含有artpA質粒進行雙酶切的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種對含有artpA質粒進行雙酶切的方法。步驟如下：首先準備實驗所需要的工具酶、宿主菌、質粒與試劑；將酵母浸提物及相應的氯化鈉溶液準備好，加入至大燒杯中，并加入10倍的去離子水進行攪拌、溶解；使用溶液將其PH調整至7.0；然后再將其容易定溶至1升，分裝至5-6個試管中；高溫高壓下進行滅菌；不高于3攝氏度的條件下進行冷藏保存;加入去離子水進行定容之前需要加入醋酸甲溶液，百分比為不低于百分之二十;緩沖液的PH為8.5。本發(fā)明的有益效果是，成本較低、重復性好，轉化效率低，而且可以比較完全的對比目的片段。
【專利說明】含有artpA質粒進行雙酶切的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種生化實驗室的試驗方法，具體來說一種對含有artpA質粒進行雙酶切的方法。
【背景技術】
[0002]質粒(Plasmid)是附加到細胞中的非細胞的染色體或核區(qū)DNA原有的能夠自主復制的較小的DNA分子(即細胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的質粒雖然都是環(huán)狀構形，然而目前也發(fā)現(xiàn)有少數(shù)的質粒屬于線性構形，它存在于許多細菌以及酵母菌等生物中，乃至于植物的線粒體等胞器中。天然質粒的DNA長度從數(shù)千堿基對至數(shù)十萬堿基對都有。質粒天然存在于這些生物里面，有時候一個細胞里面可以同時有一種乃至于數(shù)種的質粒同時存在。質粒的套數(shù)(copy number)在細胞里從單一到數(shù)千都有可能。有時有些質粒含有某種抗藥基因(如大腸桿菌中就有含有抗四環(huán)素基因的質粒)。有一些質粒攜帶的基因則可以賦予細胞額外的生理代謝能力，乃至于在一些細菌中提高它的致病力。一般來說，質粒的存在與否對宿主細胞生存沒有決定性的作用。它是基因工程最常見的運載體。
【發(fā)明內容】
[0003]為克服上述技術問題，我們提出了以下技術方案:
一種對含有artpA質粒進行雙酶切的方法，步驟如下:首先準備實驗所需要的工具酶、宿主菌、質粒與試劑；將酵母浸提物及相應的氯化鈉溶液準備好，加入至大燒杯中，并加入10倍的去離子水進行攪拌、溶解；使用溶液將其PH調整至7.0 ;然后再將其容易定溶至I升，分裝至5-6個試管中；高溫高壓下進行滅菌；不高于3攝氏度的條件下進行冷藏保存。
`[0004]本發(fā)明中，加入去離子水進行定容之前需要加入醋酸甲溶液，百分比為不低于百分之二十。
[0005]本發(fā)明中，緩沖液的PH為8.5。
[0006]本發(fā)明的有益效果是，成本較低、重復性好，轉化效率低，而且可以比較完全的對比目的片段。
【具體實施方式】
[0007]一種對含有artpA質粒進行雙酶切的方法，步驟如下:首先準備實驗所需要的工具酶、宿主菌、質粒與試劑；將酵母浸提物及相應的氯化鈉溶液準備好，加入至大燒杯中，并加入10倍的去離子水進行攪拌、溶解；使用溶液將其PH調整至7.0 ;然后再將其容易定溶至I升，分裝至5-6個試管中；高溫高壓下進行滅菌；不高于3攝氏度的條件下進行冷藏保存。加入去離子水進行定容之前需要加入醋酸甲溶液，百分比為不低于百分之二十。緩沖液的PH為8.5。
[0008]以上所述，僅為本發(fā)明較佳的【具體實施方式】，但本發(fā)明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本【技術領域】的技術人員在本發(fā)明披露的技術范圍內，根據(jù)本發(fā)明的技術方案及其發(fā)明構思加以等同替換或改變，都`應涵蓋在本發(fā)明的保護范圍之內。
【權利要求】
1.一種對含有artpA質粒進行雙酶切的方法，其特征在于，步驟如下:首先準備實驗所需要的工具酶、宿主菌、質粒與試劑；將酵母浸提物及相應的氯化鈉溶液準備好，加入至大燒杯中，并加入10倍的去離子水進行攪拌、溶解；使用溶液將其PH調整至7.0 ;然后再將其容易定溶至I升，分裝至5-6個試管中；高溫高壓下進行滅菌；不高于3攝氏度的條件下進行冷藏保存。
2.如權利要求1所述的一種對含有artpA質粒進行雙酶切，其特征在于，加入去離子水進行定容之前需要加入醋酸甲溶液，百分比為不低于百分之二十。
3.如權利要求1所述的一種對含有artpA質粒進行雙酶切，其特征在于，緩沖液的PH為 8.5。`
【文檔編號】C12N15/66GK103773788SQ201310536307
【公開日】2014年5月7日 申請日期:2013年11月4日 優(yōu)先權日:2013年11月4日
【發(fā)明者】劉軍 申請人:劉軍