專利名稱：一種乳酸乳球菌乳脂亞種菌株及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種微生物新菌株及其應(yīng)用，具體涉及一種乳酸乳球菌乳脂亞種菌株V401-403及由該菌株制備蛋乳發(fā)酵飲料的方法及制得的蛋乳發(fā)酵飲料。
背景技術(shù)：
雞蛋中含有人體所必需的優(yōu)良蛋白質(zhì)、脂肪、卵磷脂與多種磷脂質(zhì)、礦物質(zhì)、維生素等營養(yǎng)物質(zhì)，其營養(yǎng)豐富，是一種十分理想的蛋白質(zhì)食物；牛乳除含有豐富的蛋白質(zhì)、鈣、無機(jī)鹽、維生素和多不飽和脂肪酸，是老少皆宜的營養(yǎng)食品。蛋乳兩者結(jié)合使氨基酸更加平衡，利于吸收和利用。牛乳除含有豐富營養(yǎng)成分外，還含有較多的乳糖。通過有益乳酸菌發(fā)酵，可以轉(zhuǎn)化乳糖，消除乳糖不耐受反應(yīng)，生成具有多種功能性的胞外多糖、新的免疫調(diào)節(jié)因子和多種功能性多肽益生成分，容易消化吸收，調(diào)節(jié)腸道功能，有其他食品無法代替的作用。胞外多糖(exopolysaccharides, EPS)是一些特殊微生物在生長代謝過程中分泌到細(xì)胞壁外、易與菌體分離、分泌到環(huán)境中的水溶性多糖，屬于微生物的次級(jí)代謝產(chǎn)物。對微生物的生長有重要意義。乳酸菌EPS還具有降低小鼠血液膽固醇含量、抗腫瘤以及促進(jìn)益生菌與腸黏膜的吸附等重要生理活性。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種乳酸乳球菌乳脂亞種菌株V401-403。本發(fā)明菌株V401-403是從伊犁牧區(qū)農(nóng)家的酸馬奶中分離篩選到的一株乳酸乳球菌乳脂亞種菌株(Lactoccous lactis subsp. Cremoris)新菌株，已于2011年5月16日保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心(地址北京市朝陽區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào)，郵編100101)，保藏號(hào) CGMCC No 4849。該菌株具體通過如下方法分離得到取酸馬奶樣品5mL,放入盛有45mL滅菌生理鹽水的三角瓶中，置于搖床振蕩5min后，梯度稀釋；取10_4、10_5、10_6三個(gè)稀釋度進(jìn)行涂布，于37°C培養(yǎng)48-7 ;挑取單菌落分別培養(yǎng)后，劃線分離，重復(fù)劃線操作，直至鏡檢菌體細(xì)胞形態(tài)一致時(shí)認(rèn)為菌株分離完成。該菌株具有如下特性該菌呈鏈球狀，為革蘭氏陽性菌。該菌株產(chǎn)胞外多糖能力強(qiáng)。本發(fā)明菌株V401-403的16S rDNA序列與目前發(fā)表的乳酸乳球菌乳脂亞種的16SrDNA，同源性達(dá)到95%以上。綜合形態(tài)特征與16SrDNA序列鑒定，V401-403為乳酸乳球菌乳脂亞種新菌株(Lactoccous lactis subsp. cremoris.)。本發(fā)明還提供由乳酸乳球菌乳脂亞種菌株V401-403制備蛋乳發(fā)酵飲料的方法。所述方法是將雞蛋液與水混合后，與經(jīng)過巴氏殺菌的原料奶進(jìn)行混合，并攪拌均勻，加入甜味劑經(jīng)過過濾得到蛋奶混合液，然后將在原料奶中接種了乳酸乳球菌乳脂亞種V401-403后制得的生產(chǎn)用發(fā)酵劑接種到上述制得的蛋奶混合液中，攪拌均勻后制得。所述方法具體包括下述步驟
