維生素d在常溫鈍化菠蘿蛋白酶方面的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種維生素D在常溫鈍化菠蘿蛋白酶方面的應(yīng)用，其方法為菠蘿蛋白酶液的配制：取1g菠蘿蛋白酶（食品級，比活單位：50萬U/g）稀釋1000倍。即先定溶至100ml，再取以上酶液5ml定溶至50ml。添加維生素D：在上述酶液中分別加入0.00001-0.00002mg（維生素D）/mL（酶液），每毫升酶液中含0.02mg菠蘿蛋白酶。本發(fā)明鈍化效果好且安全性高，用在肉品上能保證肉品嫩度適合。
【專利說明】維生素D在常溫鈍化菠蘿蛋白酶方面的應(yīng)用
[0001]
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]本發(fā)明涉及維生素D在常溫鈍化菠蘿蛋白酶方面的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0003]目前，蛋白酶已普遍用于肉類嫩化中，常見的有木瓜蛋白酶，菠蘿蛋白酶，無花果蛋白酶等。肉通過蛋白酶的適度降解可以變得柔嫩多汁，口感更好。另外，蛋白酶可促進蛋白質(zhì)的降解，加速肉制品的成熟和風味的形成。因此，有研究者將酶制劑用于發(fā)酵香腸中以促進發(fā)酵香腸的快速成熟。有報道將脂酶和蛋白酶同時添加到發(fā)酵香腸中，發(fā)現(xiàn)部分游離氨基酸和游離脂肪酸的含量增加。在發(fā)酵香腸中添加蛋白酶，能促進干發(fā)酵香腸的蛋白水解從而提高感官特性且不會造成產(chǎn)品軟化，更重要的是能縮短香腸的成熟時間，產(chǎn)品風味與不加酶組相同，也沒有造成香腸質(zhì)地的軟化。
[0004]但酶解也帶來了一些問題，蛋白酶通過水解肉中的肌纖維蛋白，將蛋白質(zhì)分解成一些肽段，氨基酸等小分子物質(zhì)，這樣經(jīng)過酶嫩化后的肉在蒸煮時，肽段，氨基酸等小分子物質(zhì)容易流失，從而造成大量的蛋白質(zhì)損失并且降低肉品的保水性能。此外，蛋白酶過度降解肌纖維蛋白，肉質(zhì)會非常柔軟，失去固有彈性，蛋白酶解產(chǎn)物往往因此帶有苦味肽使得產(chǎn)品口感劣變，從而降低食用品質(zhì)。目前有報道稱(謝超，肉類工業(yè)，2003)酶類由于具有廣泛的底物專一性，易導致肉過嫩，空間結(jié)構(gòu)坍塌，對于整體評價、風味、質(zhì)地評價造成負面影響。T.L.Rolan在用蛋白酶對牛肉嫩化實驗中發(fā)現(xiàn)，用植物蛋白酶處理過的牛肉，嫩度確實有所增加，結(jié)締組織量減少。但同時，由于蛋白酶不但可以降解結(jié)締組織，同時又降解肌肉纖維蛋白，引起肉質(zhì)過嫩，質(zhì)地軟糊。在整體評價中，此類肉被評為輕微令人不受歡迎。并且還可導致肉的不良風味一腐臭味產(chǎn)生。
[0005]為了防止肉制品中外源蛋白酶對肉類蛋白的過渡水解，人們通常采用高溫滅酶的方法將其鈍化。楊遠帆(集美大學學報，2008)等添加兩種蛋白酶對鰱魚蛋白質(zhì)降解時，采用高溫滅酶方法終止酶的水解作用。段茂華等(肉類研究，2008)研究嫩化和TG酶改善牛肉制品時，滅酶采用75°C高溫下處理5min，高溫滅酶后的肉已成熟，只能用于生產(chǎn)牛肉干，肉脯等熟肉制品，限制了在生肉制品中的運用范圍。所以尋找一種常溫下鈍化菠蘿蛋白酶的方法對酶法改性肉制品的開發(fā)起到極其重要的作用，在常溫下鈍化蛋白酶的方法一般有化學和物理兩種方法，化學方法通過添加化學物質(zhì)影響酶的結(jié)構(gòu)將其鈍化，如菠蘿蛋白酶能被碘乙酸等鈍化。但碘乙酸具有毒性，不適用于食品行業(yè)。
