專利名稱：海洋鏈霉菌產(chǎn)生的化合物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種海洋鏈霉菌產(chǎn)生的化合物及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
放線菌是一類基因組DNA的G+C mol %含量高、具有復(fù)雜形態(tài)分化的革蘭氏陽性細(xì)菌，因其菌落多呈放射狀而得名。放線菌能生產(chǎn)多種具有極高經(jīng)濟(jì)價(jià)值的生物活性物質(zhì)， 被認(rèn)為是一類重要的工業(yè)微生物資源，迄今發(fā)現(xiàn)的兩萬余種微生物來源的生物活性物質(zhì)中，約一半是由放線菌產(chǎn)生的。目前，世界上絕大多數(shù)的金屬開采業(yè)采用機(jī)械加化學(xué)方法進(jìn)行，采礦同時(shí)產(chǎn)生的大量粉塵、噪聲、有毒有害廢水等所造成的嚴(yán)重污染已被舉世公認(rèn)。并且限于技術(shù)手段的原因，所開采的礦石多限于中、高品位礦石，大量的對(duì)于“機(jī)械加化學(xué)方法”來說是較低品位的礦源以及對(duì)中、高品位礦石開采后殘留的較低品位礦全部處于擱置甚至浪費(fèi)狀態(tài)。來源于煤礦、鐵礦及金屬硫化物礦山等的重金屬離子廢水，以及其它工業(yè)過程產(chǎn)生的重金屬離子廢水，主要以自然凈化、化學(xué)沉淀、離子交換、蒸發(fā)電解、高分子材料吸附等物理、化學(xué)法處理，而這些方法都面臨能耗高、金屬離子殘留大、對(duì)金屬離子的回收利用度低、方法不夠環(huán)保等問題。傳統(tǒng)的使用微生物轉(zhuǎn)化法處理礦石、水體中重金屬離子的方法，多集中在微生物通過其自身的代謝特點(diǎn)改變金屬離子的化學(xué)存在狀態(tài)方面，能耗高，產(chǎn)率低，金屬回收效率低下。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供鏈霉菌(Streptomyces sp. ) FXJ8. 012。本發(fā)明提供的鏈霉菌(Streptomyces sp. )FXJ8. 012，其保藏號(hào)為CGMCC No. 4950。所述的鏈霉菌(Streptomycessp. )FXJ8. 012 CGMCC No. 4950 在制備下述的式 I 所示化合物中的應(yīng)用也是本發(fā)明保護(hù)的范圍。本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種式I所示化合物。本發(fā)明提供了式I所示化合物，
權(quán)利要求
1.鏈霉菌(Sti^ptomycessp.) FXJ8. 012，其保藏號(hào)為 CGMCC No. 4950。
2.權(quán)利要求1所述的鏈霉菌(Streptomycessp.) FXJ8. 012 CGMCC No. 4950在制備如下權(quán)利要求3或4所述的式I所示化合物中的應(yīng)用。
3.式I所示化合物，
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的式I所示化合物，其特征在于所述式I所示化合物為如下式I-I所示化合物或如下式1-2所示化合物
5. 一種制備權(quán)利要求3或4所述的式I所示化合物的方法，包括如下步驟1)發(fā)酵權(quán)利要求1所述的鏈霉菌(Sti^ptomyces sp. )FXJ8. 012 CGMCC No. 4950，收集發(fā)酵液，離心取菌絲體；2)將步驟1)得到的菌絲體用無水乙醇抽提，收集抽提液、濃縮、干燥，得到乙醇粗提物；3)將步驟幻得到的乙醇粗提物進(jìn)行硅膠柱層析分離，得到一次分離產(chǎn)物；4)將步驟3)得到的一次分離產(chǎn)物進(jìn)行凝膠色譜分離，得到二次分離產(chǎn)物；5)將步驟4)得到的二次分離產(chǎn)物進(jìn)行HPLC分離，得到式I所示化合物，即為式I-I所示化合物或式1-2所示化合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于步驟1)中，所述發(fā)酵的時(shí)間為5天-10天，所述發(fā)酵的溫度為25°C -30°C;所述離心的時(shí)間為10分鐘-20分鐘，所述離心的溫度為25°C -28°C ；所述發(fā)酵的時(shí)間具體為5天、7天或10天，所述發(fā)酵的溫度具體為25°C、28°C或30°C ； 所述離心的時(shí)間具體為10分鐘、15分鐘或20分鐘，所述離心的溫度具體為25°C、26°C 或 28°C ；步驟幻中，所述抽提為將步驟1)得到的所述菌絲體和所述乙醇等體積震蕩混合， 步驟幻中，所述硅膠柱層析分離為將所述乙醇粗提物流過硅膠柱以進(jìn)行吸附，再用洗脫緩沖液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液；所述洗脫緩沖液為氯仿和甲醇的混合液，所述洗脫為梯度洗脫， 所述梯度洗脫的方式為所述洗脫緩沖液中的氯仿的體積百分含量由100%勻速降為 90%，其余為甲醇；步驟4)中，所述凝膠色譜分離為將所述一次分離產(chǎn)物流入凝膠柱，再用洗脫緩沖液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液；所述洗脫緩沖液為甲醇；步驟幻中，所述HPLC為將所述二次分離產(chǎn)物流過色譜柱以進(jìn)行吸附，再用洗脫緩沖液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液；所述洗脫緩沖液為甲醇和水體積比為68 32的混合液。