一種微生物發(fā)酵飼料原料的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種微生物發(fā)酵飼料原料的制備方法，該方法包括將復(fù)合菌種接種到發(fā)酵原料中進(jìn)行發(fā)酵，其中，所述發(fā)酵原料含有玉米淀粉渣、甜菜糖蜜、玉米酒精糟可溶物、檸檬酸糟、玉米粉、DDGS和噴漿玉米皮中的一種或多種；且所述發(fā)酵原料以干基計粗蛋白含量為20重量％以上；所述復(fù)合菌種包含乳桿菌、芽孢桿菌和酵母菌。該方法利用工業(yè)副產(chǎn)物作為發(fā)酵原料，制作高能量飼料或高蛋白質(zhì)飼料原料，對副產(chǎn)品進(jìn)行有機整合、變廢為寶，使產(chǎn)品經(jīng)濟效益最大化；采用復(fù)合菌種進(jìn)行微生物發(fā)酵，提高飼料原料中的營養(yǎng)成分和吸收率，能極大提高副產(chǎn)品的營養(yǎng)價值；另外，該制備方法生產(chǎn)工藝簡單、成本低廉、制作周期短，便于大規(guī)模生產(chǎn)。
【專利說明】
一種微生物發(fā)酵飼料原料的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明涉及飼料原料的制備方法，具體地，涉及一種微生物發(fā)酵飼料原料的制備 方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 在飼料工業(yè)中應(yīng)用生物技術(shù)被越來越重視，原因在于其能夠變廢為寶，充分的利 用工業(yè)廢棄物，這樣既提供了豐富的飼料資源，又減輕了環(huán)境污染。生物飼料憑借其優(yōu)質(zhì)、 高含量的蛋白和豐富的生物活性物質(zhì)的優(yōu)勢，對緩解飼料原料緊張的局面，推動飼料工業(yè) 和畜牧業(yè)的發(fā)展必將起到巨大的推動作用。酵母細(xì)胞含豐富的蛋白質(zhì)，氨基酸以及多種維 生素，尤其是B族維生素以及含量更為豐富各種消化酶類。能將無機氮源轉(zhuǎn)化為有機氮，提 高飼料的蛋白質(zhì)含量。芽孢桿菌可在動物腸道內(nèi)生長繁殖，能產(chǎn)生多種營養(yǎng)物質(zhì)如維生素、 氨基酸、有機酸、促生長因子等，參與動物機體的新陳代謝，為動物機體提供營養(yǎng)物質(zhì)。乳桿 菌發(fā)酵產(chǎn)生有機酸、特殊酶系、酸菌素等物質(zhì)具有特殊生理功能，可刺激組織發(fā)育，對機體 的營養(yǎng)狀態(tài)、生理功能、免疫反應(yīng)和應(yīng)激反應(yīng)等產(chǎn)生作用。
[0003] 在以玉米、木薯渣為原料，生產(chǎn)檸檬酸、賴氨酸、酒精等產(chǎn)品的過程中，會產(chǎn)生很多 類副產(chǎn)品，如檸檬酸糟、玉米淀粉渣、玉米漿、玉米皮等等。副產(chǎn)品直接進(jìn)行處理或銷售時， 其市場價值沒有得到最好的體現(xiàn)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種微生物發(fā)酵飼料原料的制備方法，由該制備方法制得的 微生物發(fā)酵飼料原料，本發(fā)明的方法能夠利用工業(yè)副產(chǎn)物作為發(fā)酵原料，制作高能量飼料 或高蛋白質(zhì)飼料原料，使產(chǎn)品經(jīng)濟效益最大化。
[0005] 根據(jù)本發(fā)明的第一方面，本發(fā)明提供了一種微生物發(fā)酵飼料原料的制備方法，該 方法包括將復(fù)合菌種接種到發(fā)酵原料中進(jìn)行發(fā)酵，其特征在于，所述發(fā)酵原料含有玉米淀 粉渣、甜菜糖蜜、玉米酒精糟可溶物、檸檬酸糟、玉米粉、干酒糟及其可溶物（以下也稱為 DDGS)和噴漿玉米皮中的一種或多種;且所述發(fā)酵原料以干基計粗蛋白含量為20重量％以 上;所述復(fù)合菌種包含乳桿菌、芽孢桿菌和酵母菌。
[0006] 根據(jù)本發(fā)明的第二方面，本發(fā)明提供了一種微生物發(fā)酵飼料原料，其中，該微生物 發(fā)酵飼料原料由上述制備方法制得。
[0007] 根據(jù)本發(fā)明的第三方面，本發(fā)明還提供了一種飼料，其中，該飼料含有上述制備方 法制備的微生物發(fā)酵飼料原料。
[0008] 通過上述技術(shù)方案，本申請?zhí)峁┑奈⑸锇l(fā)酵飼料原料制備方法利用工業(yè)副產(chǎn)物 作為發(fā)酵原料，制作高能量飼料或高蛋白質(zhì)飼料原料，對副產(chǎn)品進(jìn)行有機整合、變廢為寶， 使產(chǎn)品經(jīng)濟效益最大化;采用復(fù)合菌種進(jìn)行微生物發(fā)酵，提高飼料原料中的營養(yǎng)成分和吸 收率，能極大提高副產(chǎn)品的營養(yǎng)價值;另外，該制備方法生產(chǎn)工藝簡單、成本低廉、制作周期 短，便于大規(guī)模生產(chǎn)。
