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一種防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑及其制備方法與流程

文檔序號:11078506閱讀:491來源:國知局
本發(fā)明屬于水產(chǎn)養(yǎng)殖
技術(shù)領(lǐng)域
,尤其是涉及一種防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑。
背景技術(shù)
:錦鯉體格健美、色彩艷麗、花紋多變、泳姿雄然,是一種具有較高觀賞價值及經(jīng)濟(jì)價值的魚類,目前我國已成為世界錦鯉的主要生產(chǎn)國和出口國。隨著其養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大,集約化程度不斷提高,其病害發(fā)生也有增加的趨勢,錦鯉的各種病毒性傳染疾病尤其是錦鯉皰疹病毒病開始廣泛傳播。錦鯉皰疹病毒病1998年首次爆發(fā)在以色列,但在1999年才確認(rèn)其真正病原是錦鯉皰疹病毒(Koiherpesvirus,KHV)。此后在英國、歐洲大陸、美國、日本也都有暴發(fā)。近年來,錦鯉皰疹病毒病的廣泛傳播,造成錦鯉養(yǎng)殖業(yè)巨大的經(jīng)濟(jì)損失,已經(jīng)成為制約錦鯉養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)發(fā)展的重要因素之一。流行病學(xué)研究表明,KHV傳播迅速,可感染任何年齡的錦鯉與鯉,感染KHV的病魚典型臨床癥狀是行動遲緩、食欲不振、平衡失調(diào)、體表多黏液、在皮膚和鰭基部出現(xiàn)出血癥狀、眼球凹陷、鰓蒼白或顏色不規(guī)則并伴有中度至嚴(yán)重的鰓壞死,感染后7~10d開始出現(xiàn)死亡,2~3周后死亡率可達(dá)100%。該病毒造成病魚的死亡率極高,疫情難以控制。目前,治療這種病毒的方式有高溫治療、疫苗防治等,但治療效果不佳,西藥副作用大;中藥品種能有效治療病毒性疾病尤其是錦鯉皰疹病毒的品種少且效率低。技術(shù)實現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足之處,提供一種防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑,可增強該魚種的免疫力、有效防治錦鯉的病毒性疾病尤其是錦鯉皰疹病毒,促進(jìn)其生長。本發(fā)明實現(xiàn)目的的技術(shù)方案如下:一種防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑,按重量份數(shù)計包括如下中藥組份:刺五加10-20份、黨參5-10份、杜仲5-10份、茯苓5-10份、板藍(lán)根5-10份、芒果葉5-15份、穿心蓮提取物10-20份。進(jìn)一步地,上述防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑,按重量份數(shù)計包括如下組份:刺五加15份、黨參8份、杜仲8份、茯苓8份、板藍(lán)根8份、芒果葉10份、穿心蓮提取物15份。其中上述穿心蓮提取物,按質(zhì)量百分比計,含有穿心蓮內(nèi)酯含量至少為40%及脫水穿心蓮內(nèi)酯含量至少為2%。此外,本發(fā)明還提供了上述防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑的制備方法,包括如下制備步驟:1)將芒果葉干燥粉碎至,用9倍量的乙醇回流提取2次,每次3小時,合并每次所得提取液,回收溶劑,用真空干燥箱50℃干燥,得芒果葉提取物;2)將刺五加、黨參、杜仲、茯苓、板藍(lán)根按量稱取,混合、粉碎過篩成40目的粉末,放入煎煮容器內(nèi),加入4-6倍質(zhì)量的水,浸泡2小時,然后煎熬2小時,過濾,將藥汁倒出;再次向藥渣內(nèi)加入相對于粉末質(zhì)量2-4倍的水,煎熬1小時,過濾,得藥汁;將兩次過濾所得藥汁混合,得中藥混合液;3)將芒果葉提取物加入到步驟2)所得中藥混合液中,攪拌混合均勻,置入真空濃縮設(shè)備中進(jìn)行濃縮,濃縮溫度為60℃,濃縮時間為30分鐘,冷卻后得混合濃縮液;4)將穿心蓮提取物加入步驟3)所得混合濃縮液,混合均勻,得防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑待用液。此外上述步驟還包括將步驟4所制得的待用液,經(jīng)過噴霧干燥,得到防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑干粉。此外,本發(fā)明還提供了上述防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑在制備防治病毒性疾病提高錦鯉免疫機(jī)能的飼料中的應(yīng)用,上述飼料添加劑在基礎(chǔ)飼料中的添加量為基礎(chǔ)飼料總質(zhì)量的1-10%。進(jìn)一步地,上述添加劑在基礎(chǔ)飼料中的添加量為基礎(chǔ)飼料總質(zhì)量的7%。