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征在于步驟1)中，所述發(fā)酵采用轉(zhuǎn)速為150r/min-170r/min進(jìn)行振蕩培養(yǎng)；所述振蕩的旋轉(zhuǎn)半徑為16mm，所述離心的轉(zhuǎn)速為6000r/min-8000r/min，所述離心半徑為25. 4cm ；所述發(fā)酵采用轉(zhuǎn)速為150r/min、165r/min或170r/min進(jìn)行振蕩培養(yǎng)；所述離心的轉(zhuǎn)速為 6000r/min、7000r/min 或 8000r/min ；步驟中，所述抽提時(shí)間為他-iai，所述抽提溫度為25 V -28 V ；所述抽提時(shí)間具體為^ulOh或12h，所述抽提溫度具體為25°C、26°C或；步驟3)中，所述洗脫緩沖液的速度為1.8ml/min-2.2ml/min，所述洗脫緩沖液的量為 15-18倍柱體積，所述收集第4-13個(gè)柱體積的洗脫液；所述洗脫緩沖液的速度具體為1. 8ml/min,2ml/min或2. 2ml/min，所述洗脫緩沖液的量具體為15倍柱體積；步驟4)中，所述洗脫緩沖液的速度為0. 4ml/min-0. 6ml/min，所述洗脫緩沖液的體積用量為所述凝膠柱體積的0. 4-0. 6倍；所述收集第0. 1-0. 3個(gè)柱體積的洗脫液；所述洗脫緩沖液的速度具體為0. 4ml/min,0. 5ml/min或0. 6ml/min，所述洗過緩沖液的體積用量具體為所述凝膠柱體積的0. 4倍；步驟5)中，所述洗脫緩沖液的速度為1. Oml/min ； 所述收集洗脫液為如下A或B :A為收集保留時(shí)間為22. 5min的洗脫液，得到式1_1所示化合物； B為收集保留時(shí)間為20. 2min的洗脫液，得到式1_2所示化合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求5-7中任一所述的方法，其特征在于步驟幻中，所述乙醇粗提物和所述硅膠的體積比為1 6-1 10;所述乙醇粗提物和所述硅膠的體積比具體為1 6、1 8或1 10; 所述硅膠的粒徑為100-200目； 所述硅膠柱的柱高80cm ；柱外徑3. 6cm,內(nèi)徑3. Ocm ； 步驟4)中，所述凝膠柱為kphadex LH-20 ； 步驟5)中，所述HPLC的波長為190-800nm。
9.權(quán)利要求1所述的鏈霉菌(Sti^ptomycessp.) FXJ8. 012 CGMCC No. 4950或權(quán)利要求3或4所述式I所示的化合物或權(quán)利要求5-8中任一所述的方法在吸附金屬離子中的應(yīng)用；所述金屬離子具體為狗3+、Cu2+和/或加2+。
10.一種用于吸附金屬離子的產(chǎn)品，其活性成分為權(quán)利要求3或4所述的式I所示化合物或權(quán)利要求 1 所述的鏈霉菌(Sti^ptomyces sp.) FXJ8. 012 CGMCC No. 4950。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種海洋鏈霉菌產(chǎn)生的化合物及其應(yīng)用。本發(fā)明提供了一種式I所示化合物，還提供了制備該化合物的方法，包括如下步驟1)發(fā)酵鏈霉菌(Streptomyces sp.)FXJ8.012 CGMCC No.4950，收集發(fā)酵液，離心取菌絲體；2)將步驟1)得到的菌絲體用乙醇抽提，收集抽提液、濃縮、干燥，得到乙醇粗提物；本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)證明，通過菌株的細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物化合物8.012-1和8.012-2將礦石或水體中的重金屬離子吸附進(jìn)入菌體內(nèi)部，進(jìn)而使得金屬離子在菌體內(nèi)部得到富集；回收菌體從而實(shí)現(xiàn)重金屬離子的回收。
文檔編號(hào)C12R1/465GK102277315SQ20111017431
公開日2011年12月14日 申請(qǐng)日期2011年6月24日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月24日
發(fā)明者劉寧, 張利敏, 郗麗君, 黃英 申請(qǐng)人:中國科學(xué)院微生物研究所