[0009] 本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點將在隨后的【具體實施方式】部分予以詳細(xì)說明。
【具體實施方式】
[0010] 以下對本發(fā)明的【具體實施方式】進(jìn)行詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解的是，此處所描述的具體 實施方式僅用于說明和解釋本發(fā)明，并不用于限制本發(fā)明。
[0011] 本發(fā)明提供的微生物發(fā)酵飼料原料的制備方法，該方法包括將復(fù)合菌種接種到發(fā) 酵原料中進(jìn)行發(fā)酵，所述發(fā)酵原料含有玉米淀粉渣、甜菜糖蜜、玉米酒精糟可溶物、檸檬酸 糟、玉米粉、干酒糟及其可溶物和噴漿玉米皮中的一種或多種;且所述發(fā)酵原料以干基計粗 蛋白含量為20重量％以上;所述復(fù)合菌種包含乳桿菌、芽孢桿菌和酵母菌。
[0012] 在本發(fā)明中，所述發(fā)酵原料以干基計粗蛋白是指用《GB/T 6432飼料中粗蛋白測定 方法》所得的數(shù)據(jù)。
[0013] 根據(jù)本發(fā)明，通過使所述發(fā)酵原料含有玉米淀粉渣、甜菜糖蜜、玉米酒精糟可溶 物、檸檬酸糟、玉米粉、DDGS和噴漿玉米皮中的一種或多種，來制備微生物發(fā)酵飼料原料。
[0014] 作為上述玉米淀粉渣、玉米酒精糟可溶物、檸檬酸糟、玉米粉、DDGS和噴漿玉米皮 可以為本領(lǐng)域公知的檸檬酸、賴氨酸、酒精等產(chǎn)品的副產(chǎn)物。例如，上述玉米淀粉渣優(yōu)選為 玉米經(jīng)粉碎、液化、過濾而得到的玉米淀粉渣;上述甜菜糖蜜優(yōu)選為通過甜菜液化、糖化和 濃縮而得到的甜菜糖蜜；上述玉米酒精糟可溶物優(yōu)選為玉米經(jīng)粉碎、液化、糖化、發(fā)酵、蒸 餾、過濾而得到的玉米酒精糟可溶物;上述檸檬酸糟優(yōu)選為以玉米經(jīng)液化、糖化、發(fā)酵、過濾 而得到的檸檬酸糟；上述玉米粉優(yōu)選為玉米經(jīng)粉碎得到的玉米粉;上述DDGS優(yōu)選為玉米經(jīng) 粉碎、液化、糖化、發(fā)酵、過濾后得到液體與固渣、濃縮與烘干而得到的DDGS;上述噴漿玉米 皮優(yōu)選為將玉米浸泡液噴到玉米皮上并經(jīng)干燥而得到的噴漿玉米皮。上述玉米淀粉渣、甜 菜糖蜜、玉米酒精糟可溶物、檸檬酸糟、玉米粉、DDGS和噴漿玉米皮的制備方法和條件為本 領(lǐng)域所公知，在此不再累述。
[0015]根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選的實施方式，所述玉米淀粉渣中以干基計粗蛋白為25-30 重量％，以干基計粗灰分為2.7-3.3重量％，以干基計粗纖維為9.2-11.2重量％，以干基計 粗脂肪為10.8-13.2重量％，水分含量為9-11重量％ ;
[0016] 所述玉米酒精糟可溶物以干基計粗蛋白為14-17重量％，以干基計粗灰分為11.7-14重量％，以干基計粗纖維為0.4-0.6重量％，以干基計粗脂肪為0.12-0.14重量％，水分含 量為60-75重量％;
[0017] 所述檸檬酸糟以干基計粗蛋白為10-13重量％，以干基計粗灰分為2.7-3.4重 量％，以干基計粗纖維為20.5-25重量％，以干基計粗脂肪為2.3-2.8重量％，水分含量為 60-75重量 ％ ;
[0018] 所述玉米粉以干基計粗蛋白為7.7-9.4重量％，以干基計粗灰分為1.2-1.5重 量％，以干基計粗纖維為2.7-3.4重量％，以干基計粗脂肪為3-3.7重量％，水分含量為12-15重量％;
[0019] 所述DDGS以干基計粗蛋白為23-29重量％，以干基計粗灰分為4.5-5.5重量％，以 干基計粗纖維為10-12重量％，以干基計粗脂肪為6.6-8.0重量％，水分含量為5.5-12.0重 量％ ;
[0020] 所述噴漿玉米皮以干基計粗蛋白為17-21重量％，以干基計粗灰分為5-6重量％， 以干基計粗纖維為7.4-9重量％，以干基計粗脂肪為1.9-2.3重量％，水分含量為7.8-12.0 重量％。
[0021]優(yōu)選地，所述發(fā)酵原料含有玉米粉、玉米淀粉渣、檸檬酸糟、玉米酒精糟可溶物、 DDGS和噴漿玉米皮中的一種或多種。
[0022]更優(yōu)選地，所述發(fā)酵原料為玉米淀粉渣、甜菜糖蜜、玉米酒精糟可溶物、檸檬酸糟、 玉米粉、DDGS和噴漿玉米皮。
[0023]此外，所述發(fā)酵原料以干基計粗蛋白含量只要在20重量％以上即可，在從原料色 澤與顆粒度、營養(yǎng)成分的方面來考慮，更優(yōu)選為22-24重量％。
