一種植物單性結(jié)實(shí)調(diào)控基因及其應(yīng)用的制作方法

專利名稱：一種植物單性結(jié)實(shí)調(diào)控基因及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及利用分子生物學(xué)方法從植物中分離得到植物單性結(jié)實(shí)調(diào)控基因及其應(yīng)用，特 別涉及茄子調(diào)控單性結(jié)實(shí)的生長素響應(yīng)因子基因及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
開花植物的果實(shí)發(fā)育和種子的產(chǎn)生依賴于柱頭的授粉和子房的雙受精過程。不利的環(huán)境 條件會阻礙很多植物的果實(shí)產(chǎn)生和發(fā)育，過高或過低的溫度和濕度都會對果實(shí)生長過程的每 一個環(huán)節(jié)造成不利影響，如花粉的形成、傳播和萌發(fā)、受精和種子成熟過程等等，從而影響 作物的產(chǎn)量和質(zhì)量。另外果實(shí)中種子的生長發(fā)育，會使果實(shí)加快衰老，產(chǎn)量和商品性降低， 影響銷售。單性結(jié)實(shí)是指植物不經(jīng)過授粉和受精就能正常結(jié)果和果實(shí)生長的現(xiàn)象，能在低溫 或高溫等不利于授粉和受精的逆境條件下產(chǎn)生無籽的果實(shí)。同時，單性結(jié)實(shí)的果實(shí)因不經(jīng)受 精而無籽，品質(zhì)明顯提高，商品性得到改善，保鮮貯藏期延長，更受消費(fèi)者的歡迎。因此， 世界各國都十分重視作物單性結(jié)實(shí)的研究。
許多激素如GA，生長素和細(xì)胞分裂素，都參與到果實(shí)和種子發(fā)育的信號傳導(dǎo)過程，它們 的含量和活性增加會促進(jìn)結(jié)果和果實(shí)生長，促進(jìn)包括細(xì)胞分裂、細(xì)胞增大和產(chǎn)生種子等過程 的果實(shí)成熟。擬南芥等作物在施加外源生長素的情況下，能誘導(dǎo)產(chǎn)生單性結(jié)實(shí)。Rotino等采 用基因工程手段成功，在子房和卵子中表達(dá)生長素合成基因，使茄子子房中的生長素含量大 大增加，導(dǎo)致茄子子房未經(jīng)受精而直接膨大發(fā)育成果實(shí)，獲得了單性結(jié)實(shí)品種，并在番茄 (5^朋aceae)、葡萄(Kz'tecese)等蔬菜水果上得到廣泛利用。
Ulmasoy等(Ulmasov T. ， Hagen G and Guilfoyle TJT. Dimerization and DNA binding of auxin response factors. Plant J", 1999(19): 309 - 319; Ulmasov T. ， Hagen G and Guilfoyle T J. Activation and repression of transcription by auxin response factors. Proc Natl Acad Sci USA ， 1999 (96): 5844 - 5849.)研究表明生長素響應(yīng)因子(Auxin Response Factors)，簡稱ARFs，能和生長素早期誘導(dǎo)基因如Aux/IAA、 SAUR和GH3等家族 的啟動子響應(yīng)元件(AuxREs) TGTCTC特異結(jié)合，是生長素調(diào)控植物生長發(fā)育的關(guān)鍵基因。擬 南芥突變體fwf (sr/《-》(fruit without fertilization)能在去雄下未經(jīng)授粉和受精單性 結(jié)實(shí)產(chǎn)生無籽果實(shí)，基因克隆表明是由于Z^^基因翻譯起始位點(diǎn)ATG突變?yōu)锳TA引起的。擬 南芥^ /^基因編碼閱讀框T-DNA插入突變體7和ar/S^在去雄情況下均能單性結(jié)實(shí)， 而編碼閱讀框上游942bp處的T-DNA插入突變體ar/^-5則未能在去雄下單性結(jié)實(shí)。這些結(jié)果說明擬南芥ARF8基因的編碼區(qū)域突變功能缺失而導(dǎo)致單性結(jié)實(shí)。Goetz等將突變基因ar/《4 轉(zhuǎn)基因到番茄中表達(dá)發(fā)現(xiàn)同樣能在去雄下未經(jīng)授粉和受精而單性結(jié)實(shí)，形成無籽果實(shí)。并從 番茄中克隆獲得了 S1ARF8基因，結(jié)果域分析發(fā)現(xiàn)擁有與ARF8基因同樣的保守功能域，因此 推斷它與擬南芥ARF8基因同樣的方式控制果實(shí)發(fā)育。這些結(jié)果都表明了 ARF8基因能直接調(diào) 控植物單性結(jié)實(shí)，并且保守功能域行使主要功能。這為生長素調(diào)控植物單性結(jié)實(shí)的分子機(jī)制 提供了直接的證據(jù)。但到目前為止仍未見到關(guān)于茄子單性結(jié)實(shí)的分子調(diào)控的報(bào)導(dǎo)。茄子 (5b^/7咖/ffWo/^e朋L )在世界各地普遍栽培，是我國城鄉(xiāng)居民喜食的主要蔬菜種類之一， 因此獲得茄子的調(diào)控單性結(jié)實(shí)基因，利用轉(zhuǎn)基因植物培育無籽或少籽莉子品種具有重大的經(jīng) 濟(jì)利益。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種調(diào)控植物調(diào)控單性結(jié)實(shí)的生長素響應(yīng)因子基因，特別是茄子生 長素響應(yīng)因子基因及其應(yīng)用，以使具有生長素響應(yīng)因子基因的轉(zhuǎn)基因植物能單性結(jié)實(shí)。
本發(fā)明提供的利用分子生物學(xué)手段從茄子中分離得到的生長素響應(yīng)因子基因，命名為 5k^ /W。所述5)a^/^的核苷酸序列是序列表中的SEQ IDN0:8，長度為3750bp。所述茄子生 長素響應(yīng)因子表達(dá)的氨基酸序列是序列表中的SEQ工D N0:9。
本發(fā)明還提供了一種獲得上述生長素響應(yīng)因子的方法。是以茄子根莖葉的總RNA反轉(zhuǎn)錄 獲得的cDNA為模板，以引物P1 (SEQ ID N0:1)和引物P2 (SEQ ID NO:2)進(jìn)行PCR擴(kuò)增克 隆茄子中的ARFs基因片段(SEQ IDN0:3)，所得ARF基因片段長度為477bp。根據(jù)克隆獲得 的茄子ARF基因片段分別設(shè)計(jì)5'-RACE引物(SEQIDN0:4)和3'-RACE引物(SEQIDN0:5)。 根據(jù)Clontech公司的RACE試劑盒SMART RACE cDNA Amplification Kit (PT3269-1 )， 分別做5'-RACE和3'-RACE試驗(yàn)，進(jìn)行全長cDNA的克隆。得到長度為3750bp的cDNA全長序 列5ia^ /^(SEQ ID N0:8)。BLASTN分析結(jié)果表明，該序列與擬南芥調(diào)控單性結(jié)實(shí)基因^ /^cDNA 序列的一致性為53. 7%，氨基酸序列的同源性為54. 7%。
本發(fā)明提供了一種利用5k^/^構(gòu)建植物表達(dá)載體及其轉(zhuǎn)化茄子的方法。


圖l茄子總RNA提取的糖凝膠電泳分析
圖2 5fe^ /^ RT-PCR擴(kuò)增產(chǎn)物凝膠電泳分析
圖3 5'-RACE和3'-RACE擴(kuò)增片段瓊凝膠電泳分析圖4 5k47 /^全長cDNA的序列擴(kuò)增產(chǎn)物凝膠電泳分析
