專利名稱：軍曹魚頭蛋白降血壓肽及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物技術(shù)應(yīng)用及保健食品領(lǐng)域，特別是一種軍曹魚頭蛋白降血壓肽及 其制備方法。
背景技術(shù)：
高血壓是最常見的心血管疾病，是導(dǎo)致心、腦、腎等重要靶器官損害的重要原因。 在我國(guó)，高血壓患者約為1. 6億人，且有逐年增多趨勢(shì)。這與我國(guó)人民生活水平提高、生 活節(jié)奏加速和人口老齡化等因素有較密切關(guān)系。因此，治療和預(yù)防高血壓是當(dāng)今社會(huì)十 分關(guān)注的課題之一。人體內(nèi)的血壓受許多因素調(diào)節(jié)，而血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(Angiotensin Converting Enzyme, ACE)在血壓調(diào)節(jié)中扮演重要角色。降血壓肽是一類血管緊張素轉(zhuǎn)化 酶抑制劑(ACEI)，通過抑制ACE活性而達(dá)到降血壓的作用。食物蛋白質(zhì)序列中的某些活性肽段可以通過降解的方法釋放出來，來源于食物中 的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽具有降壓效果顯著、沒有毒副作用、安全性高、成本低、易吸收 等優(yōu)點(diǎn)，特別是對(duì)高血壓者有降血壓作用，對(duì)血壓正常者無而降血壓作用的特點(diǎn)，而常規(guī)的 降血壓藥類藥物等都有明顯的副作用，因而在高血壓已成為危及人類身體健康的主要的疾 病的今天，食物來源的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽更加符合人們的需求。軍曹魚(Rachycentron canadum Linnaeu)隸屬鱸形目、軍曹魚科、軍曹魚屬。俗稱 海竺魚、海鱺，廣泛分布于印度洋、太平洋和大西洋，棲息于熱帶及亞熱帶較深海區(qū)，我國(guó)產(chǎn) 于南海、東海與黃渤海。該魚個(gè)體大、生長(zhǎng)快、抗病性強(qiáng)，肌肉中氨基酸含量豐富，脂肪酸的 不飽和度大，微量元素組成全面，具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值。上世紀(jì)80年代末期我 國(guó)臺(tái)灣的研究人員偶然發(fā)現(xiàn)軍曹魚生長(zhǎng)快速和巨大的市場(chǎng)潛力之后，其網(wǎng)箱養(yǎng)殖在臺(tái)灣得 以迅速發(fā)展；90年代中期開始，大陸開始從臺(tái)灣輸入軍曹魚魚苗。隨著大陸人工繁殖和育 苗技術(shù)的突破以及養(yǎng)殖技術(shù)的發(fā)展，軍曹魚已經(jīng)成為廣東、海南、福建沿海的重要海水養(yǎng)殖 對(duì)象，被稱為海水網(wǎng)箱養(yǎng)殖中最有養(yǎng)殖前景的魚類之一。由于軍曹魚肉質(zhì)鮮美，個(gè)體較大， ?？杉庸こ婶~片冷藏運(yùn)輸，因而魚頭等下腳料的利用研究是迫切且十分有意義的。酶水解蛋白質(zhì)具有反應(yīng)條件溫和、水解過程易控制、安全性高等優(yōu)點(diǎn)。利用酶水解 法從天然食物蛋白尤其是食品加工下腳料蛋白中提取的具有營(yíng)養(yǎng)與生理活性的功能肽，可 以應(yīng)用到保健食品及營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化食品中，滿足不同消費(fèi)者的需要，不但可以全面利用食品中 的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)，而且提高了蛋白質(zhì)原料的附加值，將產(chǎn)生良好的經(jīng)濟(jì)與社會(huì)效益。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種軍曹魚頭蛋白降血壓肽及其制備方法，用木瓜蛋白酶進(jìn) 行酶解，利用酶技術(shù)將軍曹魚頭降解為分子量大小不等的多肽、低聚肽及游離氨基酸的混 合液，采用不同的離心分離方法去除渣及魚油，再經(jīng)不同截留限的多級(jí)超濾膜分離，得到的 75%多肽分子量在3000道爾頓以下，低聚肽占40%以上的軍曹魚頭蛋白肽產(chǎn)品。本發(fā)明是將軍曹魚頭清洗后攪碎；采 木瓜蛋白酶水解，水解條件為軍曹魚頭與水重量比為1 1 1 3，pH5. 5 6. 5，溫度65 72°C，時(shí)間3 4小時(shí)，水解結(jié)束后升 溫至90°C 95°C滅酶15分鐘，冷卻后調(diào)pH值為7. 0 8. 3 ；水解液經(jīng)離心機(jī)去渣、離心機(jī) 油水分離，得到蛋白水解液；超濾分級(jí)分離蛋白水解液，透過液經(jīng)濃縮、干燥得到軍曹魚頭 降血壓肽。本發(fā)明以軍曹魚頭重量計(jì)，添加木瓜蛋白酶2000IU/g 2500IU/g。本發(fā)明超濾分離條件為壓力0. 