龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用。本發(fā)明通過(guò)脂肪酶抑制實(shí)驗(yàn)及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明了龍血竭提取物具有抑制脂肪酶活性、顯著降低營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠體重的作用。
【專(zhuān)利說(shuō)明】龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)藥、保健食品、飲料【技術(shù)領(lǐng)域】，具體地說(shuō)是涉及中藥提取物的用途，更具體地說(shuō)是涉及龍血竭提取物用于制備減肥產(chǎn)品的用途。
【背景技術(shù)】
[0002]我國(guó)食品藥品監(jiān)督管理總局頒布的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[WS3-082(Z-016)_99(Z)]中將百合科龍血樹(shù)屬植物劍葉龍血樹(shù)Dranaena cochinchinensis (Lour.) S.C.Chen的含脂木材經(jīng)提取得到的樹(shù)脂定名為“龍血竭”。龍血竭為名貴中藥材，現(xiàn)代藥理研究表明其具有活血止血、抗炎鎮(zhèn)痛、抗菌、抗氧化、促進(jìn)表皮修復(fù)等作用。臨床上已應(yīng)用于多種病癥的治療:子宮肌瘤、子宮內(nèi)膜異位癥、閉經(jīng)痛經(jīng)、月經(jīng)不調(diào)等婦科疾?。幌莱鲅?、胃炎、胃潰瘍、結(jié)腸炎、甲亢等內(nèi)科疾?。坏驌p傷、創(chuàng)傷骨折、燒傷燙傷、痔瘡、膿瘡久不收口等外科疾??；皮膚瘙癢、真菌感染、痤瘡等皮膚科疾病。
[0003]目前已從龍血竭中分離檢測(cè)出130多種化合物。雖然有研究表明龍血竭具有降血脂作用，但其對(duì)脂肪酶的抑制作用及在減肥方面的應(yīng)用尚未有報(bào)道。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明的目 的是提供龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用。
[0005]本發(fā)明的另一目的是提供龍血竭提取物的制備方法。
[0006]其中上述的減肥產(chǎn)品是藥物制劑、保健食品或飲料中的任意一種。
[0007]其中所述的藥物制劑、保健食品是口服制劑、皮膚外用制劑中任何一種臨床可接受的制劑。
[0008]其中所述的龍血竭提取物的制備方法是以下任意一種:
[0009]a.取龍血竭藥材，粉碎，過(guò)篩，裝入萃取釜中，萃取壓力10~30MPa，溫度40~50°C，萃取時(shí)間I~5小時(shí)，CCV流量25~35kg / h ;收集萃取殘余物，放入浸出器中，加入5~8倍重量的丙酮溶液，水浴加熱，溫度70~80°C，反復(fù)抽提4~8小時(shí)，抽提完全后，提取物回收溶劑并濃縮至干，將所得提取物再置于真空干燥器中50~70°C減壓干燥2~3小時(shí)，取出，粉碎、過(guò)篩，即得龍血竭提取物；
[0010]b.取龍血竭藥材，加入8~10倍量50~95%乙醇浸泡I~3小時(shí)后，加熱回流提取I~3次，每次I~3小時(shí)，過(guò)濾或離心，合并提取液即為醇提取液，減壓濃縮，真空干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物；
[0011]C.取龍血竭藥材，加5~10倍量乙酸乙酯回流提取I~3次，每次I~3小時(shí)，得龍血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并濃縮至干，提取物粉碎后用20~40倍量的0.1~I %的NaOH攪拌使溶解，濾過(guò)，濾液用鹽酸調(diào)pH，靜置，傾出上清液，沉淀離心濾過(guò)，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物；
[0012]d.市售。
[0013]上述的制備方法，優(yōu)選的技術(shù)方案為:[0014]a.取龍血竭藥材，粉碎，過(guò)篩，裝入萃取釜中，萃取壓力20MPa，溫度45°C，萃取時(shí)間2小時(shí)，CCV流量30kg / h;收集萃取殘余物，放入浸出器中，加入6倍重量的丙酮溶液，水浴加熱，溫度80°C，反復(fù)抽提8小時(shí)，抽提完全后，提取物回收溶劑并濃縮至干，將所得提取物再置于真空干燥器中60°C減壓干燥2小時(shí)，取出，粉碎、過(guò)篩，即得龍血竭提取物；
[0015]b.取龍血竭藥材，加入10倍量65%乙醇浸泡I小時(shí)后，加熱回流提取3次，每次2小時(shí)，過(guò)濾或離心，合并提取液即為醇提取液，減壓濃縮，真空干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物；
[0016]c.取龍血竭藥材，加8倍量乙酸乙酯回流提取2次，每次I小時(shí)，得龍血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并濃縮至干，提取物粉碎后用30倍量的0.35%的NaOH攪拌使溶解，濾過(guò)，濾液用鹽酸調(diào)PH，靜置，傾出上清液，沉淀離心濾過(guò)，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物；