圖5 SmARF8氨基酸序列的結(jié)構(gòu)域分析
圖6 SmARF8及其蛋白的氨基酸序列系統(tǒng)進(jìn)化樹
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合本發(fā)明的具體實(shí)施例，作進(jìn)一步詳述。 實(shí)施例l:茄子中的ARFs基因的克隆與分離 1. 1試驗(yàn)材料及試劑
材料杭州紅茄植株由浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜所提供。植株種于室溫，于旺盛生長期分 別取根、莖、葉、花蕾、花朵、果實(shí)，液態(tài)冷凍后保存于-72'C超低溫冰箱。試劑總RNA的 提取試劑盒(RNeasy Plant Mini Kit)購自QIAGEN公司。麗LV逆轉(zhuǎn)錄酶購自Promega公司， Taq DNA聚合酶和pMD-19T載體購自寶生物公司(大連)有限公司(TaKaRa) 。 SMARTTMRACE cDNA Amplification Kit (PT3269-1)購自Clontech公司，引物均由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有 限公司合成。凝膠回收試劑盒購自杭州Vgene公司。序列測定均由北京華大生物技術(shù)有限公 司完成。
1. 2試驗(yàn)方法
1. 2. 1總RNA的提取及cDNA第一鏈的合成
取茄子不同組織用液氮碾磨后，參照RNeasy Plant Mini Kit試劑盒說明書的步驟提取 總RNA，將它們等量混合，以S叩erScript TM II反轉(zhuǎn)錄酶合成cDNA第一鏈。
采用1%凝膠電泳檢測RNA的完整性。從圖1可以清晰地看到28S和18S rRNA的2條主 帶，28S/18S的亮度比大于2，最前面的5S rRNA隱約可見。這表明總RNA純度較高，符合 試驗(yàn)要求。
1.2.2獲得茄子中生長素響應(yīng)因子基因
1) 由于ARFs家族基因的同源域保守性，根據(jù)已知序列的保守域設(shè)計(jì)簡并引物PI (SEQ ID N0:1)和P2 (SEQ ID N0:2)。
PI: 5'GGAAG(A)TTT(C)AGGCAT(C)ATC(T)TTTC G 3'
P2: 5' CA(T)GTC(T/A)GATTCA (G)TCCCAA(T/C)CCAACC 3'
2) 以步驟1.2. 1中獲得的茄子cDNA第一鏈為模板，P1/P2引物進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增。
試劑材料反應(yīng)體積為50 u 1， 5 u 1T叫緩沖液(10X )， ； 1 u 1 dNTPs(2. 5,1 L_1)，;2 iil的Pl (10uM)，； 2 ul的P2 (10uM)，； 0.2ul; lul Tag酶(5 U. u L-l)。
反應(yīng)條件為94。C預(yù)變性2min， 94。C變性30s， 58。C退火30s， 72。C延伸lmin， 35個循 環(huán)，然后72。C延伸10 min。
結(jié)果檢測PCR產(chǎn)物經(jīng)1.0%凝膠電泳檢查，表明擴(kuò)增得到一條約500bp的條帶，如圖2 所示。用PCR產(chǎn)物純化試劑盒將特異性擴(kuò)增片段回收，與pMD-19T載體連接，轉(zhuǎn)化大腸桿菌 0 .cW力DH5a。對候選克隆進(jìn)行PCR鑒定，篩選出陽性重組子，送北京華大基因公司進(jìn)行測 序。測序后的準(zhǔn)確長度為477bp，編碼130個氨基酸。其核苷酸序列為SEQ ID N0:3。
將核酸序列比對(BLASTN)表明，它與擬南芥^ /^基因的相關(guān)區(qū)段有54%的一致性，將序 列在NCBI網(wǎng)站上進(jìn)行blast序列分析，與擬南芥v^ /^序列同源性最高。 3)利用RACE試劑盒擴(kuò)增基因
根據(jù)克隆獲得的5"/a^/^基因片段序列(SEQ ID NO:3)，分別設(shè)計(jì)ARF 5'-RACE引物P3 (SEQ工D N0:4)和3'-RACE引物P4 (SEQ ID N0:5)
P3: 5'CAAACAGCATCCGGAACCTCATACC 3'
P4: 5' CCTCAAACTGTCATGCCTTCTTCGGTC 3'
以茄子不同組織的混合cDNA為RACE模板，根據(jù)Clontech公司的RACE試劑盒SMART RACE cDNA Amplification Kit (PT3269-1 )，分別做5'—-RACE和3'-RACE試驗(yàn)，進(jìn)行全長 cDNA的克隆，得到如圖3所示的5'-RACE和3' -RACE擴(kuò)增片段。
反應(yīng)體系5p1cDNA模板，5ulTaq Buffer (IOX)， 1 y 1特異引物(10 mraol L-1)， 5ix 1 10XUniversal Primer A mix (IOX)， ly ldNTPs (IO畫I L-1) ， lp 1 50X Advantage 2 Polymerase Mix,力口 dd H20至50ul。
PCR反應(yīng)程序5次循環(huán)94。C30s， 72°C 3min， 5次循環(huán)94°C 30s， 70°C 30s， 72°C 3min， 25次循環(huán)94°C 30s， 68°C 30s， 72°C 3min。經(jīng)擴(kuò)增，5'-RACE PCR反應(yīng)出現(xiàn)一條明 亮的特異性條帶，如圖3所示，回收并進(jìn)行克隆。經(jīng)測序得到1686 bp的擴(kuò)增片段，其中470 bp與簡并引物克隆得到的片段的5'-末端序列重疊。于791 bp處發(fā)現(xiàn)起始密碼子atg，其前 端序列為5'-端非翻譯區(qū)，這表明5k^/^基因的5'-端序列己經(jīng)獲得。3'-RACEPCR反應(yīng)出現(xiàn)一 條明亮的特異性條帶，如圖3所示。克隆測序得到2261 bp的特異條帶，其中313 bp與5ia^/^ 片段的3'-末端序列重疊，在3'-RACE片段中還含有23個T堿基的寡核苷酸序列，說明已經(jīng) 獲得了完整的cDNA3'-末端序列。將5'-端序列(SEQ IDNO:IO)、基因片段(SEQ ID N0:3)與 3'-端序列(SEQ ID NO: 11)進(jìn)行拼接，整合后得到含有poly A尾部結(jié)構(gòu)的、完整的cDNA拼 接序列，長度為3750 bp (SEQ ID N0:8)。
6DNAStar分析表明，在完整的cDNA序列3464 bp處發(fā)現(xiàn)終止密碼子taa; 3676-3699 bp 處發(fā)現(xiàn)poly A轉(zhuǎn)錄終止信號，其余序列為3'-端非翻譯區(qū)。分析表明完整的ORF序列長度為 2676bp (SEQ ID NO:12)。
4)全長cDNA的序列擴(kuò)增
根據(jù)拼接完整的cDNA序列設(shè)計(jì)全長引物，擴(kuò)增區(qū)域不包括cDNA的非翻譯區(qū)。
正向引物FP: 5' GGGGTTTTATACTTTTTGGGGTTGC 3' (SEQ ID NO:6)，
反向引物RP: 5' AGACTTGGCCCTTCCTCGTCTTTAG 3' (SEQ ID N0:7)
反應(yīng)程序?yàn)?4r預(yù)變性2min， 94。C變性30s， 58。C退火30s， 72。C延伸3min，進(jìn)行35 個循環(huán)，然后72。C延伸10min。
