專利名稱：一種塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基及其塊菌的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基及其塊菌的制備方法。
背景技術(shù)：
塊菌是世界上最珍貴的食用菌之一，塊菌含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，由中國藥用真菌研究之父、世界著名真菌學(xué)家劉波教授指導(dǎo)，以中國菌物學(xué)會理事長、食用菌教育部工程研究中心主任李玉教授為首席科學(xué)家的研究小組對塊菌長達(dá)八年的專項(xiàng)研究表明塊菌含有豐富的蛋白質(zhì)、18種氨基酸(包括人體不能合成的8種必需氨基酸)、不飽和脂肪酸、多種維生素、鋅、錳、鐵、鈣、磷、硒等必需微量元素，以及鞘脂類、腦苷脂、神經(jīng)酰胺、三萜、雄性酮、腺苷、松露酸、留醇、塊菌多糖、塊菌多肽等大量的代謝產(chǎn)物，具有極高的營養(yǎng)保健價(jià)值。 雄性酮有助陽、調(diào)理內(nèi)分泌的顯著功效；鞘脂類化合物在防止老年癡呆、動脈粥樣硬化以及抗腫瘤細(xì)胞毒性方面有明顯活性；多糖、多肽、三萜具有增強(qiáng)免疫力、抗衰老、抗疲勞作用等等。這些稀有天然化合物的存在構(gòu)成了塊菌神奇作用的物質(zhì)基礎(chǔ)。由于歷史和文化的原因，東方對塊菌的認(rèn)識和了解，就像西方對冬蟲夏草的認(rèn)知一樣，尚處于萌芽階段。其實(shí)這兩種名貴菌類在各自地域所扮演的角色有著驚人的相似之處，都是極度昂貴奢華食材的代表，都具有極好的功能表現(xiàn)，都承載著各自民族悠久的食療文化。塊菌的生長環(huán)境很復(fù)雜，因此，自然生長的塊菌很難得到，國內(nèi)外很多人已經(jīng)研究出了塊菌人工培養(yǎng)的方法，但這些方法只能得到塊菌的某一類成分，而無法得到和自然生長功能相纟觀美的塊菌。
發(fā)明內(nèi)容
基于上述原因，本申請人經(jīng)過多年的研究，發(fā)現(xiàn)一種新的塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基，該發(fā)酵培養(yǎng)基含有氮源、無機(jī)堿、糖類、蛋白胨、薯類、維生素；該發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)生產(chǎn)得到的塊菌， 藥理試驗(yàn)表明，與自然生長的塊菌作用無顯著性差異，充分說明，本發(fā)明發(fā)酵培養(yǎng)基具有重要科學(xué)意義。本發(fā)明通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的?！N發(fā)酵塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基，發(fā)酵培養(yǎng)基中氮源10-50重量份，無機(jī)堿0. 5-5重量份，糖類5-25重量份，蛋白胨1-10重量份，薯類1-100重量份，維生素1-5重量份。其中氮源為麥麩、奶粉、玉米粉中的一種或幾種其中無機(jī)堿為碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、碳酸鈉、碳酸鈣其中糖類為葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖中的一種或幾種。其中薯類為紅薯、白薯、土豆、芋頭中的一種或幾種。其中維生素為維生素片劑(市售維生素片)。一種塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)的塊菌。其中制備方法為將薯類粉碎成漿狀，加水，再加入氮源、糖類，蛋白胨，混合完全，加入無機(jī)堿，滅菌，加入塊菌菌種，放入真空箱中，抽真空，培養(yǎng)，既得。制備實(shí)施例實(shí)施例1一種塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基，發(fā)酵培養(yǎng)基中氮源玉米粉10g，無機(jī)堿碳酸氫鈉0. 5g，糖類蔗糖5g，蛋白胨lg，薯類白薯lg，維生素lg。其中維生素為維生素片劑。上述塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)的塊菌的制備方法為將薯類粉碎成漿狀，加水，再加入氮源、糖類，蛋白胨，混合完全，加入無機(jī)堿，滅菌，加入塊菌菌種，放入真空箱中，抽真空，培養(yǎng)，既得。實(shí)施例2一種塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基，發(fā)酵培養(yǎng)基中氮源玉米粉50g，無機(jī)堿碳酸氫鉀5g，糖類麥芽糖25g，蛋白胨10g，薯類土豆100g，維生素5g。其中維生素為維生素片劑(市售維生素片)上述塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)的塊菌。其中制備方法為將薯類粉碎成漿狀，加水，再加入氮源、糖類，蛋白胨，混合完全，加入無機(jī)堿，滅菌，加入塊菌菌種，放入真空箱中，抽真空，培養(yǎng)，既得。實(shí)施例3一種塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基，發(fā)酵培養(yǎng)基中氮源奶粉15g、玉米粉25g，無機(jī)堿碳酸氫鈉 lg、碳酸鈉1. 5g，糖類蔗糖5g、麥芽糖4g、乳糖8g，蛋白胨4g，薯類紅薯10g、白薯15g、土豆 35g、芋頭5g，維生素2g。其中維生素為維生素片劑(市售維生素片)上述塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)塊菌的制備方法為將薯類粉碎成漿狀，加水，再加入氮源、糖類，蛋白胨，混合完全，加入無機(jī)堿，滅菌，加入塊菌菌種，放入真空箱中，抽真空，培養(yǎng)，既得。實(shí)施例4一種塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基，發(fā)酵培養(yǎng)基中氮源玉米粉30g，無機(jī)堿碳酸氫鉀3g，糖類葡萄糖20g，蛋白胨7g，薯類土豆60g，維生素2g。上述塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)的塊菌的制備方法為將薯類粉碎成漿狀，加水，再加入氮源、糖類，蛋白胨，混合完全，加入無機(jī)堿，滅菌，加入塊菌菌種，放入真空箱中，抽真空，培養(yǎng)，既得。