[0006]維生素又名維他命，通俗來講，即維持生命的物質(zhì)，是維持人體生命活動必須的一類有機物質(zhì)，也是保持人體健康的重要活性物質(zhì)。維生素在體內(nèi)的含量很少，但不可或缺。各種維生素的化學結(jié)構(gòu)以及性質(zhì)雖然不同，但它們卻有著以下共同點:
①維生素均以維生素原(維生素前體)的形式存在于食物中；
·②維生素不是構(gòu)成機體組織和細胞的組成成分，它也不會產(chǎn)生能量，它的作用主要是參與機體代謝的調(diào)節(jié)；
③大多數(shù)的維生素，機體不能合成或合成量不足，不能滿足機體的需要，必須經(jīng)常通過食物中獲得；
④人體對維生素的需要量很小，日需要量常以毫克(mg)或微克(μg)計算，但一旦缺乏就會引發(fā)相應(yīng)的維生素缺乏癥，對人體健康造成損害；
維生素與碳水化合物、脂肪和蛋白質(zhì)3大物質(zhì)不同，在天然食物中僅占極少比例，但又為人體所必需。有些維生素如:B6.K等能由動物腸道內(nèi)的細菌合成，合成量可滿足動物的需要。動物細胞可將色氨酸轉(zhuǎn)變成煙酸(一種B族維生素)，但生成量不敷需要；維生素D除靈長類(包括人類)及豚鼠以外，其他動物都可以自身合成。植物和多數(shù)微生物都能自己合成維生素，不必由體外供給。許多維生素是輔基或輔酶的組成部分。
[0007]維生素是人和動物營養(yǎng)、生長所必需的某些少量有機化合物，對機體的新陳代謝、生長、發(fā)育、健康有極重要作用。如果長期缺乏某種維生素，就會引起生理機能障礙而發(fā)生某種疾病。一般由食物中取得?，F(xiàn)在發(fā)現(xiàn)的有幾十種，如維生素D、維生素B、維生素D等。 [0008]維生素是人體代謝中必不可少的有機化合物。人體猶如一座極為復雜的化工廠，不斷地進行著各種生化反應(yīng)。其反應(yīng)與酶的催化作用有密切關(guān)系。酶要產(chǎn)生活性，必須有輔酶參加。已知許多維生素是酶的輔酶或者是輔酶的組成分子。因此，維生素是維持和調(diào)節(jié)機體正常代謝的重要物質(zhì)?？梢哉J為，最好的維生素是以“生物活性物質(zhì)”的形式，存在于人體組織中。
[0009]維生素D簡介為類固醇衍生物，屬脂溶性維生素。維生素D與動物骨骼的鈣化有關(guān)，故又稱為鈣化醇。它具有抗佝僂病的作用，在動物的肝、奶及蛋黃中含量較多，尤以魚肝油含量最豐富。天然的維生素D有兩種，麥角鈣化醇(D2)和膽鈣化醇(D3)。植物油或酵母中所含的麥角固醇(24-甲基-22脫氫-7-脫氫膽固醇)，經(jīng)紫外線激活后可轉(zhuǎn)化為維生素D2。在動物皮下的7-脫氫膽固醇，經(jīng)紫外線照射也可以轉(zhuǎn)化為維生素D3，因此麥角固醇和7-脫氫膽固醇常被稱作維生素D原。在動物體內(nèi)，它們必須在動物體內(nèi)進行一系列的代謝轉(zhuǎn)變，才能成為具有活性的物質(zhì)。