專利名稱：一種柱塞套及包括該柱塞套的細(xì)胞自動(dòng)化處理裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及細(xì)胞清洗和細(xì)胞染色技術(shù)領(lǐng)域，具體是一種柱塞套及包括該柱塞套的細(xì)胞自動(dòng)化處理裝置。
背景技術(shù)：
目前，公知的細(xì)胞清洗和細(xì)胞染色一般采用離心方式或壓力過濾方式。然而，本發(fā)明人在實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的過程中經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)離心方式對(duì)于不能有效沉底的細(xì)胞，移除上清廢液時(shí)易將細(xì)胞移除，洗滌細(xì)胞時(shí)導(dǎo)致細(xì)胞丟失，在分離不同體積大小的混合細(xì)胞時(shí)更困難。壓力過濾方式以膜為阻擋材料，使用注射器等壓力使溶液穿過針頭濾器膜，將需要分離的抗體或其它染色劑等小分子物質(zhì)穿流過膜，膜截留細(xì)胞或細(xì)胞器(細(xì)胞器是細(xì)胞質(zhì)中具有一定結(jié)構(gòu)和功能的微結(jié)構(gòu)，細(xì)胞中的細(xì)胞器主要有線粒體-內(nèi)質(zhì)網(wǎng)-中心體-葉綠體， 高爾基體-核糖體等，它們組成了細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)，使細(xì)胞能正常的工作-運(yùn)轉(zhuǎn))，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞洗滌，由于操作過程中要反復(fù)加入和排出多種液體，過程復(fù)雜，難以實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化操作。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有細(xì)胞清洗和細(xì)胞染色技術(shù)的不足，提供一種柱塞套及包括該柱塞套的細(xì)胞自動(dòng)化處理裝置，其采用在微孔濾膜上開有可允許不能從微孔濾膜上穿流的細(xì)胞穿流的通道的方法，配合相應(yīng)的控制電路及結(jié)構(gòu)，實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。一種柱塞套，用于安裝在底座上，所述柱塞套的底部設(shè)有第一柱塞套通道和第二柱塞套通道，所述底座開設(shè)有第一底座通道和第二底座通道，其中所述第一柱塞套通道和所述第一底座通道連通形成通道A，所述第二柱塞套通道和所述第二底座通道連通形成通道B，所述第二柱塞套通道和所述第二底座通道的連接處設(shè)有微孔濾膜，所述通道A的孔徑設(shè)置為允許不能從所述微孔濾膜上穿流的細(xì)胞穿流，在微孔濾膜8的下方與底座之間設(shè)置膜下支架，膜下支架上開設(shè)有至少一個(gè)與所述第二底座通道連通的液體通孔。一種細(xì)胞自動(dòng)化處理裝置，其特征在于包括柱塞套、柱塞、底座，所述柱塞設(shè)于柱塞套內(nèi)，所述柱塞套安裝在底座上，所述柱塞套的底部設(shè)有第一柱塞套通道和第二柱塞套通道，所述底座開設(shè)有第一底座通道和第二底座通道，其中所述第一柱塞套通道和所述第一底座通道連通形成通道A，所述第二柱塞套通道和所述第二底座通道連通形成通道B， 所述第二柱塞套通道和所述第二底座通道的連接處設(shè)有微孔濾膜，所述通道A的孔徑設(shè)置為允許不能從所述微孔濾膜上穿流的細(xì)胞穿流，在微孔濾膜的下方與底座之間設(shè)置膜下支架，膜下支架上開設(shè)有至少一個(gè)與所述第二底座通道連通的液體通孔。本發(fā)明提供的柱塞套及包括該柱塞套的細(xì)胞自動(dòng)化處理裝置的所述通道A的孔徑設(shè)置為允許不能從所述微孔濾膜上穿流的細(xì)胞穿流，可實(shí)現(xiàn)從微孔濾膜上方注入處理液或者待處理細(xì)胞液，所述第二柱塞套通道和所述第二底座通道連通形成的通道B可實(shí)現(xiàn)從微孔濾膜下方注入處理液(可以使細(xì)胞離開微孔濾膜并重懸浮，有攪拌的作用功能)，這樣可滿足各種處理液的進(jìn)入要求；另外，本發(fā)明提供的柱塞套可方便的從自動(dòng)化處理裝置上