I)將雞蛋液與水按照I : O. 5-2的體積比混合，充分?jǐn)嚢杈鶆?，得到雞蛋液水溶液；2)將步驟I)中得到的雞蛋液水溶液在60_85°C下滅菌15min_lh ；3)取原料奶，在65-90°C下，經(jīng)過30s-30min巴氏殺菌處理后，冷卻至60°C，備用；4)將步驟2)中得到的經(jīng)過滅菌的雞蛋液水溶液和步驟3)中得到的經(jīng)過巴氏殺菌的原料奶在無菌條件下按照I : 1-2 (v/v)混合攪拌均勻，并加入甜味劑,過濾,冷卻到45-55 °C，得到蛋奶混合液；5)將蛋奶混合液在10_25MPa壓力下進(jìn)行均質(zhì)處理1_2次；6)將深凍乳酸乳球菌乳脂亞種按5-15% (v/v)接種到按照步驟3)制備的經(jīng)過巴氏滅菌的原料奶中，培養(yǎng)至菌密度達(dá)I X IO8-I X 10ncfu/ml，作為生產(chǎn)用發(fā)酵劑；7)將步驟5)中均質(zhì)處理后的蛋乳混合液冷卻到30_43°C，按2_10%的體積比接種步驟6)中得到的生產(chǎn)用發(fā)酵劑，攪拌均勻后無菌分裝，置于37°C恒溫培養(yǎng)箱中發(fā)酵IOh取出，然后在0-8 °C成熟12-38h，于4-8°C下冷藏。優(yōu)選地，所述方法包括下述步驟I)將雞蛋液與水按照I : 1-2的體積比混合，充分?jǐn)嚢杈鶆?，得到雞蛋液水溶液；2)將步驟I)中得到的雞蛋液水溶液在60_80°C下滅菌15_30min ；3)取原料奶，在70_80°C下，經(jīng)過3_20min巴氏殺菌處理后，冷卻至60°C，備用；4)將步驟2)中得到的經(jīng)過滅菌的雞蛋液水溶液和步驟3)中得到的經(jīng)過巴氏殺菌的牛乳在無菌條件下按照I : l_1.8(v/v)混合攪拌均勻，并加入甜味劑,過濾,冷卻到45-55 °C，得到蛋奶混合液；5)將蛋奶混合液在15_20MPa壓力下進(jìn)行均質(zhì)處理1_2次；6)將深凍乳酸乳球菌乳脂亞種按5-15% (v/v)接種到按照步驟3)制備的經(jīng)過巴氏滅菌的牛乳中，培養(yǎng)至菌密度達(dá)lX109-lX101(lCfu/ml，作為生產(chǎn)用發(fā)酵劑；7)將步驟5)中均質(zhì)處理后的蛋乳混合液冷卻到35_40°C，按2_6%的體積比接種步驟6)中得到的生產(chǎn)用發(fā)酵劑，攪拌均勻后無菌分裝，置于37°C恒溫培養(yǎng)箱中發(fā)酵IOh取出，然后在2-6°C成熟18-36h，于4-8°C下冷藏。更優(yōu)選地，所述方法下述步驟I)將雞蛋液與水按照I : I的體積比混合，充分?jǐn)嚢杈鶆颍?)將步驟I)中得到的雞蛋液在65°C下滅菌30min ；3)取原料奶，在68°C下，經(jīng)過15min巴氏殺菌處理后，冷卻至60°C，備用；4)將步驟2)中得到的經(jīng)過滅菌的雞蛋液和步驟3)中得到的經(jīng)過巴氏殺菌的牛乳在無菌條件下按照I : l(v/v)混合攪拌均勻，并加入甜味劑，過濾，冷卻到50°C，得到蛋奶混合液；5)將蛋奶混合液在20MPa壓力下進(jìn)行均質(zhì)處理I次；6)將深凍乳酸乳球菌乳脂亞種按5% (v/v)接種到按照步驟3)制備的經(jīng)過巴氏滅菌的牛乳中，培養(yǎng)至菌密度達(dá)I X IO9-I X 10ncfu/ml，作為生產(chǎn)用發(fā)酵劑；7)將步驟5)中均質(zhì)處理后的蛋乳混合液冷卻到38°C，按4%的體積比接種步驟6)中得到的生產(chǎn)用發(fā)酵劑，攪拌均勻后無菌分裝，置于37°C恒溫培養(yǎng)箱中發(fā)酵IOh取出，然后在4°C成熟24h，于4-8 °C下冷藏。
