一種測定藥劑對水稻紋枯病菌毒力的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種測定殺菌劑對水稻紋枯病菌毒力的方法，其包括以下步驟：1）將殺菌劑加入PSA培養(yǎng)基中制成含藥培養(yǎng)基，殺菌劑設(shè)置高、低2個質(zhì)量濃度處理，每個處理重復(fù)3次；2）用5mm打孔器打取生長3d的水稻紋枯病菌菌餅，分別接種于含藥培養(yǎng)基上，28℃培養(yǎng)42h至對照菌落長至全皿；3）當(dāng)菌落長滿培養(yǎng)皿時觀察培養(yǎng)皿內(nèi)有無菌核形成。本方法只需要制作1-2濃度含藥PSA平皿，與傳統(tǒng)的菌絲生長抑制法具有省時省力的優(yōu)點(diǎn)。
【專利說明】一種測定藥劑對水稻紋枯病菌毒力的方法 【技術(shù)領(lǐng)域】
[〇〇〇1] 本發(fā)明涉及一種測定殺菌劑對水稻紋枯病菌毒力的方法。 【背景技術(shù)】
[0002] 水稻紋枯病是水稻的三大病害之一，在我國各稻區(qū)均有發(fā)生。植株受害后，一 般造成減產(chǎn)10?30%，嚴(yán)重時可減產(chǎn)60%以上。引起水稻紋枯病病原菌為立枯絲核菌 (Rhizoctonia solani)，屬半知菌亞門絲核屬。植物病原菌菌絲在PDA培養(yǎng)基上生長速度 快，在適宜溫濕度條件下，3-4天左右菌絲即可布滿直徑為7厘米的PDA平皿，并開始形成黑 褐色菌核。
[0003] 常規(guī)藥劑對紋枯病菌毒力測定采用菌絲生長速率抑制法，即根據(jù)菌絲在含有藥劑 的PDA培養(yǎng)基中生長速度，計算出各種藥劑的不同濃度對菌絲生長的抑制率，評價藥劑對 紋枯病菌的毒力。
[0004] 殺菌劑種類不同，作用機(jī)制千差萬別。有的殺菌劑對水稻紋枯病菌絲生長抑制強(qiáng) 烈，但田間防效很差，如咪鮮胺。而有的殺菌劑雖然室內(nèi)毒力測定對菌絲生長抑制弱，但田 間對水稻紋枯病防效優(yōu)秀，如井R霉素。因此，單純依靠能否有效抑制菌絲生長來判斷一個 殺菌劑的藥效，對篩選紋枯病防治藥劑存在一定的缺陷。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005] 發(fā)明目的：針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明針對水稻紋枯病菌的藥劑室內(nèi)毒力測定 提供一種有別于"菌絲生長抑制"的毒力評價方法。具體是通過水稻紋枯病菌絲是否在含 有殺菌劑的培養(yǎng)基上形成菌核來判斷藥劑對紋枯病菌的毒力。該方法不需要采用系列濃度 的含藥培養(yǎng)基進(jìn)行菌絲生長測定，而只要1-2個藥劑濃度即可判斷藥劑是否對水稻紋枯病 菌具有毒力，具有省時省力的優(yōu)點(diǎn)。而且這種毒力測定結(jié)果與田間試驗效果相符合。
[0006] 技術(shù)方案：為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一種測定殺菌劑對水稻紋枯病菌毒 力的方法，包括以下步驟：
[0007] 1)將殺菌劑加入PSA培養(yǎng)基中制成含藥培養(yǎng)基，殺菌劑設(shè)置2個質(zhì)量濃度處理，每 個處理重復(fù)3次；
[0008] 2)用5mm打孔器打取生長3d的水稻紋枯病菌菌餅，分別接種于含藥培養(yǎng)基上， 28°C培養(yǎng)42h至對照菌落長至全皿；
[0009] 3)當(dāng)菌落長滿培養(yǎng)皿時觀察培養(yǎng)皿內(nèi)有無菌核形成。
[〇〇1〇] 其中，上述殺菌劑為嘧菌酯或咪鮮胺。
[〇〇11] 當(dāng)殺菌劑為嘧菌酯時，所述2個質(zhì)量濃度分別為0. 5 μ g/mL和100 μ g/mL。
[0012] 當(dāng)殺菌劑為咪鮮胺時，所述2個質(zhì)量濃度分別為0. 5 μ g/mL和200 μ g/mL。
[0013] 有益效果：本發(fā)明是一種評價殺菌劑對水稻紋枯病菌毒力的方法。該方法有別于 常規(guī)的菌絲生長抑制法，是通過檢測藥劑是否能有效抑制菌核形成而判斷對水稻紋枯病菌 毒力，本方法只需要制作1-2濃度含藥PSA平皿，與傳統(tǒng)的菌絲生長抑制法具有省時省力的 優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明的水稻紋枯病菌毒力評價效果與田間藥效高度吻合。本發(fā)明不用計算，只需 通過觀察菌核直徑來判斷殺菌劑的藥效。 【具體實(shí)施方式】
[0014] 下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。