4取下和安裝，使它可獨(dú)立于所述自動(dòng)化處理裝置之外，在程序控制和相應(yīng)執(zhí)行機(jī)構(gòu)的配合作用下，可以方便的按細(xì)胞清洗和細(xì)胞染色流程的要求，自動(dòng)的加入或排出相應(yīng)的液體，其制造成本低，還可防止樣本污染，容易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化處理，使用靈活，應(yīng)用范圍廣，適應(yīng)多種用途。
圖1是本發(fā)明第一實(shí)施例包含柱塞的柱塞套的立體圖；圖2是本發(fā)明第一實(shí)施實(shí)例柱塞套可看見底部的立體圖；圖3是本發(fā)明第一實(shí)施實(shí)例柱塞套的俯視圖；圖4是本發(fā)明第一實(shí)施實(shí)例柱塞套另一個(gè)方向的立體圖；圖5是本發(fā)明第一實(shí)施實(shí)例柱塞套的仰視圖；圖6A是本發(fā)明第一實(shí)施實(shí)例柱塞套的立體圖；圖6B是本發(fā)明第一實(shí)施實(shí)例設(shè)置有另一種膜下支架的柱塞套的立體圖；圖7是本發(fā)明第一實(shí)施實(shí)例柱塞套中安裝的微孔濾膜的結(jié)構(gòu)示意圖；圖8是本發(fā)明第二實(shí)施實(shí)例柱塞套的裝配剖視圖；圖9是本發(fā)明第二實(shí)施實(shí)例柱塞套的局部剖視圖；圖10是本發(fā)明第二實(shí)施例的裝置組成示意圖；圖11是本發(fā)明第三實(shí)施例的裝置組成示意圖；圖12是本發(fā)明其中一個(gè)實(shí)施例的系統(tǒng)構(gòu)成示意圖；圖13是圖10的細(xì)胞自動(dòng)化處理流程示意圖。圖中1-柱塞套；2-柱塞套連通臺(tái)；3-柱塞套底孔；4-連通臺(tái)通孔；4A-連通臺(tái)柔性連接墊；5-膜外沿密封墊；6-膜內(nèi)沿密封墊；7-膜溝；8-微孔濾膜；9、9A-膜下支架； 20-柱塞；21-推動(dòng)件；22-密封墊；30-底座；31-第一膜下連通孔、32-膜上連通孔、33-第二膜下連通孔、34-膜下空腔；34A-膜下空腔連通臺(tái)；34B-膜下空腔連通孔；35-密封墊； 36-底座螺紋；36A-柱塞套螺紋；40-軟磁體；50-電磁鐵；51-電磁鐵芯；52-電磁鐵線圈； 60-升降桿下壓塊；61-升降桿；62-升降桿電機(jī)；70a-膜上加液容器；70b_膜上加液容器； 70c-膜上加液容器；71a-膜下加液容器；71b-膜下加液容器；71c_膜下加液容器；72-氣壓源；73-廢液容器；80a.80b.80c-電磁閥；81a.81b.81c-電磁閥；82-電磁閥；83、84_液體泵；85-壓力檢測(cè)控制器；90、91、92、93、94、95、96、97_ 電磁閥；100、101、102、103、104-管道；901-液體通孔，105-前蓋板。
具體實(shí)施例方式下面將結(jié)合本發(fā)明中的附圖，對(duì)本發(fā)明中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚-完整地描述。請(qǐng)參考圖1，本發(fā)明第一實(shí)施例柱塞套1中安裝有柱塞20，柱塞20的尾端設(shè)有推動(dòng)件21。請(qǐng)一并參考圖2-5，所述柱塞套1為一管型器件，其上部為開口端，底部封殼上設(shè)有向下延伸的柱塞套連通臺(tái)2，柱塞套連通臺(tái)2中開設(shè)有連通臺(tái)通孔4 ；所述柱塞套1底部封殼上還設(shè)有柱塞套底孔3，具體的，可參考圖3，所述柱塞套1底部封殼上間隔設(shè)有多組呈扇形漸開狀排布的柱塞套底孔3，其中所述連通臺(tái)通孔4作為第一柱塞套通道，柱塞套底孔 3作為第二柱塞套通道。
