本發(fā)明屬于飼料添加劑領(lǐng)域，具體涉及一種有效調(diào)節(jié)雞腸道健康的飼料添加劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
微生物及其復(fù)雜的微生物群落在其生存環(huán)境的大部分生物轉(zhuǎn)化中承擔(dān)著巨大的責(zé)任，雞的胃腸道中寄居著復(fù)雜的微生物，這些微生物與雞的健康和疾病有著重要的關(guān)聯(lián)。雞腸道微生物菌群與飼糧存在著密切的相關(guān)性，蛋雞腸道上皮等黏膜必須保持結(jié)構(gòu)與功能的完整才能組織大批量的病原體從腸腔侵入體內(nèi)。蛋雞的健康往往與腸道疾病相關(guān)，病院微生物引起的腸道極小的損傷，就能使蛋雞生產(chǎn)性能顯著下降，為微生物感染造成的腸道嚴(yán)重?fù)p害可使雞群爆發(fā)疾病，提高蛋雞的病死率。因此蛋雞必須具有結(jié)構(gòu)完整且具有良好免疫功能的健康消化道，才能最大程度的提高對養(yǎng)分的消化和吸收。在現(xiàn)代蛋雞生產(chǎn)系統(tǒng)中，在蛋雞基礎(chǔ)飼料中添加相應(yīng)的飼料添加劑，以提高蛋雞腸道微生物平衡，這對保持良好的飼養(yǎng)效率和較佳的生長速度和經(jīng)濟效益是極為重要的。
針對上述技術(shù)問題，目前，在生產(chǎn)中，通常采用添加飼用抗生素的方法來提高蛋雞腸道的免疫力，但抗生素的使用導(dǎo)致了諸多問題，如藥物殘留、耐藥性、二重感染和降低機體免疫力等，其應(yīng)用已受到很大限制。
現(xiàn)已出現(xiàn)一種通過在基礎(chǔ)飼料中加入腸道益生菌來提高蛋雞腸道有益菌群，從而達(dá)到提高腸道免疫力的手段。如中國專利申請cn103931954a公開了一種用于調(diào)控修復(fù)蛋雞腸道的飼料添加劑及其制備方法，含有丁酸鈉、丁酸酯、丁酸梭菌等組分，能夠?qū)崿F(xiàn)蛋雞的腸道調(diào)節(jié)和修復(fù)。但是通過從外攝入微生態(tài)制劑雖然能一定程度上提高腸道的免疫力，但是無法使攝入的腸道有益菌在蛋雞腸道內(nèi)增殖，即也無法實現(xiàn)真正意義上的修復(fù)蛋雞腸道的功能，一般需要長期的攝入，才能保證腸道有益菌在有效的濃度。
因此，有必要提供一種能有效誘導(dǎo)腸道有益菌在腸道內(nèi)的增殖，修復(fù)蛋雞腸道菌群功能，增強腸道免疫力的飼料添加劑。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問題，本發(fā)明的目的在于提供一種有效調(diào)節(jié)雞腸道健康的飼料添加劑及其制備方法，本發(fā)明提供的飼料添加劑能有效誘導(dǎo)腸道有益菌在腸道內(nèi)的增殖，修復(fù)蛋雞腸道的菌群功能，增強腸道免疫力。
本發(fā)明提供了一種有效調(diào)節(jié)雞腸道健康的飼料添加劑，由以下重量份數(shù)的原料制備而成：中藥組合物22～50份、氨基酸12～30份、沸石粉10～30份、維生素20～40份、抗氧化劑2～6份、菊苣菊糖水解物5～20份、復(fù)合菌劑10～25份和革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞提取物凍干粉1～10份，其中，所述中藥組合物由敗醬草、大薊、橙皮苷和沙柳葉按1:(0.15～0.3):(0.2～0.5):(0.35～0.8)的重量比制成。
優(yōu)選地，所述飼料添加劑由以下重量份數(shù)的原料制備而成：中藥組合物32份、氨基酸25份、沸石粉20份、維生素30份、抗氧化劑4份、菊苣菊糖水解物16份、復(fù)合菌劑15份和革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞提取物凍干粉5份，其中，所述中藥組合物由敗醬草、大薊、橙皮苷和沙柳葉按1:0.25:0.3:0.6的重量比制成。
優(yōu)選地，所述氨基酸選自精氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、色氨酸、亮氨酸、甘氨酸、組氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸和異亮氨酸中的一種或幾種。更優(yōu)選地，所述氨基酸由賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸和甘氨酸按1:1:1:1的重量比組成。
