專利名稱：高密度陣列式細胞爬片培養(yǎng)裝置、貯存裝置及實驗裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種細胞培養(yǎng)裝置，尤其是一種使用方便、效率高、同一性好的高密度陣列式細胞爬片培養(yǎng)裝置、貯存裝置及實驗裝置。
背景技術(shù)：
體外細胞培養(yǎng)簡化了環(huán)境因素、排除了體內(nèi)實驗一些復(fù)雜干擾因素的影響，有利于應(yīng)用各種理化和生物等外界處理因素、探索和揭示細胞活動的規(guī)律；體外細胞培養(yǎng)便于采用各種技術(shù)和方法，分析和觀察在正常和改變了的生存條件下，細胞在形態(tài)和功能上的變化以及內(nèi)在的機制；特別是以人作為研究對象時，體外細胞培養(yǎng)不僅經(jīng)濟便捷，而且還在很大程度上避免了諸多倫理學(xué)上的問題。因此，體外細胞培養(yǎng)已成為包括生物醫(yī)學(xué)在內(nèi)的生命科學(xué)各個研究領(lǐng)域不可或缺的最為常用的實驗方法之一。
隨著生命科學(xué)研究內(nèi)容的不斷充實豐富，利用細胞培養(yǎng)實驗樣本進行分析和觀察的技術(shù)指標也不斷增多，涵蓋的領(lǐng)域日趨擴大。但是，每次試驗中，細胞本身及其培養(yǎng)條件多少會有所變化，因此每次培養(yǎng)的同種細胞在生長方式、細胞和分子生物學(xué)特性等方面就會有所不同，導(dǎo)致實驗結(jié)果產(chǎn)生偏差。為避免上述情況發(fā)生，目前人們普遍使用一種改良的體外細胞培養(yǎng)方法，即取若干適當大小(如10mm×20mm、厚度0.14.～0.17mm)的蓋玻片，浸酸和充分沖洗后高壓消毒；將蓋玻片放入培養(yǎng)皿/板中，將常規(guī)細胞鋪于片前；當細胞在蓋玻片上基本長滿后，將片取出；在4℃下用PBS漂洗3次，充分去除殘存的培養(yǎng)基和血清，細胞面朝上放入4℃冷丙酮中固定20分鐘，晾干后將蓋玻片放入培養(yǎng)皿或其它容器中，-20℃保存?zhèn)溆谩５?，此種細胞爬片培養(yǎng)方法存在著以下問題1.蓋玻片容易在光滑的瓶皿底部移動和重疊，有的蓋玻片因重疊產(chǎn)生縫隙而在雙面生長細胞，從而使細胞在每片蓋玻片上的生長條件及面積均不同，存在著因爬片的同一性不好而導(dǎo)致實驗結(jié)果產(chǎn)生偏差的問題；為了避免這個問題，實驗人員通常將蓋玻片排列松散，結(jié)果每次制備的細胞爬片數(shù)量十分有限，一般只有7～10片，難以滿足多層次、多指標研究的需要；
2.沒有專用的爬片貯存裝置，爬片在-20℃條件下保存?zhèn)溆脮r，不但占用較多的冷凍空間、造成能源浪費，而且每次拿取爬片非常麻煩，稍有不慎，將使爬片損壞；3.沒有專用的爬片實驗裝置，每次實驗都是將爬片直接擱置在器皿底面上，并以器皿為容器，添加能夠?qū)⑴榔瑳]入的藥液，藥液需求量大；同時由于器皿的表面積大，實驗過程中藥液容易蒸發(fā)，不但浪費藥液，而且還難以獲得準確的實驗結(jié)果；每次更換不同藥液時，均需將爬片取出以擦干上下表面，實驗操作步驟十分繁瑣、效率低。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是為了解決現(xiàn)有技術(shù)所存在的上述問題，提供一種使用方便、效率高、同一性好的高密度陣列式細胞爬片培養(yǎng)裝置、貯存裝置及實驗裝置。
本發(fā)明的技術(shù)解決方案是一種高密度陣列式細胞爬片培養(yǎng)裝置，其特征在于有載片板1，在載片板1上設(shè)有多個有序排列的槽2，槽2的深度是0.3～0.4mm，槽2內(nèi)置有與槽2底部形狀相吻合的玻片3。
所述載片板1的上面兩側(cè)設(shè)有把手4。
所述的槽2為圓形和方形。
在所述槽2的右側(cè)壁上設(shè)有取片缺口5。
一種高密度陣列式細胞爬片貯存裝置，其特征在于有支架6，支架6上設(shè)置有多個有序排列的用于放置圓形爬片的開口7，開口7的長度小于圓形玻片3的直徑，開口7的中間寬度大于兩端寬度，兩端寬度是0.15～0.18mm。
一種高密度陣列式細胞爬片實驗裝置，其特征在于有實驗板8，實驗板8上設(shè)置有多個有序排列的用于放置爬片的凹槽9，凹槽9的橫截面形狀與玻片3形狀相吻合，深度是4～6mm。
