專(zhuān)利名稱(chēng)：一種細(xì)胞遺傳轉(zhuǎn)化的方法和裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于應(yīng)用生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種將DNA、RNA、多糖、蛋白等生物大分 子轉(zhuǎn)化入難轉(zhuǎn)化微生物、微藻和動(dòng)植物細(xì)胞中的方法。本發(fā)明還涉及實(shí)現(xiàn)上述方法的超聲波轉(zhuǎn)化裝置。
背景技術(shù)：
在生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域，目前廣泛應(yīng)用在微生物、動(dòng)物和植物細(xì)胞中的遺傳 轉(zhuǎn)化方法主要包括化學(xué)轉(zhuǎn)化、細(xì)胞融合、農(nóng)桿菌侵染、基因槍和電穿孔轉(zhuǎn)化。對(duì)于難以轉(zhuǎn)化 的細(xì)胞比如微藻、革蘭氏陽(yáng)性高溫嗜熱細(xì)胞，即使借助電穿孔轉(zhuǎn)化，往往也難以奏效。原因 是電穿孔轉(zhuǎn)化過(guò)程需要在低濃度離子狀態(tài)下進(jìn)行，感受態(tài)細(xì)胞制備過(guò)程繁瑣，而且對(duì)于厭 氧菌需要專(zhuān)用的厭氧工作站。此外，電穿孔轉(zhuǎn)化儀器和一次性使用的電擊杯，使得該方法的 使用在成本上一直居高不下。低頻超聲波介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化方法是近幾年才發(fā)現(xiàn)的、一種處于不斷完善的新方法。該 方法的原理是通過(guò)超聲波在細(xì)胞膜表面瞬時(shí)產(chǎn)生微型囊泡，該囊泡在形成的同時(shí)可以裹 入與之相鄰的核酸、多糖等生物大分子。然后囊泡破裂并在細(xì)胞膜上形成一個(gè)納米通道， 其包裹的生物大分子通過(guò)納米通道和細(xì)胞膜在自我修復(fù)的同時(shí)嵌入細(xì)胞內(nèi)部，完成“攝 入”或者轉(zhuǎn)化過(guò)程。該方法最初主要用于真核細(xì)胞的轉(zhuǎn)化和基因療法。在原核生物中 的 艮道始于 2007 年[Song, Y.，T. Hahn, I. P. Thompson, Τ. J. Mason, G. Μ. Preston, G. Li, L.Paniwnyk&ff. Ε. Huang, (2007)Ultrasound-mediatedDNA transfer for bacteria. Nucleic Acids Res. 35 :el29.]。但是當(dāng)時(shí)報(bào)道的超聲波轉(zhuǎn)化法仍然僅僅局限在革蘭 氏陰性菌或者中溫菌中。主要包括大腸桿菌(Escherichia coli DH5a)、具核梭桿菌 (Fusobacterium nucleatum)、焚光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)禾口 惡臭假單 胞菌(Pseudomonasputida)。上述報(bào)道的作者也發(fā)展了一種超聲波轉(zhuǎn)化方法，通過(guò)調(diào)整 超聲波的頻率、功率和持續(xù)時(shí)間，可以將超聲波技術(shù)應(yīng)用到革蘭氏陽(yáng)性菌的轉(zhuǎn)化中[宋 厚輝、林璐、黃巍、徐健；一種超聲波介導(dǎo)的微生物遺傳轉(zhuǎn)化方法及其應(yīng)用，專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?201010186403. 1]。在研究中也發(fā)現(xiàn)不同的微生物、藻類(lèi)和動(dòng)植物細(xì)胞，雖然可以通過(guò)超聲 波方法實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化，但是最佳轉(zhuǎn)化條件各不相同。主要包括超聲波裝置的溫度控制、頻率控 制、功率、時(shí)間控制，而全部實(shí)現(xiàn)這些功能的超聲波儀器目前在國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)上尚無(wú)出售。