一種用于鑒別泡菜生花病害菌的微生物純化方法
【專利摘要】本發(fā)明通過(guò)對(duì)疑似生花病害微生物接種培養(yǎng)，利用不同種類的微生物不同的生長(zhǎng)特性和菌落特征得以將目標(biāo)病害疑似菌挑取出來(lái)，并多次重復(fù)純化過(guò)程從而達(dá)到將雜菌剔除，獲得待鑒定目標(biāo)病害疑似菌的純培養(yǎng)物。本發(fā)明方法具有實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)單、成本低廉、易操作實(shí)施、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。
【專利說(shuō)明】—種用于鑒別泡菜生花病害菌的微生物純化方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及食品病害微生物鑒別【技術(shù)領(lǐng)域】，具體是提供一種簡(jiǎn)單且準(zhǔn)確的用于鑒別泡菜生花病害茵的微生物純化方法。
【背景技術(shù)】
[0002]泡菜，是指經(jīng)過(guò)發(fā)酵的蔬菜，古稱菹。我國(guó)泡菜歷史悠久，流傳廣泛，我國(guó)最早的詩(shī)集《詩(shī)經(jīng)》中有“中田有廬，疆場(chǎng)有瓜是剝是菹，獻(xiàn)之皇祖”的詩(shī)句。廬和瓜是蔬菜，“剝”和“菹”是腌潰加工的意思。據(jù)漢許慎《說(shuō)文解字》解釋“菹菜者，酸菜也”。說(shuō)明至遲在3100多年前的商代武丁時(shí)期，我國(guó)勞動(dòng)人民就能用鹽來(lái)潰梅烹飪用。由此可見(jiàn)，我國(guó)的鹽潰菜應(yīng)早于《詩(shī)經(jīng)》，應(yīng)起源于3100年前的商周時(shí)期。
[0003]一般來(lái)說(shuō)，只要是纖維豐富的蔬菜或水果，都可以被制成泡菜，是一種既營(yíng)養(yǎng)又衛(wèi)生的蔬菜加工品。因?yàn)榕莶说闹饕鲜歉鞣N蔬菜，維生素及鈣、鐵、磷等礦物質(zhì)含量豐富，其中豆類還含有豐富的全價(jià)蛋白質(zhì)。在泡制過(guò)程中，蔬菜的溫度一直保持在常溫下，蔬菜中的維生素C和B族維生素不會(huì)受到破壞，因此，泡菜比起炒菜來(lái)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值更高。泡菜富含乳酸，一般為0.4%?0.8%，可刺激消化腺分泌消化液，幫助食物的消化吸收。同時(shí)，發(fā)酵生成的左旋乳酸易被人體利用。泡菜中的乳酸菌群可抑制多種病原菌的生長(zhǎng)繁殖，如痢疾桿菌在泡菜中經(jīng)3?6小時(shí)、霍亂菌經(jīng)I?2小時(shí)、傷寒菌經(jīng)2?9小時(shí)均能被殺滅。新鮮蔬菜上所沾附的蛔蟲(chóng)卵，在密封的泡菜壇內(nèi)也會(huì)因缺氧窒息死亡。因此，常吃泡菜可以增加腸胃中的有益菌，抑制腸道中的致病菌，降低患胃腸道疾病的幾率，增加身體抵抗力。此外，蔬菜中含有一定量的蛋白質(zhì)，在加工泡菜過(guò)程中，蛋白質(zhì)由于受到微生物和蛋白質(zhì)水解酶的作用，逐漸被分解為小分子多肽物質(zhì)直至氨基酸。這是一種重要的生物化學(xué)變化，使腌制品不僅產(chǎn)生一定的光澤、香氣和風(fēng)味，還促進(jìn)了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，增加了食物的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。因而泡菜既能為人體提供充足的營(yíng)養(yǎng)，又能預(yù)防動(dòng)脈硬化等疾病。
[0004]泡菜以其獨(dú)特的風(fēng)味以及豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，受到世界各地越來(lái)越多人們的喜愛(ài)。但由于各種原因，我國(guó)泡菜出口總額還比較低，其中影響最大的是泡菜生產(chǎn)的工業(yè)化改造技術(shù)還不夠成熟，工業(yè)化生產(chǎn)出來(lái)的泡菜質(zhì)量不及傳統(tǒng)法生產(chǎn)出來(lái)的泡菜，而工業(yè)化生產(chǎn)泡菜過(guò)程中“生花”的侵害最大，給泡菜質(zhì)量和產(chǎn)量帶來(lái)的損失也是最大。