全長cDNA的擴(kuò)增提取茄子的總RNA，用引物FP、 RP按常規(guī)方法進(jìn)行RT-PCR反應(yīng)。 結(jié)果有明亮的特異性條帶出現(xiàn)如圖4所示，約為3000bp，將之回收并克隆。經(jīng)測序得到2911 bp的特異片段，測序結(jié)果與拼接而成的序列一樣。0RF Finder分析整個序列編碼1個完 整的0RF (SEQ ID NO: 12)。表明茄子生長素響應(yīng)因子基因的全長序列已經(jīng)克隆獲得。 條帶用PCR產(chǎn)物純化試劑盒將特異性擴(kuò)增片段回收，與pMD-19T載體連接，轉(zhuǎn)化大腸桿菌 (fU'oh')DH5a。對候選克隆進(jìn)行PCR鑒定，篩選出陽性重組子，送北京華大基因公司進(jìn)行測 序，獲得茄子生長素響應(yīng)因子基因5VwARFS (SEQ ID NO: 8)，其全長為3750bp。
實(shí)施例2全長cDNA序列及結(jié)構(gòu)域分析
新克隆的茄子5ia4《/^序列全長3750 bp，開放閱讀框2676bp，編碼891個氨基酸，其氨 基酸序列與擬南芥的ARF8 —致性為54. 7%，與水稻的0sARF8 —致性為68. 2%;氨基酸序列與 番莉的S1ARF8 —致性達(dá)到54. 4%。
SmARF8蛋白氨基酸序列分析表明，與擬南芥ARF8基因一樣，具有這個家族基因序列的 典型特征。我們將水稻0sARF8、擬南芥ARF8、黃瓜CsARF3、番茄S1ARF8及茄子SmARF8基 因氨基酸序列用clustW 1.83程序進(jìn)行同源保守域分析，再用Gendoc分析。ARFs家族基因 在N-末端含有一個300 aa左右的保守域，它在ARF1基因中驗(yàn)證具有DNA結(jié)合域的功能 (Ul腿sov T， Hagen G， Guilfoyle TJ. 1997a . ARF1， a transcription factor that binds to auxin response elements. Science. 1997 Jun 20:276(5320) :1865-1868 )，被稱為DNA-結(jié)合域(DBD)，能跟生長素響應(yīng)基因AuxRES的啟動子序列中的保守回文重復(fù)序列TGTCNC特 異結(jié)合。氨基酸序列保守性分析結(jié)果如圖5表明，新克隆的茄子SmARF8基因在N-端序列與 其他物種的這段保守域同源性非常高，含有一個完整的N-端DNA-結(jié)合域。擬南芥的ARFs家 族基因除了 ARF3和ARF17夕卜，都擁有一個C-末端保守域(CTD)，它含有與Aux/IAA蛋R白中的區(qū)域III和IV相似的保守域，具有蛋白互作功能，能使ARF和Aux/IM蛋白形成同源 或異源二聚體(Ulmasov T, Murfett J， Hagen G， Guilfoyle TJ (1997b) Aux/IAA proteins repress expression of reporter genes containing natural and highly active synthetic auxin response elements. Plant Cell 9: 1963-1971 ; Ulmasov T， Hagen G, Guilfoyie TJ. 1999a . Dimerization and DNA binding of auxin response factors. Plant J19:309-319b., Tom J. Guilfoyle, and Gretchen Hagen. Auxin Response Factors. J Plant Growth Regul， 2001， 20:281-291.)。而ARFs家族基因含有同樣的兩個保守域III和IV，表明他們也是生 長素的響應(yīng)基因。茄子SmARF8基因同樣擁有非常保守的CTD，同源性分析結(jié)果顯示與其他物 種的CTD域幾乎一致。SmARF8基因在DNA結(jié)合域和C-末端之間的區(qū)域是不保守的，但是富含 脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸殘基。在這個區(qū)域并具有轉(zhuǎn)錄因子的特征區(qū)域核定位序列PQRNKRPR。 表明它具有ARFs家族基因的典型特征。SmARF8擁有與ARF8 —致的保守功能域，表明該基因 具有調(diào)控單性結(jié)實(shí)的功能。
實(shí)施例3不同物種ARF家族基因的系統(tǒng)進(jìn)化樹分析
為了比較克隆得到的茄子SmARF8基因與其他物種ARFs家族基因的親緣關(guān)系，分別下 載擬南芥、水稻、黃瓜和番茄中已經(jīng)公布的ARFs家族基因序列。以各基因的全長氨基酸序 列進(jìn)行聯(lián)配，并用phylip軟件構(gòu)建成系統(tǒng)進(jìn)化樹。結(jié)果如圖6所示，可見SmARF8基因與 ARF8、 OsARF8、 S1ARF8、 CsARF3、 CsARF4、 OsARF6a、 OsARF6b聚集在一個分支上，其 他基因與他們都沒有聚集在一起。表明他們的親緣關(guān)系非常近。其中與調(diào)控?cái)M南芥單性結(jié)實(shí) 的基因ARF8親緣關(guān)系非常密切，表明該基因具有調(diào)控單性結(jié)實(shí)的功能。
實(shí)施例4利用5)a^/^構(gòu)建植物表達(dá)載體
以茄子cDNA第一鏈為模板，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，所用引物為P-U (SEQIDNO:13) ， P-L (SEQIDNO:14):
P-U: 5' CAGTTTCAACATCAACAGCGAACC 3' P-L: 5'ACAAATGGAGTAACCCGAGAAG 3'
其反應(yīng)條件為P-U和P-L引物分別為2(11 (10nmol'L-l) ， 5 pi Taq Buffer (10X ) ， 1 pldNTPs (2.5mmol丄-l) ， Taq酶2 U，加ddH20至50 pl。反應(yīng)程序?yàn)?4。C預(yù)變性2min, 94。C變性30 s， 58。C退火30 s， 72 。C延伸30 s，進(jìn)行35個循環(huán)，然后72 。C延伸10 min。 將特異性擴(kuò)增片段回收，分別以正向、反向錨定連接到pBSSK "11載體的內(nèi)含子結(jié)構(gòu)2端，構(gòu)建含目的序列反向重復(fù)結(jié)構(gòu)的RNA干涉中間載體。對候選克隆進(jìn)行PCR鑒定，篩選出陽 性重組子。將含有內(nèi)含子結(jié)構(gòu)和正反基因片斷的載體片斷克隆到含超強(qiáng)啟動子的35S-1300表 達(dá)載體，然后電擊法將載體轉(zhuǎn)化到根癌農(nóng)桿菌。
實(shí)施例5利用構(gòu)建植物表達(dá)載體轉(zhuǎn)化茄子的方法(農(nóng)桿菌介導(dǎo)法)
將轉(zhuǎn)化有1300-5V ^i FS干涉表達(dá)載體的農(nóng)桿菌單菌落，在YEP液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)過夜， 直到菌液OD6(X)值為0.1。菌液離心后，沉淀用MS基本培養(yǎng)基重新懸浮。杭州紅茄葉片或者 子葉外植體在MS培養(yǎng)基上預(yù)培養(yǎng)2天，在農(nóng)桿菌懸浮液中浸潤5分鐘，在無菌濾紙上瀝干， 然后重置回預(yù)培養(yǎng)的瓶子中繼續(xù)培養(yǎng)48小時后，轉(zhuǎn)移到含有卡那霉素和氯霉素的MS選擇培 養(yǎng)基上生長，獲得愈傷組織。將愈傷組織轉(zhuǎn)移到不含NAA的MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)，經(jīng)莖分化和 伸長后，然后在V3培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，獲得茄子5V^4i FS基因被干涉表達(dá)的能單性結(jié) 實(shí)的轉(zhuǎn)基因植株。序歹!j表
