一株產(chǎn)油內(nèi)生真菌Salicorn5及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于食品生物【技術(shù)領(lǐng)域】，公開了一株產(chǎn)油內(nèi)生真菌Salicorn5及其應(yīng)用。一株產(chǎn)油內(nèi)生真菌Salicorn5，經(jīng)鑒定為新種，命名為畢士海篷子小克銀漢霉（Cunninghamella?bigelovii），保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物，保藏日期為2013年9月2日，保藏號(hào)為CGMCC?No.8094。本發(fā)明Salicorn5能大量產(chǎn)生包括油酸、亞油酸、γ-亞麻酸等多種不飽和油脂和甾醇，在食品、生物制藥、化工等領(lǐng)域具有廣泛的工業(yè)化應(yīng)用價(jià)值。
【專利說明】—株產(chǎn)油內(nèi)生真菌Sal icorn5及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于食品生物【技術(shù)領(lǐng)域】,涉及一株產(chǎn)油內(nèi)生真菌Salicorn5及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]鹽生海蘆笑俗稱海蓬子或海豆,學(xué)名鹽角草,海蘆笑(Salicornia bigelovii),是一種鮮美多汁、口感咸脆的綠色海水蔬菜，多生長在鹽度較高的海灘、鹽湖等地。由于生活在高鹽環(huán)境中，這些嗜鹽菌在長期進(jìn)化過程中形成獨(dú)特的代謝機(jī)制，能夠產(chǎn)生結(jié)構(gòu)新穎的次級(jí)代謝產(chǎn)物，在食品、生物制藥、化工等領(lǐng)域具有潛在的應(yīng)用價(jià)值，也為尋找有價(jià)值的高產(chǎn)油脂菌株提供新的途經(jīng)。
[0003]油脂是構(gòu)成和維持生命活動(dòng)的基本物質(zhì)，也是重要的工業(yè)原料。尤其是不飽和脂肪酸，隨著人們對(duì)其生理功效(降血酯、降糖、健腦、益智等)的深入了解，尋求富含不飽和脂肪酸的新油源，以彌補(bǔ)動(dòng)植物油源的不足成為當(dāng)前的研究熱點(diǎn)。傳統(tǒng)的食用油脂主要是來源于動(dòng)、植物的油脂。在當(dāng)今人口快速增長，能源日益減少的情況下，食用油脂呈現(xiàn)出價(jià)格不斷上漲甚至供不應(yīng)求的局面。針對(duì)這一情況，科學(xué)工作者正利用生物技術(shù)手段，從各種環(huán)境中篩選能夠產(chǎn)生油脂的微生物并利用發(fā)酵工程，把使用價(jià)值較低的農(nóng)副產(chǎn)品和食品工業(yè)的廢棄物轉(zhuǎn)化為食用油脂的研究，為食用油脂的來源開辟了一條新的途經(jīng)。研究過程中，如何篩選出油脂高產(chǎn)的微生物菌株并分類鑒定，無疑是實(shí)現(xiàn)工業(yè)化需要解決的首要問題，從蔬菜中篩選產(chǎn)油脂內(nèi)生真菌并確定其種屬地位，通過研究與比較菌株的特性與代謝產(chǎn)物的安全性，并對(duì)菌株的培養(yǎng)基成分與發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化以提高產(chǎn)量，就能預(yù)菌株是否具有的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值，而且，微生物細(xì)胞增殖快，生產(chǎn)周期短，生長所需的原料豐富，價(jià)格便宜，食品工業(yè)和農(nóng)業(yè)廢棄物都可以利用，從而降低成本并降低污染，具有可持續(xù)發(fā)展的優(yōu)點(diǎn)。用微生物方法生產(chǎn)食用油脂，不受季節(jié)和氣候變化的限制，能連續(xù)大規(guī)模生產(chǎn)，生產(chǎn)成本低，可以利用微生物細(xì)胞融合和細(xì)胞誘變等高科技方法，使微生物合成生產(chǎn)出比動(dòng)、植物油脂更符合人體需要的高營養(yǎng)食用油脂或具有某些特定脂肪酸的油脂，應(yīng)用前景十分廣闊。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明的目的是提供一株產(chǎn)油內(nèi)生真菌Salicorn5。
[0005]本發(fā)明的另一目的是提供該產(chǎn)油內(nèi)生真菌Salicorn5的應(yīng)用。
[0006]本發(fā)明的目的可通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):
