負(fù)向調(diào)控I型干擾素通路的miRNA分子及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及負(fù)向調(diào)控I型干擾素通路的miRNA分子及其應(yīng)用。首次發(fā)現(xiàn)和證明了小核糖核酸Hsa-miR-127-3p與系統(tǒng)性紅斑狼瘡密切相關(guān)。本發(fā)明人還進一步驗證了所述miRNA的作用靶通路，發(fā)現(xiàn)Hsa-miR-127-3p可抑制I型干擾素通路，從而可用于防治I型干擾素通路異?；罨嚓P(guān)疾病。
【專利說明】負(fù)向調(diào)控I型干擾素通路的miRNA分子及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于分子生物學(xué)領(lǐng)域；更具體地，本發(fā)明涉及負(fù)向調(diào)控I型干擾素通路的miRNA分子及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]I型干擾素，是一類具有抗病毒、抗細(xì)菌感染和免疫調(diào)節(jié)功能的細(xì)胞因子，在先天免疫和適應(yīng)免疫發(fā)揮著重要作用[Theofilopoulos, A.N., R.Baccala, etal.Type I Interferons ( α /β) in Immunity and Autoimmunity.Annual Review ofImmunology.2005.23(1):307-335]。近來研究發(fā)現(xiàn)，在自身免疫疾病系統(tǒng)性紅斑狼瘡中，I型干擾素通路是異?；罨模罨腎型干擾素通路可以激活自身反應(yīng)的T細(xì)胞、DC細(xì)胞和B細(xì)胞等,從而促進自身免疫反應(yīng),加重系統(tǒng)紅斑狼瘡病情[Virginia Pascual, JacquesBanchereau.Systemic Lupus Erythematosus and Type I interferon.NatureImmunology ；L Ronnblom.Type I Interferon in Systemic Lupus Erythematosus.Arthriti s&Rheumati sm.2006]。
[0003]miRNA是一類19_22nt長的不編碼蛋白質(zhì)的單鏈小分子RNA，廣泛存在于真核生物中，主要對靶基因起負(fù)調(diào)控作用。它通過核酸序列互補結(jié)合到靶mRNA的3’UTR區(qū)來抑制翻譯或促進靶mRNA的降解。隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)miRNA在不同的生物學(xué)過程中都發(fā)揮著重要的作用。已有的研究表明,在免疫系統(tǒng)中，miRNA參與了包括造血細(xì)胞的分化、免疫細(xì)胞內(nèi)的信號傳導(dǎo)、免疫細(xì)胞抗病毒功能的發(fā)揮等一系列免疫學(xué)過程。 [0004]但是，關(guān)于miRNA在I型干擾素通路中的功能研究工作卻是甚少。因此，該方向的深入研究是本領(lǐng)域亟需進行的，從而為相關(guān)疾病的預(yù)防、診斷和治療提供新的途徑。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005]本發(fā)明的目的在于提供負(fù)向調(diào)控I型干擾素通路的miRNA分子及其應(yīng)用。
[0006]在本發(fā)明的第一方面，提供Hsa-miR-127_3p、其類似物、前體、上調(diào)劑或它們的變異體的用途，用于制備預(yù)防、緩解或治療I型干擾素通路異常活化相關(guān)疾病的組合物。
[0007]在一個優(yōu)選例中，所述的I型干擾素通路異?；罨嚓P(guān)疾病包括(但不限于):系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、I型糖尿病、干燥綜合癥、肌炎、系統(tǒng)性硬皮病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、HIV相關(guān)認(rèn)知障礙、腦炎或Aicard1-GoutiSres綜合癥。
[0008]在另一優(yōu)選例中，所述的I型干擾素通路異?；罨嚓P(guān)疾病為系統(tǒng)性紅斑狼瘡。