這一轉(zhuǎn)變主要是在肝臟及腎臟中進行的羥化反應(yīng)，首先在肝臟羥化成25-羥維生素D3，然后在腎臟進一步羥化成為1，25-(0H)2-D3，后者是維生素D3在體內(nèi)的活性形式。1，25-二羥維生素D3具有顯著的調(diào)節(jié)鈣、磷代謝的活性(圖11)。它促進小腸粘膜對磷的吸收和轉(zhuǎn)運，同時也促進腎小管對鈣和磷的重吸收。在骨骼中，它既有助于新骨的鈣化，又能促進鈣由老骨髓質(zhì)游離出來，從而使骨質(zhì)不斷更新，同時，又能維持血鈣的平衡。由于1，25-二羥維生素D3在腎臟合成后轉(zhuǎn)入血液循環(huán)，作用于小腸、腎小管、骨組織等遠距離的靶組織，基本上符合激素的特點，故有人將維生素D歸入激素類物質(zhì)。維生素D有調(diào)節(jié)鈣的作用，所以是骨及牙齒正常發(fā)育所必需。特別在孕婦、嬰兒及青少年需要量大。如果此時維生素D量不足，則血中鈣與磷低于正常值，會出現(xiàn)骨骼變軟及畸形:發(fā)生在兒童身上稱為佝僂??；在孕婦身上為骨質(zhì)軟化癥。1克維生素D為40000000國際單位。嬰兒、青少年、孕婦及喂乳者每日需要量為400~800單位。
[0010]維生素D于1926年由化學家卡爾首先從魚肝油中提取。它是淡黃色晶體，熔點115~118°C，不溶于水，能溶于醚等有機溶劑。它化學性質(zhì)穩(wěn)定，在20(TC下仍能保持生物活性，但易被紫外光破壞，因此，含維生素D的藥劑均應(yīng)保存在棕色瓶中。維生素D的生理功能是幫助人體吸收磷和鈣，是造骨的必需原料，因此缺少維生素D會得佝僂癥。在魚肝油、動物肝、蛋黃中它的含量較豐富。人體中維生素D的合成跟曬太陽有關(guān)，因此，適當?shù)毓庹沼欣】怠?br>
[0011]每天的需求量
0.0005至0.01毫克。35克鯡魚片，60克鮭魚片，50克鰻魚或2個雞蛋加150克蘑菇。只有休息少的人，才需要額吃些含維生素D的食品或制劑。
[0012]功效:維生素D是形成骨骼和軟骨的發(fā)動機，能使牙齒堅硬。對神經(jīng)也很重要，并對炎癥的抑制作用。
[0013]人們通過常常途徑攝入的維生素D的量很難達到正常的生長需求，在一定程度上影響了人類的健康，使得某些病癥容易發(fā)生。
[0014]
【發(fā)明內(nèi)容】
[0015]本發(fā)明的目的在于提供鈍化效果好且安全性高，用在肉品上能保證肉品嫩度適合的維生素D在常溫鈍化菠蘿蛋白酶方面的應(yīng)用，同時能烹飪的肉中適當補充人體必須的維
生素D。
[0016]一種維生素D在常溫下鈍化菠蘿蛋白酶的方法，包括以下步驟:
(1)菠蘿蛋白酶液的配制:取lg菠蘿蛋白酶(食品級，比活單位:50萬U/g)稀釋1000倍，即先定溶至100ml，再取以上酶液5ml定溶至50ml ；
(2)添加維生素D:在上述酶液中分別加入0.00001 mg (維生素D)/mL (酶液)，每毫升酶液中含0.02mg菠蘿蛋白酶；
一種維生素D在常溫下鈍化肉制品中的菠蘿蛋白酶的方法，包括以下步驟:
(1)原料肉處理:選取新鮮或冷加工的瘦肉為原料，去除表層脂肪、筋腱和污物，斬拌成肉糜；
(2)菠蘿蛋白酶的嫩化處理:按每克肉0.2-0.5毫克酶稱取比活單位:50萬U/g菠蘿蛋白酶，將菠蘿蛋白酶溶解于2mL蒸餾水中配制成酶液，均勻地撒到肉糜中，攪拌，使酶液均勻滲透擴散，然后在5-15°C下反應(yīng)lh使酶與肉糜反應(yīng)；