微孔濾膜8套設(shè)在所述柱塞套連通臺(tái)2上，如圖5所示，在所述柱塞套1底部封殼的底面位于所述柱塞套連通臺(tái)的外圍設(shè)有膜內(nèi)沿密封墊6，底部封殼與柱塞套側(cè)壁連接處設(shè)有膜外沿密封墊5，這樣在微孔濾膜8從底部套上柱塞套連通臺(tái)2后，可實(shí)現(xiàn)微孔濾膜8 上下通道之間的密閉隔絕，防止比微孔濾膜8孔徑大的細(xì)胞(實(shí)際處理過程中需要保留的細(xì)胞)由于出現(xiàn)縫隙而導(dǎo)致下漏到微孔濾膜8下方，影響清洗或者洗滌效果。請(qǐng)參考圖6A，微孔濾膜8的下方安裝有膜下支架9，膜下支架9可以通過熔接的方法(或其他方法)與柱塞套底部連接，也可以通過螺紋連接安裝，通過螺紋方式的連接安裝則可方便更換不同的微孔濾膜，膜下支架9上開設(shè)有至少一個(gè)液體通孔，圖6A中示出為螺紋連接方式的膜下支架9，其上開設(shè)有多個(gè)液體通孔，其與所述柱塞套1底部封殼上開設(shè)的柱塞套底孔3對(duì)應(yīng)，所述柱塞套連通臺(tái)2的底部設(shè)有連通臺(tái)柔性連接墊4A。圖6A中柱塞套連通臺(tái)2設(shè)置在柱塞套的幾何中心，這樣可通過螺旋方式方便的將柱塞套與底座連接，當(dāng)然，也可以可通過卡接方式將柱塞套與底座30連接(如圖6B所示)， 此時(shí)，柱塞套連通臺(tái)2可不必設(shè)置在柱塞套的幾何中心，此時(shí)膜下支架9A通過熔接的方法與柱塞套底部連接，在膜下支架9A上設(shè)有膜下空腔連通臺(tái)34A，所述膜下空腔連通臺(tái)34A中開設(shè)有膜下空腔連通孔MB。所述膜下空腔連通孔34B用于所述底座30中的膜下空腔34 連通后與膜下加液容器連接，實(shí)現(xiàn)從膜下注入處理液。膜下溶液柱塞套連通臺(tái)2中開有連通臺(tái)通孔4，可將柱塞套連通臺(tái)2按國(guó)標(biāo)注射器尺寸設(shè)計(jì)，方便與針頭等市場(chǎng)上容易購(gòu)買的標(biāo)準(zhǔn)設(shè)備連接。此時(shí)它是一個(gè)多功能的注射器(微孔濾膜在液體潤(rùn)濕時(shí)，由于液體的表面張力作用，在施加的壓力小于克服表面張力作用的條件下，微孔濾膜阻擋氣體通過，相當(dāng)于封閉狀態(tài))，可用于吸取或排出樣本溶液。請(qǐng)參考圖8及圖9，在另一實(shí)施例中，內(nèi)部安裝有柱塞20的柱塞套1固定在底座 30上，柱塞20的頭部裝設(shè)有密封墊22，可進(jìn)一步保證柱塞20與柱塞套1內(nèi)側(cè)壁之間的氣密性。如圖9所示，所述柱塞套1底部封殼上設(shè)有向下延伸的柱塞套連通臺(tái)2，柱塞套連通臺(tái)2中開設(shè)有連通臺(tái)通孔4，所述連通臺(tái)通孔4作為第一柱塞套通道；所述柱塞套1底部封殼上設(shè)有柱塞套底孔3，所述柱塞套底孔3作為第二柱塞套通道。微孔濾膜由于制造方式不同，大致有四種結(jié)構(gòu)模式，即篩式結(jié)構(gòu)、網(wǎng)式結(jié)構(gòu)、中間結(jié)構(gòu)、各向異性結(jié)構(gòu)，其中篩式結(jié)構(gòu)通過膜面捕捉粒子，膜孔易堵塞，逆洗容易；網(wǎng)式結(jié)構(gòu)在網(wǎng)孔中捕獲粒子，過濾速度快，總過濾量大，逆洗困難；中間結(jié)構(gòu)的膜強(qiáng)度大，其他特性介于篩式結(jié)構(gòu)與網(wǎng)式結(jié)構(gòu)之間；各向異性結(jié)構(gòu)的總過濾量大，表孔徑大，里孔徑小。微孔濾膜的用途及濾膜的孔徑和用途之間的關(guān)系介紹如下微孔濾膜的用途液體中微生物測(cè)定，大氣污染檢查，滅菌試驗(yàn)，空氣中微生物檢查，顯微鏡檢測(cè)，微粒分析，重量分析，比色分析，流體污染檢測(cè)，化學(xué)活性反應(yīng)儀器分析，溶介與非溶介物質(zhì)對(duì)比，凈化室及其工作服污染檢測(cè)；除菌、血液過濾、血漿分離、血清、組織培養(yǎng)液以及其他生化制劑的過濾和除菌。微孔濾膜的孔徑(um)和用途之間的關(guān)系3. 0 8. 0 溶劑、試劑、潤(rùn)滑油、光致抗蝕劑澄清過濾。流體中除去1. 0以下粒子的預(yù)過濾；細(xì)胞診斷；液體中微粒檢出；除去淡水中小球藻和蘭色藻類；0. 8 1. 0 酵母、霉菌的定量檢出；除去啤酒、葡萄酒、糖液、碳酸飲料中酵母、霉菌；一般澄清過濾，除去細(xì)菌(指炭疽菌，葡萄球菌)?？諝鈨艋?；