[0024] 根據(jù)本發(fā)明，出于營養(yǎng)成分、原料色澤與顆粒度的考慮，所述發(fā)酵原料以干基計粗 蛋白含量在滿足上述條件的基礎(chǔ)上，優(yōu)選所述發(fā)酵原料中的水分含量為35重量％以下（更 優(yōu)選為33-34.5重量％ );更優(yōu)選地，所述發(fā)酵原料以干基計粗纖維為10重量％以下(更優(yōu)選 為6-8重量％ )，以干基計粗脂肪為2重量％以上（更優(yōu)選為3-4重量％ )，以干基計粗灰分為 10重量％以下（更優(yōu)選為6-8重量％)。在此，以干基計粗纖維是指用《GB/T 6434飼料中粗纖 維測定方法》測定所得的數(shù)據(jù)，同理，以干基計粗脂肪是指用《GB/T 6433飼料中粗脂肪的測 定》測定所得的數(shù)據(jù)。以干基計粗灰分是指用《GB/T 6438-2007飼料中粗灰分的測定》測定 所得的數(shù)據(jù)。
[0025] 根據(jù)本發(fā)明，所述復(fù)合菌種包含乳桿菌、芽孢桿菌和酵母菌。
[0026]優(yōu)選地，所述乳桿菌為嗜酸乳桿菌（如編號為CGMCC 1.1854的菌種）、植物乳桿菌 (如編號為CGMCC 1.2158的菌種）和發(fā)酵乳桿菌(如編號為CGMCC 1.3223的菌種）中的一種 或多種，所述芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌(如編號為安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院951ΝΑ4的菌 種）、地衣芽孢桿菌（如編號為CGMCC 1.265的菌種）和凝結(jié)芽孢桿菌（如編號為CGMCC 1.3220的菌種）中的一種或多種，所述酵母菌為產(chǎn)朊假絲酵母菌(如編號為CGMCC 2.1180的 菌種)和/或釀酒酵母(如編號為CGMCC 2.3853的菌種）。
[0027]更優(yōu)選地，所述復(fù)合菌種包含嗜酸乳桿菌、枯草芽孢桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母菌。
[0028] 在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方式中，所述復(fù)合菌種由芽孢桿菌種子液、乳桿菌種 子液和酵母菌種子液混合而成。所述芽孢桿菌種子液、乳桿菌種子液和酵母菌種子液分別 由芽孢桿菌、乳桿菌和酵母菌經(jīng)過搖瓶種子培養(yǎng)、一級種子培養(yǎng)兩步培養(yǎng)過程完成。培養(yǎng)方 法和條件均為本領(lǐng)域常規(guī)方式，滿足本申請所需的菌種含量即可。
[0029] 作為上述搖瓶種子培養(yǎng)的方法例如可以為：將菌懸液接入經(jīng)滅菌的搖瓶培養(yǎng)基 中，根據(jù)菌種性質(zhì)，在靜置(厭氧)/搖瓶機(好氧)條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)過程測定0D(波長600nm、 比色皿寬度lcm)和pH值。
[0030] 作為上述一級種子培養(yǎng)的方法例如可以為:將搖瓶培養(yǎng)液接入一級種子培養(yǎng)培養(yǎng) 基，在擴培罐中，適當(dāng)條件下培養(yǎng);培養(yǎng)過程測定0D(波長600nm、比色皿寬度lcm)和pH值。 [0031]優(yōu)選地，所述芽孢桿菌種子液芽孢桿菌的含量為5X 108~1 X 109cfu/mL，乳桿菌種 子液中乳桿菌的含量為5 X 109~1 X 101()Cfu/mL，酵母菌種子液中酵母菌的含量為2.5 X 109 ~5X109cfu/mL;
[0032]更優(yōu)選地，所述芽孢桿菌種子液與所述乳桿菌種子液和所述酵母菌種子液的體積 比為 1:1-1.5:0.5-1。
[0033]根據(jù)本發(fā)明，所述發(fā)酵的條件包括:發(fā)酵溫度為25-35°C(優(yōu)選為28-32Γ)，發(fā)酵時 間為48-168小時（優(yōu)選為72-144小時），發(fā)酵pH值為5-7(優(yōu)選為5.5-6.5)。本發(fā)明的發(fā)明人 經(jīng)過深入的研究發(fā)現(xiàn)，在上述條件下，特別是在上述pH值范圍內(nèi)進(jìn)行發(fā)酵，能夠使乳桿菌、 芽孢桿菌和酵母菌均能夠獲得極好的發(fā)酵效果，最終得到具有較高菌種含量的微生物發(fā)酵 飼料原料。作為調(diào)節(jié)pH值的物質(zhì)，沒有特別的限定，可以使用本領(lǐng)域常規(guī)使用的各種用于調(diào) 節(jié)pH值的試劑。例如可以用氫氧化鈣進(jìn)行調(diào)整。
[0034] 優(yōu)選地，相對于lg所述發(fā)酵原料，所述芽孢桿菌的接種量為2X 105~4X 106cfu(優(yōu) 選為4 X 105~4 X 106cfu)，所述乳桿菌的接種量為2 X 107~4 X 108cfu(優(yōu)選為4 X 107~4 X 108cfu)，所述酵母菌的接種量為2 X 107~4 X 108cfu(優(yōu)選為4 X 107~4 X 108cfu)。