[0017]d.市售。
[0018]本發(fā)明的應(yīng)用中，所述的藥物制劑及保健食品是口服制劑、皮膚外用制劑中任何一種臨床可接受的制劑。為使上述劑型能夠?qū)崿F(xiàn)，需在制備這些劑型時(shí)加入藥學(xué)可接受的輔料，例如:填充劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、膠粘劑、保濕劑、賦形劑、軟化劑等，填充劑包括:淀粉、預(yù)膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、鹿糖等，崩解劑包括:淀粉、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素納等，潤(rùn)滑劑包括:硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等，助懸劑包括:聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等，粘合劑包括:水、乙醇、淀粉漿、羧甲基纖維素鈉、羥丙基纖維素、甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素，明膠溶液、蔗糖溶液、聚乙烯比咯烷酮等，甜味劑包括:糖精鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等，矯味劑包括:甜味劑及各種香精，膠粘劑包括明膠、淀粉、瓊脂、甘露聚糖、海藻酸、聚丙烯酸、聚丙烯酸鹽類(lèi)、糊精、甲基纖維素、PVP,甲基乙烯基醚、順丁烯二酸酐的共聚物、阿拉伯膠、西黃芪膠、梧桐膠`、槐樹(shù)豆膠等，保濕劑包括乙二醇、二甘醇、聚乙二醇、甘油、山梨醇、丙二醇等，賦形劑包括高嶺土、粘土、滑石粉、碳酸鈣、氧化鋅等，軟化劑包括蓖麻油及其他油脂等。
[0019]實(shí)施方式
[0020]為了更好地理解本發(fā)明，發(fā)明人提供以下研究資料，說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)效果，以下實(shí)施例用于進(jìn)一步說(shuō)明，但不限于本發(fā)明。
[0021]實(shí)施例1硬膠囊劑的制備
[0022]取龍血竭藥材500g，粉碎，過(guò)篩，裝入萃取釜中，萃取壓力20MPa，溫度45°C，萃取時(shí)間2小時(shí)，CO2流量30kg / h ;收集萃取殘余物，放入浸出器中，加入6倍重量的丙酮溶液，水浴加熱，溫度80°C，反復(fù)抽提8小時(shí)，抽提完全后，提取物回收溶劑并濃縮至干，將所得提取物再置于真空干燥器中60°C減壓干燥2小時(shí)，取出，粉碎、過(guò)篩，即得龍血竭提取物，加入適量淀粉，以聚丙烯酸樹(shù)脂制粒，裝膠囊，制粒，即得。
[0023]實(shí)施例2軟膠囊劑的制備
[0024]取龍血竭藥材600g，加入10倍量65%乙醇浸泡I小時(shí)后，加熱回流提取3次，每次2小時(shí)，過(guò)濾或離心，合并提取液即為醇提取液，減壓濃縮，真空干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物，加入玉米油、大豆磷脂、蜂蠟制成的混合油基質(zhì)適量，充分混合，用膠體磨研至均勻，制粒，即得。
[0025]實(shí)施例3顆粒劑的制備
[0026]取龍血竭藥材800g，加8倍量乙酸乙酯回流提取2次，每次I小時(shí)，得龍血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并濃縮至干，提取物粉碎后用30倍量的0.35%的NaOH溶液攪拌使溶解，濾過(guò)，濾液用鹽酸調(diào)PH，靜置，傾出上清液，沉淀離心濾過(guò)，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成細(xì)粉，加入適量的蔗糖和淀粉，或加入適量的糊精，制成顆粒，干燥，加入適量羧甲基纖維素鈉，制粒，即得。
[0027]實(shí)施例4片劑的制備
[0028]取龍血竭藥材700g，粉碎，過(guò)篩，裝入萃取釜中，萃取壓力lOMPa，溫度40°C，萃取時(shí)間I小時(shí)，CO2流量25kg / h ;收集萃取殘余物，放入浸出器中，加入5倍重量的丙酮溶液，水浴加熱，溫度70°C，反復(fù)抽提4小時(shí)，抽提完全后，提取物回收溶劑并濃縮至干，將所得提取物再置于真空干燥器中50°C減壓干燥2小時(shí)，取出，粉碎、過(guò)篩，即得龍血竭提取物，加入硬脂酸鎂混合均勻壓制成片，即得。
[0029]實(shí)施例5滴丸劑的制備
[0030]取龍血竭藥材50g，加入8倍量50%乙醇浸泡I小時(shí)后，加熱回流提取I小時(shí)，過(guò)濾或離心，提取液即為醇提取液，減壓濃縮，真空干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物，加入適量聚乙二醇4000，加熱熔化，混勻，滴入甲基硅油冷卻劑中，制丸，包薄膜衣，即得。
[0031]實(shí)施例6濃縮丸的制備