0.4 0.6 —般澄清過濾，除去細(xì)菌(大腸桿菌、霍亂、傷寒、斑疹傷寒、綠膿菌、破傷風(fēng)菌)；捕集石棉纖維過濾，微粒總量分析，細(xì)菌總量分析；0. 2 細(xì)菌全部捕集過濾(天然病毒，牛痘病毒)；細(xì)菌總量分析；血漿分離；0.08 0. 10 病毒過濾(流行感冒，狂犬病毒等)；超純水最終過濾，人工肺、血漿凈化；0. 03 0. 05 細(xì)菌病毒過濾(小兒麻痹病毒，流行感冒病毒)；高分子量蛋白質(zhì)過濾；無菌水制造。圖7所示微孔濾膜8為篩式結(jié)構(gòu)，具體的構(gòu)造形式可根據(jù)實(shí)際對(duì)生物細(xì)胞的處理進(jìn)行選擇。微孔濾膜8的中部開設(shè)有一個(gè)通孔，安裝時(shí)，如圖9所示，將柱塞套連通臺(tái)2從所述微孔濾膜8中部的通孔穿過，使微孔濾膜8套設(shè)在所述柱塞套連通臺(tái)2上，然后在微孔濾膜8的下方設(shè)置膜下支架9，膜下支架9上開設(shè)有至少一個(gè)液體通孔901，所述底座30對(duì)應(yīng)柱塞套連通臺(tái)2的連通臺(tái)通孔4設(shè)有膜上連通孔32，所述底座30在微孔濾膜8的下方開設(shè)有膜下空腔34，膜下空腔34與至少一個(gè)膜下連通孔連通，圖8中示出了兩個(gè)，分別是第一膜下連通孔31、第二膜下連通33，膜下支架9的液體通孔901與所述膜下空腔34是連通的。所述膜上連通孔32作為第一底座通道，所述膜下空腔34及與之連通的膜下連通孔(31、3；3)作為第二底座通道。在柱塞套1安裝在底座30上之后，柱塞套1底部的部分結(jié)構(gòu)(柱塞套1底端部及柱塞套連通臺(tái)2、插入底座30開設(shè)的凹腔，柱塞套連通臺(tái)2的連通臺(tái)通孔4 (第一柱塞套通道)與膜上連通孔32 (第一底座通道)連通，這樣第一柱塞套通道和第一底座通道連通形成通道A。依次將微孔濾膜8、膜下支架9裝入，所述柱塞套底孔3 (第二柱塞套通道)通過微孔濾膜8、膜下支架9與所述底座30上的膜下空腔34及與之連通的膜下連通孔(第二底座通道)連通，其中第二柱塞套通道和第二底座通道形成通道B，微孔濾膜8設(shè)置在第二柱塞套通道和第二底座通道的連接處。所述通道A的孔徑設(shè)置為允許不能從所述微孔濾膜8上穿流的細(xì)胞穿流。所述柱塞套1的底部呈環(huán)狀間隔設(shè)有凹槽狀的膜溝7，便于與微孔濾膜8貼附后處理液可與微孔濾膜8充分接觸，有利于處理液從微孔濾膜 8溢出。圖9所示柱塞套1與底座30為螺紋連接，其中柱塞套1底部外圈設(shè)有柱塞套螺紋 36A，底座30凹腔內(nèi)壁上設(shè)有對(duì)應(yīng)的形狀互補(bǔ)的底座螺紋36，柱塞套1和底座30通過柱塞套螺紋36A和底座螺紋36形成緊固連接，較佳的，可在底座30凹腔內(nèi)裝設(shè)密封墊35，以使柱塞套1與底座30更緊密固定，可防止液體從柱塞套1與底座30之間的縫隙溢出。請(qǐng)參考圖10，所述底座30上開設(shè)的膜上連通孔32通過輸送管與膜上加液容器 (70a.70b.70c)連接，這樣用于處理細(xì)胞的細(xì)胞液(例如清洗液、抗體、緩沖液或者染色液等)以及待處理細(xì)胞液可從膜上加液容器(70a、70b、70c)從所述通道A (即膜上連通孔32 和連通臺(tái)通孔4連通形成的通道)進(jìn)入微孔濾膜8與柱塞20之間的密閉空間，實(shí)現(xiàn)從微孔濾膜8上方注入細(xì)胞液(例如清洗液、抗體、緩沖液或者染色液等)。與所述膜下空腔34連通的其中一個(gè)膜下連通孔，即第二膜下連通孔33通過輸送管與膜下加液容器(71a、71b、71c)連接，這樣用于處理細(xì)胞的細(xì)胞液(例如清洗液、抗體、 緩沖液或者染色液等)可從膜下加液容器依次經(jīng)過第二膜下連通孔33、膜下空腔34、膜下支架9后，穿過微孔濾膜8后通過柱塞套底孔3進(jìn)入微孔濾膜8與柱塞20之間的密閉空間5/7頁(yè)