此 外，與電穿孔和基因槍相比，超聲波儀器價(jià)格低廉且不需要特制的耗材，可以在初始培養(yǎng)基 中直接進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作，而且超聲波技術(shù)本身在微生物、藻類(lèi)和動(dòng)植物細(xì)胞遺傳轉(zhuǎn)化方面的 應(yīng)用也越來(lái)越普遍，將來(lái)有望和電穿孔轉(zhuǎn)化儀平分秋色。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種可以將DNA、RNA、多糖、蛋白等生物大分子轉(zhuǎn)化入難轉(zhuǎn) 化微生物、微藻和動(dòng)植物細(xì)胞中的方法。本發(fā)明的又一目的在于提供一種實(shí)現(xiàn)上述方法的超聲波轉(zhuǎn)化裝置。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的細(xì)胞遺傳轉(zhuǎn)化的方法，利用超聲波轉(zhuǎn)化裝置，并將 該超聲波轉(zhuǎn)化裝置定為如下參數(shù)1)外接電源為110-220伏特，50-60赫茲，0.5-20安培；2)超聲波發(fā)射頻率為0. 1-1000千赫；3)超聲波輸出功率為0. 01-1000瓦特/cm2 ；上述條件下，將待轉(zhuǎn)化的生物大分子轉(zhuǎn)化入微生物、微藻和動(dòng)植物細(xì)胞中。所述的方法中，待轉(zhuǎn)化的生物大分子其分子量大于100道爾頓。所述的方法中，待轉(zhuǎn)化的生物大分子為DNA、RNA、質(zhì)粒、基因組、蛋白質(zhì)、多糖、脂 類(lèi)、抗生素、納米顆粒中的一種或多種。本發(fā)明提供的實(shí)現(xiàn)上述方法的超聲波轉(zhuǎn)化裝置，其主要包括有一內(nèi)腔，內(nèi)腔中放置有超聲波介質(zhì)；一加熱和制冷裝置，用于控制內(nèi)腔液體溫度；一液體壓力循環(huán)泵，用于控制內(nèi)腔液體的流動(dòng)和傳熱；一時(shí)鐘控制裝置，用于控制在任意時(shí)間內(nèi)啟動(dòng)裝置及超聲波持續(xù)發(fā)射的時(shí)間一遠(yuǎn)程控制裝置，用于在任意時(shí)間內(nèi)開(kāi)啟和停止超聲波發(fā)射；一超聲波諧振裝置，該裝置位于內(nèi)腔的底部或者四周；所述超聲波轉(zhuǎn)化裝置參數(shù)為外接電源為110-220伏特，50-60赫茲，0.5-20安培；超聲波發(fā)射頻率為0. 1-1000千赫；超聲波輸出功率為0. 01-1000瓦特/cm2。所述的超聲波轉(zhuǎn)化裝置中，加熱和制冷裝置的溫度控制范圍是-20至200°C，精度 為 0. 1-0. Ol0Co所述的超聲波轉(zhuǎn)化裝置中，液體壓力循環(huán)泵的泵壓為每分鐘0-500升。所述的超聲波轉(zhuǎn)化裝置中，時(shí)鐘控制裝置的控制時(shí)間是0-999分鐘，精度為0. 1秒。所述的超聲波轉(zhuǎn)化裝置中，超聲波裝置含有一個(gè)置于控制面板上的可編可視化程 序界面，以對(duì)溫度、超聲波發(fā)射頻率、輸出功率、時(shí)鐘進(jìn)行任意控制。所述的超聲波轉(zhuǎn)化裝置中，可編可視化程序界面為液晶顯示屏。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于實(shí)現(xiàn)了溫度、頻率、功率和時(shí)鐘的同步控制，因此本發(fā)明可以保 證在細(xì)胞膜上形成囊泡的同時(shí)，不破壞細(xì)胞膜和周?chē)锎蠓肿拥慕Y(jié)構(gòu)。既可以對(duì)單個(gè)細(xì) 胞、單個(gè)反應(yīng)器操作，也可以實(shí)現(xiàn)高通量，而且操作簡(jiǎn)單，隨意控制，并可以實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程遙控。