[0035] 根據(jù)本發(fā)明，所述發(fā)酵過程包括有氧發(fā)酵和無氧發(fā)酵兩個階段，有氧發(fā)酵消耗環(huán) 境中的氧氣，氧氣消耗完畢后進(jìn)行無氧發(fā)酵過程，根據(jù)菌種的特性利用一次發(fā)酵過程同時 完成三類菌種的發(fā)酵。優(yōu)選地，所述發(fā)酵過程在不透氣的包裝袋中進(jìn)行，所述包裝袋上設(shè)有 單向排氣閥，氣體僅可通過所述單向排氣閥從袋內(nèi)排出袋外。為了能夠使乳桿菌、芽孢桿菌 和酵母菌均能夠獲得較好的發(fā)酵效果，優(yōu)選地，袋中的發(fā)酵原料與密封在袋中的空氣的體 積比為10:0.5-1，排出多余氣體密封即可。
[0036] 本發(fā)明還提供一種通過上述制備方法得到的微生物發(fā)酵飼料原料。
[0037]通過本發(fā)明的制備方法得到的微生物發(fā)酵飼料原料的pH值為3.0-5.0，優(yōu)選為 3.5-4.5，更優(yōu)選為3.8-4.2。通過pH值在上述范圍內(nèi)，可以有效地抑制因含水量較高導(dǎo)致的 霉菌和致病菌等的污染。
[0038] 微生物發(fā)酵飼料原料中的總酸體現(xiàn)其中的有機酸含量，通過本發(fā)明的制備方法得 到的微生物發(fā)酵飼料原料，以乳酸計總酸為2.5-4.5重量％，優(yōu)選為3.0-4.5重量％，更優(yōu)選 為4.0-4.5重量％。通過總酸在上述范圍內(nèi)，具有降低動物胃腸道pH、改善動物胃腸道微生 物區(qū)系、提高動物采食量的優(yōu)良效果。
[0039] 根據(jù)本發(fā)明，通過本發(fā)明的制備方法得到的微生物發(fā)酵飼料原料以干基計粗蛋白 為16-24重量％ ;優(yōu)選為18-24重量％ ;更優(yōu)選為22-24重量％。
[0040] 根據(jù)本發(fā)明，通過本發(fā)明的制備方法得到的微生物發(fā)酵飼料原料中所述芽孢桿菌 含量為2 X 105~8 X 106cfu/g，所述乳桿菌含量為2 X 107~8 X 108cf u/g，所述酵母菌含量為 2X107~8X108cfu/g;
[0041 ] 優(yōu)選地，所述芽孢桿菌含量為1 X 106~8 X 106cfu/g，所述乳桿菌含量為1 X 108~8 X 108cfu/g，所述酵母菌含量為1 X 108~8 X 108cfu/g;
[0042] 更優(yōu)選地，所述芽孢桿菌含量為4X 106~8X 106cfu/g，所述乳桿菌含量為4X 108 ~8 X 108cfu/g，所述酵母菌含量為4 X 108~8 X 108cfu/g。
[0043] 根據(jù)本發(fā)明，通過本發(fā)明的制備方法得到的微生物發(fā)酵飼料原料中水分含量優(yōu)選 為30-50重量％，更優(yōu)選為32-34重量％。
[0044] 根據(jù)本發(fā)明，所述微生物發(fā)酵飼料原料制備的原料處理、混合、接種、裝袋和發(fā)酵 過程由本領(lǐng)域常規(guī)方法進(jìn)行。具體地，根據(jù)各種固體原料的配比，使用鏟車向各個料斗內(nèi)投 料，采用皮帶稱實現(xiàn)固體原料的稱重，投入斗式提升機;斗式提升機將固體原料輸送至濕物 料打散機，經(jīng)打散后，原塊狀固體濕物料打散成均勻的小顆粒，濕物料打散機可連續(xù)生產(chǎn)； 經(jīng)打散機后的固體原料，進(jìn)入混合機。開啟液體原料及菌種進(jìn)料閥門，液體原料按配比量進(jìn) 行添加，與固體物料混合，菌種與發(fā)酵原料混合，完成接種過程?；旌?-10分鐘后，將混合機 內(nèi)的物料卸下濕料倉內(nèi)，通過螺旋輸送機從濕料倉內(nèi)采出，輸送至包裝袋內(nèi)，稱重密封。通 過叉車移至發(fā)酵間在發(fā)酵條件下完成發(fā)酵過程。
[0045] 進(jìn)一步地，本發(fā)明還提供了一種飼料，該飼料含有上述微生物發(fā)酵飼料原料。所述 微生物發(fā)酵飼料原料用于替代玉米、豆柏等材料作為飼料的主要成分。所述微生物發(fā)酵飼 料原料在飼料的含量為4-12重量％。
[0046] 作為本發(fā)明的一種優(yōu)選的實施方式，上述微生物發(fā)酵飼料原料的含量為8.36重 量％，其它的成分的種類和含量分別為：玉米為48.75重量％柏為35.37重量％，大油 為4.84重量％，石粉為1.38重量％，磷酸氫鈣為1.30重量％。
[0047] 以下將通過實施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述。以下實施例中，總酸通過化學(xué)滴定法 測得，水分通過《GB/T 6435飼料水分和其它揮發(fā)性物質(zhì)含量的測定方法》測得，以干基計粗 蛋白通過《GB/T 6432飼料中粗蛋白測定方法》測得，以干基計粗灰分通過《GB/T 6438-2007 飼料中粗灰分的測定》測定，以干基計粗纖維通過《GB/T 6 4 3 4飼料中粗纖維測定方法》測 定，以干基計粗脂肪通過《GB/T 6433飼料中粗脂肪的測定》測定。