[0007]—株產(chǎn)油內(nèi)生真菌Salicorn5,經(jīng)鑒定為新種，命名為畢士海篷子小克銀漢霉(Cunninghamella.bigelovii),保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏地址為:北京市朝陽區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào)，中國科學(xué)院微生物研究所，保藏日期為2013年9月2日，保藏號(hào)為CGMCC N0.8094。
[0008]所述的產(chǎn)油內(nèi)生真菌Salicorn5在制備不飽和油脂和甾醇中的應(yīng)用。
[0009]所述的不飽和油脂包括油酸(I)、亞油酸(II)，Y -亞麻酸(III)、2，3-二羥基油酸丙酯(IV)、2，3-二羥基硬脂酸丙酯(V)、二油酸酯(VI)、3-羥基-1，2-二油酸丙酯(VII)，1，3-二油酸-2-硬脂酸甘油酯(VIII)中的任意一種或多種；所述的留醇包括過氧化麥角甾醇(IX)、22，23- 二烯-3 β，5 α，6 α -三羥基-留醇(X)、豆留醇(XI)或麥角留醇(XII)中的
一種或多種。所述的不飽和油脂和留醇結(jié)構(gòu)如下所示:
[0010]
【權(quán)利要求】
1.一株產(chǎn)油內(nèi)生真菌Salicorn5，經(jīng)鑒定為新種，命名為畢士海篷子小克銀漢霉(Cunninghamella.bigelovii),保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物,保藏日期為2013年9月2日，保藏號(hào)為CGMCC N0.8094。
2.權(quán)利要求1所述的產(chǎn)油內(nèi)生真菌Salicorn5在制備不飽和油脂和留醇中的應(yīng)用。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于所述的不飽和油脂包括油酸、亞油酸，Y -亞麻酸、2，3- 二羥基油酸丙酯、2，3- 二羥基硬脂酸丙酯、二油酸酯、3-羥基-1，2- 二油酸丙酯，1，3-二油酸，2-硬脂酸甘油酯中的任意一種或多種；所述的留醇包括過氧化麥角甾醇、22，23- 二烯-3 β，5 α，6 α -三羥基-留醇、豆留醇或麥角留醇中的一種或多種。
4.利用權(quán)利要求1所述的產(chǎn)油內(nèi)生真菌Salicorn5制備不飽和油脂和留醇的方法，其特征在于選自以下任意一種方法: 方法1:將權(quán)利要求1所述的產(chǎn)油內(nèi)生真菌Salicorn5菌株接種到液體培養(yǎng)基中，25~280C，100~130r/min搖床培養(yǎng)6~8d后，發(fā)酵液經(jīng)布氏漏斗過濾得到菌絲體和發(fā)酵液，菌絲體用高速勻漿器勻漿后，用體積比為8:2的丙酮-水溶液浸提22~25h，減壓濃縮至不含丙酮，得到丙酮提取物，再用等量的乙酸乙酯萃取三次，得到乙酸乙酯提取液；發(fā)酵液用等量的乙酸乙酯萃取三次得到又一乙酸乙酯提取液，合并兩次乙酸乙酯提取液，減壓濃縮至干，得到富含多不飽和脂肪酸和留醇的粗油萃取物； 方法2:將權(quán)利要求1所述的產(chǎn)油內(nèi)生真菌Salicorn5菌株接種到液體培養(yǎng)基中，靜置培養(yǎng)25~35d，發(fā)酵液經(jīng)布氏漏斗過濾得到菌絲體和發(fā)酵液，菌絲體用高速勻漿器勻漿后，用體積比為8:2的丙酮-水溶液浸提22~25h，減壓濃縮至不含丙酮，得到丙酮提取物，再用等量的乙酸乙酯萃取三次，得到乙酸乙酯提取液；發(fā)酵液用等量的乙酸乙酯萃取三次得到又一乙酸乙酯提取液，合并兩次乙酸乙酯提取液，減壓濃縮至干，得到富含多不飽和脂肪酸和留醇的粗油萃取物； 方法I和方法2中所述液體 培養(yǎng)基的配方為:馬鈴薯200g.L_\麥芽糖20g.L—1，甘露醇20g.I71,葡萄糖IOg.L4,味精5g.L4,蛋白胨5g.L4,酵母膏3g.I71,氯化鈉3g.L-1,pH 為 7.0。
5.權(quán)利要求1所述的產(chǎn)油內(nèi)生真菌Salicorn5作為食品、醫(yī)藥或化工產(chǎn)業(yè)的添加劑或原輔料的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】C12P33/00GK103740598SQ201310649131
【公開日】2014年4月23日 申請(qǐng)日期:2013年12月3日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月3日
【發(fā)明者】辛志宏, 趙育卉, 王惠, 王曉敏 申請(qǐng)人:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)