[0009]在另一優(yōu)選例中，所述的Hsa-miR-127_3p的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
[0010]在另一優(yōu)選例中，所述的Hsa-miR-127-3p的前體的核苷酸序列如SEQ ID N0:2所
/Jn ο
[0011]在另一優(yōu)選例中，所述的Hsa-miR-127-3p的變異體是5 ’端第2_7位堿基為CGGAUC，第8位之后一個或多個(如1-5個；較佳地1_3個；更佳地1_2個)堿基被替換的
變異體。[0012]在另一優(yōu)選例中，所述的組合物:用于抑制I型干擾素誘導(dǎo)的下游基因表達；較佳地，所述下游基因包括:CCL2、CXCLlO或IFIT3 ;或用于抑制STATl和STAT2磷酸化。
[0013]在另一優(yōu)選例中，所述的Hsa-miR-127-3p的類似物包括(但不限于):Hsa-miR-127_3p 成熟體模擬物(mimics)或 Agomir-127_3p。
[0014]在本發(fā)明的另一方面，提供Hsa-miR-127-3p的用途，用于作為篩選預(yù)防、緩解或治療I型干擾素通路異?；罨嚓P(guān)疾病的潛在物質(zhì)的靶標(biāo)；或用于篩選預(yù)防、緩解或治療I型干擾素通路異?；罨嚓P(guān)疾病的物質(zhì)。
[0015]在本發(fā)明的另一方面，提供一種篩選預(yù)防、緩解或治療I型干擾素通路異?；罨嚓P(guān)疾病的潛在物質(zhì)的方法，所述方法包括步驟:
[0016](a)將候選物質(zhì)與表達Hsa-miR-127-3p的體系接觸；
[0017](b)觀察候選物質(zhì)對于Hsa-miR-127_3p的表達的影響；
[0018]其中，若所述候選物質(zhì)可提高Hsa-miR-127_3p的表達,貝U表明該候選物質(zhì)是預(yù)防、緩解或治療I型干擾素通路異?；罨嚓P(guān)疾病的潛在物質(zhì)。
[0019]在另一優(yōu)選例中，步驟(a)包括:在測試組中，將候選物質(zhì)加入到表達Hsa-miR-127-3p的體系中；和/或
[0020]步驟(b)包括:檢測測試組的體系中Hsa-miR-127-3p的表達，并與對照組比較，其中所述的對照組是不添加所述候選物質(zhì)的表達Hsa-miR-127-3p的體系；
[0021]如果測試組Hsa-miR-127_3p的表達在統(tǒng)計學(xué)上高于(優(yōu)選顯著高于，如高20%，更優(yōu)選高40%，進一步優(yōu)選高6·0%或更高)對照組，就表明該候選物是預(yù)防、緩解或治療I型干擾素通路異?；罨嚓P(guān)疾病的物質(zhì)。
[0022]在另一優(yōu)選例中，所述的體系包括:細(xì)胞體系，亞細(xì)胞體系，動物體系，組織體系。較佳地，為細(xì)胞體系。
[0023]本發(fā)明的其它方面由于本文的公開內(nèi)容，對本領(lǐng)域的技術(shù)人員而言是顯而易見的。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0024]圖 1A、Hsa-miR-127-3p mimics (mir-127-1FNlOOO)對于 Type I IFN 誘導(dǎo)的ISRE-熒光素酶活性的影響，以陰性對照mimics作為對照(NC-1FN1000)。
[0025]圖1B、Hsa-miR-127-3p mimics (mir-127-1FNlOOO)對于 Type I IFN 誘導(dǎo)的GAS-熒光素酶活性的影響，以NC-1FN1000作為對照。
[0026]圖 lC、Hsa-miR-127_3p mimics (miR-127)以及 hsa-miR-127_3p seed mutl( seedmutl)和 hsa-miR-127_3p seed mut2 (seed mut2)對于 Type I IFN 誘導(dǎo)的 ISRE-突光素酶活性的影響，以陰性對照mimics作為對照(NC)。
[0027]圖2A、RT-PCR 檢測 Hsa-miR-127-3p mimics 對于 Type I IFN 誘導(dǎo)的下游基因表達如CCL2、CXCLlO和IFIT3的mRNA表達的影響。以NC-1FN1000作為對照。
[0028]圖2B、Elisa檢測Hsa-miR-127_3p mimics對于Type I IFN誘導(dǎo)的下游基因表達如CCL2、CXCLlO的蛋白表達的影響。以NC-1FN1000作為對照。