[0048] 以下實施例中，菌體密度通過平板計數(shù)法測定測得，乳桿菌、酵母菌和芽孢桿菌分 別使用的平板培養(yǎng)基配制方法如下：
[0049] 乳桿菌平板培養(yǎng)基:稱取MRS肉湯培養(yǎng)基55.2g/L，瓊脂10.14g/L，加蒸餾水定容， 調(diào)節(jié)pH值為6.2，120°C，20min滅菌，制成平板培養(yǎng)基，空培養(yǎng)24h后使用。
[0050] 酵母菌平板培養(yǎng)基:稱取酵母粉l〇g/L，蛋白胨20g/L，葡萄糖20g/L，瓊脂14g/L，加 蒸餾水定容，調(diào)節(jié)pH值為6.0，120°C，20min滅菌，制成平板培養(yǎng)基，空培養(yǎng)24h后使用。
[00511芽孢桿菌平板培養(yǎng)基:稱取酵母粉5g/L，蛋白胨10g/L，葡萄糖5g/L，氯化鈉10g/L， 瓊脂20g/L，加蒸餾水定容，調(diào)節(jié)pH值為7.20，120°C，20min滅菌，制成平板培養(yǎng)基，空培養(yǎng) 24h后使用。
[0052]菌體密度采用平板計數(shù)法測定，稱取5.0g物料到45g無菌水中，放置搖床培養(yǎng)(溫 度32°C，轉(zhuǎn)速120rpm/min，時間40min-50min)，然后取0. lml培養(yǎng)液至0.9ml無菌水搖勾，稀 釋至一定的梯度、涂布至相應(yīng)菌種的平板培養(yǎng)基，放置恒溫箱30°C培養(yǎng)48h。計數(shù)方法:一個 稀釋度的菌落數(shù)為30-300個菌落數(shù)，則以該稀釋度菌落數(shù)除以涂布平板所用稀釋液體積 (0.1ml)，乘以稀釋倍數(shù)作為該樣品的菌體總數(shù)。
[0053]下述實施例中，玉米淀粉渣為生產(chǎn)檸檬酸等玉米深加工產(chǎn)品過程中，玉米經(jīng)粉碎、 液化、過濾獲得的濾渣，再經(jīng)干燥獲得的產(chǎn)品；
[0054]甜菜糖蜜購自廣西亞糖太古貿(mào)易有限公司；
[0055]玉米酒精糟可溶物為玉米、浸潤、粉碎、液化、糖化，再經(jīng)酵母發(fā)酵、蒸餾除去乙醇 后，對剩余的釜溜物過濾獲得的清液(干物3% )進(jìn)行濃縮(濃縮后干物35% )后的產(chǎn)品； [0056]檸檬酸糟為以玉米為原料發(fā)酵生產(chǎn)檸檬酸產(chǎn)品過程中，發(fā)酵液經(jīng)過濾剩余的濾渣 產(chǎn)品，其水分含量為70 %;
[0057] 玉米粉為玉米經(jīng)粉碎得到的粉末；
[0058] DDGS(Distillers Dried Grains with Solubles，干酒糟及其可溶物）為玉米經(jīng) 浸潤、脫胚芽、粉碎、液化、糖化、發(fā)酵、蒸餾的過程得到的濾液和清液混合而成；
[0059]噴漿玉米皮為將玉米浸泡液噴到玉米皮上并經(jīng)干燥獲得的產(chǎn)品。
[0060]下述實施例中，嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus，CGMCC編號 1 · 1854)、植 物乳桿菌（Lactobacil lus plantarum，CGMCC編號 1 · 2158)、發(fā)酵乳桿菌（Lactobacil lus fermentum，CGMCC編號 1 · 3223)、地衣芽抱桿菌（Bacillus 1 icheniformis，CGMCC編號 1.265)、凝結(jié)芽孢桿菌（Bacillus coagulans，CGMCC編號1.3220)、產(chǎn)朊假絲酵母菌 (Candida utilis，CGMCC編號2.1180)、釀酒酵母菌（Saccharomyces cerevisiae，CGMCC編 號2.3853)均來自于中國普通微生物菌種保藏管理中心，枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis)購自安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，編號為951NA4。
[0061 ] 實施例1
[0062]選取產(chǎn)朊假絲酵母菌、枯草芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌三種菌作為復(fù)合菌種。
[0063] (1)搖瓶種子培養(yǎng)
