一種紅細胞裂解液及其裂解方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種紅細胞裂解液及利用該裂解液裂解紅細胞的方法，所述紅細胞裂解液包括以下濃度的組份：0.1M～0.5M氯化銨、0.001M～0.2M碳酸氫鉀、0.001～0.05M乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸二鈉。本發(fā)明所述紅細胞裂解液試劑具有很好的紅細胞裂解效果，對操作人員安全無毒副作用，裂解效率高。并且以甲醛作為固定劑，與其它組份聯(lián)合使用，實現(xiàn)了該試劑不僅可用于血液中紅細胞的去除，而且可以作為血液樣本中的非紅細胞部分細胞的保護劑用于樣本運輸，從而克服了現(xiàn)有技術(shù)所純化的血液不能穩(wěn)定保存剩余細胞組分的缺點。
【專利說明】一種紅細胞裂解液及其裂解方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于分子生物學(xué)領(lǐng)域，涉及醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)，具體的是涉及一種紅細胞裂解液及其裂解方法。
【背景技術(shù)】
[0002]紅細胞也稱紅血球(RBC)，是血液中數(shù)量最多的一種血細胞，也是脊椎動物體內(nèi)通過血液運送氧氣的最主要的媒介，同時還具有免疫功能。紅細胞中含有血紅蛋白，因而使血液呈紅色。但是在利用現(xiàn)代臨床診斷方法對血液樣品進行診斷檢測時，紅細胞對許多診斷檢測存在干擾作用，這就需要先把紅細胞從血液樣品中分離出去，然后再進一步對樣品進行檢測。
[0003]目前去除紅細胞的方法主要有:密度梯度離心法、自然沉降法、差異沉降法、氯化銨分離法等。密度梯度離心法分離的腫瘤細胞不純，分離效率不高，有相當(dāng)一部分腫瘤細胞丟失，自然沉降法和差異沉降法簡便但各層中的細胞種類多，分離的細胞純度不高，而目前應(yīng)用最廣泛的氯化銨分離法也存在分離細胞純度差的問題。
[0004]目前，很多常規(guī)的紅細胞裂解試劑在實際應(yīng)用中都存在裂解效果不夠好的缺陷，例如或是分離細胞純度差，或是裂解效率不夠高等。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005]本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種紅細胞裂解液，利用該裂解液裂解血液中的紅細胞，簡單高效，利于高通量的操作，更好地滿足實際應(yīng)用的需要。
[0006]實現(xiàn)上述目的技術(shù)方案如下。
[0007]一種紅細胞裂解液，其包括有以下濃度的組份:0.1M~0.5M氯化銨、0.0OlM~0.2M碳酸氫鉀、0.001~0.05M乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸二鈉。
[0008]進一步地，包括有以下濃度的組份:0.3M~0.32M氯化銨、0.018M~0.022M碳酸氫鉀、0.003~0.005M乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸二鈉。
[0009]在其中一個實施例中，還包括有0.01%~0.2%的甲醛。
[0010]本發(fā)明的另一個目的是提供一種紅細胞裂解的方法。
[0011]實現(xiàn)上述的目的的技術(shù)方案如下:
[0012]一種血液中紅細胞裂解的方法，取血液樣本，按照體積為1:2-5的比例加入上述的紅細胞裂解液，兩者混合15-30min。
[0013]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明有益效果主要體現(xiàn)在:
[0014]本發(fā)明利用常規(guī)紅細胞裂解試劑，經(jīng)過大量的實驗和發(fā)明人的技術(shù)積累，選取新的組份濃度， 達到比現(xiàn)有技術(shù)更好的紅細胞裂解效果，并且對操作人員安全無毒副作用，裂解效率高。并且以甲醛作為固定劑，與其它組份聯(lián)合使用，實現(xiàn)了該試劑不僅可用于血液中紅細胞的去除，而且可以作為保存血液樣本中的非紅細胞部分細胞的保護劑用于樣本運輸，從而克服了現(xiàn)有技術(shù)所純化的血液不能穩(wěn)定保存剩余細胞組分的缺點。具體實施例
[0015]實施例1.一種紅細胞裂解液
[0016]1、一種紅細胞裂解液，具有以下組成:
[0017]
【權(quán)利要求】
1.一種紅細胞裂解液，其特征在于，包括有以下濃度的組份:0.1M~0.5M氯化銨、0.0OlM~0.2M碳酸氫鉀、0.001~0.05M乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸二鈉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紅細胞裂解液，其特征在于，包括有以下濃度的組份:0.3M~0.32M氯化銨、0.018M~0.022M碳酸氫鉀、0.003~0.005M乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸二鈉。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的紅細胞裂解液，其特征在于，所述的紅細胞裂解液還包括有0.01%~0.2%的甲醛。
4.一種裂解血液中紅細胞的方法，其特征在于，取血液樣本，按照體積為1:2-5的比例加入權(quán)利要求1或2所述的 紅細胞裂解液，兩者混合反應(yīng)15-30min。
【文檔編號】C12N1/06GK104178424SQ201310200383
【公開日】2014年12月3日 申請日期:2013年5月24日 優(yōu)先權(quán)日:2013年5月24日
【發(fā)明者】許嘉森, 劉志明, 吳詩揚, 楊威威 申請人:益善生物技術(shù)股份有限公司