(3)維生素D鈍化:按每100克肉0.00001-0.00002克維生素D稱取維生素D，直接添加到嫩化后的肉糜中，與肉糜混合均勻即可。
[0017]其中:菠蘿蛋白酶、維生素D為食品級或以上級別
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有明顯的有益效果，從以上技術(shù)方案可知:
維生素D能將菠蘿蛋白酶活力降低到原酶活力的5%以下，接近碘乙酸的鈍化效果，維生素D無毒安全性高，此滅酶方法也擴大了酶解嫩化肉制品的應(yīng)用范圍。
[0018]添加維生素D作為菠蘿蛋白酶的鈍化劑，避免了高溫滅酶給肉制品造成的破壞。常溫下利用維生素D鈍化菠蘿蛋白酶活力，運用此方法可抑制經(jīng)適度嫩化后肉中殘存的菠蘿蛋白酶，阻止肉制品嫩化過度，保證肉品的嫩度適合，其外觀，質(zhì)地良好。
[0019]維生素D不僅可以運用于食品領(lǐng)域中菠蘿蛋白酶活力的鈍化，還可用于其它領(lǐng)域中菠蘿蛋白酶的鈍化作用。
[0020]在人類日常的食·品中合適的補充維生素D，無需額外服用相應(yīng)的維生素，同時還能提高人的食欲，有益的促進了人類健康。【具體實施方式】
[0021]下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明作進一步的說明。
[0022]附圖為不同濃度的維生素D對菠蘿蛋白酶活力抑制效果圖。
[0023]實施例1:
維生素D在常溫下鈍化菠蘿蛋白酶的方法，包括以下步驟:
(1)菠蘿蛋白酶液的配制:取lg菠蘿蛋白酶(食品級，比活單位:50萬U/g)稀釋1000倍，即先定溶至100ml，再取以上酶液5ml定溶至50ml ；
(2)添加維生素D:在上述酶液中分別加入不同濃度(見附圖)維生素D，鈍化劑濃度單位為mg (維生素D)/mL (酶液)，每毫升酶液中含0.02mg菠蘿蛋白酶；
由附圖可知，對濃度0.02mg/mL為菠蘿蛋白酶液鈍化效果顯示，當維生素D濃度為0.00001~0.00002mg維生素D/mL (酶液)，酶活力可降低到原酶活力的5%水平以下。
[0024]實施例2:
維生素D在常溫下鈍化肉制品中的菠蘿蛋白酶，包括以下步驟:
(1)原料肉處理:選取新鮮的瘦豬肉為原料，去除表層脂肪、筋腱和污物，斬拌成肉糜；
(2)菠蘿蛋白酶的嫩化處理:按0.2mg (酶)/g (肉)的濃度，稱取菠蘿蛋白酶(食品級，比活單位:50萬U/g)溶于2mL蒸餾水制成酶液，均勻地撒到肉糜中，攪拌，使酶液均勻滲透擴散，然后在5°C下反應(yīng)lh使酶與肉糜反應(yīng)；
(3)維生素D鈍化:按0.0OOOlg (維生素D) /100g(肉)的濃度稱取維生素D，直接添加到嫩化后的肉糜中，與肉糜混合均勻即可。
【權(quán)利要求】
1.維生素D在常溫 鈍化菠蘿蛋白酶方面的應(yīng)用。
【文檔編號】C12N9/99GK103667238SQ201310548320
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2013年11月7日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月7日
【發(fā)明者】廖安平, 盧彥越, 李媚, 吳如春, 謝濤, 封余賢, 楊卓 申請人:南寧市格瑞安特化工新材料科技有限公司