[0064]搖瓶種子培養(yǎng)過程為配制下述培養(yǎng)基，121°C，20min高溫滅菌，冷卻后取菌懸液接 入培養(yǎng)基中，在對應(yīng)控制參數(shù)條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)過程測定0D(波長600nm、比色皿寬度lcm)和 pH值，達(dá)到終止參數(shù)時，搖瓶種子培養(yǎng)完成。
[0065] 嗜酸乳桿菌：
[0066] 培養(yǎng)基:MRS肉湯培養(yǎng)液48克于1000ml水中，調(diào)節(jié)pH值6.2±0.1。
[0067]控制參數(shù):30°C，靜置條件下進(jìn)行厭氧培養(yǎng)。
[0068]終止參數(shù):0D 2 0.250 [0069] 枯草芽孢桿菌：
[0070] 培養(yǎng)基:酵母粉5g、蛋白胨10g、葡萄糖5g、氯化鈉10g、水1000ml，用lmol/L NaOH溶 液調(diào)節(jié)pH至偏堿性。
[0071] 控制參數(shù)：35°C、160r/min。
[0072] 終止參數(shù):〇D 2 0.120
[0073] 產(chǎn)朊假絲酵母菌：
[0074]培養(yǎng)基:蛋白胨19g，葡萄糖19g，酵母浸膏9.5g，用水定容1000ml。
[0075] 控制參數(shù)：3(TC、200r/min。
[0076] 終止參數(shù):0D 2 0.320
[0077] (2)-級種子培養(yǎng)
[0078] -級種子培養(yǎng)過程為配制如表1所示原輔料種類和添加比例的一級種子培養(yǎng)基于 擴培罐中，121°C，20min高溫滅菌，冷卻后，取搖瓶培養(yǎng)后的培養(yǎng)基100mL接入一級種子培養(yǎng) 基500L中，在如表1所示控制參數(shù)條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)過程測定0D(波長600nm、比色皿寬度 lcm)、pH值，培養(yǎng)至表1所不終止參數(shù)時，一級種子培養(yǎng)完成。
[0079] 表 1
[0080]
[0081 ]其中，所述玉米漿為玉米用亞硫酸溶液浸泡、稀玉米漿濃縮后得到的玉米漿，其中 干物為35重量％。
[0082]玉米漿購自中糧生物化學(xué)(安徽)股份有限公司、甜菜糖蜜購自廣西亞糖太古貿(mào)易 有限公司，牛肉膏、吐溫80購自安徽滁州華宇試劑材料有限公司。
[0083]經(jīng)測量，培養(yǎng)得到的芽孢桿菌種子液芽孢桿菌的含量為5 X 108cfu/mL，乳桿菌種 子液中乳桿菌的含量為5X109cfu/mL，酵母菌種子液中酵母菌的含量為2.5X109cfu/mL。 [0084] (3)微生物發(fā)酵飼料原料的制備
[0085] 將上述芽孢桿菌種子液、乳桿菌種子液和酵母菌種子液以重量比2:2:1混合得到 菌種混合液。
[0086] 將5重量份玉米淀粉渣、2重量份甜菜糖蜜、26重量份玉米酒精糟可溶物、11重量份 玉米粉、4份檸檬酸糟、6重量份DDGS和44重量份噴漿玉米皮分別經(jīng)打散后與2重量份菌種混 合液混合(乳桿菌的接種量為1 X 108cfu/g，芽孢桿菌的接種量為1 X 106cfu/g，酵母菌的接 種量為IX 108cfu/g)，裝入不透氣的包裝袋，該包裝袋上設(shè)有單向排氣閥，氣體僅可通過所 述單向排氣閥從袋內(nèi)排出袋外。包裝袋中的發(fā)酵原料與密封在袋中的空氣的體積比為10: 1〇
[0087] 發(fā)酵條件為:發(fā)酵溫度為30°C，發(fā)酵時間為120小時，發(fā)酵pH值為5.5。
[0088]發(fā)酵完成后，測定所得微生物發(fā)酵飼料原料的水分含量為33.50重量％，pH值為 4.2，以乳酸計總酸為4.0重量％，嗜酸乳桿菌含量為4.1 X 108cfu/g，枯草芽孢桿菌含量為 4.3 X 106cfu/g，產(chǎn)朊假絲酵母菌含量為4.0 X 108cfu/g;以干基計粗蛋白為22.56重量％，以 干基計粗脂肪為3.45重量％，以干基計粗灰分為7.65重量％，以干基計粗纖維為7.86重 量％。
[0089] 實施例2
[0090] 按照實施例1的方法制備微生物發(fā)酵飼料原料，不同的是，該發(fā)酵原料及其質(zhì)量比 為玉米淀粉渣:甜菜糖蜜:玉米酒精糟可溶物:玉米粉:噴漿玉米皮:檸檬酸糟=11:2:26:4: 44:11。發(fā)酵選用的菌種及其接種量為:乳桿菌為植物乳桿菌，其接種量為4 X 108cfu/g，芽 孢桿菌為凝結(jié)芽孢桿菌，其接種量為4 X 106cfu/g，酵母菌為釀酒酵母菌，其接種量為4 X 108cfu/g〇
[0091] 發(fā)酵條件為:發(fā)酵溫度為28°C，發(fā)酵時間為72小時，發(fā)酵pH值為6.0小時。
