，對于總PBMCs和T細(xì)胞亞群CD3+CD4+，CD3+CH8+，CD3+CH25+和CD3+CD45+的每一個(gè)來說，ACTIMEL組的增加與安慰劑組觀察到的相比，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。
因此看來在有關(guān)的個(gè)體中，ACTIMEL攝入誘導(dǎo)體內(nèi)免疫引發(fā)，引起它們的T細(xì)胞對微生物抗原尤其是流感抗原的離體反應(yīng)，這種反應(yīng)比安慰劑組觀察到的好。
該反應(yīng)的增加與ACTIMEL組個(gè)體中CD3+T細(xì)胞及其亞群的活化頻率和狀態(tài)有關(guān)。
此外，與CD25活化標(biāo)記的存在正相關(guān)提示表達(dá)CD25 IL-2受體和能夠?qū)α鞲锌乖行У貞?yīng)答的流感特異性T細(xì)胞體內(nèi)活化的參與。T細(xì)胞亞群的分析也提示增殖反應(yīng)可能包括與流感抗原對應(yīng)的CD4+和CD8+亞群。CD3+/CD8+T亞群在分析增殖中的重要性提示流感特異性CD8+細(xì)胞毒性細(xì)胞庫體內(nèi)引發(fā)的可能性。
權(quán)利要求
1.干酪乳桿菌物種的菌株在制備可口服給藥來加強(qiáng)抗病原微生物的特異性全身免疫反應(yīng)的組合物中的應(yīng)用。
2.權(quán)利要求1的應(yīng)用，其特征在于所述的病原微生物是呼吸道的病原體。
3.權(quán)利要求1和2任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于所述的病原微生物是選自鼻病毒、呼吸道合胞病毒和粘液病毒的病毒。
4.權(quán)利要求3的應(yīng)用，其特征在于所述的病毒是流感病毒。
5.權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于所述的干酪乳桿菌菌株是CNCM株I-1518。
6.權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于所述的組合物是食品或食品添加物的形式。
7.權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于所述的組合物是發(fā)酵乳制品的形式。
全文摘要
本發(fā)明涉及干酪乳桿菌在口服給藥來加強(qiáng)特異性針對病原微生物的免疫的組合物中的應(yīng)用。所述組合物可以特別是食品或食品添加物。
文檔編號(hào)A61P11/00GK1430518SQ0181005
公開日2003年7月16日 申請日期2001年4月27日 優(yōu)先權(quán)日2000年5月25日
發(fā)明者E·波斯泰勒, B·波納維達(dá) 申請人:熱爾韋·達(dá)諾尼公司