[0029]圖3A、Western Blot 檢測 Hsa-miR-127_3p 對于 Hela 細(xì)胞內(nèi) STATl 磷酸化以及蛋白表達的影響。以NC-1FN1000作為對照。[0030]圖 3B、Western Blot 檢測 Hsa-miR-127_3p 對于 Hela 細(xì)胞內(nèi) STAT2 磷酸化以及蛋白表達的影響。以NC-1FN1000作為對照。
[0031 ] 圖4A、PBS緩沖液對照組的肺組織H&E染色切片。
[0032]圖4B、miR-127類似物實驗組的肺組織H&E染色切片。
[0033]圖4C、PBS緩沖液對照組、miR-127類似物實驗組的肺出血的發(fā)生率。
【具體實施方式】
[0034]本發(fā)明人經(jīng)過廣泛的研究，首次發(fā)現(xiàn)和證明了小核糖核酸(miRNA)Hsa-miR-127-3p與系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)密切相關(guān)。本發(fā)明人還進一步驗證了所述miRNA的作用靶通路。并且，本發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)Hsa-miR-127-3p可抑制I型干擾素通路，從而可用于防治I型干擾素通路異?；罨嚓P(guān)疾病(如系統(tǒng)性紅斑狼瘡)。在此基礎(chǔ)上完成了本發(fā)明。
[0035]本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，一種小核糖核酸Hsa-miR-127-3p可調(diào)控I型干擾素通路。所述的小核糖核酸具有以下序列結(jié)構(gòu):
[0036]5，UCGGAUCCGUCUGAGCUUGGCU3，(SEQ ID NO:1)；
[0037]所述的Hsa-miR-127_3p的前體具有如下結(jié)構(gòu)(SEQ ID NO:2):
[0038]5，UGUGAUCAC腳CUCCAGCCUGCUGAAGCUCAGAGGGCUCUGAUUCAGAAAGAUCAUCGGAUCCGUCUGAGCUUGGCUG⑶CGGAA⑶CUCAUCAUC3，。
[0039]本發(fā)明人將Hsa-miR-127_3p的mimics及陰性對照mimics轉(zhuǎn)染到Hela細(xì)胞中，利用突光素酶報告基因?qū)嶒?，檢測Hsa-miR-127-3p對I型干擾素通路的影響。通過在Hela細(xì)胞中過表達Hsa-miR-127-3p，發(fā)現(xiàn)Hsa-miR-127_3p能夠抑制Type I IFN誘導(dǎo)的ISRE/GAS-熒光素酶的活性。進一步檢測Type I IFN誘導(dǎo)的下游基因發(fā)現(xiàn)，Hsa-miR-127-3p能顯著抑制CCL2、CXCLlO和IFIT3的表達。磷酸化的STATl和STAT2在整個Type I IFN通路活化過程中起著重要作用，磷酸化的STATl和STAT2進入核內(nèi)，激活Type I IFN誘導(dǎo)的下游基因表達。Western Blot實驗證實，Hsa-miR-127_3p能顯著抑制STATl和STAT2磷酸化，從而抑制Type I IFN通路活化。本發(fā)明人的研究表明，在整個I型干擾素通路活化過程中，Hsa-miR-127-3p起著十分重要的作用。它通過抑制STATl和STAT2磷酸化，對整個I型干擾素通路起負(fù)向調(diào)控作用。其作為一個新的藥物干預(yù)靶點，為治療包括病毒感染、腫瘤、免疫排斥、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等疾病帶來新的希望。
[0040]在得知了所述的小核糖核酸的用途后，可以采用本領(lǐng)域熟知的多種方法來篩選調(diào)控I型干擾素通路的物質(zhì)。
[0041]在本發(fā)明的一種優(yōu)選方式中，提供一種篩選方法，所述的方法包括:(a)將候選物質(zhì)與表達Hsa-miR-127-3p的體系接觸；(b)觀察候選物質(zhì)對于Hsa-miR-127-3p的表達的影響；其中，若所述候選物質(zhì)可提高Hsa-miR-127-3p的表達,貝U表明該候選物質(zhì)是預(yù)防、緩解或治療I型干擾素通路異常活化相關(guān)疾病的潛在物質(zhì)。
[0042]更優(yōu)選的，可通過設(shè)置對照組來觀察候選物質(zhì)對于Hsa-miR-127-3p的表達的影響狀況；所述對照組是不添加所述候選物質(zhì)的表達Hsa-miR-127-3p的體系。
