專利名稱：一種天然海藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物的應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及殺蟲劑領(lǐng)域，具體地說是一種天然海藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物的應用。隨著化學合成農(nóng)藥使用時間的推移，其產(chǎn)生的不良影響已越來越突出?；瘜W農(nóng)藥大規(guī)模地生產(chǎn)和無限制地大量使用，使70 % 80 %的農(nóng)藥直接滲透到環(huán)境中，殘留非常嚴重，對土壤、地表水、地下水造成污染，并進一步進入生物鏈，對生物和人類健康都造成直接和潛在的危害。我國加入世界貿(mào)易組織后，因化學農(nóng)藥殘留而導致的“綠色壁壘”嚴重制約著我國農(nóng)產(chǎn)品的出口，傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)面臨著更大的風險和挑戰(zhàn)。農(nóng)業(yè)部已從2001年起在全國范圍內(nèi)實施“無公害食品行動計劃”，而使用無公害農(nóng)藥又是實施這一目標的關(guān)鍵措施， 于是人們把目光投向?qū)Νh(huán)境更友好的生物農(nóng)藥。與傳統(tǒng)的化學合成農(nóng)藥相比，生物農(nóng)藥具有對人畜和非靶標生物安全，環(huán)境兼容性好，不易產(chǎn)生抗性等優(yōu)點。生物農(nóng)藥的開發(fā)應用對人類健康，環(huán)境保護和農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展都具有極其重要的意義。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種天然的海藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物的應用。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為一種天然海的藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物所述天然海藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物具有殺蟲作用，海藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物如式(I)所示
權(quán)利要求
1. 一種天然海藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物，其特征在于所述天然海藻內(nèi)生真菌萜生物堿類化合物具有殺蟲作用，海藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物如式(I)所示
2.按權(quán)利要求1所述的天然藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物的應用，其特征在于所述海藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物可作為殺蟲劑。
3.按權(quán)利要求1所述的天然海藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物的應用，其特征在于 所述海藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物按如下步驟制備1)將米曲霉(Aspergillusoryzae) cf_2接種于真菌液體培養(yǎng)基中靜止發(fā)酵20-25天， 過濾，發(fā)酵液經(jīng)乙酸乙酯萃取濃縮，收集的菌絲體用有機溶劑提取，而后再經(jīng)乙酸乙酯萃取濃縮，發(fā)酵液所得濃縮物和菌絲體所得濃縮物合并，即為粗提物；所述米曲霉(Asp. 0ryZae)Cf-2，其于2010年3月1日保存于中國典型培養(yǎng)物保藏中心 CCTCC，保藏編號為 CCTCC M 2010045，株號為 cf-2 ；2)取步驟1)中的粗提物進行硅膠柱層析，用有機溶劑進行梯度洗脫，收集洗脫液，洗脫液經(jīng)薄層層析檢測；3)收集步驟幻中以洗脫液體積比5-8 1梯度的洗脫組分，將收集的洗脫組分進行凝膠柱層析、硅膠柱層析和薄層層析分離純化，純化收集Rf值為0. 6-0. 7組分，即得海藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物。
4.按權(quán)利要求3所述的天然海藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物的應用，其特征在于 步驟1)中的有機溶劑提取液為氯仿、丙酮、乙酸乙酯、乙醇或甲醇中一種或幾種。
5.按權(quán)利要求3所述的天然海藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物的應用，其特征在于 步驟2)中的有機溶劑為石油醚-乙酸乙酯或石油醚-丙酮。
6.按權(quán)利要求3所述的天然海藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物的制備方法，其特征在于步驟幻所述凝膠柱層析洗脫液為體積比1-2 1的氯仿-甲醇或氯仿-乙醇；硅膠柱層析洗脫液為體積比3-8 1比石油醚-乙酸乙酯或石油醚-丙酮；薄層層析展開劑為體積比為31的氯仿-乙酸乙酯。
7.按權(quán)利要求3所述的天然海藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物的制備方法，其特征在于步驟幻所述凝膠柱層析時收集經(jīng)TLC檢測藍紫色斑點的組分；硅膠柱層析時收集以洗脫液體積比5-8 1梯度的洗脫液。
全文摘要
本發(fā)明涉及殺蟲劑領(lǐng)域，具體地說是一種天然的海藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物的應用。所述海藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物具有殺蟲作用，海藻內(nèi)生真菌二萜生物堿類化合物如式(I)所示；本發(fā)明通過分離于海洋紅藻異管藻的真菌米曲霉(Aspergillus oryzae)cf-2發(fā)酵經(jīng)提取、分離獲得的二萜生物堿類天然化合物，經(jīng)殺蟲活性實驗得出此二萜生物堿類化合物在100微克/毫升時對鹵蟲的致死率為60.3％。
文檔編號C12R1/69GK102190614SQ20101013113
公開日2011年9月21日 申請日期2010年3月19日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月19日
發(fā)明者喬明鋒, 季乃云 申請人:中國科學院煙臺海岸帶研究所