實(shí)施例5一種塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基，發(fā)酵培養(yǎng)基中氮源麥麩15g、玉米粉10g，無機(jī)堿碳酸氫鉀 2g、碳酸鈉2g，糖類麥芽糖10g、乳糖8g，蛋白胨8g，薯類紅薯45g、白薯10g，維生素5g。其中維生素為維生素片劑(市售維生素片)。上述塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)的塊菌的制備方法為將薯類粉碎成漿狀，加水，再加入氮源、糖類，蛋白胨，混合完全，加入無機(jī)堿，滅菌，加入塊菌菌種，放入真空箱中，抽真空，培養(yǎng)，既得。實(shí)施例6一種塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基，發(fā)酵培養(yǎng)基中氮源奶粉50g，無機(jī)堿碳酸鈣3g，糖類葡萄糖 7g、乳糖15g，蛋白胨4g，薯類土豆40g、芋頭5g，維生素2g。其中維生素為維生素片劑(市售維生素片)。
上述塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)的塊菌的制備方法為將薯類粉碎成漿狀，加水，再加入氮源、糖類，蛋白胨，混合完全，加入無機(jī)堿，滅菌，加入塊菌菌種，放入真空箱中，抽真空，培養(yǎng)，既得。藥理實(shí)施例試驗(yàn)1提高免疫力試驗(yàn)試驗(yàn)動物BALB/C雄性小鼠，體重18_20g。試驗(yàn)藥物藥物1組··塊菌(自然生長的，市售)；藥物2組實(shí)施例1的塊菌。藥物3組實(shí)施例2的塊菌。
藥物4組實(shí)施例3的塊菌。試驗(yàn)方法取小鼠，隨機(jī)分組，事先在小鼠造模為免疫力低下，正常組不造模，造模成功開始給藥，對照組給予生理鹽水0. 2ml/20go給藥1組至給藥4組灌胃給藥，給藥量 4g原料/kg，連續(xù)給藥30天，停藥后24小時(shí)斷頭放血處死小鼠，在無菌條件下取出脾臟， 用1640培養(yǎng)液(含10%小牛血清)制成脾細(xì)胞懸液，并將小鼠脾細(xì)胞調(diào)整到5X106細(xì)胞/ml，加到96孔培養(yǎng)板中，每孔IOOul，每個(gè)脾加雙份(即一個(gè)加ConA，一個(gè)不加ConA)。 ConA 20ul (濃度為 100ug/ml)，1640 培養(yǎng)液 80ul，使每孔至 200ul 體積，于 5% C0237°C恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)72小時(shí)，終止培養(yǎng)前M小時(shí)，每孔加3H — TdR3. 7X109 (iucr)。用細(xì)胞收集器(TITERTEK CELL HARVESTER 550)收集細(xì)胞于49型玻璃纖維濾紙上，依次用蒸餾水、5% 三氨醋酸、無水乙醇洗滌，將濾紙片置60°C溫箱烘干，加到含5ml閃爍液的杯內(nèi)，經(jīng)液閃儀 (BECKMEN LS 9800)測參入放射性活度(cpm)，然后計(jì)算刺激指數(shù)(Si)，即=SI =加入ConA 孑L cpm/未力口入ConA孑L cpm.表1不同藥物對免疫力低下小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響
權(quán)利要求
1.一種塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于發(fā)酵培養(yǎng)基中氮源10-50重量份，無機(jī)堿0. 5-5重量份，糖類5-25重量份，蛋白胨1-10重量份，薯類1-100重量份，維生素1-5重量份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基，其中氮源為麥麩、奶粉、玉米粉中的一種或幾種
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基，其中無機(jī)堿為碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、碳酸鈉、碳酸鈣
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基，其中糖類為葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖中的一種或幾種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基，其中薯類為紅薯、白薯、土豆、芋頭中的一種或幾種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基，其中維生素為維生素片劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的一種塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)的塊菌。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)的塊菌，其中制備方法為將薯類粉碎成漿狀，加水，再加入氮源、糖類，蛋白胨，混合完全，加入無機(jī)堿，滅菌，加入塊菌菌種， 放入真空箱中，抽真空，培養(yǎng)，既得。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥保健技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明公開了一種塊菌發(fā)酵培養(yǎng)基及其塊菌的制備方法，該發(fā)酵培養(yǎng)基含有氮源、無機(jī)堿、糖類、蛋白胨、薯類、維生素；該發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)生產(chǎn)得到的塊菌，藥理試驗(yàn)表明，與自然生長的塊菌作用無顯著性差異，充分說明，本發(fā)明發(fā)酵培養(yǎng)基具有重要科學(xué)意義。
文檔編號C12R1/645GK102199547SQ201110107090
公開日2011年9月28日 申請日期2011年4月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月28日
發(fā)明者郭景龍 申請人:郭景龍