圖1是本發(fā)明提供的超聲波轉(zhuǎn)化裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。附圖中組件符號(hào)說(shuō)明1、6超聲波溫度控制按鈕；2、7超聲波發(fā)射功率控制按鈕；3、8超聲波發(fā)射頻率控 制按鈕；4、9超聲波時(shí)鐘控制按鈕；5、10超聲波主菜單和程序編輯按鈕；11超聲波控制面 板；12循環(huán)泵；13、16超聲波終止按鈕；14加熱和制冷裝置；15、18超聲波啟動(dòng)按鈕；17液 晶顯示屏幕；19水柵；20超聲波內(nèi)腔；21電源；22箱體；23遙控感應(yīng)器。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明提供了用于各種常見(jiàn)生命體細(xì)胞(微生物、病毒、藻類(lèi)和動(dòng)植物細(xì)胞)的超 聲波轉(zhuǎn)化裝置的技術(shù)參數(shù)。能夠?qū)崿F(xiàn)這些關(guān)鍵參數(shù)的超聲波轉(zhuǎn)化裝置可以將DNA、RNA、多 糖、蛋白等生物大分子轉(zhuǎn)化入難轉(zhuǎn)化微生物、微藻和動(dòng)植物細(xì)胞中。本發(fā)明可以用于各種微生物、病毒、藻類(lèi)和動(dòng)植物細(xì)胞的遺傳轉(zhuǎn)化及最佳轉(zhuǎn)化條 件的摸索。本發(fā)明的超聲波轉(zhuǎn)化裝置，是采用基于超聲波聲致穿孔的原理并設(shè)定了技術(shù)參 數(shù)。超聲波在微生物細(xì)胞膜表面形成的瞬時(shí)囊泡，將細(xì)胞外部的生物大分子(脫氧核糖核 酸、核糖核酸、蛋白、多糖等)裹入其中，然后通過(guò)細(xì)胞膜的自我修復(fù)功能，使膜上的囊泡連 同內(nèi)容物一起攝入細(xì)胞內(nèi)部。本發(fā)明的裝置最大的優(yōu)點(diǎn)在于實(shí)現(xiàn)了溫度、頻率、功率和時(shí)鐘 的同步控制。因此本發(fā)明的裝置可以保證在細(xì)胞膜上形成囊泡的同時(shí)，不破壞細(xì)胞膜和周 圍生物大分子的結(jié)構(gòu)。既可以對(duì)單個(gè)細(xì)胞、單個(gè)反應(yīng)器操作，也可以實(shí)現(xiàn)高通量，而且操作 簡(jiǎn)單，隨意控制，并可以實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程遙控。具體地說(shuō)，本發(fā)明提供的超聲波轉(zhuǎn)化裝置主要包括一內(nèi)腔，內(nèi)腔液體容積為0. 1-100升；內(nèi)腔內(nèi)的液體為超聲波介質(zhì)；一加熱和制冷裝置，用于控制內(nèi)腔液體溫度。溫度控制范圍是-20°C -200°C，精度
為 ο. 1-0. ore ；一液體壓力循環(huán)泵，用于控制內(nèi)腔液體的流動(dòng)和傳熱，泵壓為每分鐘0-500升；一時(shí)鐘控制裝置，可以控制在任意時(shí)間內(nèi)啟動(dòng)裝置及超聲波持續(xù)發(fā)射的時(shí)間；超 聲波持續(xù)時(shí)間控制范圍是0-999分鐘，精度為0. 1秒；一遠(yuǎn)程控制裝置，用于在任意時(shí)間內(nèi)開(kāi)啟和停止超聲波發(fā)射；一超聲波諧振裝置，該裝置位于內(nèi)腔的底部或者四周。本發(fā)明的超聲波裝置的技術(shù)參數(shù)設(shè)為1)外接電源為110-220伏特，50-60赫茲，0.5-20安培；2)超聲波發(fā)射頻率為0. 1-1000千赫；3)超聲波輸出功率 0. 01-1000瓦特/cm2。使用本發(fā)明的超聲波轉(zhuǎn)化裝置時(shí)，只需將待轉(zhuǎn)化的微生物、病毒、藻類(lèi)和動(dòng)植物細(xì) 胞和質(zhì)粒DNA等生物大分子混合，放置在玻璃瓶或Eppendorf小管中，然后將小瓶或小管放 置在充有去離子水的超聲波儀器內(nèi)腔中，啟動(dòng)機(jī)器，設(shè)置所需要的溫度、超聲波輸出頻率、 輸出功率、超聲波持續(xù)時(shí)間，開(kāi)始即可。也可以根據(jù)需要，通過(guò)裝置的可視化程序界面，設(shè)置 超聲啟動(dòng)時(shí)間和各種參數(shù)。與傳統(tǒng)的超聲波儀器相比，本發(fā)明中的超聲波轉(zhuǎn)化裝置更精細(xì)、更完美，完全適合 生命科學(xué)領(lǐng)域的研究需要。