所述步驟6)中的乳酸乳球菌乳脂亞種為乳酸乳球菌乳脂亞種菌株(Lactoccouslactis subsp. Cremoris) V401-403，其保藏號(hào)為 CGMCC No 4849。所述步驟I)中的雞蛋液為全蛋液、蛋白液或蛋黃液。所述步驟4)中的甜味劑的量占蛋奶混合液的2-12%。優(yōu)選地，所述步驟4)中的甜味劑的量占蛋奶混合液的4_10%。所述原料奶為還原奶或鮮奶，可為牛奶、羊奶、或其他哺乳動(dòng)物奶，優(yōu)選為牛奶。
所述雞蛋液通過下述方法制得用清水清洗蛋殼，然后用2%次氯酸溶液浸泡5min，晾干外殼后，在潔凈生產(chǎn)線上進(jìn)行蛋液生產(chǎn)，即經(jīng)蛋殼切割、蛋殼掰分、蛋液(蛋清、蛋黃或全蛋)收集、在60-70°C下，經(jīng)過3-10min巴氏殺菌處理后，冷卻至4_10°C，備用。所述分裝為無菌灌裝、杯裝或瓶裝。制得的蛋乳發(fā)酵飲料中，每罐、每杯或每瓶的雞蛋液含量按質(zhì)量比為15-30%。本發(fā)明還提供由上述方法制得的蛋乳發(fā)酵飲料。本發(fā)明提供的乳酸乳球菌乳脂亞種菌株V401-403，該菌株產(chǎn)胞外多糖能力強(qiáng)。制備本發(fā)明提供的蛋乳發(fā)酵飲料時(shí)，采用優(yōu)質(zhì)的乳酸乳球菌乳脂亞種(Lactoccous lactis subsp. cremoris)菌株V401-403進(jìn)行發(fā)酵,使得制得的發(fā)酵飲料具有優(yōu)良的生產(chǎn)理化特性、風(fēng)味特性、以及色澤和質(zhì)地，含有豐富的胞外多糖，具有良好的口感與風(fēng)味，粘度適中。
圖I為在顯微鏡下觀察的乳酸乳球菌乳脂亞種V401-403菌株的圖片。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例，對本發(fā)明的具體實(shí)施方式
作進(jìn)一步詳細(xì)描述。以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。下述實(shí)施例中使用的納豆膏及松花蛋膏按照如下方法制備。制備蛋清液用清水清洗蛋殼,然后用2%次氯酸溶液浸泡5min，晾干外殼后,在潔凈生產(chǎn)線上進(jìn)行蛋液生產(chǎn)，即經(jīng)蛋殼切割、蛋殼掰分、蛋清收集、在60°C下，經(jīng)過5min巴氏殺菌處理后，冷卻至6°C，備用。制備蛋黃液用清水清洗蛋殼,然后用2%次氯酸溶液浸泡5min，晾干外殼后，在潔凈生產(chǎn)線上進(jìn)行蛋液生產(chǎn)，即經(jīng)蛋殼切割、蛋殼掰分、蛋黃收集、60°C下，經(jīng)5min巴氏殺菌處理，冷卻至6 °C，備用。制備全蛋液用清水清洗蛋殼,然后用2%次氯酸溶液浸泡5min，晾干外殼后,在潔凈生產(chǎn)線上進(jìn)行蛋液生產(chǎn)，即經(jīng)蛋殼切割、蛋殼掰分、全蛋收集、在60°C下，經(jīng)過5min巴氏殺菌處理后，冷卻至6°C，備用。實(shí)施例I蛋乳發(fā)酵飲料的制備I)將上述制備得到的IL蛋清液與IL水混合，充分?jǐn)嚢杈鶆?