優(yōu)選地，所述維生素選自維生素b1、維生素b2、維生素b3、維生素b5和維生素b6中的一種或幾種。更優(yōu)選地，所述維生素由b1、維生素b2和維生素b3按1:1:1的重量比組成。
優(yōu)選地，所述菊苣菊糖水解物由以下步驟制得：
稱取菊苣根粗粉，加入粗粉重量1～3倍的純化水，60～90℃浸提1～3次，每次1～3h，過濾，合并浸提液，將浸提液減壓濃縮至60℃條件下測相對密度為1.15-1.25的浸膏，粉碎，噴霧干燥，即得。
優(yōu)選地，所述中藥組合物由以下步驟制得：
按1:(0.15～0.3):(0.2～0.5):(0.35～0.8)的重量比稱取敗醬草、大薊、橙皮苷和沙柳葉，將敗醬草、大薊和沙柳葉洗凈，晾干，粉碎成粗粉，加入粗粉總重量6～10倍量體積分?jǐn)?shù)為65～80％的乙醇，再加入藥材總量0.8％～1.0％的纖維素酶，在38～45℃下浸提1～2小時，然后在80～90℃回流提取3～6小時，過濾，濾液減壓濃縮至60℃下相對密度為1.10～1.25的浸膏，粉碎，噴霧干燥，加入橙皮苷，混合，即得。
優(yōu)選地，所述革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞提取物凍干粉由以下步驟制得：
使用ph值7.0～8.0的mrs培養(yǎng)基培養(yǎng)革蘭氏陽性細(xì)菌24h，測定其od600值達(dá)到1.0以上，滅活，濃縮，加入凍干賦形劑和水，分裝，凍干，得到革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞提取物凍干粉。
優(yōu)選地，所述革蘭氏陽性細(xì)菌由雙歧桿菌和乳酸桿菌按1:(0.2～1)的重量比組成。
優(yōu)選地，所述凍干賦形劑為甘露醇、葡萄糖或蔗糖中的一種，優(yōu)選為蔗糖。
需要指出的是，經(jīng)上述方法制備得到的革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞提取物凍干粉含有多種活性物質(zhì)：革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞碎片(優(yōu)選為雙歧桿菌細(xì)胞碎片和乳酸桿菌細(xì)胞碎片)、細(xì)胞代謝物、mrs培養(yǎng)基成分等。其能誘導(dǎo)攝入的復(fù)合菌劑在蛋雞腸道內(nèi)增殖，對蛋雞腸道具有全面調(diào)節(jié)、修復(fù)的功效，增強蛋雞腸道免疫力。
優(yōu)選地，所述抗氧化劑選自維生素e、維生素c和茶多酚中的一種。更優(yōu)選地，選擇茶多酚。
優(yōu)選地，所述復(fù)合菌劑包括由干酪乳桿菌菌粉、德氏乳桿菌菌粉、黑曲霉菌粉和短小芽孢桿菌菌粉按重量比1:(1～3):(2～3):(1～2)混合而成；其中，干酪乳桿菌活菌數(shù)為1.4×106個/g，德氏乳桿菌活菌數(shù)為2.8×107個/g，黑曲霉活菌數(shù)為2.5×105個/g，短小芽孢桿菌活菌數(shù)為5.5×105個/g。
相應(yīng)地，本發(fā)明還提供了一種制備上述的飼料添加劑的方法，包括以下步驟：
a)中藥組合物的制備：按1:(0.15～0.3):(0.2～0.5):(0.35～0.8)的重量比稱取敗醬草、大薊、橙皮苷和沙柳葉，將敗醬草、大薊和沙柳葉洗凈，晾干，粉碎成粗粉，加入粗粉總重量6～10倍量體積分?jǐn)?shù)為65～80％的乙醇，再加入藥材總量0.8％～1.0％的纖維素酶，在38～45℃下浸提1～2小時，然后在80～90℃回流提取3～6小時，過濾，濾液減壓濃縮至60℃下相對密度為1.10～1.25的浸膏，粉碎，噴霧干燥，加入橙皮苷，混合，得到中藥組合物；
b)菊苣菊糖水解物的制備：稱取菊苣根粗粉，加入粗粉重量1～3倍的純化水，60～90℃浸提1～3次，每次1～3h，過濾，合并浸提液，將浸提液減壓濃縮至60℃條件下測相對密度為1.15-1.25的浸膏，粉碎，噴霧干燥，得到菊苣菊糖水解物；
c)革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞提取物凍干粉的制備：使用ph值7.0～8.0的mrs培養(yǎng)基培養(yǎng)革蘭氏陽性細(xì)菌24h，滅活，濃縮，加入凍干賦形劑和水，分裝，凍干，得到革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞提取物凍干粉；