而傳統(tǒng)的超聲波儀器，是基于清洗功能而設(shè)計(jì)，頻率和功率都是 固定不變或者只有2-3個(gè)頻率可選，無(wú)法連續(xù)可調(diào)，無(wú)法實(shí)現(xiàn)溫度控制(或者僅能實(shí)現(xiàn)粗糙 的加熱控制)，在時(shí)間的控制上也無(wú)法隨心所欲，更無(wú)遠(yuǎn)程遙控功能。傳統(tǒng)的超聲波儀器，更 無(wú)基于液晶顯示的可編和可視化程序界面，設(shè)計(jì)粗糙。本發(fā)明所述的超聲波轉(zhuǎn)化裝置，是為遺傳轉(zhuǎn)化而設(shè)計(jì)，頻率、功率、時(shí)鐘、溫度精度 更高?？梢詫?duì)分子量大于100道爾頓的生物大分子進(jìn)行轉(zhuǎn)化，如DNA、RNA、質(zhì)粒、基因組、蛋白質(zhì)、多糖、脂類(lèi)、抗生素、納米顆粒中的一種或多種。對(duì)于生命體的應(yīng)用范圍更廣，包括微 生物、病毒、微藻、動(dòng)物和植物細(xì)胞等。與電穿孔轉(zhuǎn)化相比，本發(fā)明裝置無(wú)需電擊杯，真正實(shí) 現(xiàn)了低成本、高通量，一次可以對(duì)幾十、上百個(gè)生物樣品進(jìn)行轉(zhuǎn)化。此外，本發(fā)明中建立的超聲波轉(zhuǎn)化裝置可以放大到大型生物反應(yīng)器中基因的瞬時(shí) 表達(dá)和調(diào)控、可以隨意控制生物反應(yīng)器中特定底物(DNA、RNA、多糖、蛋白以及特定化學(xué)藥物 等生物大分子)與細(xì)胞的接觸、攝取和代謝時(shí)間。下面結(jié)合附圖1對(duì)本發(fā)明提供的超聲波轉(zhuǎn)化裝置進(jìn)行描述，該超聲波轉(zhuǎn)化裝置主 要包括控制面板11上設(shè)置有超聲波啟動(dòng)按鈕15和超聲波終止按鈕16，并設(shè)有超聲波溫 度控制按鈕6、超聲波發(fā)射功率控制按鈕7、超聲波發(fā)射頻率控制按鈕8、超聲波時(shí)鐘控制按 鈕9，以對(duì)超聲波轉(zhuǎn)化裝置的工作參數(shù)進(jìn)行修改。為方便使用者根據(jù)自己的需要對(duì)超聲波 轉(zhuǎn)化裝置設(shè)定程序，控制面11上還設(shè)有超聲波主菜單和程序編輯按鈕10供使用者選擇，比 如可以先讓儀器制冷到4°C，待溫度達(dá)到4°C自動(dòng)啟動(dòng)超聲波，持續(xù)后10秒后結(jié)束，然后維 持4°C。所設(shè)定的任何參數(shù)都可以在控制面板11上的液晶顯示屏幕17上顯示。超聲波箱體22內(nèi)部為超聲波內(nèi)腔20，內(nèi)腔20的液體容積可以為0. 1-100升。超 聲波箱體22內(nèi)部設(shè)置有超聲波發(fā)射和諧振裝置(公知技術(shù)，圖中未示)。在超聲波箱體22 的上方也設(shè)有可以對(duì)溫度、發(fā)射功率、發(fā)射頻率、時(shí)鐘等參數(shù)進(jìn)行設(shè)定的超聲波溫度控制按 鈕1、超聲波發(fā)射功率控制按鈕2、超聲波發(fā)射頻率控制按鈕3、超聲波時(shí)鐘控制按鈕4等按 鈕。與控制面板11相同，在超聲波箱體22上也設(shè)有使用者自己對(duì)超聲波轉(zhuǎn)化裝置設(shè)定程 序的超聲波主菜單和程序編輯按鈕5。超聲波箱體22上設(shè)置的對(duì)各參數(shù)進(jìn)行設(shè)定的按鈕和 控制面板11上的按鈕同步。按鈕5可以切換到控制面板，進(jìn)行程序編輯，與控制面板11上 按鈕10功能相同?？刂泼姘迮c超聲波箱體通過(guò)USB或者COM通訊端口連接在一起，因此控制面板既 可以獨(dú)立于箱體之外，也可以直接放置在箱體的一側(cè)。當(dāng)控制面板與箱體正常連接在一起 時(shí)，箱體上的按鈕1、2、3、4、5、18、13與控制面板上對(duì)應(yīng)的按鈕6、7、8、9、10、15、16功能完全 相同。