一種勻漿法協(xié)同酶解制備薯蕷皂苷元的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種勻漿法協(xié)同酶解提取薯蕷皂苷元的方法，其處理步驟包括：將穿山龍除雜切片曬干，烘干粉碎，過100目篩，加入原料5~8倍（重量比）的50~70%的乙醇，使用高速勻漿機，在200W的功率下，對穿山龍粉末進行處理8~10min，得薯蕷皂苷提取液，再經(jīng)酶解、滅活、離心、濃縮、重結(jié)晶得薯蕷皂苷元。本發(fā)明采用勻漿法協(xié)同酶解提取薯蕷皂苷元，工藝簡單、提取時間短、提取率高，且無須昂貴的儀器，生產(chǎn)成本低，可進行工業(yè)化的生產(chǎn)。
【專利說明】一種勻漿法協(xié)同酶解制備薯蕷皂苷元的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物有效成分分離領(lǐng)域，具體涉及一種利用勻漿法協(xié)同酶解提取薯蕷皂苷元的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]穿山龍為薯蕷科植物穿山龍薯蕷的干燥根莖，所含的主要成分為薯蕷皂苷。我國薯蕷屬植物資源豐富，有60多種，大多數(shù)含有多量薯蕷皂苷。薯蕷皂苷經(jīng)酸或酶水解后，生成薯蕷皂苷元(俗稱薯蕷皂苷素)和I分子葡萄糖及2分子鼠李糖。薯蕷皂苷元為白色晶體，熔點204~207?，可溶于常用的有機溶劑如乙醚、石油醚、汽油及醋酸中，不溶于水，是目前合成各種留體藥物的重要合成原料。
[0003]目前關(guān)于薯蕷皂苷元的制備方法的專利和文獻較多，包括使用酸水解法、有機溶劑(如石油醚、汽油、己烷、氯仿等)法，超臨界流體萃取法，或超聲提取酸水解法等。然而，傳統(tǒng)的方法需經(jīng)過多次的萃取濃縮，能耗高，生產(chǎn)周期長，提取率低，同時也對環(huán)境造成了嚴重的污染；而超臨界流體萃取法和超聲波提取法效果雖好，但存在設備一次性投入過高的缺點。如專利200410060679.X公布了的方法，其不足之處是仍使用傳統(tǒng)的鹽酸為催化劑，產(chǎn)生大量的酸性有機廢水，無法從根本上解決薯蕷皂苷元生產(chǎn)的污染問題，且得率較低。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種工藝簡單、提取時間短、收率高的制備薯蕷皂苷元的方法。
[0005]本發(fā)明包括以下步驟:
將穿山龍除雜切片曬干，烘干粉碎，過100目篩，加入原料5~8倍(重量比)的50-70%的乙醇，使用高速勻漿機，在200W的功率下，對穿山龍粉末進行處理flOmin，得薯蕷皂苷提取液，再加入原料3~4% (重量比)的復合酶，醋酸/醋酸鈉調(diào)節(jié)PH為3.5^4.5，攪拌均勻，于5(T60 °C酶解l~2h，80 °C滅活15min，氫氧化鈉調(diào)PH為中性，經(jīng)離心、濃縮、重結(jié)晶得薯蕷皂苷元。本發(fā)明所述的生物酶為纖維素酶、半纖維素酶與淀粉酶的復合酶(比例為0.4:0.2:0.4)，結(jié)晶溶劑為石油醚、甲醇或乙醇。
[0006]本發(fā)明使用勻漿法提取植物的有效成分，通過機械及液力剪切作用將物料撕裂和粉碎，使物料破碎和有效成分的提取同步進行，達到對植物有效成分快速、強化提取的目的。再結(jié)合復合酶(纖維素酶、半纖維素酶和淀粉酶酶)進一步的破壞細胞的細胞壁和細胞質(zhì)，使其疏松、膨脹、崩潰，從而增大了有效成分的擴散面積，減小了阻力，提高了有效成分的得率。
[0007]下面將結(jié)合【具體實施方式】進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