d)將上述中藥組合物、菊苣菊糖水解物和革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞提取物凍干粉混合，攪拌均勻，加入氨基酸、沸石粉、維生素、抗氧化劑和復(fù)合菌劑，攪拌均勻，分裝，得到飼料添加劑。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明蛋雞飼料添加劑具有以下優(yōu)勢：
1)本發(fā)明所述蛋雞飼料添加劑能夠誘導(dǎo)腸道有益菌群在蛋雞腸道內(nèi)的增殖，從而在真正意義上實現(xiàn)對蛋雞腸道的調(diào)節(jié)和修復(fù)，增強蛋雞腸道的免疫力，降低蛋雞腸道疾病的發(fā)生，提高蛋雞成活率、飼料消化率和養(yǎng)雞效益，具有巨大的經(jīng)濟效益，值得推廣應(yīng)用。
2)本發(fā)明革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞提取物凍干粉能誘導(dǎo)復(fù)合菌劑在蛋雞腸道內(nèi)的增殖，結(jié)合中藥組合物、菊苣菊糖水解物和其他成分為蛋雞的生長提高了全面充足的養(yǎng)分，通過試驗證明，本發(fā)明飼料添加劑能夠提高蛋雞的體重，降低料肉比，提高蛋雞的存活率。
具體實施方式：
以下通過具體實施方式的描述對本發(fā)明作進一步說明，但這并非是對本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的基本思想，可以做出各種修改或改進，但是只要不脫離本發(fā)明的基本思想，均在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
實施例1、一種飼料添加劑
本發(fā)明實施例1所述飼料添加劑由以下重量份數(shù)的原料制成：中藥組合物32份、氨基酸25份、沸石粉20份、維生素30份、抗氧化劑4份、菊苣菊糖水解物16份、復(fù)合菌劑15份和革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞提取物凍干粉5份，其中，所述中藥組合物由敗醬草、大薊、橙皮苷和沙柳葉按1:0.25:0.3:0.6的重量比制成。
本發(fā)明制備方法：
a)中藥組合物的制備：按1:0.32:0.3:0.5的重量比稱取敗醬草、大薊、橙皮苷和沙柳葉，將敗醬草、大薊和沙柳葉洗凈，晾干，粉碎成粗粉，加入粗粉總重量8倍量體積分?jǐn)?shù)為75％的乙醇，再加入藥材總量0.8％的纖維素酶，在40℃下浸提2小時，然后在85℃回流提取4小時，過濾，濾液減壓濃縮至60℃下相對密度為1.20的浸膏，粉碎，噴霧干燥，加入橙皮苷，混合，得到中藥組合物；
b)菊苣菊糖水解物的制備：稱取菊苣根粗粉，加入粗粉重量2倍的純化水，80℃浸提2次，每次2h，過濾，合并浸提液，將浸提液減壓濃縮至60℃條件下測相對密度為1.25的浸膏，粉碎，噴霧干燥，得到菊苣菊糖水解物；
c)革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞提取物凍干粉的制備：使用ph值7.3的mrs培養(yǎng)基培養(yǎng)革蘭氏陽性細(xì)菌24h，滅活，濃縮，加入蔗糖和水，分裝，凍干，得到革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞提取物凍干粉，所述革蘭氏陽性細(xì)菌由雙歧桿菌和乳酸桿菌按1:1的重量比組成；
d)將上述中藥組合物、菊苣菊糖水解物和革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞提取物凍干粉混合，攪拌均勻，加入氨基酸、沸石粉、維生素、抗氧化劑和復(fù)合菌劑，攪拌均勻，分裝，得到飼料添加劑。
其中，所述抗氧化劑為茶多酚；所述氨基酸由賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸和甘氨酸按1:1:1:1的重量比組成；所述維生素由b1、維生素b2和維生素b3按1:1:1的重量比組成。
實施例2、一種飼料添加劑