當(dāng)控制面板因種種原因(比如電壓波動(dòng)引起的主板故障)無(wú)法正常工作時(shí)，控制面 板上的所有按鈕也將停止工作，但不影響箱體上的按鈕，此時(shí)可以通過(guò)控制超聲波箱體上 的按鈕繼續(xù)運(yùn)行機(jī)器，只是運(yùn)行參數(shù)無(wú)法在屏幕上顯示，但可以通過(guò)箱體上的按鈕對(duì)機(jī)器 性能進(jìn)行調(diào)試。在超聲波轉(zhuǎn)化儀正常使用過(guò)程中，客戶(hù)僅需對(duì)控制面板上的按鈕進(jìn)行操作 既可以實(shí)現(xiàn)該裝置的全部功能；箱體上的按鈕僅限在調(diào)試、故障排除或者強(qiáng)行啟動(dòng)和關(guān)閉 某一特定功能時(shí)使用。因此，箱體上的超聲波啟動(dòng)按鈕18和超聲波終止按鈕13分別啟動(dòng) 和終止超聲波發(fā)射，與控制面板11上的超聲波啟動(dòng)按鈕15、超聲波終止按鈕16功能相同；加熱和制冷裝置14可以對(duì)箱體內(nèi)的液體進(jìn)行溫度控制，溫控范圍 為-20°C _200°C，精度為 0. 1-0.01°C。循環(huán)泵12與加熱和制冷裝置14聯(lián)動(dòng)使用，通過(guò)水柵19將泵內(nèi)液體泵入空腔內(nèi)， 實(shí)現(xiàn)溫度的實(shí)時(shí)控制。遙控裝置23可以實(shí)現(xiàn)對(duì)超聲波裝置的遠(yuǎn)程控制。本發(fā)明的超聲波裝置，可以對(duì)將分子量大于100道爾頓的生物大分子轉(zhuǎn)化入微生 物、細(xì)菌、病毒、微藻或動(dòng)植物細(xì)胞中。其中，分子量大于100道爾頓的生物大分子為DNA、RNA、質(zhì)粒、基因組、蛋白質(zhì)、多糖、脂類(lèi)、抗生素、納米顆粒中的一種或多種。 以下的轉(zhuǎn)化方法可以使本領(lǐng)域技術(shù)人員更全面的了解本發(fā)明，但不以任何方式限
制本發(fā)明，該轉(zhuǎn)化方法也可以參照本發(fā)明人申請(qǐng)的專(zhuān)利[宋厚輝、林璐、黃巍、徐健。一種超
聲波介導(dǎo)的微生物遺傳轉(zhuǎn)化方法及其應(yīng)用。專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?01010186403. 1]。 實(shí)施例(以質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化微生物細(xì)胞為例)1)微生物培養(yǎng)培養(yǎng)代轉(zhuǎn)化的微生物菌液長(zhǎng)至對(duì)數(shù)期，(不同種屬微生物培養(yǎng)基配方不同，對(duì)于特 定的微生物，需要選用相應(yīng)的培養(yǎng)基，此為公知技術(shù)，不作詳細(xì)介紹)。取1毫升微生物培養(yǎng) 物于小青瓶中，也可以在小青瓶中直接培養(yǎng)。2)向步驟1的小青瓶中加質(zhì)粒DNA，質(zhì)粒用量為5 μ g。3)將含有5 μ g質(zhì)粒和1毫升微生物培養(yǎng)物的小青瓶放入超聲波儀器的空腔內(nèi)，空 腔內(nèi)液體的液面略高于玻璃瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基的液面，但又不至于完全浸沒(méi)玻璃瓶。如果小青瓶 在超聲波儀器內(nèi)腔的液面上漂浮，可以用支架固定。4)啟動(dòng)本發(fā)明提供的超聲波儀器。對(duì)于不同的微生物，實(shí)現(xiàn)最佳轉(zhuǎn)化的超聲波參 數(shù)不同。比如嗜熱厭氧乙醇桿菌的最佳條件為40千赫、19瓦特，超聲波持續(xù)時(shí)間為20秒。5)然后向含有質(zhì)粒和微生物培養(yǎng)物的小青瓶中加入5mL新鮮的、適用于該微生物 的液體培養(yǎng)基，復(fù)蘇細(xì)胞。6)將細(xì)胞涂布于適用于該特定微生物的固體平板上，進(jìn)行篩選。平板是否添加抗 生素，由質(zhì)粒的特性和實(shí)驗(yàn)?zāi)康臎Q定。
權(quán)利要求