(其中第二膜下連通孔33、膜下空腔34與柱塞套底孔3連通形成通道B)，實(shí)現(xiàn)從微孔濾膜 8下方注入細(xì)胞液(例如清洗液、抗體、緩沖液或者染色液等)。與所述膜下空腔34連通的另外一個(gè)膜下連通孔，即第一膜下連通孔31，其通過輸送管與廢液容器73連接，在處理液對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理完成后，處理液可從微孔濾膜8與柱塞20之間的密閉空間穿過微孔濾膜8 后，依次通過膜下支架9、膜下空腔34后通過過輸送管送至廢液容器73，實(shí)現(xiàn)廢液的收集。通道A和通道B均可在壓力的作用下有液體流動(dòng)，壓力源可以是插入柱塞套1的柱塞20的運(yùn)動(dòng)，也可以是與柱塞套1連通的外部液體泵(如柱塞泵、蠕動(dòng)泵、齒輪泵等)，圖 10中所示為與膜上加液容器(70a、70b、70c)和膜下加液容器(71a、71b、71c)連通的輸送管上的液體泵83和84，壓力源還可以是柱塞20的上下運(yùn)動(dòng)與外部液體泵(83、84)兩者的共同作用，壓力源也可以是與膜上加液容器和膜下加液容器連通的氣壓源72，例如氮?dú)夤?。如圖10所示，膜上加液容器(70a、70b、70c)與膜下加液容器(71a、71b、71c)可通過氣壓源72實(shí)現(xiàn)加壓，將膜上加液容器(70a、70b、70c)與膜下加液容器(71a、71b、71c)中的處理液加壓注入通道A和通道B。膜上加液容器(70a、70b、70c)的輸送管上設(shè)有電磁閥 (80a、80b、80c)，膜下加液容器(71a.71b.71c)的輸送管上設(shè)有電磁閥(81a、81b、81c)。廢液容器73與第一膜下連通孔31連接的輸送輸送管上也設(shè)有電磁閥82。當(dāng)用氣壓源72 (例如氮?dú)夤?作為壓力源時(shí)，液體泵(83、84)可以不用，目的是能將膜上加液容器和膜下加液容器中的液體按需要壓入或進(jìn)行管道的清洗，例如71a內(nèi)為清洗液，要清洗管道時(shí)，可打開電磁閥81a和電磁閥82，清洗液流經(jīng)輸送管、第二膜下連通孔 33、膜下空腔34、膜下支架9、微孔濾膜8、柱塞套底孔3進(jìn)入微孔濾膜8與柱塞20底部的密閉空間進(jìn)行細(xì)胞清洗，清洗之后的廢液在柱塞20的作用下，經(jīng)微孔濾膜8、膜下支架9、膜下空間34、第一膜下連通孔31最后到達(dá)廢液容器73，實(shí)現(xiàn)廢液的收集。氣壓源72與壓力檢測(cè)控制器85，可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)并控制氣壓源72輸出的氣壓。一般控制注入處理液的液體體積是由柱塞20在柱塞套1內(nèi)的相對(duì)位置決定的。柱塞20的運(yùn)動(dòng)可通過外力協(xié)助，如圖10所示，升降桿電機(jī)62下設(shè)升降桿61，升降桿61與升降桿下壓塊60連接。加入處理液時(shí)，柱塞20在壓力作用下被向上推，此時(shí)，升降桿電機(jī)62 驅(qū)動(dòng)升降桿61，帶動(dòng)升降桿下壓塊60上行，在升降桿下壓塊60上可設(shè)置有測(cè)力裝置(例如半導(dǎo)體壓力傳感器)，柱塞向上作用可以被該測(cè)力裝置檢測(cè)，升降桿下壓塊60的位置配合壓力檢測(cè)，可以指示出柱塞套1內(nèi)的處理液的容量，這樣使用壓縮氣體(或普通液體泵)作為壓力源即可，不必使用可精確控制進(jìn)入柱塞套1內(nèi)的處理液容量的、價(jià)格昂貴的液體泵。當(dāng)需要在柱塞20的上行過程中提供輔助壓力時(shí)，可以在升降桿下壓塊60下增加電磁鐵50，電磁鐵50中電磁鐵線圈52纏繞在電磁鐵芯51上，同時(shí)在柱塞20上的上表面部位(即在柱塞20尾端的推動(dòng)件21)卡上軟磁體40 (如鐵等)，電磁鐵線圈52通電時(shí)，電磁鐵50會(huì)產(chǎn)生吸力將軟磁體40緊緊吸住，提供輔助壓力；斷電時(shí)則電磁鐵50與軟磁體40 分離。電磁鐵50的作用是吸住安裝在柱塞20上的軟磁體可以輔助上拉柱塞，使處理液進(jìn)入柱塞套1時(shí)更容易。