，得到雞蛋液水溶液；2)將步驟I)中得到的雞蛋液水溶液在65°C下滅菌30min ；3)取2L新鮮標(biāo)準(zhǔn)化牛奶，在68°C下，經(jīng)過15min巴氏殺菌處理后，冷卻至60°C，備用；4)將步驟2)中得到的2L經(jīng)過滅菌的雞蛋液水溶液和步驟3)中得到的2L經(jīng)過巴氏殺菌的牛奶在無菌條件下混合攪拌均勻，加入240g甜味劑(蔗糖)，過濾，冷卻到50°C，得到蛋奶混合液；5)將蛋奶混合液在20MPa壓力下進(jìn)行均質(zhì)處理I次；6)將深凍乳酸乳球菌乳脂亞種按5% (v/v)接種到按照步驟3)制備的經(jīng)過巴氏滅菌的新鮮標(biāo)準(zhǔn)化牛奶中，培養(yǎng)至菌密度達(dá)lxl01(lcfu/mL，作為生產(chǎn)用發(fā)酵劑；7)將步驟5)中均質(zhì)處理后的蛋乳混合液冷卻到38°C，按4%的體積比接種步驟6)中得到的生產(chǎn)用發(fā)酵劑，攪拌均勻后無菌分裝，置于37°C恒溫培養(yǎng)箱中發(fā)酵IOh取出，然后在4°C成熟24h，制得蛋奶，于4°C下冷藏。實(shí)施例2蛋乳發(fā)酵飲料的制備I)將上述制備得到的IL全蛋液與O. 5L水混合，充分?jǐn)嚢杈鶆?，得到雞蛋液水溶液；2)將步驟I)中得到的雞蛋液水溶液在60°C下滅菌Ih ；3)取3L新鮮標(biāo)準(zhǔn)化牛奶，在65°C下，經(jīng)過30min巴氏殺菌處理后，冷卻至60°C，備用；4)將步驟2)中得到的I. 5L經(jīng)過滅菌的雞蛋液水溶液和步驟3)中得到的4L經(jīng)過巴氏殺菌的牛奶在無菌條件下混合攪拌均勻，加入120g甜味劑(蔗糖)，過濾，冷卻到45°C，得到蛋奶混合液；5)將蛋奶混合液在IOMPa壓力下進(jìn)行均質(zhì)處理I次；6)將深凍乳酸乳球菌乳脂亞種按15% (v/v)接種到按照步驟3)制備的經(jīng)過巴氏滅菌的新鮮標(biāo)準(zhǔn)化牛奶中，培養(yǎng)至菌密度達(dá)lxlOncfu/mL，作為生產(chǎn)用發(fā)酵劑；7)將步驟5)中均質(zhì)處理后的蛋乳混合液冷卻到30°C，按2%的體積比接種步驟6)中得到的生產(chǎn)用發(fā)酵劑，攪拌均勻后無菌分裝，置于37°C恒溫培養(yǎng)箱中發(fā)酵IOh取出，然后在0°C成熟12h，制得蛋奶，于8°C下冷藏。實(shí)施例3蛋乳發(fā)酵飲料的制備I)將上述制備得到的IL蛋黃液與2L水按混合，充分?jǐn)嚢杈鶆颍玫诫u蛋液水溶液；2)將步驟I)中得到的雞蛋液水溶液在85°C下滅菌15min ；3)取3L新鮮標(biāo)準(zhǔn)化牛奶，在90°C下，經(jīng)過30s巴氏殺菌處理后，冷卻至60°C，備用；4)將步驟2)中得到的3L經(jīng)過滅菌的雞蛋液水溶液和步驟3)中得到的3L經(jīng)過巴氏殺菌的牛奶在無菌條件下混合攪拌均勻，加入720g甜味劑(蔗糖)，過濾，冷卻到50°C，得到蛋奶混合液；5)將蛋奶混合液在25MPa壓力下進(jìn)行均質(zhì)處理2次；6)將深凍乳酸乳球菌乳脂亞種按5% (v/v)接種到按照步驟3)制備的經(jīng)過巴氏滅菌的新鮮標(biāo)準(zhǔn)化牛奶中，培養(yǎng)至菌密度達(dá)IX 108cfu/ml，作為生產(chǎn)用發(fā)酵劑；7)將步驟5)中均質(zhì)處理后的蛋乳混合液冷卻到43°C，按10%的體積比接種步驟