<110〉浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
〈120> —種植物單性結(jié)實(shí)調(diào)控基因及其應(yīng)用 〈130> 參見說明書內(nèi) <160〉 14
〈170> Patentln version 3.3
〈210〉 1 <211> 21 <212〉 DNA 〈213〉 引物l 〈400〉 1
ggaarttyag gcayatyttt c 21
〈210〉 2 〈211〉 23 <212> 腿 <213> 引物2 〈400〉 2
cwg thgattc rtcccahcca acc 23
〈210〉 3
<211> 477
〈212〉 DNA
〈213〉茄子基因片段
〈400〉 3
atctggaagt tcaggcacat ctttcgcgga caaccaaaga ggcatctatt gacaacagga 60tggagtgtgt ttgtgagtgc aaaaagactt gttgcaggtg atgcggtcat ctttatctgg 120
aatgaaaaca atcaattgct tttggggatt cgacgtgcca atcgtcctca aactgtcatg 180
ccttcttcgg tcttgtcaag tgatagcatg cacattggtc tcctagctgc agcagctcat 240
gcagccgcaa ctaatagccg ctttacaata ttttacaatc caagggctag cccgtcagag 300
tttgtcatac ctcttgccaa gtatgttaaa gcagtgtatc acactcgaat ttctgttggt 360
atgaggttcc ggatgctgtt tgaaacagaa gaatcgagtg tccgaaggta catgggcaca 420
attactggca tcagtgactt agatccggtt cgctgccgac tcacactgcc gtccgga 477
<210> 4
<211> 25
〈212〉 DNA
〈213〉 5'-RACE引物
〈400〉 4
caaacagcat ccggaacctc atacc 25
<210> 5
〈211> 27
〈212〉 DNA
〈213〉 3'-RACE引物
〈400> 5
cctcaaactg tcatgccttc ttcggtc 27
〈210〉 6 〈211〉 25 〈212〉 DNA<213>正向引物 〈400〉 6
ggggttttat actttttggg gttgc 25
〈210〉 7 〈211〉 25 〈212〉 DNA 〈213〉反向引物 〈400〉 7
agacttggcc cttcctcgtc tttag 25
<210> 8 <2丄1〉 3750 <212〉 DNA
〈213〉茄子生長素相應(yīng)因子基因全長序列 <400> 8
tgtcatgcct gcaggtcgac tctagactcg agggtccaga tctccagtct tctaatacga 60 ctcactatag ggcaagcagt gtatcaacgc agagtacgcg gggaagtctt attttcatgt 120 caataatgga tttttatatg attactactc tttttgtttt taataattca gaattggaaa 180 tggaaaggag tgagaaggaa cagttcccta acttagcagc attttacaat ctccagttcc 240 ttaaattcat ggggttcttt cttctgtagc tttcaatatg tgaaaagaaa atcaatcact 300 cagagaaaag aaaagaaaaa cgaaaaaagt acagctgaag agatctactt aatagcctac 360 ttgagctctt actcagtcac tatgcagtag agatcttgaa gtggccaaaa aagttgtttc 420 ttcaatactc ttactgttgc tctttagggt tttctagtta gttttacttc aagatctgtg 480 gttgtgttgc ttctgcagct tatttgaaga aaagggtatt tagggtttgt gtagtttctt 540
12gattttactttgcctaattga卿tctgggagcagctcttgstggtggtg600
tttagttgtgg犯ctgggttaggatg卿atatggtttcttgcttcttggtttttgctag660
gggtgggggggggggggttgcttttcatttttggggttttatactttttg720
gggttgctcttttttttggcttaactagtgtgcttgataggagttagttg780
atttgctgaaatgagggtgtcttcatctgggttcaatcctcagcc卿gg肪gcaacagg840
tgcttgaattcggagctgtggcacgcttgtgcaggaccattagtatc已ct900
tccacctgtagg犯gc卿gtagtttattttCCtC33gggcatagtgagc鄉(xiāng)ttgctgc960
ttcaacc幼caagg鄉(xiāng)tagatgctcatatccctaattatcctggtttacc已cctcaact1020
aeitttgtcagcttcacaacctgcagatgttg卿ctgatg犯gt3t3tgC1080
ttgcagccact犯gtccac3gatgtgtgcctgctacctgc1140
agaacttggcatccccagtacaactatttctgcaaaaccttgacggcaag1200
tggcaccagtactcatggtggattctctgtCCCtCgCCg￡Laagttttccc1260
ccctcttgattactctcagcagccaccttgtca^gagttgattgcaaaagatctcca/tgg1320
aaattccggcatatttttcgcggac犯cca1380
aggatggagtgtgtttgtgagtgca^犯agacttgttgcaggtg3tgcggtcatctttat1440
tgcttttggggattcgacgtgccaatcgtcctca^actgt1500
catgccttcttcggtcttgtcaagtgalagcatgcacattggtctcctagctgcagcagc1560
tcatgcagccgccgctttacaatccaagggctagcccgtc1620
agagtttgtcatacctcttgccaagtatgttaa^gc已gtgtatcacactcgaatttctgt1680
tggtatg郷ttccggatgctgtttgaaacagtgtccg犯ggtacatggg1740
ggcatcagtg8Cttag3tCCtgttcgttggccgaattcacsctggcggtc1800
cgtgaaggttggatgggatgaatcaactgcagg卿caggcagcccagagtttctctgtg1860
gga^attga^cctctgacaactttccctatgtatccttctcctttctccct犯ggctaaa1920