請(qǐng)結(jié)合參考圖11，將本發(fā)明柱塞套1安裝到自動(dòng)化處理裝置中進(jìn)行細(xì)胞清洗處理時(shí)是這樣進(jìn)行的啟動(dòng)機(jī)器電源后，打開機(jī)器前蓋板105，升降桿61將升降桿下壓塊60提升到最高位置，此時(shí)可方便的將柱塞套1安裝在底座30上(一般情況下先將柱塞20插入柱塞套1，吸取細(xì)胞或生物組織樣本，排除空氣后再安裝)。安裝好后，關(guān)上機(jī)器的前蓋板105，設(shè)定好處理流程，啟動(dòng)樣本處理流程，機(jī)器即可按設(shè)定流程自動(dòng)處理，處理完成后發(fā)出提示。請(qǐng)參考圖13，細(xì)胞清洗操作過程介紹如下步驟1 細(xì)胞進(jìn)樣；具體的，將待清洗細(xì)胞從通道A注入微孔濾膜8與柱塞20之間的密閉空間(膜上注入)；步驟2 添加清洗液；具體的，將清洗液從通道B注入，從微孔濾膜8下方注入清洗液，使細(xì)胞離開微孔濾膜8并重懸浮。步驟3 排出清洗液，迅速有效的將細(xì)胞與清洗液分離；在步驟3完成之后返回執(zhí)行步驟2，即在每次排液后再加入清洗液，使細(xì)胞液重新稀釋(可循環(huán)多次，循環(huán)的次數(shù)根據(jù)實(shí)際需要設(shè)定，最后一個(gè)循環(huán)不加入清洗液)。請(qǐng)結(jié)合參考圖12，其示出的自動(dòng)化處理裝置用于從待處理細(xì)胞液中分離出小體積細(xì)胞，例如從血液中分離血小板，白細(xì)胞，紅細(xì)胞。由柱塞20在柱塞套1內(nèi)向上運(yùn)動(dòng)直接手動(dòng)吸入生物樣本(此時(shí)柱塞套1尚未安裝在機(jī)器上)；或者用于分離綜合操作的生物樣本由管道101進(jìn)入第一個(gè)柱塞套Ia內(nèi)，所有電磁閥處于關(guān)閉狀態(tài)，然后進(jìn)行如下步驟(1)打開電磁閥91上行通路，第一個(gè)柱塞套Ia內(nèi)的柱塞上行，吸取樣本，然后再由管道101、電磁閥91上行通路加入清洗緩沖液，使生物樣本完全進(jìn)入柱塞套Ia內(nèi)(包括管道空間中的生物樣本)，關(guān)閉所有電磁閥；如果在過濾的時(shí)候柱塞套Ia底部的微孔濾膜被細(xì)胞堵住了，可從管道100注入清洗緩沖液進(jìn)去，使微孔濾膜上的細(xì)胞懸浮。(2)打開電磁閥92下行通路和電磁閥93上行通路，Ia內(nèi)的柱塞下行，Ib內(nèi)的柱塞同時(shí)上行，將小體積的細(xì)胞經(jīng)電磁閥92下行通路、管道102和電磁閥93上行進(jìn)入第二個(gè)柱塞套Ib內(nèi)，關(guān)閉所有電磁閥，再打開電磁閥91下行通路和電磁閥93上行通路，經(jīng)管道101 加入清洗緩沖液，關(guān)閉所有電磁閥；Ia柱塞套內(nèi)留下的是大體積細(xì)胞；(3)打開電磁閥94下行通路和電磁閥95上行通路，Ib內(nèi)的柱塞下行Ic內(nèi)的柱塞同時(shí)上行，將次小體積的細(xì)胞經(jīng)電磁閥94下行通路、管道103、電磁閥95上行通路進(jìn)入第三個(gè)柱塞套Ic內(nèi)，關(guān)閉所有電磁閥，打開電磁閥91下行通路、95上行通路經(jīng)管道101加入清洗緩沖液，關(guān)閉所有電磁閥；Ib柱塞套內(nèi)留下的是小體積細(xì)胞或小體積的樣本或細(xì)胞器；(4)打開電磁閥97，Ic內(nèi)的柱塞下行，將更小體積的細(xì)胞經(jīng)管道104進(jìn)入細(xì)胞回收容器(例如廢液容器73)內(nèi)；Ic柱塞套內(nèi)留下的是次小體積細(xì)胞或細(xì)胞器。