6)中得到的生產(chǎn)用發(fā)酵劑，攪拌均勻后無菌分裝，置于37°C恒溫培養(yǎng)箱中發(fā)酵IOh取出，然后在8°C成熟38h，制得蛋奶，于4°C下冷藏。實(shí)施例4蛋乳發(fā)酵飲料的制備I)將上述制備得到的IL蛋清液與IL水按混合，充分?jǐn)嚢杈鶆?，得到雞蛋液水溶液；2)將步驟I)中得到的雞蛋液水溶液在80°C下滅菌30min ；3)取3L新鮮標(biāo)準(zhǔn)化牛奶，在70°C下，經(jīng)過3min巴氏殺菌處理后，冷卻至60°C，備用；4)將步驟2)中得到的2L經(jīng)過滅菌的雞蛋液水溶液和步驟3)中得到的I. 8L經(jīng)過巴氏殺菌的牛奶在無菌條件下混合攪拌均勻，加入152g甜味劑(蔗糖)，過濾，冷卻到55°C，得到蛋奶混合液；5)將蛋奶混合液在20MPa壓力下進(jìn)行均質(zhì)處理2次；6)將深凍乳酸乳球菌乳脂亞種按5% (v/v)接種到按照步驟3)制備的經(jīng)過巴氏滅菌的新鮮標(biāo)準(zhǔn)化牛奶中，培養(yǎng)至菌密度達(dá)lX101(lCfU/ml，作為生產(chǎn)用發(fā)酵劑；7)將步驟5)中均質(zhì)處理后的蛋乳混合液冷卻到35°C，按2%的體積比接種步驟
6)中得到的生產(chǎn)用發(fā)酵劑，攪拌均勻后無菌分裝，置于37°C恒溫培養(yǎng)箱中發(fā)酵IOh取出，然后在6°C成熟18h，制得蛋奶，于4°C下冷藏。實(shí)施例5蛋乳發(fā)酵飲料的制備I)將上述制備得到的IL蛋黃液與IL水按混合，充分?jǐn)嚢杈鶆?，得到雞蛋液水溶液；2)將步驟I)中得到的雞蛋液水溶液在60°C下滅菌30min ；3)取3L新鮮標(biāo)準(zhǔn)化牛奶，在80°C下，經(jīng)過20min巴氏殺菌處理后，冷卻至60°C，備用；4)將步驟2)中得到的2L經(jīng)過滅菌的雞蛋液水溶液和步驟3)中得到的2L經(jīng)過巴氏殺菌的牛奶在無菌條件下混合攪拌均勻，加入400g甜味劑(蔗糖)，過濾，冷卻到45°C，得到蛋奶混合液；5)將蛋奶混合液在15MPa壓力下進(jìn)行均質(zhì)處理2次；6)將深凍乳酸乳球菌乳脂亞種按15% (v/v)接種到按照步驟3)制備的經(jīng)過巴氏滅菌的新鮮標(biāo)準(zhǔn)化牛奶中，培養(yǎng)至菌密度達(dá)IX 109cfu/ml，作為生產(chǎn)用發(fā)酵劑；7)將步驟5)中均質(zhì)處理后的蛋乳混合液冷卻到40°C，按6%的體積比接種步驟
6)中得到的生產(chǎn)用發(fā)酵劑，攪拌均勻后無菌分裝，置于37°C恒溫培養(yǎng)箱中發(fā)酵IOh取出，然后在2°C成熟36h，制得蛋奶，于4°C下冷藏。對比例將市售的酸奶作為對比例。對對比例及實(shí)施例一得到的產(chǎn)品進(jìn)行感官實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)，具體方法如下采用不記名打分的方式進(jìn)行100人評(píng)分測評(píng)?？诟?、滋味、氣味、組織狀態(tài)、整體感覺5項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行打分，滿分為100分，分?jǐn)?shù)越高，標(biāo)示產(chǎn)品效果越好，對品嘗結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果如下表I所示。表I
權(quán)利要求
