一種糞腸球菌的復(fù)配增效方法及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種糞腸球菌的復(fù)配增效方法及其應(yīng)用。所述一種糞腸球菌的復(fù)配增效方法主要包括微生物菌種復(fù)配、活菌繁殖促進(jìn)劑復(fù)配等。發(fā)明中所述的微生物菌種主要由糞腸球菌、屎腸球菌、嗜酸鏈球菌、酵母菌中的一種或多種混合組成；所述活菌繁殖促進(jìn)劑主要由木糖醇、乳糖、低聚果糖、低聚木糖、殼聚糖、酵母粉、葉酸、檸檬酸中的一種或多種混合而成。本發(fā)明菌株復(fù)配增效方法實(shí)現(xiàn)了不同微生物菌株間協(xié)同作用，加速了對(duì)水體污染物的凈化過(guò)程，促進(jìn)養(yǎng)殖生態(tài)系統(tǒng)的物流及能流的平衡。在水產(chǎn)養(yǎng)殖過(guò)程中使用本品，可以有效平衡水體菌相和藻相，快速分解殘餌、糞便、動(dòng)物尸體等污染物，改善養(yǎng)殖水體水質(zhì)，增加養(yǎng)殖水體穩(wěn)定性，防止養(yǎng)殖水體老化。
【專利說(shuō)明】一種糞腸球菌的復(fù)配增效方法及其應(yīng)用【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于微生物技術(shù)應(yīng)用領(lǐng)域，具體涉及一種糞腸球菌的復(fù)配增效方法，還涉及到一種糞腸球菌復(fù)合微生物菌劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖上的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]糞腸球菌也叫糞鏈球菌，其菌體形態(tài)為鏈球或球狀，菌體直徑大小0.3 Mm-0.7 Mm之間，無(wú)芽孢，稀釋后在肉湯瓊脂平板上形成的菌落圓形，乳白色，表面凸起濕潤(rùn)，有光澤，邊緣整齊，大多數(shù)成雙或短鏈狀排列，通常不運(yùn)動(dòng)。糞腸球菌為D族鏈球菌中腸球菌的代表種，通常所謂的糞腸球菌主要包括糞鏈球菌、糞鏈球菌液化亞種、糞鏈球菌產(chǎn)酶亞種、尿鏈球菌、牛鏈球菌、馬腸鏈球菌、鳥(niǎo)鏈球菌等。其中前四種主要存在于人腸道，稱腸球菌；后三種主要存在于家畜及家禽的糞便內(nèi)。
[0003]糞腸球菌的繁殖營(yíng)養(yǎng)要求低，在普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂上也可生長(zhǎng)。能在10°C或45°C pH
9.6或含6.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，并能耐65°C、30分鐘。它可利用精氨酸為能源，發(fā)酵山梨醇，不發(fā)酵阿拉伯糖。
[0004]1989年，美國(guó)食品與藥品管理局(Food and Drug Administration, FDA)和美國(guó)飼料管理協(xié)會(huì)(Association of American Feed Control Officials, AAFC0)公布了 44種“可直接飼喂且通常認(rèn)為是安全的微生物(Generally Recognized as Safe, GRAS) ”作為微生態(tài)制劑的出發(fā)菌株，其中均有糞腸球菌。
[0005]我國(guó)農(nóng)業(yè)部1999年第105號(hào)文件公布允許使用的微生物種類是12種，也包括益生腸球菌。目前國(guó)內(nèi)用于微生態(tài)調(diào)節(jié)劑的菌種主要有乳酸桿菌、雙歧桿菌、大腸桿菌、鏈球菌、芽孢桿菌及某些酵母和真菌。這些微生物可以單個(gè)使用，也可以混合使用。
·[0006]糞腸球菌是目前專用的微生物青貯接種劑主要菌種之一，屬兼性厭氧革蘭氏陽(yáng)性菌。已被廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖業(yè)中，為減少和避免使用抗生素發(fā)揮了巨大作用。它經(jīng)過(guò)系列工藝制成的微生物制劑直接投喂養(yǎng)殖動(dòng)物后，有利于改善腸道內(nèi)微生態(tài)平衡，防治動(dòng)物腸道菌叢區(qū)系紊亂，有分解蛋白質(zhì)為水肽、合成B族維生素等功效，也可以促進(jìn)養(yǎng)殖動(dòng)物的免疫反應(yīng)，提高抗體水平，增強(qiáng)巨嗜細(xì)胞的活性。