[0043]由于Hsa-miR-127_3p的上調(diào)劑可調(diào)節(jié)Hsa-miR-127_3p的表達或活性，因此，所述的Hsa-miR-127-3p的上調(diào)劑也可被應(yīng)用于本發(fā)明，其可通過上調(diào)Hsa-miR-127_3p的表達或活性，來發(fā)揮負(fù)向調(diào)控I型干擾素通路的作用。
[0044]所述的Hsa-miR-127_3p的上調(diào)劑是指任何可維持Hsa-miR-127_3p的穩(wěn)定性、促進Hsa-miR-127-3p表達、延長Hsa-miR-127-3p有效作用時間的物質(zhì)，這些物質(zhì)均可用于本發(fā)明，作為可用于調(diào)控(特別是抑制)1型干擾素通路有用的物質(zhì)。
[0045]Hsa-miR-127_3p的前體也被包含在本發(fā)明中，作為調(diào)控(特別是抑制)1型干擾素通路有用的物質(zhì)。天然狀態(tài)下，動物來源的miRNA是在動物細(xì)胞中由前體miRNA加工獲得的miRNA。因此，本領(lǐng)域公知Hsa-miR-127-3p的前體可以在體內(nèi)演變?yōu)镠sa-miR-127_3p，發(fā)揮作用。
[0046]所述的Hsa-miR-127_3p或其前體或類似物的變異體也被包含在本發(fā)明中，只要這些變異體中，相應(yīng)于Hsa-miR-127-3p的5’端第2_7位的堿基是保守的，為CGGAUC。所述的Hsa-miR-127-3p或其前體或類似物的變異體中，相應(yīng)于Hsa-miR-127_3p的5’端第8位之后的堿基是可以適當(dāng)變化的，由于這些堿基并非為與靶序列結(jié)合的關(guān)鍵位點，并非位于種子區(qū)域；因此，這些位置上一個或多個(如1-5個；較佳地1-3個；更佳地1-2個)堿基被替換的變異體也被包含在本發(fā)明中。本領(lǐng)域公知，niRNA與靶序列的結(jié)合以及發(fā)揮下調(diào)作用，關(guān)鍵在于種子區(qū)域的序列。
[0047]在得知了所述Hsa-miR-127_3p的用途后，可以采用本領(lǐng)域熟知的多種方法來將所述的Hsa-miR-127-3p或其前體的編碼基因、或藥物組合物給藥于需要治療的受試者(如SLE患者)。優(yōu)選的，可采用基因治療的手段進行。比如，可直接將Hsa-miR-127-3p或其前體、上調(diào)劑、類似物或它們的變異體通過諸如注射等方法給藥于受試者；或者，可通過一定的途徑將攜帶Hsa-miR-127-3p或其前體、上調(diào)劑、類似物或它們的變異體的表達單位遞送到靶點上，并使之表達Hsa-miR-127-3p，這些均是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的。
[0048]本發(fā)明的Hsa-miR-127-3p或其前體、上調(diào)劑、類似物或它們的變異體，當(dāng)在治療上進行施用(給藥)時，可·提供不同的效果。通常，可將這些物質(zhì)配制于無毒的、惰性的和藥學(xué)上可接受的水性載體介質(zhì)中，其中PH通常約為5-8，較佳地pH約為6-8，盡管pH值可隨被配制物質(zhì)的性質(zhì)以及待治療的病癥而有所變化。配制好的藥物組合物可以通過常規(guī)途徑進行給藥，其中包括(但并不限于):肌注、靜脈、或皮下給藥。
[0049]所述的Hsa-miR-127-3p或其前體、上調(diào)劑、類似物或它們的變異體可直接用于疾病治療，例如，用于系統(tǒng)性紅斑狼瘡的治療。在使用本發(fā)明的Hsa-miR-127-3p或其前體、上調(diào)劑、類似物或它們的變異體時，還可同時使用其他治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡的藥劑。
[0050]本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，它含有安全有效量的本發(fā)明的Hsa-miR-127_3p或其前體、上調(diào)劑、類似物或它們的變異體以及藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。這類載體包括(但并不限于):鹽水、緩沖液、葡萄糖、水、甘油、乙醇、及其組合。藥物制劑應(yīng)與給藥方式相匹配。本發(fā)明的藥物組合物可以被制成針劑形式，例如用生理鹽水或含有葡萄糖和其他輔劑的水溶液通過常規(guī)方法進行制備。藥物組合物如針劑、溶液宜在無菌條件下制造?；钚猿煞值慕o藥量是治療有效量，例如每天約0.1微克/千克體重-約10毫克/千克體重。
