專利名稱:一種芽孢桿菌菌粉簡易制備方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明屬于微生態(tài)制劑技術(shù)領(lǐng)域,涉及一種飼用芽孢桿菌菌粉簡易制備方法。
背景技術(shù):
微生態(tài)制劑是指根據(jù)微生態(tài)理論,將從動物體內(nèi)外分離的對動物有益的微生物,經(jīng)特殊工藝制成的只含有活菌或包含細菌菌體及其代謝產(chǎn)物的主要用于動物的活菌制劑。目前用于微生態(tài)活菌制劑的加工方法主要有噴霧干燥法、真空冷凍干燥法和微囊包被法。市場現(xiàn)有的微生態(tài)產(chǎn)品,大部分采用大部分是噴霧干燥法,干燥法優(yōu)點是處理量大,所得微膠囊粉末流散性好,加工過程易于控制。真空冷凍干燥法也是微生物制品應(yīng)用中最為廣泛的方法之一,通過真空冷凍干燥法,也可以得到活菌率較高的微生態(tài)產(chǎn)品,但是真 空冷凍干燥法存在著以下問題應(yīng)用成本較高(噴霧干燥的5-8倍)、時間成本比較高(48h/批次)、設(shè)備損耗較迅速、制得的產(chǎn)品集結(jié)在一起,需要進一步的進行破碎,制粉,流散性差。微囊包被是保護益生菌活力最為直接有效的方法,壁材在加工過程中,在菌體細胞外形成玻璃化狀態(tài),更好的保護菌體細胞膜和胞內(nèi)蛋白質(zhì),使產(chǎn)品中活菌數(shù)大大提高。這三種加工方法雖然被廣泛使用,但都需要額外添加價格較高的干燥保護劑或載體、需要專業(yè)的干燥設(shè)備,生產(chǎn)工藝比較復(fù)雜,必須由專業(yè)的人員來生產(chǎn)操作。
發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述問題,本發(fā)明提供一種芽孢桿菌菌粉簡易制備方法。本發(fā)明提供的制備方法,包括如下步驟1)將發(fā)酵結(jié)束后的芽孢桿菌發(fā)酵液和菌液吸附劑按重量比I. O :1. O I. 5混合,攪拌混勻;2)把混合均勻的發(fā)酵液和菌液吸附劑的混合物分攤成2cm 3cm,置于通風處自然晾干至含水量降至20%以下時,菌粉制備完成。在本發(fā)明具體的實施方案中,步驟2)中發(fā)酵液和菌液吸附劑的混合物自然晾干至含水量為5% 15%。其中,所述的菌液吸附劑選自玉米芯粉、淀粉、碳酸鈣中的一種或幾種。其中,所述的芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌和/或短小芽孢桿菌。其中,所述的發(fā)酵液和菌液吸附劑的混合物自然晾干時避免陽光直射。本發(fā)明中,枯草芽孢桿菌CGMCC No. 4628已于CN200810106520. 5中公布;地衣芽孢桿菌CGMCC NO. 5094已在專利CN201110384444. 6中公布;短小芽孢桿菌CGMCC No. 4756已于 CN201110140925. 2 中公布。本發(fā)明采用菌液吸附劑吸附發(fā)酵液中的活菌及其代謝產(chǎn)物,經(jīng)干燥后直接制成微生態(tài)制劑,省去了發(fā)酵結(jié)束后復(fù)雜的后處理及制劑過程,工藝簡單,技術(shù)難度低,降低了產(chǎn)品制造的成本。與現(xiàn)有方法制備的或市售的芽孢桿菌菌粉相比,菌粉中活菌數(shù)含量相近,且均能滿足飼用微生態(tài)制劑中對活菌數(shù)和芽孢率的要求。本發(fā)明省去發(fā)酵結(jié)束后菌體分離程序,最大限度的利用了發(fā)酵液中益生菌的有益代謝產(chǎn)物,特別適用于現(xiàn)場發(fā)酵直接飼喂的養(yǎng)殖模式,促進芽孢桿菌在微生態(tài)制劑中的應(yīng)用。
具體實施例方式通過下列實施例將更具體的說明本發(fā)明,但是應(yīng)理解所述實施例僅是為了說明本發(fā)明,而不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍。本發(fā)明下列實施例所用的儀器型號、試劑及其來源如下發(fā)酵罐NewBrunswick公司 BioFlo/Celligen 115 型;循環(huán)水機北京長流科學儀器公司DX-208型;空氣壓縮機北京豪福機電技術(shù)開發(fā)應(yīng)用有限公司HF-6100C型;分光光度計上海精密科學儀器有限公司72IN型;顯微鏡0LYMPUSCX31 型;·超凈臺蘇凈安泰SW-CJ-2FD型;生化培養(yǎng)箱上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠SPX-250B-Z型玉米芯粉購自山東宏達玉米芯顆粒有限公司,酵母膏、牛肉粉、胰蛋白胨購自北京奧博星生物技術(shù)責任有限公司,其他試劑均購自北京化學試劑公司。實施例I枯草芽孢桿菌菌粉簡易制備方法利用如下培養(yǎng)基對枯草芽孢桿菌CGMCC No. 4628進行發(fā)酵葡萄糖10g、豆餅粉10g、氯化鈉5g,硫酸錳O. 6g,通過稀鹽酸和氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH發(fā)酵過程中pH穩(wěn)定在7. 