一種細(xì)胞遺傳轉(zhuǎn)化的方法，利用超聲波轉(zhuǎn)化裝置，并將該超聲波轉(zhuǎn)化裝置定為如下參數(shù)1)超聲波發(fā)射頻率為0.1 1000千赫；2)超聲波輸出功率為0.01 1000瓦特/cm2；上述條件下，將待轉(zhuǎn)化的生物大分子轉(zhuǎn)化入微生物、微藻和動(dòng)植物細(xì)胞中。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，待轉(zhuǎn)化的生物大分子其分子量大于100道爾頓。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中，待轉(zhuǎn)化的生物大分子為DNA、RNA、質(zhì)粒、基 因組、蛋白質(zhì)、多糖、脂類(lèi)、抗生素、納米顆粒中的一種或多種。
4.一種實(shí)現(xiàn)權(quán)利要求1所述方法的超聲波轉(zhuǎn)化裝置，其主要包括有 一內(nèi)腔，內(nèi)腔中放置有超聲波介質(zhì)；一加熱和制冷裝置，用于控制內(nèi)腔液體溫度；一液體壓力循環(huán)泵，用于控制內(nèi)腔液體的流動(dòng)和傳熱；一時(shí)鐘控制裝置，用于控制在任意時(shí)間內(nèi)啟動(dòng)裝置及超聲波持續(xù)發(fā)射的時(shí)間一遠(yuǎn)程控制裝置，用于在任意時(shí)間內(nèi)開(kāi)啟和停止超聲波發(fā)射；一超聲波諧振裝置，該裝置位于內(nèi)腔的底部或者四周；所述超聲波轉(zhuǎn)化裝置參數(shù)為超聲波發(fā)射頻率為0. 1-1000千赫；超聲波輸出功率為0. 01-1000瓦特/cm2。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的超聲波轉(zhuǎn)化裝置，其中，超聲波轉(zhuǎn)化裝置的外接電源為 110-220 伏特，50-60 赫茲，0. 5-20 安培；
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的超聲波轉(zhuǎn)化裝置，其中，加熱和制冷裝置的溫度控制范圍 是-20 至 200°C，精度為 0. 1-0. Ol0Co
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的超聲波轉(zhuǎn)化裝置，其中，液體壓力循環(huán)泵的泵壓為每分鐘 0-500 升。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的超聲波轉(zhuǎn)化裝置，其中，時(shí)鐘控制裝置的控制時(shí)間是0-999分 鐘，精度為0.1秒。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的超聲波轉(zhuǎn)化裝置，其中，超聲波裝置含有一個(gè)置于控制面板 上的可編可視化程序界面，以對(duì)溫度、超聲波發(fā)射頻率、輸出功率、時(shí)鐘進(jìn)行任意控制。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的超聲波轉(zhuǎn)化裝置，其中，可編可視化程序界面為液晶顯示屏。
全文摘要
一種細(xì)胞遺傳轉(zhuǎn)化的方法，利用超聲波轉(zhuǎn)化裝置，并將該超聲波轉(zhuǎn)化裝置定為如下參數(shù)1)超聲波發(fā)射頻率為0.1-1000千赫；2)超聲波輸出功率為0.01-1000瓦特/cm2；上述條件下，將待轉(zhuǎn)化的生物大分子轉(zhuǎn)化入微生物、微藻和動(dòng)植物細(xì)胞中。本發(fā)明還提供了用于實(shí)現(xiàn)上述方法的超聲波轉(zhuǎn)化裝置。本發(fā)明可以用于微生物的遺傳轉(zhuǎn)化；細(xì)胞間物質(zhì)和能量的轉(zhuǎn)移；生物反應(yīng)器內(nèi)核酸、蛋白質(zhì)、多糖、藥物的定時(shí)轉(zhuǎn)化。
文檔編號(hào)C12N13/00GK101948825SQ20101026031
公開(kāi)日2011年1月19日 申請(qǐng)日期2010年8月24日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月24日
發(fā)明者宋厚輝, 徐健, 林璐, 黃巍 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院青島生物能源與過(guò)程研究所