gcggccttggccatctggattaccttctcttactggttttcctaatggtgatatggctat1980
gaattctccgctctcatggctgcgtggtgscatggg卿tcagggaatgc2040
tttccagggttttggtgttactccatttatgcaaccaagaatggatgcttctttgttagg2100
cttgcaacctgacattctgcaaacaatggcagcactagatccatcgaaacttgca犯tca2160gtcccttatgcagttccaactaacagttcagcatctttgagtcag已gtca2220
gatgttgcagccttctcatttctgatccaaggcttctcagaaaaccactt2280
gctcagatgcttcagcagcagttgcagcgccgtcaaaatt2340
acagcaattgcttcagccacagcttcagcagcaccaggaagtgaactcac已gtttcaaca2400
tceiacagcg3accaaggccatctccagtctctctcagatggcttcagttac3C3gcccca2460
txtttctcatttgccagtctta^gttc38ctggttcccagcaaaccttttctgatatgct2520
gggtacccatgtcaattcatctagcaattct￡L￡Lt3tgC￡L￡Lagtctattgagttcattttx2580
ccgtgatggagcacctgctgtcctgaacatgcatgaaacacaccctctagtgtcttcgtc2640
ctcatcatcaaagcg已已ttgctct已gaatctcagctcccttctcgggttactccatttgt2700
tttatcccagcccgagaatgtgatagcaccgtctcagatctttcctcttt2760
actgccaccttttcctggcagggaMctttttctgattat認(rèn)gg3gcag2820
犯gcaeitgcactctatggatttacagactctttgaacatactgcagaccggtstgtccaa2880
catga鄉(xiāng)gt3gC3gtggtgtttatctattccttatgctatctctacctt2940
cacaagtactgtgggcaatgagtatccccttaactcagacatgacagcttcaagttgtgt3000
gga,tg皿tcaggtttcttgc已gtcctccga,犯atggggscc^gcaascc3060
aatctttgtgaaggttc犯3犯tc已gggtcCtttgg3CggtC3CtCg3t3tctcc犯3tt3120
tagcsgctatcacgaacttcgaagtgagcttgctcgc已tgtttgggctagaaggcttgtt3180
ggaggaccctgag卿tc已ggctggcagcttgtaattgttgaccgag卿atgatgtcct3240
cctcctcggtgacgatccttggcaggagttcgtgaataatgtttggt已catcaagatact3300
ctctccatatgaagtgcagc卿tgggg犯卿gggccttgatcttctaaatggcgtccg3360
aacacagaggcttcctggcaatgtcaatggatgtgatgactatatgaacc卿agggttc3420
ccgaaatacttaccattggggtcacttgaccattagtgtg3480
acctgcctaaggtacttgtsctatatagttgcttttgcccttggttstttttttgtaccc3540
tgttgtgtctcaagttgtcatgtatcttttctacctaaagacg郷犯gggccaagtctc3600
atttgttagcttgtatxccagattaagtacat犯tatttt3660
gactgtaactactagaaaaatactctgcgttgataccact3720
gcttgccctatagtgagtxg3750<210> 9 〈211〉 891 〈212〉 PRT
<213>茄子生長素相應(yīng)因子氨基酸序列 〈400〉 9
Met Arg Val Ser Ser Ser Gly Phe Asn Pro 1 5 10
Gly Glu Lys Lys Cys Leu Asn Ser Glu Leu
20 25 Pro Leu Val Ser Leu Pro Pro Val Gly Ser
35 40 Gin Gly His Ser Glu Gin Val Ala
50 55 Ala His lie Pro Asn Tyr Pro Gly 65 70 Leu His Asn Leu Thr Met His Ala 85
Ala Gin Met Thr Leu Gin Pro Leu 100
Cys Leu Leu Pro Ala Glu Leu Gly 115 120 Tyr Phe Cys Lys Thr Leu Thr Ala
130 135 Phe Ser Val Pro Arg Arg Ala Ala 145 150 Tyr Ser Gin Gin Pro Pro Cys Gin
Gin Pro Glu Glu Ala Thr 15
Trp His Ala Cys Ala Gly 30
Arg Val Val Tyr Phe Pro 45
Ala Ser Thr Asn Lys Glu Val Asp 60
Leu Pro Pro Gin Leu lie Cys Gin
75 80 Asp Val Glu Thr Asp Glu Val Tyr
90 95 Ser Pro Gin Glu Gin Lys Asp Val 105 110 lie Pro Ser Lys Gin Pro Thr Asn 125
Ser Gly Thr Ser Thr His Gly Gly 140
Glu Lys Val Phe Pro Pro Leu Asp 155 160 Glu Leu lie Ala Lys Asp Leu His170 175
His lie Phe Arg Gly Gin Pro Lys Arg
185 190 Ser Val Phe Val Ser Ala Lys Arg Leu 200 205 Phe lie Trp Asn Glu Asn Asn Gin Leu 220
Asn Arg Pro Gin Thr Val Met Pro Ser 235 240 Met His lie Gly Leu Leu Ala Ala Ala
165
Gly Asn Glu Trp Lys Phe Arg 180
His Leu Leu Thr Thr Gly Trp 195
Val Ala Gly Asp Ala Val lie 210 215 Leu Leu Gly lie Arg Arg Ala 225 230 Ser Val Leu Ser Ser Asp Ser 245
Ala His Ala Ala Ala Thr Asn Ser 260
Arg Ala Ser Pro Ser Glu Phe Val 275 280 Ala Val Tyr His Thr Arg lie Ser
290 295 Phe Glu Thr Glu Glu Ser Ser Val 305 310 Gly lie Ser Asp Leu Asp Pro Val 325
Ser Val Lys Val Gly Trp Asp Glu 340
Arg Val Ser Leu Trp Glu lie Glu 355 360 Pro Ser Pro Phe Ser Leu Arg Leu 370 375