[0005]在泡菜生產(chǎn)過(guò)程中常常易出現(xiàn)“生花”病害也叫產(chǎn)膜，俗稱“臭風(fēng)”，會(huì)散發(fā)一種令人不愉悅的氣味，而且會(huì)產(chǎn)生澀味，使受侵害泡菜口感和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值比正常發(fā)酵泡菜差很多。常出現(xiàn)在啤酒、醬油、果汁、葡萄酒及泡菜的生產(chǎn)過(guò)程中。主要是由氧化性酵母(包括假絲酵母和畢氏酵母等)所引起的，同時(shí)還附帶產(chǎn)生不愉快氣味。目前，國(guó)內(nèi)外還沒(méi)有學(xué)者對(duì)泡菜“生花”現(xiàn)象進(jìn)行比較系統(tǒng)的研究。在工業(yè)化生產(chǎn)中，鑒別生花泡菜的方法只能單純依靠工人的經(jīng)驗(yàn)人工進(jìn)行粗略的鑒定和分離。如何在鑒別泡菜是否受到生花病害菌污染的過(guò)程中對(duì)待鑒定的生花病害疑似菌準(zhǔn)確地提取出來(lái)并在較大程度上剔除影響鑒定的雜菌，將疑似菌進(jìn)行純化用于進(jìn)一步鑒定是加工技術(shù)的一個(gè)重要待解決問(wèn)題。
[0006]因此提供一種簡(jiǎn)單且準(zhǔn)確的用于鑒別泡菜生花病害菌的微生物純化方法，幫助工人避免“生花”病原菌對(duì)泡菜生產(chǎn)帶來(lái)的不利影響，也為其它農(nóng)產(chǎn)品深加工中類似問(wèn)題提供參考。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0007]針對(duì)現(xiàn)有生產(chǎn)存在的技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明的目的是提供一種操作簡(jiǎn)單、安全可靠、成本低廉的用于鑒別泡菜生花病害菌的微生物純化方法。
[0008]本發(fā)明采用傳統(tǒng)微生物鑒定方法對(duì)泡菜“生花”病害微生物進(jìn)行挑取，并進(jìn)一步對(duì)挑取得到的產(chǎn)物進(jìn)行培養(yǎng)純化。具體技術(shù)方案為一種用于鑒別泡菜生花病害菌的微生物純化方法，其特征在于包括步驟:
[0009]I)取樣接種:取出現(xiàn)“生花”現(xiàn)象的泡菜液液面上層白色物質(zhì)作為樣品，接種于培養(yǎng)基上，置于31?35°C恒溫培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)6?7d,觀察菌落生長(zhǎng)狀況；
[0010]2)分選純化:將培養(yǎng)后的疑似菌單菌落接種培養(yǎng)于新的培養(yǎng)基上，重復(fù)5?6次進(jìn)行純化；
[0011]3)取菌:挑取病害菌純培養(yǎng)物，以備用于進(jìn)一步鑒定。
[0012]本發(fā)明通過(guò)對(duì)疑似生花病害微生物接種培養(yǎng)，利用不同種類的微生物不同的生長(zhǎng)特性和菌落特征得以將目標(biāo)病害疑似菌挑取出來(lái)，并多次重復(fù)純化過(guò)程從而達(dá)到將雜菌剔除，獲得待鑒定目標(biāo)病害疑似菌的純培養(yǎng)物。本發(fā)明方法具有實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)單、成本低廉、易操作實(shí)施、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。
【專利附圖】
【附圖說(shuō)明】
[0013]圖1是本發(fā)明用于鑒別泡菜生花病害菌的微生物純化方法步驟示意圖；
【具體實(shí)施方式】