病毒是病原微生物中最小的一種,在細(xì)胞內(nèi)繁殖,其核心是核糖核酸(RNA)或脫氧核糖核酸(DNA),外殼是蛋白質(zhì),不具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)。病毒寄生于寄主細(xì)胞內(nèi),依賴寄主細(xì)胞代謝系統(tǒng)進(jìn)行增殖復(fù)制。在病毒基因提供的遺傳信息調(diào)控下合成病毒核酸和蛋白質(zhì),然后在胞漿內(nèi)裝配為成熟的感染性病毒體,以各種方式自細(xì)胞釋放出而感染其他細(xì)胞,病毒核酸有時整合于細(xì)胞,不易消除,因此抗病毒藥研究發(fā)展緩慢。錦鯉皰疹病毒,簡稱KHV,因其主要是由DNA類皰疹濾過性病毒感染所引起,又名鯉魚腎炎及鰓壞疽病毒,該病的發(fā)病迅速,死亡速度快。一旦發(fā)現(xiàn)KHV,目前常用的處理方法是將魚殺滅,切斷病毒源,因此該病的預(yù)防工作也具有非常重要的意義,其中預(yù)防工作的重點之一就是日常需要注意增強提高魚體的自身免疫力。本發(fā)明所提供的防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑中,穿心蓮提前物主要有效成分為心蓮內(nèi)酯含量、脫水穿心蓮內(nèi)酯,具有極強的抗菌消炎活性。本發(fā)明中穿心蓮提取物的制備參照專利2012105014849所提供的穿心蓮提取物提前方法制備而得,在制備獲得上述穿心蓮提前物的同時,去除了穿心蓮中的色素等雜質(zhì)成分,避免了穿心蓮制劑毒副作用的發(fā)生,增加了在水產(chǎn)養(yǎng)殖中使用的安全性。同時由于穿心蓮內(nèi)酯類活性成分在加熱過程中容易分解損失,本發(fā)明在制備過程中避免了高溫加熱、高溫干燥等環(huán)節(jié),最大程度的避免了其有效成分受熱分解;芒果葉資源豐富、價格低廉、分布地域廣,四季可采,其提取物中主要有效成為芒果苷,是一種黃酮類化合物。通過本發(fā)明提供制備方法獲得的芒果葉提取物,具有很強的抗氧化活性,具有抗氧化、抑菌抗病毒、抗炎性、免疫調(diào)節(jié)、提高免疫功能和促進(jìn)生長的作用;目前對穿心蓮提取物提取物、芒果葉提取物同時作為水產(chǎn)飼料添加劑原料配伍使用的研究較少,還未有將其用來防止錦鯉皰疹性病毒疾病的相關(guān)報道。通過采用本發(fā)明提供的上述飼料添加劑配方來代替化學(xué)合成添加劑,經(jīng)過研發(fā)人員對錦鯉各生長指標(biāo)進(jìn)行反復(fù)試驗論證,發(fā)現(xiàn)使用本發(fā)明所提供的添加劑,該品類魚不僅無不良反應(yīng),可增強該魚種的免疫力、有效防治錦鯉的病毒性疾病尤其是錦鯉皰疹病毒,并促進(jìn)其生長,毒副作用小,同時對水質(zhì)環(huán)境的污染也降至低點,大大提升了該品類魚的存活率。具體實施方式下面通過具體實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳述,以下實施例只是描述性的,不是限定性的,不能以此限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。實施例1:一種防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑,有如下中藥組份:刺五加15kg、黨參8kg、杜仲8kg、茯苓8kg、板藍(lán)根8kg、芒果葉10kg、穿心蓮提取物15kg。其中穿心蓮提取物,按質(zhì)量百分比計含有穿心蓮內(nèi)酯40%及脫水穿心蓮內(nèi)酯2%。其制備方法為:1)將芒果葉干燥粉碎至,用9倍量的乙醇回流提取2次,每次3小時,合并每次所得提取液,回收溶劑,用真空干燥箱50℃干燥,得芒果葉提取物;2)將刺五加、黨參、杜仲、茯苓、板藍(lán)根按量稱取,混合、粉碎過篩成40目的粉末,放入煎煮容器內(nèi),加入4-6倍質(zhì)量的水,浸泡2小時,然后煎熬2小時,過濾,將藥汁倒出;再次向藥渣內(nèi)加入相對于粉末質(zhì)量2-4倍的水,煎熬1小時,過濾,得藥汁;將兩次過濾所得藥汁混合,得中藥混合液;3)將芒果葉提取物加入到步驟2)所得中藥混合液中,攪拌混合均勻,置入真空濃縮設(shè)備中進(jìn)行濃縮,濃縮溫度為60℃,濃縮時間為30分鐘,冷卻后得混合濃縮液;4)將穿心蓮提取物加入步驟3)所得混合濃縮液,混合均勻,得防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑待用液;5)將步驟4)所制得的待用液,經(jīng)過噴霧干燥,得到防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑干粉。實施例2:一種防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑,由如下組分刺五加10kg、黨參5kg、杜仲5kg份、茯苓5kg、板藍(lán)根5kg、芒果葉5kg、穿心蓮提取物10kg。其中穿心蓮提取物,按質(zhì)量百分比計含有穿心蓮內(nèi)酯40%及脫水穿心蓮內(nèi)酯2%。