[0092] 發(fā)酵完成后，測定所得微生物發(fā)酵飼料原料的水分含量為34.00重量％，pH值為 3.9，以乳酸計總酸為4.4重量％，乳桿菌含量為7.1 X 108cfu/g，芽孢桿菌含量為6.9 X 106cfu/g，酵母菌含量為7.9 X 108cfu/g;以干基計粗蛋白為23.03重量％，以干基計粗脂肪 為3.66重量％，以干基計粗灰分為7.80重量％，以干基計粗纖維為7.53重量％。
[0093] 實施例3
[0094]按照實施例1的方法制備微生物發(fā)酵飼料原料，不同的是，該發(fā)酵原料及其質(zhì)量比 為玉米淀粉渣：甜菜糖蜜：玉米酒精糟可溶物：玉米粉:DDGS:噴漿玉米皮:檸檬酸糟=3:2: 20:4:8:44:17。
[0095]發(fā)酵選用的菌種及其接種量為：乳桿菌為發(fā)酵乳桿菌，其接種量為2 X108cfu/g， 芽孢桿菌為凝結(jié)芽孢桿菌，其接種量為2 X 106cfu/g，酵母菌為產(chǎn)朊假絲酵母菌，其接種量 為2X108cfu/g 〇
[0096] 發(fā)酵條件為:發(fā)酵溫度為32°C，發(fā)酵時間為144小時，發(fā)酵pH值為6.5。
[0097]發(fā)酵完成后，測定所得微生物發(fā)酵飼料原料的水分含量為33.80重量％，pH值為 4.1，以乳酸計總酸為4.1重量％，乳桿菌含量為5.6X 108cfu/g，芽孢桿菌含量為4.8X 106cfu/g，酵母菌含量為6.9 X 108cfu/g;以干基計粗蛋白為23.76重量％，以干基計粗脂肪 為3.78重量％，以干基計粗灰分為7.86重量％，以干基計粗纖維為7.29重量％。
[0098] 實施例4
[0099] 按照實施例1的方法制備微生物發(fā)酵飼料原料，不同的是，該發(fā)酵原料及其質(zhì)量比 為玉米淀粉渣:甜菜糖蜜：玉米酒精糟可溶物:DDGS:噴漿玉米皮:檸檬酸糟=3:2:20:6:50: 17。
[0100] 發(fā)酵選用的菌種及其接種量為：乳桿菌為嗜酸乳桿菌，其接種量為2 X107cfu/g， 芽孢桿菌為地衣芽孢桿菌，其接種量為2 X 105cfu/g，酵母菌為釀酒酵母菌，其接種量為2 X 107cfu/g〇
[0101] 發(fā)酵條件為:發(fā)酵溫度為26°C，發(fā)酵時間為48小時，發(fā)酵pH值為5.0小時。
[0102] 發(fā)酵完成后，測定所得微生物發(fā)酵飼料原料的水分含量為32.50重量％，pH值為 4.5，以乳酸計總酸為2.6重量％，乳桿菌含量為3.2 X 107cfu/g，芽孢桿菌含量為2.8 X 105cfu/g，酵母菌含量為3.0 X 107cfu/g;以干基計粗蛋白為21.35重量％，以干基計粗脂肪 為2.86重量％，以干基計粗灰分為8.59重量％，以干基計粗纖維為8.43重量％。
[0103] 實施例5
[0104] 按照實施例1的方法制備微生物發(fā)酵飼料原料，不同的是，該發(fā)酵原料及其質(zhì)量比 為玉米淀粉渣:甜菜糖蜜：玉米酒精糟可溶物:DDGS:噴漿玉米皮:檸檬酸糟=3:1:25:7:50: 12。發(fā)酵選用的菌種及其接種量為:乳桿菌為植物乳桿菌，其接種量為3 X 107cfu/g，芽孢桿 菌為枯草芽孢桿菌，其接種量為3 X 105cfu/g，酵母菌為產(chǎn)朊假絲酵母菌，其接種量為3 X 107cfu/g〇
[0105] 發(fā)酵條件為:發(fā)酵溫度為34°C，發(fā)酵時間為168小時，發(fā)酵pH值為7.0。
[0106] 發(fā)酵完成后，測定所得微生物發(fā)酵飼料原料的水分含量為33.0重量％，pH值為 4.3，以乳酸計總酸為2.9重量％，乳桿菌含量為3.5 X 107cfu/g，芽孢桿菌含量為3.2 X 105cfu/g，酵母菌為3.6 X 107cfu/g;以干基計粗蛋白為21.65重量％，以干基計粗脂肪為 2.43重量％，以干基計粗灰分為9.56重量％，以干基計粗纖維為8.64重量％。
[0107]以上詳細(xì)描述了本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，但是，本發(fā)明并不限于上述實施方式中 的具體細(xì)節(jié)，在本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思范圍內(nèi)，可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行多種簡單變型，這 些簡單變型均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0108] 另外需要說明的是，在上述【具體實施方式】中所描述的各個具體技術(shù)特征，在不矛 盾的情況下，可以通過任何合適的方式進(jìn)行組合，為了避免不必要的重復(fù)，本發(fā)明對各種可 能的組合方式不再另行說明。
[0109] 此外，本發(fā)明的各種不同的實施方式之間也可以進(jìn)行任意組合，只要其不違背本 發(fā)明的思想，其同樣應(yīng)當(dāng)視為本發(fā)明所公開的內(nèi)容。