[0014]以下將結(jié)合具體實(shí)施例和說(shuō)明書附圖對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。
[0015]實(shí)施例1
[0016]試驗(yàn)原料和試劑
[0017]I)泡菜疑似菌:出現(xiàn)“生花”現(xiàn)象的泡菜液中取液面上層白色物質(zhì)；
[0018]2)糖發(fā)酵基礎(chǔ)肉湯:胰蛋白胨10.0g，牛肉浸粉3.0g，氯化鈉5.0g，溴甲酚紫0.04g，加水至 1000ml，pH 值 7.0，121 °C 高壓滅菌 15min ；
[0019]3)營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基:蛋白胨10.0g，牛肉粉3.0g，氯化鈉5.0g，瓊脂15.0g，蒸餾水1000ml, 121°C 滅菌 20min。
[0020]試驗(yàn)步驟:
[0021]I)取樣接種:取出現(xiàn)“生花”現(xiàn)象的泡菜液液面上層白色物質(zhì)作為樣品，接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基上，置于35°C恒溫培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)7d,觀察菌落生長(zhǎng)狀況；
[0022]2)分選純化:將培養(yǎng)后的疑似菌單菌落劃線接種培養(yǎng)于新的營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基上，重復(fù)6次進(jìn)行純化；
[0023]3)取菌:挑取病害細(xì)菌純培養(yǎng)物，以備用于進(jìn)一步鑒定。
[0024]實(shí)施例2
[0025]試驗(yàn)原料和試劑
[0026]I)泡菜疑似菌:出現(xiàn)“生花”現(xiàn)象的泡菜液中取液面上層白色物質(zhì)；
[0027]2)糖發(fā)酵基礎(chǔ)肉湯:胰蛋白胨10.0g，牛肉浸粉3.0g，氯化鈉5.0g，溴甲酚紫0.04g，加水至 1000ml，pH 值 7.0，121 °C 高壓滅菌 15min ；
[0028]3)孟加拉紅培養(yǎng)基:蛋白胨5.0g,葡萄糖10.0g,磷酸二氫鉀1.0g,無(wú)水硫酸鎂0.5g，瓊脂20.0g,孟加拉紅0.033g,氯霉素0.1g,蒸餾水100ml，121 °C滅菌20min。
[0029]試驗(yàn)步驟:
[0030]I)取樣接種:取出現(xiàn)“生花”現(xiàn)象的泡菜液液面上層白色物質(zhì)作為樣品，接種于孟加拉紅平板培養(yǎng)基上，置于31°C恒溫培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)7d,觀察菌落生長(zhǎng)狀況；
[0031]2)分選純化:將培養(yǎng)后的疑似菌單菌落劃線接種培養(yǎng)于新的孟加拉紅平板培養(yǎng)基上，重復(fù)6次進(jìn)行純化；
[0032]3)取菌:挑取病害細(xì)菌純培養(yǎng)物，以備用于進(jìn)一步鑒定。
【權(quán)利要求】
1.一種用于鑒別泡菜生花病害菌的微生物純化方法，其特征在于包括步驟: 1)取樣接種:取出現(xiàn)“生花”現(xiàn)象的泡菜液液面上層白色物質(zhì)作為樣品，接種于培養(yǎng)基上，置于31?35°C恒溫培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)6?7d,觀察菌落生長(zhǎng)狀況； 2)分選純化:將培養(yǎng)后的疑似菌單菌落接種培養(yǎng)于新的培養(yǎng)基上，重復(fù)5?6次進(jìn)行純化； 3)取菌:挑取病害菌純培養(yǎng)物，以備用于進(jìn)一步鑒定。
【文檔編號(hào)】C12N1/20GK104419655SQ201310395801
【公開(kāi)日】2015年3月18日 申請(qǐng)日期:2013年8月30日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月30日
【發(fā)明者】張政 申請(qǐng)人:張政