[0051]使用藥物組合物時，是將安全有效量的所述Hsa-miR-127-3p或其前體、上調(diào)劑、類似物或它們的變異體施用于哺乳動物，其中該安全有效量通常至少約0.1微克/千克體重，而且在大多數(shù)情況下不超過約10毫克/千克體重，較佳地該劑量是約0.1微克/千克體重-約100微克/千克體重。當(dāng)然，具體劑量還應(yīng)考慮給藥途徑、病人健康狀況等因素，這些都是熟練醫(yī)師技能范圍之內(nèi)的。
[0052]通過給予受試者所述的Hsa-miR-127-3p或其前體、上調(diào)劑、類似物或它們的變異體，可提高受試者中該小核糖核酸的含量、表達，從而預(yù)防或治療該小核糖核酸降低相關(guān)的疾病，如干擾素通路異常激活相關(guān)疾病。已有研究顯示，I型干擾素通路的異常激活在狼瘡發(fā)病中發(fā)揮著關(guān)鍵的作用。
[0053]下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件如J.薩姆布魯克等編著，分子克隆實驗指南，第三版，科學(xué)出版社，2002中所述的條件，或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則百分比和份數(shù)按重量計算。
[0054]除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學(xué)用語與本領(lǐng)域熟練人員所熟悉的意義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應(yīng)用于本發(fā)明中。文中所述的較佳實施方法與材料僅作示范之用。
[0055]材料和方法
[0056]1、細(xì)胞培養(yǎng)
[0057]Hela細(xì)胞來源于美國菌種保藏中心(ATCC)。培養(yǎng)于DMEM(加10%小牛血清，加100U/ml青霉素-鏈霉素)培養(yǎng)基中，37°C 5%C02。
[0058]2、熒光素酶報告基因?qū)嶒?br>
[0059]Hela細(xì)胞培養(yǎng)于96 孔板，細(xì)胞50-60%融合時，用Lipofectaminea?2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法共轉(zhuǎn)染ISRE報告基因載體(購自Clonetech，全名p-1SRE-luc)或GAS報告基因載體(購自 Clonetech,全名 p-GAS-luc) (lOOng/ 孔)和 Hsa-miR-127_3p (IOOnM/ 孔)成熟體mimics (購自上海吉瑪公司)或陰性對照mimics (NC)(購自上海吉瑪公司)，4hr后換液，24hr后加入Type I IFN(1000u/ml，PBL公司)刺激(經(jīng)過刺激后的以IFN1000表示)，刺激6hr后，除去上清，加入30uL/孔裂解液(Promega公司)，150轉(zhuǎn)室溫?fù)u30分鐘，收集蛋白，取5uL上機檢測，底物購自Promega，F(xiàn)irefly和Renilla底物各60uL/孔。
[0060]Hsa-miR-127-3p mimics 序列:5，UCGGAUCCGUCUGAGCUUGGCU3，；
[0061]陰性對照mimics 序列:5’ UUCUCCGAACGUGUCACGU3’ (SEQ ID NO: 3)；
[0062]上述序列被用于直接轉(zhuǎn)細(xì)胞。
[0063]3、實時熒光定量 PCR (Real-time PCR)
[0064]Hela細(xì)胞培養(yǎng)于24孔，用Lipofectaminea?2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)染Hsa-miR-127-3p (IOOnM/孔)及陰性對照(NC)的成熟體mimics, 4hr后換液,24hr后加入Type I IFN(1000u/ml, PBL公司)刺激，刺激6hr后，除去上清，使用酚氯仿法抽提，每孔細(xì)胞使用0.5mLTrizol (Invitrogen公司)收集RNA,加入IOOuL氯仿混勻后靜置3分鐘，12000g4°C離心15分鐘，吸取上清并加入300uL異丙醇混勻后靜置10分鐘，12000g4°C離心10分鐘，除去上清，用500uL的75%的乙醇洗滌兩次，每次7500g4°C離心5分鐘。使用Nanodrop測定其濃度。然后，經(jīng)TaKaRa PrimeScript RT reagent kit逆轉(zhuǎn)錄,加樣體系為10ul，逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)條件為37°C、15min85°C、5s。逆轉(zhuǎn)錄后的cDNA，采用TaKaRa SYBRPremix Ex Taq,加樣體系為 5ul,進行實時突光定量 PCR。在 Applied Biosystems7900HTFast Real-Time PCR System 上進行檢測。