其制備方式與實施例1一致。實施例3一種防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑,由如下組分刺五加20kg、黨參10kg、杜仲10kg份、茯苓10kg、板藍(lán)根10kg、芒果葉15kg、穿心蓮提取物20kg。其中穿心蓮提取物,按質(zhì)量百分比計含有穿心蓮內(nèi)酯40%及脫水穿心蓮內(nèi)酯2%。其制備方式與實施例1一致。實施例4將實施例1所制防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑添加到市售基礎(chǔ)飼料中,添加量為基數(shù)飼料的1%。實施例5將實施例1所制防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑添加到市售基礎(chǔ)飼料中,添加量為基數(shù)飼料的7%。實施例6將實施例1所制防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑添加到市售基礎(chǔ)飼料中,添加量為基數(shù)飼料的10%。對比例1在實施例5的飼料添加劑配方中,不添加芒果葉和穿心蓮提取物,其余與實施例5一致。對比例2在實施例5的飼料添加劑配方中,僅保留有芒果葉和穿心蓮提取物,其他組分不添加,其余與實施例5一致。臨床試驗:實驗一自染病養(yǎng)殖場,選取感染有皰疹病毒的錦鯉,其癥狀為:多數(shù)病魚表現(xiàn)為眼球及頭部皮膚凹陷。感染發(fā)生后,體表出現(xiàn)斑紋,背鰭似乎重疊,之后,體表分泌大量黏液。選取染病錦鯉隨機(jī)分為6組,每組中4個重復(fù),每個重復(fù)25尾魚。4組中1組空白組為僅投喂市售基礎(chǔ)飼料;3組為實驗組,實驗組分實驗1、2、3組,對應(yīng)在市售基礎(chǔ)飼料中分別添加7%(質(zhì)量百分?jǐn)?shù))的本發(fā)明所示實施例1、2、3飼料添加劑;2組為對比組,對比組分為對比1、2組,分別對應(yīng)添加了對比例1所述飼料、添加了對比例2所述飼料;對照組與實驗組的飼養(yǎng)環(huán)境和飼料質(zhì)量嚴(yán)格保持一致,連續(xù)投喂三周,各實驗組死亡率均大大降低。其中實驗組1在第一周治愈率就到達(dá)85%,兩周治愈率達(dá)93%,死亡率極低,即染病錦鯉獲得了較強的免疫保護(hù)。對比1、2也起到一定的治療效果,但其遠(yuǎn)不如本發(fā)明所采用各組分配伍的效果。表1實驗二自養(yǎng)殖場選取體重相當(dāng)?shù)慕】靛\鯉,對照組用的飼料中均不添加本發(fā)明飼料添加劑,下設(shè)3個重復(fù);實驗組分實驗1、2、3組,對應(yīng)所用飼料中分別添加5%(質(zhì)量百分?jǐn)?shù))的本發(fā)明產(chǎn)品實施例1、2、3,實驗1、2、3組分別下設(shè)3個重復(fù)。對照組與實驗組的飼養(yǎng)環(huán)境和飼料質(zhì)量嚴(yán)格保持一致,飼養(yǎng)60天。實驗初期測定魚體長度及魚體質(zhì)量,并記錄,試驗結(jié)束時,再對魚體長度和魚體質(zhì)量進(jìn)行測定;觀察兩組魚的誘食反應(yīng),同時收集試驗組魚的排泄物和餌料殘渣,烘干后稱質(zhì)量。結(jié)論:從下表2、3可看出,試驗組在誘食效果、魚體長度、質(zhì)量增長及肥滿度方面比對照組有顯著的提升;錦鯉的免疫指標(biāo)(免疫指標(biāo)吞噬指數(shù)、溶菌酶活力和補體活力)均顯著高于對照組;且實驗組1的整體效果要高于實驗2、3組。組別誘食反應(yīng)增長率%增重率%肥滿度%對照組一般2.3%7.3%5.5%實驗組1強6.2%20%9.3%實驗組2好于一般4.5%13%6.7%實驗組3強5.6%16%8.9%表2表3實驗三此外,分別在全國不同區(qū)域兩處進(jìn)行大田養(yǎng)殖試驗,兩處錦鯉的養(yǎng)殖實驗以及對照組的實驗均分別在4口塘進(jìn)行,每口塘的平均面積均為3畝,對照組飼料中不添加本發(fā)明的基礎(chǔ)飼料,實驗組分別為飼喂實施例4-6所述飼料。經(jīng)過180天的飼養(yǎng)實驗后,魚的成活率、錦鯉體內(nèi)3種主要免疫指標(biāo)(吞噬指數(shù)、溶菌酶活力和補體活力)結(jié)論與在試驗場室內(nèi)循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)中進(jìn)行的實驗結(jié)論一致,實施例5所在實驗組,在染病幾率、成活率、免疫指標(biāo)方面明顯高于其他實驗組別。以上對本發(fā)明的較佳實施例進(jìn)行了詳細(xì)說明,但所述內(nèi)容僅為本發(fā)明的較佳實施例,不能被認(rèn)為用于限定本發(fā)明的實施范圍。凡依本發(fā)明申請范圍所作的均等變化與改進(jìn)等,均應(yīng)仍歸屬于本發(fā)明的專利涵蓋范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁1 2 3 
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