250 255 Arg Phe Thr lie Phe Tyr Asn Pro 265 270 lie Pro Leu Ala Lys Tyr Val Lys 285
Val Gly Met Arg Phe Arg Met Leu 300
Arg Arg Tyr Met Gly Thr lie Thr 315 320 Arg Trp Pro Asn Ser His Trp Arg
330 335 Ser Thr Ala Gly Asp Arg Gin Pro 345 350 Pro Leu Thr Thr Phe Pro Met Tyr 365
Lys Arg Pro Trp—Pro Ser Gly Leu 380Pro Ser Leu Thr Gly Phe Pro Asn Gly Asp Met Ala Met Asn Ser Pro 385 390 395 400
Leu Ser Trp Leu Arg Gly Asp Met Gly Asp Gin Gly Met Gin Ser Leu
405 410 415
Asn Phe Gin Gly Phe Gly Val Thr Pro Phe Met Gin Pro Arg Met Asp
420 425 430
Ala Ser Leu Leu Gly Leu Gin Pro Asp lie Leu Gin Thr Met Ala Ala
435 440 445
Leu Asp Pro Ser Lys Leu Ala Asn Gin Ser Leu Met Gin Phe Gin Gin
450 455 460
Ser lie Pro Asn Ser Ser Ala Ser Leu Ser Gin Ser Gin Met Leu Gin 465 470 475 480
Pro Ser His Ser His Gin Asn Leu lie Gin Gly Phe Ser Glu Asn His
485 490 495
Leu lie Ser Gin Ala Gin Met Leu Gin Gin Gin Leu Gin Arg Arg Gin
500 505 510
Asn Phe Asn Asp Gin Gin Gin Leu Leu Gin Pro Gin Leu Gin Gin His
515 520 525
Gin Glu Val Asn Ser Gin Phe Gin His Gin Gin Arg Thr Lys Ala lie
530 535 540
Ser Ser Leu Ser Gin Met Ala Ser Val Thr Gin Pro His Leu Ser His 545 550 555 560
Leu Pro Val Leu Ser Ser Thr Gly Ser Gin Gin Thr Phe Ser Asp Met
565 570 575
Leu Gly Thr His Val Asn Ser Ser Ser Asn Ser Asn Met Gin Ser Leu
580 585 590
Leu Ser Ser Phe Ser Arg Asp Gly Ala Pro Ala Val Leu Asn Met His<formula>formula see original document page 18</formula>Leu Leu Leu Gly Asp Asp Pro Trp Gin Glu Phe Val Asn Asn Val Trp
820 825 830
Tyr lie Lys lie Leu Ser Pro Tyr Glu Val Gin Gin Met Gly Lys Glu
835 840 845
Gly Leu Asp Leu Leu Asn Gly Val Arg Thr Gin Arg Leu Pro Gly Asn
850 855 860
Val Asn Gly Cys Asp Asp Tyr Met Asn Gin Lys Gly Ser Arg Asn Thr 865 870 875 880
Met Asn Gly lie Pro Leu Gly Ser i>eu Asp Tyr
〈210〉 10 〈211〉 1686 〈212〉 DNA
〈213〉 5'-RACE擴(kuò)增片段 〈400〉 10
tgtcatgcct gcaggtcgac tctagactcg agggtccaga tctccagtct tctaatacga 60
ctcactatag ggcaagcagt gtatcaacgc agagtacgcg gggaagtctt attttcatgt 120
caataatgga tttttatatg attactactc tttttgtttt t犯taattca gaattggaaa 180
tggaaaggag tgagaaggaa cagttcccta acttagcagc attttacaa/t ctccagttcc 240
ttaaattcat ggggttcttt cttctgtagc tttcaatatg tgaaaagaaa atcaatcact 300
cagag肌aag肌aa辟aaaa cgaaa朋agt scagctgaag agatctsctt肪t3gcct3C 360
ttgagctctt actcagtcac tatgcagtag agatcttgaa gtggccaaaa aagttgtttc 420
ttcaatactc ttactgttgc tctttagggt tttctagtta gttttacttc aagatctgtg 480
gttgtgttgc ttctgcagct tatttgaaga aaagggtatt tagggtttgt gtagtttctt 540
gattttactt tgcctaattg aagatctggg acaagcatga agcagctctt gatggtggtg 600g;aactgggttaggatg卿已tatggtttcttgcttcttggtttttgctag660
gggtggggggg鵬鵬ttgtgctagta朋cttttcatttttggggttttatactttttg720
gggttgctcttttttttggcttaactagtgtgcttgatsggagttagttg780
atttgctg犯atgagggtgtcttcatctgggttcaatcctcagcc卿ggaagc犯cagg840
ggagaa犯aatgcttgaattcggagctgtggcacgcttgtgcsggaccattagtatcact900
tccacctgtagg鄉(xiāng)c卿gtagtttattttCCtC33gggcatagtgagcaggttgctgc960
ttcaacc犯c幼gg犯gtagatgctcatatccctaattatcctggtttaccacctcaact1020
aatttgtcagcttcacaacctgaca^tgcatgcagatgttaagtatatgc1080
tcaaatgac8ttgcagccacta^gtccacag3tgtgtgCCtgctacctgc1140
3g33CttggCatccccagtacaacta/tttctgc犯犯ccttgacggcaag1200
tggcaccagtactcatggtggattctctgtccctcgccgagCagC3g8犯aagttttccc1260
ccctcttgattactctcagcagccaccttgtcaagagttgattgc3Eie^gatctccatgg1320
g犯t,tgga肪ttccggcatatttttcgcggacaacca33g3ggC3tCtattgscaac1380
gtgtttgtgagtgcaaa已a(bǔ)gacttgttgcaggtgatgcggtcatctttat1440