[0032]取龍血竭藥材400g，加5倍量乙酸乙酯回流提取I小時(shí)，得龍血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并濃縮至干。提取物粉碎后用20倍量的0.1 %的NaOH溶液攪拌使溶解，濾過(guò)，濾液用鹽酸調(diào)PH，靜置，傾出 上清液，沉淀離心濾過(guò)，沉淀，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成細(xì)粉，加入適量水，泛制成丸，低溫干燥，制成濃縮丸，即得。
[0033]實(shí)施例7貼劑的制備
[0034]取龍血竭藥材800g，加入10倍量95%乙醇浸泡3小時(shí)后，加熱回流提取3次，每次3小時(shí)，過(guò)濾或離心，合并兩次提取液即為醇提取液，減壓濃縮至適量，加入適量的由橡膠、松香等制成的基質(zhì)中，制成涂料，進(jìn)行涂膏；蓋襯，切片，或收卷，即得。
[0035]實(shí)施例8咀嚼片的制備
[0036]取龍血竭藥材500g，加10倍量乙酸乙酯回流提取3次，每次3小時(shí)，得龍血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并濃縮至干。提取物粉碎后用40倍量的1%的NaOH溶液攪拌使溶解，濾過(guò)，濾液用鹽酸調(diào)PH，靜置，傾出上清液，沉淀離心濾過(guò)，沉淀，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成細(xì)粉，加硬脂酸鎂混合，壓片，包衣、滅菌，即得。
[0037]實(shí)施例9固體飲料的制備
[0038]取龍血竭藥材800g，粉碎，過(guò)篩，裝入萃取釜中，萃取壓力30MPa，溫度50°C，萃取時(shí)間5小時(shí)，CO2流量35kg/h ;收集萃取殘余物，放入浸出器中，加入8倍重量的丙酮溶液，水浴加熱，溫度80°C，反復(fù)抽提8小時(shí)，抽提完全后，提取物回收溶劑并濃縮至干，將所得提取物再置于真空干燥器中70°C減壓干燥3小時(shí)，取出，粉碎、過(guò)篩，即得龍血竭提取物，加入蔗糖、水?dāng)嚢?，造粒，烘干，過(guò)篩，高溫殺菌，即得。
[0039]實(shí)施例10對(duì)胰脂肪酶的抑制作用
[0040]1、實(shí)驗(yàn)藥物、材料[0041]1.1 藥物
[0042]桔梗水提物:桔梗500g，粉碎，加水浸泡30分鐘，加入6倍量蒸餾水，煎煮2次，過(guò)濾，合并兩次濾液，減壓濃縮，得桔梗水提物；
[0043]藥物1:取龍血竭藥材500g，粉碎，過(guò)篩，裝入萃取釜中，萃取壓力20MPa，溫度45°C，萃取時(shí)間2小時(shí)，CCV流量30kg / h ;收集萃取殘余物，放入浸出器中，加入6倍重量的丙酮溶液，水浴加熱，溫度80°C，反復(fù)抽提8小時(shí)，抽提完全后，提取物回收溶劑并濃縮至干，將所得提取物再置于真空干燥器中60°C減壓干燥2小時(shí)，取出，粉碎、過(guò)篩，即得龍血竭提取物；
[0044]藥物I1:取龍血竭藥材500g，加入10倍量65%乙醇浸泡I小時(shí)后，加熱回流提取3次，每次2小時(shí)，過(guò)濾或離心，合并提取液即為醇提取液，減壓濃縮，真空干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物；
[0045]藥物II1:取龍血竭藥材500g，加8倍量乙酸乙酯回流提取2次，每次I小時(shí)，得龍血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并濃縮至干，提取物粉碎后用30倍量的0.35%的NaOH溶液攪拌使溶解，濾過(guò)，濾液用鹽酸調(diào)PH，靜置，傾出上清液，沉淀離心濾過(guò)，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物。
[0046]1.2 材料
[0047]豬胰脂肪酶、4-硝基苯棕櫚酸酯、阿拉伯樹(shù)膠粉、奧利司他，sigma公司。
[0048]Tris, Amersco0
[0049]異丙醇，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。
[0050]脫氧膽酸鈉，國(guó)`藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。
[0051]DMS0，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。
[0052]鹽酸，南京化學(xué)試劑有限公司。
[0053]酶標(biāo)儀，moleculardevices spectraMax M2e。
[0054]天平，MettlerToledo AL104。
[0055]離心機(jī)，Eppendorf5424。
[0056]2、實(shí)驗(yàn)方法
[0057]2.1試劑配制
[0058]藥品配制:稱(chēng)取樣品溶于DMSO中配制成50mg / mL母液(奧利司他配制成
0.5mg / mL母液)，-20°C保存。緩沖液配制:50mM Tris-HCl溶液，含0.1%阿拉伯樹(shù)膠粉和
0.2%脫氧膽酸鈉，pH值為10.0。酶溶液配制:用緩沖液配制1.2mg / mL酶，混勻，5000rpm離心5分鐘，取上清，分裝，-70°C保存。底物溶液配制:稱(chēng)取0.302g pNPP，加入32ml異丙醇，超生乳化，即為25mM pNPP，分裝，4°C保存。