[0015] 實(shí)施例1 :
[〇〇16] 將嘧菌酯加入PSA培養(yǎng)基中制成系列濃度平皿，將嘧菌酯原藥設(shè)置2個質(zhì)量濃度 處理：0. 5μ g/mL和100μ g/mL ;井R霉素用PSA培養(yǎng)基稀釋配制成濃度為0. 5μ g/mL和 200 μ g/mL ;無藥PSA培養(yǎng)基平板為對照；每個處理重復(fù)3次；用5mm打孔器打取生長3d的 水稻紋枯病菌菌餅置于各濃度含藥培養(yǎng)基上和無藥PSA培養(yǎng)基上，28°C培養(yǎng)42h至對照菌 落長至全皿時，觀察培養(yǎng)皿內(nèi)有無菌核形成。
[0017] 實(shí)驗結(jié)果表明，含有嘧菌酯的PSA平皿的結(jié)果：兩個濃度培養(yǎng)皿中雖然長滿了菌 絲，但兩個濃度無菌核形成。含井R霉素 PSA平皿的結(jié)果：雖然長滿了菌絲，但各濃度均無 紋枯病菌核的形成。對照不含有藥劑的培養(yǎng)皿的結(jié)果：菌絲長滿培養(yǎng)皿而且其中形成大量 的菌核。
[0018] 實(shí)施例2
[〇〇19] 將咪鮮胺加入PSA培養(yǎng)基中制成系列濃度平皿，將咪鮮胺原藥設(shè)置2個質(zhì)量濃度 處理：0. 5μ g/mL和200μ g/mL ;井R霉素用PSA培養(yǎng)基稀釋配制成濃度為0. 5μ g/mL和 200 μ g/mL ;無藥PSA培養(yǎng)基平板為對照；每個處理重復(fù)3次；用5mm打孔器打取生長3d的 水稻紋枯病菌菌餅接種于各濃度含藥培養(yǎng)基上，28°C培養(yǎng)42h至對照菌落長至全皿時，測 量處理菌落直徑并觀察培養(yǎng)皿內(nèi)有無菌核形成。
[0020] 實(shí)驗結(jié)果表明，含咪鮮胺2濃度PSA平皿的結(jié)果：均無菌絲生長，更無菌核形成。 含井R霉素 PSA平皿的結(jié)果：培養(yǎng)皿長滿了菌絲，但各濃度均無紋枯病菌菌核形成。而對照 不含有井R霉素的培養(yǎng)皿的結(jié)果：菌絲長滿培養(yǎng)皿而且其中形成大量的菌核。
[0021] 應(yīng)用實(shí)例：
[0022] 在田間水稻紋枯病發(fā)生時期，按照實(shí)施例1、實(shí)施例2中的藥劑種類和最高濃度 (嘧菌酯100 μ g/mL，咪鮮胺200 μ g/mL)噴霧進(jìn)行水稻紋枯病田間小區(qū)藥劑防治試驗。試 驗結(jié)果表明，在平皿中完全抑制菌絲生長的藥劑咪鮮胺對水稻紋枯病幾乎沒有防效，而嘧 菌酯雖然不能抑制菌絲生長，但田間對水稻紋枯病防效優(yōu)秀。
[0023] 對照不施藥：結(jié)果見表1。
[0024] 表1、嘧菌酯、咪鮮胺對水稻紋枯病田間防效
[0025]
【權(quán)利要求】
1. 一種測定殺菌劑對水稻紋枯病菌毒力的方法，其特征在于，包括以下步驟： 1) 將殺菌劑加入PSA培養(yǎng)基中制成含藥培養(yǎng)基，殺菌劑設(shè)置2個質(zhì)量濃度處理，每個處 理重復(fù)3次； 2) 用5 mm打孔器打取生長3 d的水稻紋枯病菌菌餅，分別接種于含藥培養(yǎng)基上，28°C 培養(yǎng)42 h至對照菌落長至全皿； 3) 當(dāng)菌落長滿培養(yǎng)皿時觀察培養(yǎng)皿內(nèi)有無菌核形成。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測定殺菌劑對水稻紋枯病菌毒力的方法，其特征在于， 所述殺菌劑為嘧菌酯或咪鮮胺。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種測定殺菌劑對水稻紋枯病菌毒力的方法，其特征在于， 當(dāng)殺菌劑為嘧菌酯時，所述2個質(zhì)量濃度分別為0. 5 μ g/mL和100 μ g/mL。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種測定殺菌劑對水稻紋枯病菌毒力的方法，其特征在于， 當(dāng)殺菌劑為咪鮮胺時，所述2個質(zhì)量濃度分別為0. 5 μ g/mL和200 μ g/mL。
【文檔編號】C12R1/645GK104087651SQ201410324026
【公開日】2014年10月8日 申請日期:2014年7月8日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月8日
【發(fā)明者】楊紅福, 姚克兵, 束兆林, 吉沐祥, 繆康, 趙來成, 費(fèi)子華, 吳祥, 陳源, 王莉莉, 張建華, 龔幫東, 朱成剛, 邵春, 王健 申請人:江蘇省綠盾植保農(nóng)藥實(shí)驗有限公司