本發(fā)明提供的柱塞套及包括該柱塞套的細(xì)胞自動(dòng)化處理裝置由于在柱塞套上開設(shè)有第一柱塞套通道和第二柱塞套通道，同時(shí)與之對(duì)應(yīng)的在底座開設(shè)有第一底座通道和第二底座通道，所述第二柱塞套通道和所述第二底座通道的連接處設(shè)有微孔濾膜，其中第一柱塞套通道和所述第一底座通道連通形成通道A，所述通道A的孔徑設(shè)置為允許不能從所述微孔濾膜上穿流的細(xì)胞穿流，可實(shí)現(xiàn)從微孔濾膜上方注入處理液或者待處理細(xì)胞液，所述第二柱塞套通道和所述第二底座通道連通形成的通道B可實(shí)現(xiàn)從微孔濾膜下方注入處理液，這樣可滿足各種處理液的進(jìn)入要求，例如有的細(xì)胞處需要待處理細(xì)胞處于充分懸浮狀態(tài)，而現(xiàn)有的柱塞套只能其開口端注入處理液(膜上注入)，這樣處理液進(jìn)入柱塞套后不能使細(xì)胞出于充分懸浮狀態(tài)，不能對(duì)細(xì)胞進(jìn)行有效分離操作。另外，本發(fā)明提供的柱塞套可方便的從自動(dòng)化處理裝置上取下和安裝，使它可獨(dú)立于所述自動(dòng)化處理裝置之外，在程序控制和相應(yīng)執(zhí)行機(jī)構(gòu)的配合作用下，可以方便的按細(xì)胞清洗和細(xì)胞染色流程的要求，自動(dòng)的加入或排出相應(yīng)的液體，其制造成本低，還可防止樣本污染，容易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化處理(細(xì)胞清洗和細(xì)胞染色)，使用靈活，應(yīng)用范圍廣，適應(yīng)多種用途。本發(fā)明提供的柱塞套及包括該柱塞套的細(xì)胞自動(dòng)化處理裝置可以用于不同體積大小的細(xì)胞的分離，也可用于中藥注射方面的過濾和中藥雜質(zhì)檢測(cè)；還可用于空氣采樣方面。將多個(gè)上述裝置裝配到一臺(tái)機(jī)器上，可實(shí)現(xiàn)多個(gè)樣本的同時(shí)處理，其還可作為流式細(xì)胞分析儀的前置配套洗滌裝置，應(yīng)用于流式細(xì)胞分析儀或組合。以上所述，僅為本發(fā)明的具體實(shí)施方式
，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何屬于本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，可輕易想到的變化或替換，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。因此，本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)該以權(quán)利要求的保護(hù)范圍為準(zhǔn)。
權(quán)利要求
1.一種柱塞套，其特征在于用于安裝在底座上，所述柱塞套的底部設(shè)有第一柱塞套通道和第二柱塞套通道，所述底座開設(shè)有第一底座通道和第二底座通道，其中所述第一柱塞套通道和所述第一底座通道連通形成通道A，所述第二柱塞套通道和所述第二底座通道連通形成通道B，所述第二柱塞套通道和所述第二底座通道的連接處設(shè)有微孔濾膜(8)，所述通道A的孔徑設(shè)置為允許不能從所述微孔濾膜(8)上穿流的細(xì)胞穿流，在微孔濾膜(8) 的下方與底座之間設(shè)置膜下支架(9)，膜下支架(9)上開設(shè)有至少一個(gè)與所述第二底座通道連通的液體通孔(901)。
2.如權(quán)利要求1所述的柱塞套，其特征在于所述柱塞套為一管型器件，其上部為開口端，底部封殼上設(shè)有向下延伸的柱塞套連通臺(tái)O)，柱塞套連通臺(tái)( 中開設(shè)有連通臺(tái)通孔 G)，所述連通臺(tái)通孔(4)作為所述第一柱塞套通道，所述柱塞套(1)底部封殼上設(shè)有柱塞套底孔(3)，所述柱塞套底孔C3)作為所述第二柱塞套通道；所述底座(30)對(duì)應(yīng)柱塞套連通臺(tái)( 的連通臺(tái)通孔(4)設(shè)有膜上連通孔(32)，所述膜上連通孔(3 作為所述第一底座通道，所述底座(30)在微孔濾膜(8)的下方開設(shè)有膜下空腔(34)，膜下空腔(34)與至少一個(gè)膜下連通孔連通，所述膜下空腔(34)及與之連通的膜下連通孔作為所述第二底座通道， 膜下支架(9)的液體通孔(901)與所述膜下空腔(34)連通。
3.如權(quán)利要求1所述的柱塞套，其特征在于所述柱塞套與底座(30)為螺紋連接，所述柱塞套連通臺(tái)( 設(shè)置在柱塞套的幾何中心。