ctgg肌tgaatgcttttggggattcgacgtgccaatcgtcctcaaactgt1500
catgcctixttcggtcttgtcaagtgeitagcatgcacattggtctcctagCtgCBgC2LgC1560
tcatgcagccgccgctt"t犯gacctggtctgc郷cggccgcccatggga1620
tatcatcgstcatatgtcgccctatsgtgagtcgtattacggtaccgagctcgaatcact1680
gccgtc1686
<210> 11
<211〉 2207
〈212〉 DNA
<213〉 3'-RACE擴(kuò)增片段
〈400〉 11
aatagccgctttacaatattagggctagcccgtcagagtttgtcatacct60
cttgccaagtstgttaaagcagtgtatcacctgttggtatgaggttccgg120
20atgctgtttgatcgagtgtctgggcacsattactggcatc180
agtgacttagatcctgttcgttggccgaatixacactggcggtccgtgaaggttggatgg240
ctgcagg卿caggcagcccagagtttctctgtggg3朋ttgaacctctg300
aC33CtttCCctatgtatccttctcctttctccctaaggct犯agcggccttggccatct360
ggattaccttctcttactggttttcctaatggtg由tggctatgaattctccgctctca420
tggctgcgtggtg3C3tggg卿tcaggg3atgcagtcgcttaatttccagggttttggt480
gttactccatttatgcaacca已g已a(bǔ)tggatgcttctttgttaggcttgcaacctgacatt540
tggcagcsct灘atccatcgatcagtcccttatgcagttc600
ttcctaacagttcagcatctttgagtc8gagtcagatgttgcagccttct660
cattcacatcccaaggctixELCtt肌t3tCtcaggctcag720
atgcttcagcagcagttgcagcgccgtcaaaattttaatgattgcttcag780
ccacagcttcagcagcaccaggaagtg咖tcacagtttcaacatcaacagcgaaccaag840
gccatctccagtctctctcagatggctccagtt3C3C3gCcccatctttctcatttgcca900
gtcttaagttcaactggttcccagcsaaxxttttctgatatgctgggtacccatgtcaat960
tcatctagcagcaaagtctattg3gttC3ttttcccgtgatggagcacct1020
gctgtcctga8catgcatg3ctagtgtcttcgtcctcatca^tcaaagcga1080
attgctctag犯tctcagctcccttctcgggttactccatttgttttatcccagcccgag1140
aatgtgat已gcacccsatactaaggtctc3gatctttcctctttactgccaccttttcct1200
ggc鄉(xiāng)gaatctttttctgagcag已3g已t已gcc犯aacaatgcactctat1260
ggatttacagactctttga已catactgcagaccggtatgtccaacatgaeigggtagcagt1320
ggtgst犯tggatctttatctattccttatgctatctctaccttcacaagtactgtgggc1380
aatg3gta,tccccttaactcgcttcaagttgtgtggatgaatcaggtttc1440
ttgcetgtcctccgaaaatggggaccaagcaaaccaaacta3t3g33tC"tttgtgaaggtt1500
ggtcctttggacggtcactcgatstctcca肪tttagcagctatcacgaa1560
cttcgaagtgagcttgctcgcatgtttgggctsgaaggcttgttggaggaccctgagaga1620
tC8ggCtggC3gcttgtaattgttgaccgag卿3tg3tgtcctcctcctcggtgacgat1680
ccttggc鄉(xiāng)taatgtttggtaca^tcaag已tactctctcc8tatgaagtg1740gg犯卿gggccttgatcttcta犯tggcgtccgaacaca gaggcttcct1800
ggcaatgtc33tgg3tgtgatgactatatg aaccagaagg gttcccgaaa tactatgaacI860
gggataccattggggtcacttgactactaa tgaccattagtgtgacctgcct犯ggtect1920
tgt3Ct3t3tagttgcttttgcccttggttatttttttgtaccctgttgtgtctcaagtt1980
gtcatgtatcttttctacctsa卿cgagg犯gggcc幼gtctcatttgttagcttgtat2040
cccagattaagt已caatgt已a(bǔ)attataata ttttatattgat犯g已ctgtaac tax: tags2100
aaaaaaaaaagcgttgataccactgcttgccctatagtga2160
gtcgtattagaatcgtcgacctgcaggcatgc犯gctggc2207
〈210〉 12
〈211〉 2676
〈212> DNA
〈213〉 ORF編碼閱讀框序列
〈400〉 12
atgagggtgtcttcatctgggttcaatcctcagcc卿gg犯gC83C3gg60
tgcttgaattcggagctgtggcacgcttgtgcaggaccattagtatcacttccacctgta120
gg犯gc卿gtagtttattttcctcaagggcatagtgagcaggttgctgcttcaaccaac180
鄉(xiāng)g鄉(xiāng)tELgatgctcatatccctaattatcctggtttaccacctca^ct犯tttgtC3g240
cttcac朋cctgacaatgcatgcagatgttgag已ctg已tgaagtatatgctcaaatga<c3300
ttgcagccactaagtccscagatgtgtgcctgctacctgc郞朋cttggc360
atccccagtacaactatttctgc犯犯ccttgacggc幼gtggcaccagt420
actcatggtggattctctgtccctcgccgagC3gC3g朋3aagttttcccccctcttgat■
tactctcagcagccaccttgtcaag已gttg3ttgC犯犯gatctccatgggaatgaatgg540
a^iattccggcatatttttcgcggac肌cca3agsggc已tctattgac犯c鄉(xiāng)atggagt600
gtgtttgtgagtgcaaaaagacttgttgcaggtgatgcggtcatctttatCtgg33tg幼660
tgcttttggggattcgacgtgcc犯tcgtcctcaaactgtcatgccttct720
tcggtxttgtC肌gtg3t3gC3tgC3C3ttggtctcctagctgcagcagctcatgcagcc780gccgctttacaatccasgggctagcccgtcagagtttgtc840