[0059]2.2脂肪酶抑制劑活性測(cè)定
[0060]在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，加入198 μ I緩沖液，再加入2μ I各樣品母液，混勻，使其稀釋100倍。脂肪酶用緩沖液稀釋120倍，底物用緩沖液稀釋50倍。以上稀釋后的試劑待用。取96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，按照表1中不同的分組分別加入緩沖液、抑制劑和脂肪酶，37°C孵育10分鐘。脂肪酶和抑制劑預(yù)孵育10分鐘后，每孔加入100 μ I底物，37°C反應(yīng)60分鐘。在酶標(biāo)儀0D405nm處測(cè)量各孔的吸光值。
[0061 ] 表1脂肪酶抑制劑篩選反應(yīng)體系(200 μ I)
【權(quán)利要求】
1.龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述的龍血竭提取物中龍血竭總黃酮或總酚含量大于50%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述的減肥產(chǎn)品是以下產(chǎn)品中的任意一種:藥物制劑、保健食品、飲料。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述的藥物制劑及保健食品是口服制劑、皮膚外用制劑中任何一種臨床可接受的制劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述的龍血竭提取物的制備方法是以下任意一種: a.取龍血竭藥材，粉碎，過(guò)篩，裝入萃取釜中，萃取壓力10~30MPa，溫度40~50°C，萃取時(shí)間I~5小時(shí)，CO2流量25~35kg / h ;收集萃取殘余物，放入浸出器中，加入5~8倍重量的丙酮溶液，水浴加熱，溫度70~80°C，反復(fù)抽提4~8小時(shí)，抽提完全后，提取物回收溶劑并濃縮至干，將所得提取物再置于真空干燥器中50~70°C減壓干燥2~3小時(shí)，取出，粉碎、過(guò)篩，即得龍血竭提取物； b.取龍血竭藥材，加入8~10倍量50~95%乙醇浸泡I~3小時(shí)后，加熱回流提取I~3次，每次I~3小時(shí)，過(guò)濾或離心，合并提取液即為醇提取液，減壓濃縮，真空干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物； c.取龍血竭藥材，加5~10倍量乙酸乙酯回流提取I~3次，每次I~3小時(shí)，得龍血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并濃縮至干，提取物粉碎后用20~40倍量的0.1~1%的NaOH攪拌使溶解，濾過(guò)，濾液用鹽酸調(diào)pH，靜置，傾出上清液，沉淀離心濾過(guò)，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物； d.市售。`
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述的龍血竭提取物的制備方法是以下任意一種: a.取龍血竭藥材，粉碎，過(guò)篩，裝入萃取釜中，萃取壓力20MPa，溫度45°C，萃取時(shí)間2小時(shí)，CCV流量30kg / h;收集萃取殘余物，放入浸出器中，加入6倍重量的丙酮溶液，水浴加熱，溫度80°C，反復(fù)抽提8小時(shí)，抽提完全后，提取物回收溶劑并濃縮至干，將所得提取物再置于真空干燥器中60°C減壓干燥2小時(shí)，取出，粉碎、過(guò)篩，即得龍血竭提取物； b.取龍血竭藥材,加入10倍量65%乙醇浸泡I小時(shí)后，加熱回流提取3次，每次2小時(shí)，過(guò)濾或離心，合并提取液即為醇提取液，減壓濃縮，真空干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物； c.取龍血竭藥材，加8倍量乙酸乙酯回流提取2次，每次I小時(shí)，得龍血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并濃縮至干，提取物粉碎后用30倍量的0.35%的NaOH攪拌使溶解，濾過(guò)，濾液用鹽酸調(diào)PH，靜置，傾出上清液，沉淀離心濾過(guò)，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物； d.市售。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述的肥胖是指非藥物性肥胖。
【文檔編號(hào)】A23L1/29GK103768345SQ201410043396
【公開(kāi)日】2014年5月7日 申請(qǐng)日期:2014年1月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月24日
【發(fā)明者】蕭偉, 王振中, 費(fèi)洪強(qiáng), 李娜, 曹亮, 劉文君, 齊曉輝, 孟兆青, 丁崗, 王躍生, 徐海娟 申請(qǐng)人:江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司