20Mpa 0. 4Mpa、溫度20°C 25°C、截留限8000 3000道爾頓的多級(jí)超濾膜分離。本發(fā)明制備的軍曹魚頭蛋白降血壓肽，75%多肽分子量在3000道爾頓以下，低聚 肽占40%，對(duì)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)的有較強(qiáng)抑制作用，并可顯著降低原發(fā)性高血壓大 鼠的血壓。本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)(1)本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單，操作容易，利用生物酶法水解制備降血壓肽， 反應(yīng)過程溫和、易于控制，安全性高；(2)本發(fā)明制備的軍曹魚頭降血壓肽降血壓能力強(qiáng)， ACE半數(shù)抑制濃度(IC5Q)達(dá)到0. 24mg/mL，并可顯著降低原發(fā)性高血壓大鼠的血壓，以 150mg/kg體重灌胃原發(fā)性高血壓大鼠，在灌胃2h、4h、6h、8h后血壓均顯著降低，最大降幅 32mmHg ； (3)本發(fā)明制備的軍曹魚頭水解蛋白是天然魚蛋白經(jīng)過生物酶降解得到的產(chǎn)物， 具有一般活性多肽營(yíng)養(yǎng)豐富、易于吸收的特點(diǎn)，可廣泛用于營(yíng)養(yǎng)保健食品、醫(yī)藥行業(yè)等，也 可作為營(yíng)養(yǎng)添劑及康復(fù)食品。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明結(jié)合實(shí)施工藝實(shí)例做進(jìn)一步說明軍曹魚頭解凍清洗后，經(jīng)絞肉機(jī)絞碎后放入反應(yīng)器中，加入魚頭重量2倍的水，用 鹽酸調(diào)pH值為6. 0，加入2300IU/g原料的木瓜蛋白酶，在72°C水解4小時(shí)，水解結(jié)束，升溫 至95°C滅酶15分鐘，用氫氧化鈉調(diào)pH值為8. 3 ；水解液經(jīng)離心機(jī)過濾去渣、濾液由離心機(jī) 進(jìn)行油水分離得蛋白水解液，蛋白水解液經(jīng)0. 25Mpa、23°C、截留限8000 3000道爾頓的多 級(jí)超濾膜分離后，經(jīng)減壓蒸發(fā)濃縮、冷凍干燥得到軍曹魚頭降血壓肽，77. 81%多肽分子量 在3000道爾頓以下，低聚肽占45. 61%。
權(quán)利要求
一種軍曹魚頭蛋白降血壓肽，其特征是以軍曹魚頭為原料，用木瓜蛋白酶進(jìn)行酶解，采用不同截留限的多級(jí)超濾膜分離，得到的75％多肽分子量在3000道爾頓以下，低聚肽占40％以上的軍曹魚頭蛋白肽產(chǎn)品。
2.據(jù)權(quán)利要求1所述的軍曹魚頭蛋白降血壓肽的制備方法，其特征在于(1)將軍曹魚頭清洗后攪碎；(2)攪碎后的軍曹魚頭與水按重量比為1 1 1 3混勻，調(diào)pH5. 5 6. 5，加入木 瓜蛋白酶，在溫度65 72°C，酶解3 4小時(shí)，水解結(jié)束后升溫至90°C 95°C滅酶15分 鐘，冷卻后調(diào)pH值為7. 0 8. 3 ；(3)水解液經(jīng)離心去渣得濾液，濾液經(jīng)離心進(jìn)行油水分離，得到蛋白水解液；(4)用超濾分離蛋白水解液，經(jīng)濃縮、干燥得到軍曹魚頭降血壓肽。
3.據(jù)權(quán)利要求2所述軍曹魚頭蛋白降血壓肽的制備方法，其特征在于所述步驟(1)加 入木瓜蛋白酶以軍曹魚頭重量計(jì)2000IU/g 2500IU/g。
4.據(jù)權(quán)利要求2或3所述軍曹魚頭蛋白降血壓肽的制備方法，其特征在于所述步驟 (4)超濾分離為壓力0. 20Mpa 0. 4Mpa、溫度20°C 25°C、截留限8000 3000道爾頓的 多級(jí)超濾膜分離。
全文摘要
一種軍曹魚頭蛋白降血壓肽及其制備方法，將軍曹魚頭清洗，攪碎；蛋白酶水解采用木瓜蛋白酶水解；油水分離水解液經(jīng)離心去渣，濾液進(jìn)行油水分離，得到蛋白水解液；分級(jí)分離用超濾膜分離蛋白水解液，經(jīng)濃縮、干燥得到軍曹魚頭降血壓肽。本發(fā)明用木瓜蛋白酶水解軍曹魚頭蛋白，經(jīng)離心分離、超濾得到富含肽的具有的降血壓作用的蛋白水解液，該軍曹魚頭降血壓肽對(duì)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的有抑制作用，可顯著降低原發(fā)性高血壓大鼠的血壓。水解液可廣泛用于營(yíng)養(yǎng)保健食品、醫(yī)藥行業(yè)等，也可作為營(yíng)養(yǎng)添劑及康復(fù)食品。
文檔編號(hào)C12P21/06GK101851655SQ20101017743
公開日2010年10月6日 申請(qǐng)日期2010年5月12日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月12日
發(fā)明者周春霞, 曹文紅, 曾少葵, 楊萍, 洪鵬志, 章超樺 申請(qǐng)人:廣東海洋大學(xué)