專(zhuān)利名稱(chēng)：一種用酶解法制備乙醇脫氫酶的工藝的制作方法
一種用酶解法制備乙醇脫氫酶的工藝
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用酶解法制備乙醇脫氫酶的工藝。背景技術(shù)：
乙醇脫氫酶(Alcohol dehydronose, EC 1. 1. 1. 1，縮寫(xiě)ADH)屬氧化還原酶類(lèi)，是體內(nèi)一種含Zn的金屬酶，它在乙醇代謝途徑中起著關(guān)鍵酶的重要作用。催化反應(yīng)如下
ADH
權(quán)利要求
1.一種用酶解法制備乙醇脫氫酶的方法，其特征在于，包括以下步驟1)混合液將CBP液和α-淀粉酶液按體積比為5 1-2混合均勻，得混合溶液；取啤酒酵母和上述混合液置反應(yīng)罐中，攪拌均勻；2)在攪拌下調(diào)ρΗ值至6.5-7. 5，在37-42°C條件下攪拌反應(yīng)23h_25h，得酶解啤酒酵母液；3)上述酶解啤酒酵母液經(jīng)離心、超濾濃縮，得濃縮液；4)上述濃縮液經(jīng)干燥得乙醇脫氫酶酶粉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用酶解法制備乙醇脫氫酶的方法，其特征在于，所述步驟1) 的α-淀粉酶液由以下方法制得混合步驟3)的殘?jiān)筒襟E4)的殘?jiān)没旌衔铮瑢⑺龌旌衔锛尤毽宝?. 0-pH7. 0、0. 01mol/L磷酸緩沖液，混合物的質(zhì)量g與磷酸緩沖液的體積ml之比為1 2，攪拌0.5h，經(jīng)離心、超濾濃縮，得α-淀粉酶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用酶解法制備乙醇脫氫酶的方法，其特征在于，步驟2)中的所述啤酒酵母為廢棄啤酒酵母泥，即生產(chǎn)啤酒后過(guò)濾出的啤酒酵母。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用酶解法制備乙醇脫氫酶的工藝，其特征在于，步驟1)中，所述啤酒酵母的質(zhì)量g與混合溶液的體積ml之比為1 2。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用酶解法制備乙醇脫氫酶的方法，其特征在于，所述步驟3) 具體包括301)上述酶解啤酒酵母液抽入離心機(jī)，經(jīng)1200-1500r/min常溫離心收集上清液，殘?jiān)鼔簽V再收集上清液，合并兩次上清液，殘?jiān)Ａ魝溆茫?02)上述合并上清液抽入離心機(jī)，經(jīng)14000-17000r/min常溫離心收集上清液，殘?jiān)Ａ魝溆茫?03)將步驟302)所得的上清液經(jīng)超濾濃縮，得濃縮液。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用酶解法制備乙醇脫氫酶的方法，其特征在于，所述步驟4) 具體為，上述濃縮液轉(zhuǎn)入冷凍干燥機(jī)中冷凍干燥，或用_15°C以下的冷丙酮洗滌脫水干燥， 得乙醇脫氫酶酶粉。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用酶解法制備乙醇脫氫酶的方法，其特征在于，包括以下步驟1)混合液將CBP液和α-淀粉酶液按體積比為5∶1-2混合均勻，得混合溶液；取啤酒酵母和上述混合液置反應(yīng)罐中，攪拌均勻；2)在攪拌下調(diào)pH值至6.5-7.5，在37-42℃條件下攪拌反應(yīng)23h-25h，得酶解啤酒酵母液；3)上述酶解啤酒酵母液經(jīng)離心、超濾濃縮，得濃縮液；4)上述濃縮液經(jīng)干燥得乙醇脫氫酶酶粉。本發(fā)明的原料獲取簡(jiǎn)單，制備設(shè)備簡(jiǎn)單、過(guò)程操作簡(jiǎn)單且時(shí)間不長(zhǎng)。
文檔編號(hào)C12N9/04GK102206615SQ20111010745
公開(kāi)日2011年10月5日 申請(qǐng)日期2011年4月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月27日
發(fā)明者徐鳳彩, 程京燕, 胡永剛, 蘇保榮 申請(qǐng)人:珠海市御品堂生物科技有限公司