[0007]飼料里添加糞腸球菌能使飼料里的纖維變軟，提高飼料的轉(zhuǎn)化吸收率。另外糞腸球菌在生長(zhǎng)和代謝過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生的乳酸、氨基酸、維生素、酶等特殊營(yíng)養(yǎng)成分彌補(bǔ)了常規(guī)餌料的營(yíng)養(yǎng)缺陷，對(duì)各種養(yǎng)殖動(dòng)物幼體起到了十分重要的營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化和促生長(zhǎng)作用。糞腸球菌還可以分泌肽或蛋白質(zhì)類的細(xì)菌素。因此，糞腸球菌被作為一種優(yōu)良的飼料添加劑廣泛使用，在飼料添加中糞腸球菌，既有防腐作用，又增加飼料的風(fēng)味，促進(jìn)養(yǎng)殖動(dòng)物的食欲。
[0008]日本最早開(kāi)發(fā)糞腸球菌用于治療各種腸道疾病。日本目前市場(chǎng)上出售的含有糞腸球菌的酸奶制品或藥品有清水制藥生產(chǎn)的Lascpanj^日啤酒株式會(huì)社生產(chǎn)的新Lacton、若素制藥生產(chǎn)的Lebenin、武田制藥生產(chǎn)的Biosmin、韓國(guó)生產(chǎn)的用于治療嬰幼兒腸道疾病的益生菌制劑如媽咪愛(ài)等。其中有些產(chǎn)品，如媽咪愛(ài)等目前已打入中國(guó)市場(chǎng)。在歐洲一些國(guó)家如德國(guó)和瑞典生產(chǎn)的益生菌制品中也都含有屎腸球菌。目前國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上對(duì)腸球菌的應(yīng)用多用作畜禽、水產(chǎn)飼料添加劑和改良水質(zhì)的微生態(tài)制劑，菌種主要集中在糞腸球菌和屎腸球菌。
[0009]目前，國(guó)外已有此類產(chǎn)品進(jìn)入到我國(guó)市場(chǎng)，如瑞士的糞鏈球菌微膠囊“賜美健”、荷蘭的“百福菌”等，但是價(jià)格很高，難以大規(guī)模使用。國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上由于存在菌種的篩選、活菌數(shù)、菌種失活、雜菌含量的多少、使用條件等問(wèn)題而導(dǎo)致益生腸球菌制劑活性降低，出現(xiàn)使用效果的重復(fù)性和穩(wěn)定性較差等。目前國(guó)內(nèi)對(duì)糞腸球菌的研究開(kāi)發(fā)多集中在提高發(fā)酵液或產(chǎn)品中的活菌數(shù)，以及包埋技術(shù)的突破上，如新菌種的篩選、高濃度發(fā)酵工藝提升、微膠囊化包被工業(yè)化途徑，卻很少關(guān)注如何提高菌體活力。
[0010]申請(qǐng)?zhí)枮?00910232711.0的專利公布了一株糞腸球菌及其應(yīng)用，是為了獲得高濃度酪胺液；申請(qǐng)?zhí)枮?01110268516.0的專利提供了一種糞腸球菌的高濃度富集方法。關(guān)于活菌增殖方面的研究已有不少，如李丹丹(2008)牛蒡菊糖的制備、對(duì)雙歧桿菌的增殖及應(yīng)用研究，潘寶海等(2012) 3種植物多糖與枯草芽孢桿菌協(xié)同作用的研究等，但是還沒(méi)有關(guān)于糞腸球菌增效方面的專利或文獻(xiàn)報(bào)道。
[0011]本發(fā)明涉及一種糞腸球菌的復(fù)配增效方法及其應(yīng)用，具體來(lái)講，我們對(duì)糞腸球菌進(jìn)行了菌種復(fù)配，并添加了菌種繁殖促進(jìn)劑。該復(fù)配方法有效增強(qiáng)腸球菌制劑的菌活力和效果穩(wěn)定性。