[0008]【具體實施方式】:
實施例1:將穿山龍除雜切片曬干，烘干粉碎，過100目篩，取100g，加入原料5倍(重量比)的50%的乙醇，使用高速勻漿機，在200W的功率下，對穿山龍粉末進行處理8min，得薯蕷皂苷提取液，再加入原料3% (重量比)的復合酶(纖維素酶、半纖維素酶和淀粉酶比例為
0.4:0.2:0.4)，醋酸/醋酸鈉調(diào)節(jié)PH為3.5，攪拌均勻，于50°C酶解2h，80°C滅活15min，氫氧化鈉調(diào)PH為中性，經(jīng)離心、濃縮、石油醚重結(jié)晶得薯蕷皂苷元1.92g，經(jīng)檢測，薯蕷皂苷元的收率為1.92%。
[0009]實施例2:
將穿山龍除雜切片曬干，烘干粉碎，過100目篩，取100g，加入原料7倍(重量比)的70%的乙醇，使用高速勻漿機，在200W的功率下，對穿山龍粉末進行處理lOmin，得薯蕷皂苷提取液，再加入原料4% (重量比)的復合酶(纖維素酶、半纖維素酶和淀粉酶比例為
0.4:0.2:0.4)，醋酸/醋酸鈉調(diào)節(jié)PH為4.5，攪拌均勻，于55 °C酶解1.5h，80°C滅活15min，氫氧化鈉調(diào)PH為中性，經(jīng)離心、濃縮、乙醇重結(jié)晶得薯蕷皂苷元2.05g,經(jīng)檢測，薯蕷皂苷元的收率為2.05%。
[0010]實施例3:
將穿山龍除雜切片曬干，烘干粉碎，過100目篩，取100g，加入原料8倍(重量比)的65%的乙醇，使用高速勻漿機，在200W的功率下，對穿山龍粉末進行處理9min，得薯蕷皂苷提取液，再加入原料3.5% (重量比)的復合酶(纖維素酶、半纖維素酶和淀粉酶比例為
0.4:0.2:0.4) ,醋酸/醋酸鈉調(diào)節(jié)PH為4.0，攪拌均勻，于60°C酶解lh, 80°C滅活15min，氫氧化鈉調(diào)PH為中性，經(jīng)離心、濃縮、甲醇重結(jié)晶得薯蕷皂苷元1.97 g，經(jīng)檢測，薯蕷皂苷元的收率為1.97%。
【權(quán)利要求】
1.一種勻漿法協(xié)同酶解提取薯蕷皂苷元的方法，其特征在于，包括以下步驟:將穿山龍除雜切片曬干，烘干粉碎，過100目篩，加入原料5~8倍(重量比)的50-70%的乙醇，使用高速勻漿機，在200W的功率下，對穿山龍粉末進行處理flOmin，得薯蕷皂苷提取液，再加入原料3~4% (重量比)的復合酶，醋酸/醋酸鈉調(diào)節(jié)PH為3.5~4.5，攪拌均勻，于5(T60°C酶解f2h，80°C滅活15min，氫氧化鈉調(diào)PH為中性，經(jīng)離心、濃縮、重結(jié)晶得薯蕷皂苷元。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種勻漿法協(xié)同酶解提取薯蕷皂苷元的方法，其特征在于，所述的生物酶為纖維素酶、半纖維素酶與淀粉酶的復合酶(比例為0.4:0.2:0.4)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種勻漿法協(xié)同酶解提取薯蕷皂苷元的方法，其特征在于，所述的結(jié)晶過程中使用的 有機溶劑為石油醚、甲醇或乙醇。
【文檔編號】C12P33/20GK104073541SQ201410266301
【公開日】2014年10月1日 申請日期:2014年6月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月16日
【發(fā)明者】劉東鋒, 楊成東 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司