1.乳酸乳球菌乳脂亞種菌株(Lactoccouslactis subsp. cremoris) V401-403,其保藏號(hào)為CGMCC No 4849。
2.一種通過權(quán)利要求I所述的乳酸乳球菌乳脂亞種V401-403發(fā)酵制備蛋乳發(fā)酵飲料的方法，其是將雞蛋液與水混合后，與經(jīng)過巴氏殺菌的原料奶進(jìn)行混合，并攪拌均勻，加入甜味劑經(jīng)過過濾得到蛋奶混合液，然后將在原料奶中接種了乳酸乳球菌乳脂亞種V401-403后制得的生產(chǎn)用發(fā)酵劑接種到上述制得的蛋奶混合液中，攪拌均勻后制得。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備蛋乳發(fā)酵飲料的方法，其特征在于，該方法包括下述步驟1)將雞蛋液與水按照I: O. 5-2的體積比混合，充分?jǐn)嚢杈鶆?，得到雞蛋液水溶液；2)將步驟I)中得到的雞蛋液水溶液在60-85°C下滅菌15min-lh；3)取原料奶，在65-90°C下，經(jīng)過30s-30min巴氏殺菌處理后，冷卻至60°C，備用；4)將步驟2)中得到的經(jīng)過滅菌的雞蛋液水溶液和步驟3)中得到的經(jīng)過巴氏殺菌的原料奶在無菌條件下按照I : l_2(v/v)混合攪拌均勻，并加入甜味劑,過濾,冷卻到45-55°C,得到蛋奶混合液；5)將蛋奶混合液在10-25MPa壓力下進(jìn)行均質(zhì)處理1_2次；6)將深凍乳酸乳球菌乳脂亞種按5-15%(v/v)接種到按照步驟3)制備的經(jīng)過巴氏滅菌的原料奶中，培養(yǎng)至菌密度達(dá)I X IO8-I X 10ncfu/ml，作為生產(chǎn)用發(fā)酵劑；7)將步驟5)中均質(zhì)處理后的蛋乳混合液冷卻到30-43°C，按2-10%的體積比接種步驟6)中得到的生產(chǎn)用發(fā)酵劑，攪拌均勻后無菌分裝，置于37°C恒溫培養(yǎng)箱中發(fā)酵IOh取出，然后在0-8 °C成熟12-38h。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述制備蛋乳發(fā)酵飲料的方法，其包括下述步驟1)將雞蛋液與水按照I: 1-2的體積比混合，充分?jǐn)嚢杈鶆?，得到雞蛋液水溶液；2)將步驟I)中得到的雞蛋液水溶液在60-80°C下滅菌15-30min；3)取原料奶，在70-80°C下，經(jīng)過3-20min巴氏殺菌處理后，冷卻至60°C，備用；4)將步驟2)中得到的經(jīng)過滅菌的雞蛋液水溶液和步驟3)中得到的經(jīng)過巴氏殺菌的牛乳在無菌條件下按照I : l_1.8(v/v)混合攪拌均勻，并加入甜味劑,過濾,冷卻到45-55°C,得到蛋奶混合液；5)將蛋奶混合液在15-20MPa壓力下進(jìn)行均質(zhì)處理1_2次；6)將深凍乳酸乳球菌乳脂亞種按5-15%(v/v)接種到按照步驟3)制備的經(jīng)過巴氏滅菌的牛乳中，培養(yǎng)至菌密度達(dá)I X IO9-I X KTcfu/ml，作為生產(chǎn)用發(fā)酵劑；7)將步驟5)中均質(zhì)處理后的蛋乳混合液冷卻到35-40°C，按2-6%的體積比接種步驟6)中得到的生產(chǎn)用發(fā)酵劑，攪拌均勻后無菌分裝，置于37°C恒溫培養(yǎng)箱中發(fā)酵IOh取出，然后在2-6°C成熟18-36h。