[0065]實時定量引物如表1。[0066]表1
【權(quán)利要求】
1.Hsa-miR-127-3p、其類似物、前體、上調(diào)劑或它們的變異體的用途，用于制備預(yù)防、緩解或治療I型干擾素通路異常活化相關(guān)疾病的組合物。
2.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的I型干擾素通路異?；罨嚓P(guān)疾病包括:系統(tǒng)性紅斑狼瘡、I型糖尿病、干燥綜合癥、肌炎、系統(tǒng)性硬皮病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、HIV相關(guān)認(rèn)知障礙、腦炎或Aicard1-GoutiSres綜合癥。
3.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的I型干擾素通路異?；罨嚓P(guān)疾病為系統(tǒng)性紅斑狼瘡。
4.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的Hsa-miR-127-3p的核苷酸序列如SEQID NO:1 所示。
5.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的Hsa-miR-127-3p的前體的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
6.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的Hsa-miR-127-3p的變異體是5’端第2-7位堿基為CGGAUC，第8位之后一個或多個堿基被替換的變異體。
7.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的組合物: 用于抑制I型干擾素誘導(dǎo)的下游基因表達；較佳地，所述下游基因包括:CCL2、CXCLlO或IFIT3 ;或 用于抑制STATl和STAT2磷酸化。
8.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的Hsa-miR-127-3p的類似物包括:Hsa-miR-127-3p 成熟體模擬物或 Agomir-127_3p。`
9.Hsa-miR-127-3p的用途,用于作為篩選預(yù)防、緩解或治療I型干擾素通路異?；罨嚓P(guān)疾病的潛在物質(zhì)的靶標(biāo)；或用于篩選預(yù)防、緩解或治療I型干擾素通路異?；罨嚓P(guān)疾病的物質(zhì)。
10.一種篩選預(yù)防、緩解或治療I型干擾素通路異?；罨嚓P(guān)疾病的潛在物質(zhì)的方法，其特征在于，所述方法包括步驟: (a)將候選物質(zhì)與表達Hsa-miR-127-3p的體系接觸； (b)觀察候選物質(zhì)對于Hsa-miR-127-3p的表達的影響； 其中，若所述候選物質(zhì)可提高Hsa-miR-127_3p的表達,貝U表明該候選物質(zhì)是預(yù)防、緩解或治療I型干擾素通路異?；罨嚓P(guān)疾病的潛在物質(zhì)。
11.如權(quán)利要求10所述的方法，其特征在于， 步驟(a)包括:在測試組中，將候選物質(zhì)加入到表達Hsa-miR-127-3p的體系中；和/或 步驟(b)包括:檢測測試組的體系中Hsa-miR-127-3p的表達，并與對照組比較，其中所述的對照組是不添加所述候選物質(zhì)的表達Hsa-miR-127-3p的體系； 如果測試組Hsa-miR-127-3p的表達在統(tǒng)計學(xué)上高于對照組，就表明該候選物是預(yù)防、緩解或治療I型干擾素通路異常活化相關(guān)疾病的物質(zhì)。
【文檔編號】C12Q1/68GK103861122SQ201310625948
【公開日】2014年6月18日 申請日期:2013年11月28日 優(yōu)先權(quán)日:2012年12月7日
【發(fā)明者】沈南, 曲波, 韓曉, 梁棟 申請人:中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院