atecctcttgcc犯gtatgtta已a(bǔ)gcagtgtatcacactxgaatttctgttggt3tg鄉(xiāng)900
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ggcatc灘tgactt已gatcctgUcgttggccg犯ttcacactggcggtccgtga鄉(xiāng)tt1020
卿tggg3tg鄉(xiāng),caggcagcccagagtttctctgtg1080
cctctgacaactttccctatgtatccttctcctttctccctaaggct3犯gcggccttgg1140
ccatctggattaccttctcttactggttttcctaatggtgatatggctatgaattctccg1200
ctctcatggctgcgtggtga C3tggg卿tcagggaatgcagtcgctt犯tttccagggt1260
tttggtgttactccatttatgc犯ccaag3atggstgcttctttgttaggcttgcaacct1320
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cagttccaact已a(bǔ)cagttcagcatctttgagtxagagtcagatgttgcag1440
ccttctcattcacatcaaaatctgatccaaggcttctcagaaaaccactt幼ta/tctc3g1500
gctcagatgcttcagcagcagttgcagcgcCgtC3EL3已ttttaatgatca3C3gca已ttg1560
cttcagccacagcttcagcagcaccaggaagtgaactcacagtttcaacatcaacagcga1620
3CC33ggCC3tctccagtctctctcag已tggcttcagtt3cscagcccc3tctttctcat1680
ttgccagtcttggttcccagcaaaccttttctgatatgctgggtacccat1740
gtC犯ttC3tctagcaattctaatatgcaa8gtctsttgagttcattttcccgtgatgga1800
gC3CCtgCtgtcctgaacatcaccctctagtgtcttcgtcctca/tcatca1860
CtCt8g犯tCtcagctcccttctcgggttsctccatttgttttatcccag1920
CCCg3g犯tgtgatagcsccgtctcagatctttcctctttactgccacct1980
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ctctatggatttacagactctttgaacatactgcagaccggtatgtccaacatg犯gggt2100
agcagtggtgccttatgctatctctaccttCaC￡L8Lgt8LCt2160
gtgggC33tgagtatcccctatg3cagcttc犯gttgtgtgg3tgaatcet2220
ggtttcttgcagtcctccgaaatctttgtg2280
3atC3gggtCctttggacggtcactcgatatctccaaattt3gcagctat2340
g朋gtg3gCttgCtCgC3tgtttgggctag犯ggcttgttggaggaccct2400gaccgagaga atgatgtcct cctcctcggt 2460
gacgatcctt ggcaggagtt cgtgaataat gtttggtaca tcaagatact ctctccatat 2520
gaagtgcagc agatggggaa agagggcctt gatcttctaa atggcgtccg aacacagagg 2580
cttcctggca atgtcaatgg atgtgatgac tatatgaacc agaagggttc ccgaaatact 2640
atgaacggga taccattggg gtcacttgac tactaa 2676
〈210〉 13
〈211〉 24
<212〉 DNA
<213〉 P-U引物1 '
〈400〉 13
cagtttcaac atcaacagcg aacc 24
<210〉 14 〈211〉 22 〈212〉 腿 <213〉 P-U引物2 <400> 14
acaaatggag taacccgaga 2權(quán)利要求
1. 一種DNA序列，其堿基序列如序列表中SEQ ID NO8所示。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的DNA序列，其特征在于，所述DNA序列來自茄子。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的DNA序列，其特征在于，所述DNA序列為調(diào)控單性結(jié)實(shí)的生長素響應(yīng)因子基因。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的DNA序列，其特征在于，所述DNA序列編碼序列表中SEQ ID N0:9的氨基酸序列。
5. —種植物表達(dá)載體，其特征在于，其含有權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)的DNA。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的載體，其特征在于，所述載體為pBSSK-in載體。
7. —種轉(zhuǎn)基因植物，其特征在于，所述轉(zhuǎn)基因植物含有權(quán)利要求所述的1至3中任一項(xiàng)的DNA。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的轉(zhuǎn)基因植物，其特征在于，將權(quán)利要求5所述的載體用電擊法轉(zhuǎn)化 到農(nóng)桿菌中，利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將所述載體轉(zhuǎn)化到植物中。
9. 根據(jù)權(quán)利要求7至8所述任一項(xiàng)的轉(zhuǎn)基因植物，其特征在于，所述轉(zhuǎn)基因植物為茄子。
10. 根據(jù)權(quán)利要求7至8所述任一項(xiàng)轉(zhuǎn)基因植物，其特征在于，所述轉(zhuǎn)基因植物是含有調(diào)控單 性結(jié)實(shí)的生長素響應(yīng)因子基因的轉(zhuǎn)基因茄子。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種與植物單性結(jié)實(shí)相關(guān)的基因，特別涉及調(diào)控茄子單性結(jié)實(shí)的生長素響應(yīng)因子SmARF8，該基因cDNA序列全長3750bp。本發(fā)明還涉及將本發(fā)明的單性結(jié)實(shí)相關(guān)基因在茄子中干涉表達(dá)的方法。本發(fā)明的基因可以使轉(zhuǎn)基因植物發(fā)生單性結(jié)實(shí)，從而提高品質(zhì)，延長保鮮貯藏期，并且操作方法簡單。
文檔編號C12N15/29GK101451138SQ200810164128
公開日2009年6月10日 申請日期2008年12月25日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月25日
發(fā)明者包崇來, 朱琴妹, 杜黎明, 毛偉海, 胡天華, 胡海嬌 申請人:浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院