【主權(quán)項】
1. 一種微生物發(fā)酵飼料原料的制備方法，該方法包括將復(fù)合菌種接種到發(fā)酵原料中進(jìn) 行發(fā)酵，其特征在于， 所述發(fā)酵原料含有玉米淀粉渣、甜菜糖蜜、玉米酒精糟可溶物、檸檬酸糟、玉米粉、干酒 糟及其可溶物和噴漿玉米皮中的一種或多種;且所述發(fā)酵原料以干基計粗蛋白含量為20重 量％以上； 所述復(fù)合菌種包含乳桿菌、芽孢桿菌和酵母菌。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其中，所述發(fā)酵原料中的水分含量為35重量％以 下;所述發(fā)酵原料以干基計粗纖維為10重量％以下，以干基計粗脂肪為2重量％以上，以干 基計粗灰分為10重量％以下。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其中，所述乳桿菌為嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌和發(fā) 酵乳桿菌中的一種或多種，所述芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌和凝結(jié)芽孢桿菌 中的一種或多種，所述酵母菌為產(chǎn)朊假絲酵母菌和/或釀酒酵母。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其中，所述復(fù)合菌種由芽孢桿菌種子液、乳桿菌種 子液和酵母菌種子液混合而成； 優(yōu)選地，所述芽孢桿菌種子液中芽孢桿菌的含量為5 X 108~1 X 109cfu/mL，乳桿菌種子 液中乳桿菌的含量為5 X 109~1 X 101()Cfu/mL，酵母菌種子液中酵母菌的含量為2.5 X 109~ 5X109cfu/mL； 更優(yōu)選地，所述芽孢桿菌種子液與所述乳桿菌種子液和所述酵母菌種子液的混合體積 比為 1:1-1.5:0.5-1。5. 根據(jù)權(quán)利要求1-4中任意一項所述的制備方法，其中，所述發(fā)酵的條件包括:發(fā)酵溫 度為25-35°C，發(fā)酵時間為48-168小時，發(fā)酵pH值為5-7; 優(yōu)選地，相對于lg所述發(fā)酵原料，所述芽孢桿菌的接種量為2X105~4X106cfu，所述乳 桿菌的接種量為2 X 107~4 X 108cfu，所述酵母菌的接種量為2 X 107~4 X 108cfu。6. 根據(jù)權(quán)利要求1-5中任意一項所述的制備方法，其中，所述發(fā)酵過程在不透氣的包裝 袋中進(jìn)行，所述包裝袋上設(shè)有單向排氣閥，氣體僅可通過所述單向排氣閥從袋內(nèi)排出袋外。7. -種由權(quán)利要求1-6中任意一項所述的制備方法制得的微生物發(fā)酵飼料原料。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的微生物發(fā)酵飼料原料，其中，所述微生物發(fā)酵飼料原料的pH值 為3-5,以乳酸計總酸為2.5重量％以上，以干基計粗蛋白為16重量％以上； 優(yōu)選地，所述微生物發(fā)酵飼料原料的pH值為3.5-4.5，以乳酸計總酸為3重量％以上，以 干基計粗蛋白為18重量％以上； 更優(yōu)選地，所述微生物發(fā)酵飼料原料的pH值為3.8-4.2，以乳酸計總酸為4重量％以上， 以干基計粗蛋白為22重量％以上。9. 根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的微生物發(fā)酵飼料原料，其中，所述微生物發(fā)酵飼料原料中 的所述乳桿菌2 2X 107cfu/g，所述芽孢桿菌2 2X 105cfu/g，所述酵母菌2 2X 107cfu/g; 優(yōu)選地，所述乳桿菌2 1 X 108cfu/g，所述芽孢桿菌2 1 X 106cfu/g，所述酵母菌2 1 X 108cfu/g； 更優(yōu)選地，所述乳桿菌2 4 X 108cfu/g，所述芽孢桿菌2 4 X 106cfu/g，所述酵母菌2 4 X 108cfu/g〇10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的微生物發(fā)酵飼料原料，其中，所述微生物發(fā)酵飼料原料中的 水分含量為30-50重量％，優(yōu)選為32-34重量％。11. 一種飼料，其特征在于，該飼料含有權(quán)利要求7-10中任意一項所述的微生物發(fā)酵飼 料原料。
【文檔編號】A23K10/33GK105831394SQ201610183590
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2016年3月25日
【發(fā)明人】羅虎, 盧宗梅, 滿云, 陳影, 張夕紅, 葛頌
【申請人】中糧生物化學(xué)（安徽）股份有限公司