本發(fā)明實施例2所述飼料添加劑由以下重量份數(shù)的原料制成：中藥組合物22份、氨基酸12份、沸石粉10份、維生素20份、抗氧化劑2份、菊苣菊糖水解物5份、復(fù)合菌劑10份和革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞提取物凍干粉1份，其中，所述中藥組合物由敗醬草、大薊、橙皮苷和沙柳葉按1:0.15:0.2:0.35的重量比制成。
制備方法參考實施例1所述制備方法。
實施例3、一種飼料添加劑
本發(fā)明實施例3所述飼料添加劑由以下重量份數(shù)的原料制成：中藥組合物50份、氨基酸30份、沸石粉30份、維生素40份、抗氧化劑6份、菊苣菊糖水解物20份、復(fù)合菌劑25份和革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞提取物凍干粉10份，其中，所述中藥組合物由敗醬草、大薊、橙皮苷和沙柳葉按1:0.3:0.5:0.8的重量比制成。
制備方法參考實施例1所述制備方法。
對比例1、一種飼料添加劑
對比例1與實施例1的區(qū)別在于，去掉革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞提取物凍干粉，其余參數(shù)及操作如實施例1。
對比例2：一種飼料添加劑
對比例2與實施例1的區(qū)別在于，用菊苣菊糖代替菊苣菊糖水解物，其余參數(shù)及操作如實施例1。
對比例3：一種飼料添加劑
對比例3與實施例1的區(qū)別在于，用雙歧桿菌細(xì)胞碎片和乳酸桿菌細(xì)胞碎片替代革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞提取物凍干粉，其余參數(shù)及操作如實施例1。
所述雙歧桿菌細(xì)胞碎片和乳酸桿菌細(xì)胞碎片的制備為：取雙歧桿菌細(xì)胞和乳酸桿菌細(xì)胞，滅活，高壓均漿，即得。
試驗例一、性能測試
取700只蛋雞分為7組，分為實施例1～3組和對比例1～3組樣品飼料(取實施例1～3以及對比例1～3制備得到的飼料添加劑，按1％的質(zhì)量分?jǐn)?shù)添加到基礎(chǔ)飼料中制備得到各組對應(yīng)的樣品飼料)以及基礎(chǔ)飼料組，0-7日齡、7-14日齡、14-28日齡、28日齡-出欄，在這四個階段的養(yǎng)殖過程中，各組采用上述對應(yīng)的樣品飼料喂養(yǎng)，統(tǒng)計各組蛋雞的耗料量、體重、料肉比和死亡數(shù)(見表1)。統(tǒng)計結(jié)束后，每組任選20只蛋雞處死，按以下方法測定腸道菌群：試驗雞脫頸處死，無菌采集十二指腸內(nèi)容物置于實現(xiàn)稱重帶有玻璃珠的無菌三角瓶內(nèi)，加入無菌生理鹽水稀釋，振蕩30min，取此稀釋液0.5ml于盛有4.5ml滅菌生理鹽水的離心管中，依次進行102～8倍遞進稀釋，用微量移液器分別取104、105、107、108倍稀釋液0.1ml，接種于麥康凱培養(yǎng)基、ss培養(yǎng)基、sl培養(yǎng)基，每個稀釋度3次重復(fù)，用玻璃棒涂勻，生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)，計算菌落數(shù)并換算成每1g內(nèi)容物所含菌落數(shù)，每1g腸內(nèi)包含大腸桿菌、沙門氏菌、雙歧桿菌和乳酸桿菌數(shù)的菌群數(shù)量以“cfu/g”表示，結(jié)果見表2。
表1各組生產(chǎn)性能指標(biāo)統(tǒng)計表
表2蛋雞十二指腸內(nèi)容物的測定結(jié)果(cfu/g)
由表1、2可知，本發(fā)明實施例1～3飼料添加劑能有效提高雙歧桿菌和乳酸桿菌在蛋雞腸道內(nèi)的增殖，并且還能降低腸道有害菌的含量，這一點是發(fā)明人意想不到的。經(jīng)對各組蛋雞的生產(chǎn)性能統(tǒng)計，證明，本發(fā)明飼料添加劑還能提高蛋雞的體重，降低料肉比，提高蛋雞的存活率。而從對比例1～3組試驗結(jié)果可以明顯看出，革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞提取物凍干粉具有誘導(dǎo)蛋雞腸道內(nèi)有益菌的增殖作用，而明顯地，菊苣菊糖水解物更有利于提高蛋雞的質(zhì)量。另外，通過對比例3可以看出，單獨使用雙歧桿菌細(xì)胞碎片和乳酸桿菌細(xì)胞碎片并不能誘導(dǎo)有益菌在蛋雞腸道內(nèi)增殖。