4.如權(quán)利要求1所述的柱塞套，其特征在于所述柱塞套與底座(30)通過卡接的方式固定安裝。
5.一種細(xì)胞自動(dòng)化處理裝置，其特征在于包括柱塞套(1)、柱塞(20)、底座(30)，所述柱塞00)設(shè)于柱塞套內(nèi)，所述柱塞套安裝在底座(30)上，所述柱塞套的底部設(shè)有第一柱塞套通道和第二柱塞套通道，所述底座(30)開設(shè)有第一底座通道和第二底座通道，其中所述第一柱塞套通道和所述第一底座通道連通形成通道A，所述第二柱塞套通道和所述第二底座通道連通形成通道B，所述第二柱塞套通道和所述第二底座通道的連接處設(shè)有微孔濾膜 (8)，所述通道A的孔徑設(shè)置為允許不能從所述微孔濾膜(8)上穿流的細(xì)胞穿流，在微孔濾膜8的下方與底座之間設(shè)置膜下支架(9)，膜下支架(9)上開設(shè)有至少一個(gè)與所述第二底座通道連通的液體通孔(901)。
6.如權(quán)利要求5所述的細(xì)胞自動(dòng)化處理裝置，其特征在于還包括膜上加液容器、膜下加液容器及廢液容器(73)，所述第一底座通道與所述膜上加液容器及所述廢液容器(73) 連接，所述第二底座通道與所述膜下加液容器連接，所述膜上加液容器和所述膜下加液容器與壓力源連接。
7.如權(quán)利要求6所述的細(xì)胞自動(dòng)化處理裝置，其特征在于所述壓力源為氣壓源或液體泵。
8.如權(quán)利要求6或7所述的細(xì)胞自動(dòng)化處理裝置，其特征在于所述柱塞套為一管型器件，其上部為開口端，底部封殼上設(shè)有向下延伸的柱塞套連通臺(tái)0)，柱塞套連通臺(tái)(2) 中開設(shè)有連通臺(tái)通孔G)，所述連通臺(tái)通孔(4)作為所述第一柱塞套通道，所述柱塞套(1) 底部封殼上設(shè)有柱塞套底孔(3)，所述柱塞套底孔C3)作為所述第二柱塞套通道；所述底座 (30)對(duì)應(yīng)柱塞套連通臺(tái)( 的連通臺(tái)通孔(4)設(shè)有膜上連通孔(32)，所述膜上連通孔(32) 作為所述第一底座通道，所述底座(30)在微孔濾膜(8)的下方開設(shè)有膜下空腔(34)，膜下空腔(34)與至少一個(gè)膜下連通孔連通，所述膜下空腔(34)及與之連通的膜下連通孔作為所述第二底座通道，膜下支架(9)的液體通孔(901)與所述膜下空腔(34)連通。
9.如權(quán)利要求8所述的細(xì)胞自動(dòng)化處理裝置，其特征在于還包括設(shè)置在柱塞00)上方的升降桿下壓塊(60)，升降桿下壓塊(60)上設(shè)置有測(cè)力裝置，升降桿下壓塊(60)通過升降桿(61)與升降桿電機(jī)(62)連接。
10.如權(quán)利要求9所述的細(xì)胞自動(dòng)化處理裝置，其特征在于升降桿下壓塊(60)下面安裝電磁鐵(50)，柱塞00)尾端的推動(dòng)件卡上軟磁體00)。
全文摘要
一種柱塞套，用于安裝在底座上，柱塞套的底部設(shè)有第一柱塞套通道和第二柱塞套通道，底座開設(shè)有第一底座通道和第二底座通道，其中第一柱塞套通道和第一底座通道連通形成通道A，所述第二柱塞套通道和所述第二底座通道連通形成通道B，所述第二柱塞套通道和所述第二底座通道的連接處設(shè)有微孔濾膜，所述通道A的孔徑設(shè)置為允許不能從所述微孔濾膜上穿流的細(xì)胞穿流，在微孔濾膜的下方與底座之間設(shè)置膜下支架，膜下支架上開設(shè)有至少一個(gè)與所述第二底座通道連通的液體通孔。本發(fā)明還提供一種包括該柱塞套的細(xì)胞自動(dòng)化處理裝置。本發(fā)明可滿足各種處理液的進(jìn)入要求，柱塞套可方便的從自動(dòng)化處理裝置上取下和安裝，容易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化處理。
文檔編號(hào)C12M1/12GK102391946SQ201110356570
公開日2012年3月28日 申請(qǐng)日期2011年11月11日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月11日
發(fā)明者李飛揚(yáng), 楊仕琴, 楊濤, 黃世海 申請(qǐng)人:武漢優(yōu)視科技有限公司