5.根據(jù)權(quán)利要求2-4任一項(xiàng)所述制備蛋乳發(fā)酵飲料的方法，其包括下述步驟1)將雞蛋液與水按照I: I的體積比混合，充分?jǐn)嚢杈鶆颍玫诫u蛋液水溶液；2)將步驟I)中得到的雞蛋液水溶液在65°C下滅菌30min；3)取原料奶，在68°C下，經(jīng)過15min巴氏殺菌處理后，冷卻至60°C，備用；4)將步驟2)中得到的經(jīng)過滅菌的雞蛋液水溶液和步驟3)中得到的經(jīng)過巴氏殺菌的牛乳在無菌條件下按照I : I (v/v)混合攪拌均勻，并加入甜味劑，過濾，冷卻到50°C，得到蛋奶混合液； 5)將蛋奶混合液在20MPa壓力下進(jìn)行均質(zhì)處理I次；6)將深凍乳酸乳球菌乳脂亞種按5%(v/v)接種到按照步驟3)制備的經(jīng)過巴氏滅菌的牛乳中，培養(yǎng)至菌密度達(dá)lX109-lX101(lCfu/ml，作為生產(chǎn)用發(fā)酵劑；7)將步驟5)中均質(zhì)處理后的蛋乳混合液冷卻到38°C，按4%的體積比接種步驟6)中得到的生產(chǎn)用發(fā)酵劑，攪拌均勻后無菌分裝，置于37°C恒溫培養(yǎng)箱中發(fā)酵IOh取出，然后在4°C 成熟 24h。
6.根據(jù)權(quán)利要求2-5任一項(xiàng)所述制備蛋乳發(fā)酵飲料的方法，其特征在于，所述步驟6)中的乳酸乳球菌乳脂亞種為乳酸乳球菌乳脂亞種菌株(Lactoccous lactis subsp.Cremoris) V401-403，其保藏號(hào)為 CGMCC No 4849。
7.根據(jù)權(quán)利要求2-5任一項(xiàng)所述的制備蛋乳發(fā)酵飲料的方法，其特征在于，所述步驟I)中的雞蛋液為全蛋液、蛋白液或蛋黃液。
8.根據(jù)權(quán)利要求2-5任一項(xiàng)所述制備蛋乳發(fā)酵飲料的方法，其特征在于，所述步驟4)中的甜味劑的量占蛋奶混合液的2-12%。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述制備蛋乳發(fā)酵飲料的方法，其特征在于，所述步驟4)中的甜味劑的量占蛋奶混合液的4-10%。
10.根據(jù)權(quán)利要求2-9任意一項(xiàng)所述方法制備的蛋乳發(fā)酵飲料。
全文摘要
本發(fā)明涉及乳酸乳球菌乳脂亞種菌株及其應(yīng)用。具體地，本發(fā)明提供一株乳酸乳球菌乳脂亞種V401-403(Lactoccous lactis subsp.cremoris)。其是從酸馬奶中分離得到，其保藏號(hào)為CGMCC No 4849。本發(fā)明還提供由上述菌株制備蛋乳發(fā)酵飲料的方法及制得的蛋乳發(fā)酵飲料。上述方法是將雞蛋液與水混合后，與經(jīng)過巴氏殺菌的原料奶進(jìn)行混合，并攪拌均勻，加入甜味劑經(jīng)過過濾得到蛋奶混合液，然后將在原料奶中接種了乳酸乳球菌乳脂亞種V401-403后制得的生產(chǎn)用發(fā)酵劑接種到上述制得的蛋奶混合液中，攪拌均勻后制得。從而使制得的蛋奶發(fā)酵飲料胞外多糖含量豐富、具有良好的口感與風(fēng)味，粘度適中。
文檔編號(hào)C12N1/20GK102952758SQ20111023652
公開日2013年3月6日 申請日期2011年8月17日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月17日
發(fā)明者盧曉明, 陳尚武, 劉旭明, 盧相義, 左芳雷, 孫曉菲 申請人:北京德青源農(nóng)業(yè)科技股份有限公司