0,28°C發(fā)酵72小時。發(fā)酵結(jié)束后將發(fā)酵液與玉米芯粉按重量比1:1混合,攪拌均勻后,在曲盤上攤成薄餅,厚度2cm,放在盤架上自然風干。當含水量降至10%時,即得到枯草芽孢桿菌CGMCCNo. 4628菌粉。經(jīng)檢測該菌粉含枯草芽孢桿菌CGMCC No. 4628活菌數(shù)為2. 7X 109cfu/g,芽孢率82. 3%。實施例2地衣芽孢桿菌菌粉簡易制備方法利用如下培養(yǎng)基對地衣芽孢桿菌CGMCC No. 5094進行發(fā)酵葡萄糖12g、豆餅粉Hg、氯化鈉4g,硫酸錳O. 5g,通過稀鹽酸和氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH發(fā)酵過程中pH穩(wěn)定在7. 0,28°C發(fā)酵72小時。發(fā)酵結(jié)束后將發(fā)酵液與玉米芯粉按重量比1:1. 2混合,攪拌均勻后,在曲盤上攤成薄餅,厚度2. 5cm,放在盤架上自然風干。當含水量降至15%時,即得到地衣芽孢桿菌CGMCC 5094菌粉。經(jīng)檢測該菌粉含地衣芽孢桿菌CGMCC 5094活菌數(shù)為3. 2X 109cfu/g,芽孢率79. 6%。實施例3短小芽孢桿菌菌粉簡易制備方法利用如下培養(yǎng)基對短小芽孢桿菌CGMCC No. 4756進行發(fā)酵葡萄糖10g、豆餅粉Hg、氯化鈉5g,硫酸錳0. 5g,通過稀鹽酸和氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH發(fā)酵過程中pH穩(wěn)定在7. 0,28°C發(fā)酵72小時。發(fā)酵結(jié)束后將發(fā)酵液與玉米芯粉按重量比1:1. 5混合,攪拌均勻后,在曲盤上攤成薄餅,厚度3cm,放在盤架上自然風干。當含水量降至5%時,即得到短小芽孢桿菌CGMCCNo. 4756菌粉。經(jīng)檢測該菌粉含短小芽孢桿菌CGMCC No. 4756活菌數(shù)為2. 4X 109cfu/g,芽孢率84. 6%。以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式,應(yīng)當指出,對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說,在 不脫離本發(fā)明技術(shù)原理的前提下,還可以做出若干改進和潤飾,這些改進和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護范圍。
權(quán)利要求
1.一種芽孢桿菌菌粉簡易制備方法,其包括如下步驟 1)將發(fā)酵結(jié)束后的芽孢桿菌發(fā)酵液和菌液吸附劑按重量比I.O :1. O I. 5混合,攪拌混勻; 2)把混合均勻的發(fā)酵液和菌液吸附劑的混合物分攤成2cm 3cm,置于通風處自然晾干至含水量降至20%以下時,菌粉制備完成。
2.如權(quán)利要求I所述的制備方法,其特征在于,步驟2)中發(fā)酵液和菌液吸附劑的混合物自然晾干至含水量為5% 15%。
3.如權(quán)利要求I或2所述的制備方法,其特征在于,所述的菌液吸附劑選自玉米芯粉、淀粉、米糠中的一種或幾種。
4.如權(quán)利要求I或2所述的制備方法,其特征在于,所述的芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌和/或短小芽孢桿菌。
5.如權(quán)利要求I或2所述的制備方法,其特征在于,所述的發(fā)酵液和菌液吸附劑的混合物自然晾干時避免陽光直射。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種芽孢桿菌菌粉簡易制備方法。該方法包括如下步驟1)將發(fā)酵結(jié)束后的芽孢桿菌發(fā)酵液和菌液吸附劑按重量比1.01.0~1.5混合,攪拌混勻;2)把混合均勻的發(fā)酵液和菌液吸附劑的混合物分攤成2cm~3cm,置于通風處自然晾干至含水量降至20%以下時,菌粉制備完成。本發(fā)明采用菌液吸附劑吸附發(fā)酵液中的活菌及其代謝產(chǎn)物,經(jīng)干燥后直接制成微生態(tài)制劑,工藝簡單,技術(shù)難度低。省去發(fā)酵結(jié)束后菌體分離程序,最大限度的利用了發(fā)酵液中益生菌的有益代謝產(chǎn)物。
文檔編號A23L1/16GK102871008SQ20121038361
公開日2013年1月16日 申請日期2012年10月11日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月11日
發(fā)明者汪攀, 張軍, 孫曉雯, 閆軼潔, 王安如 申請人:北京大北農(nóng)科技集團股份有限公司, 湖南大北農(nóng)農(nóng)業(yè)科技有限公司, 漳州大北農(nóng)農(nóng)牧科技有限公司