[0012]本發(fā)明涉及一種糞腸球菌的復(fù)配增效方法及其應(yīng)用，具體來(lái)講，表現(xiàn)在養(yǎng)殖水體改良方面，將其成品施用在水產(chǎn)養(yǎng)殖水體中，可有效分解水中殘餌、糞便等有機(jī)污染物，減少池塘淤泥沉積，降低水中氨態(tài)氨、亞硝酸鹽等，明顯改善了養(yǎng)殖水體環(huán)境，減少水體污染。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0013]本發(fā)明的目的在于提供了一種糞腸球菌的復(fù)配增效方法及其應(yīng)用，較為獨(dú)特的是，遵循了菌種復(fù)配的多元化原則，利用多種功能互補(bǔ)的有益菌種，進(jìn)行科學(xué)組合，形成高效的糞腸球菌復(fù)合菌劑。更為獨(dú)特的是本發(fā)明添加了活菌繁殖促進(jìn)劑，保證了該糞腸球菌制劑的高效、穩(wěn)定。解決了目前市場(chǎng)上的糞腸球菌制劑存在活菌存活率低，產(chǎn)品性狀不穩(wěn)定，使用效果不理想等問(wèn)題。
[0014]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):一種糞腸球菌的復(fù)配增效方法及其應(yīng)用，含多種功能不同的有益菌種和活菌繁殖促進(jìn)劑。所述各有益菌種均為市售產(chǎn)品，來(lái)源易得。具體來(lái)說(shuō)，一種糞腸球菌的復(fù)配增效方法及其應(yīng)用，其復(fù)配方法如下:
多功能有益菌組合包括糞腸球菌，屎腸球菌，嗜酸鏈球菌、釀酒酵母菌等四個(gè)菌群，按照1-10份:1-8份:1-8份:1飛份的重量份比例混合制成?；罹敝炒龠M(jìn)劑包括乳糖、低聚果糖、殼聚糖、酵母粉、葉酸、檸檬酸等，按0.1-2.5份:0.1-2.5份:0.1-2.5份:0.1-2.5份:
0.1-2.5份:0.1-2.5的重量份比例混合制成。將上述復(fù)合菌粉與活菌繁殖促進(jìn)劑充分混合后，低溫真空冷凍干燥制成粉狀產(chǎn)品。
[0015]優(yōu)選的范圍及最佳值為:
I優(yōu)選范圍I最佳值
糞腸球菌 4-10 10_
g腸球菌 b-8 8
_鏈球菌 W 6 ~
11酒酵母菌|2-6 |3 —
【權(quán)利要求】
1.一種糞腸球菌的復(fù)配增效方法及其應(yīng)用，其特征在于:復(fù)合微生物菌劑和活菌繁殖促進(jìn)劑按重量份數(shù)比I飛:0.5~2配伍；其優(yōu)選范圍為3~5：1~2 ;其最佳值為5:1.6。
2.根據(jù)權(quán)利要求書(shū)I所述的一種糞腸球菌的復(fù)配增效方法及其應(yīng)用，其特征在于，復(fù)合微生物各菌種按重量份數(shù)計(jì)各組分為:糞腸球菌1-10份，屎腸球菌1-8份，嗜酸鏈球菌1-8份，釀酒酵母菌1-6份；其優(yōu)選范圍為糞腸球菌4-10份，屎腸球菌2-8份，嗜酸鏈球菌2-8份，釀酒酵母菌2-6份；其最佳值為糞腸球菌10份，屎腸球菌8份，嗜酸鏈球菌6份，釀酒酵母菌3份。
3.根據(jù)權(quán)利要求書(shū)I所述的一種糞腸球菌的復(fù)配增效方法及其應(yīng)用，其特征在于，活菌繁殖促進(jìn)劑按重量份數(shù)計(jì)各組分為:乳糖0.1-2.5份，低聚果糖0.1-2.5份，殼聚糖0.1-2.5份，酵母粉0.1-2.5份，葉酸0.1-2.5份，檸檬酸0.1_2.5份；其優(yōu)選范圍乳糖0.5-2.5份，低聚果糖0.5-2.5份，殼聚糖0.5-2.5份，酵母粉0.5-2.5份，葉酸0.5-2.5份，檸檬酸0.5-2.5份；最佳值為乳糖1.4份，低聚果糖1.2份，殼聚糖0.8份，酵母粉1.2份，葉酸0.8份，檸檬酸1.5份。
4.如權(quán)利要求書(shū)1-4，任一一項(xiàng)所述粉末制劑的制備方法，其特征在于:將原料及輔料過(guò)40目篩，以25-40°C低溫干燥，配料充分混勻，低溫真空冷凍干燥后按劑量無(wú)菌包裝制成。
5.如權(quán)利要求書(shū)1-4所得復(fù)合糞腸球菌菌劑，其特征在于，將所述復(fù)合糞腸球菌菌劑加入到10-20倍各類養(yǎng)殖水體中，活化2-4小時(shí)，直接潑灑。
【文檔編號(hào)】C12N1/18GK103667140SQ201310668157
【公開(kāi)日】2014年3月26日 申請(qǐng)日期:2013年12月11日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月11日
【發(fā)明者】榮克明, 張學(xué)振, 馮憲斌 申請(qǐng)人:武漢市天辰生物科技有限公司