本發(fā)明同現(xiàn)有技術(shù)相比，具有如下優(yōu)點1.可以在直徑10cm的培養(yǎng)皿中同時獲得50～100張長勢良好的細胞爬片，細胞爬片培養(yǎng)效率高；2.由于玻片鑲嵌于載片板上的凹槽中，使其不易重疊，細胞單面生長，為后續(xù)試驗提供了很大方便；3.凹槽的深度僅高出玻片厚度0.13～0.26mm，因此各玻片上的細胞培養(yǎng)液處于同一平面，使各玻片上的細胞在相同培養(yǎng)條件下生長，從而保證了爬片的同一性、實驗結(jié)果的平行性與穩(wěn)定性；
4.在載片板上設(shè)置的扶手可以十分方便地將載片板取、放在培養(yǎng)皿中，而凹槽右側(cè)壁上設(shè)置的取片缺口，也可方便地將玻片放入以及將爬片取出凹槽，操作簡單易行；5.可以將相同規(guī)格的爬片豎直有序地排列在專用的貯存裝置中，可節(jié)省大量的冷凍空間，既而達到節(jié)約能源的目的；貯存裝置中的中間寬兩邊窄的開口設(shè)置，方便爬片的放置、拿取，有效防止因操作不當而對爬片的損壞；6.將爬片置于專用實驗裝置上，即將爬片置于實驗板上的凹槽(操作小室)中，使隨后的免疫組化、原位雜交、免疫熒光等相關(guān)實驗步驟以高效快捷的形式進行。小室與爬片的匹配吻合設(shè)置，只將藥液(50μl)滴入凹槽將爬片沒入即可，可節(jié)省大量的藥液，同時又能利用相對封閉的小室避免液體蒸發(fā)(干片)，有利于獲得淮確可靠的實驗結(jié)果，在實驗過程中不必將爬片反復(fù)取出擦干，大大簡化了操作步驟。
總之，本發(fā)明有助于獲得大量均勻穩(wěn)定的細胞爬片，實驗操作簡單易行，在很大程度上避免了由操作引起的實驗偏差和失誤，使細胞培養(yǎng)技術(shù)在生命科學(xué)研究領(lǐng)域中發(fā)揮更大的作用，具有相當廣闊的應(yīng)用前景。
圖1為本發(fā)明實施例1的結(jié)構(gòu)示意圖。
圖2為圖1的A-A視圖。
圖3為本發(fā)明實施例2的結(jié)構(gòu)示意圖。
圖4為圖2的C-C視圖。
圖5本發(fā)明實施例3的結(jié)構(gòu)示意圖。
圖6為本發(fā)明實施例貯存裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。
圖7為本發(fā)明實施例實驗裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。
圖8為圖7的B-B視圖。
具體實施例方式下面將結(jié)合
本發(fā)明的具體實施方式
。
實施例1如圖1、2所示有比培養(yǎng)器皿直徑小2mm的圓形載片板1，載片板1用可高壓滅菌的硅膠、金屬或其它材料制成。載片板1上面兩側(cè)設(shè)有0.5～0.8高的把手4，便于載片板1的取放。在載片板1上設(shè)有有序排列的向下凹的圓形槽2，圓形槽2的深度是0.3～0.4mm，圓形槽2內(nèi)置有與槽2底部匹配吻合的圓形玻片3，玻片3采用厚度為0.14～0.17mm的標準玻片，在槽2的右側(cè)壁上設(shè)有取片缺口5。為了分清爬片的正、反面，可以在玻片上做出標識，如在玻片的正面用磨(噴)砂磨出“R”字母。
實施例1可以是單獨的板狀結(jié)構(gòu)，使用時置于細胞培養(yǎng)皿中；也可以將細胞培養(yǎng)皿的底部制成本實施例1的結(jié)構(gòu)形式。
培養(yǎng)好的高密度陣列式細胞爬片，可以放置在如圖6所示的貯存裝置上進行處理，之后直接用于實驗或放置在-20℃條件下保存?zhèn)溆?。所述貯存裝置有用耐酸、耐堿的硬質(zhì)塑料或其它材料制成支架6，支架6上設(shè)置有多個有序排列的用于放置圓形爬片的開口7，開口7的長度小于圓形玻片3的直徑，開口7的中間寬度大于兩端寬度，兩端寬度是0.15～0.18mm，使圓形爬片下端的1/4～1/3置于開口內(nèi)。
當進行細胞爬片的免疫組織化學(xué)染色、DNA和RNA原位雜交以及免疫熒光等的各種實驗時，可以將爬片置于圖7、8所示的實驗裝置上。所述實驗裝置有實驗板8，實驗板8上設(shè)置有多個有序排列的用于放置爬片的凹槽9，凹槽9的橫截面形狀與玻片3形狀相匹配吻合，如爬片直徑是6mm，凹槽9的直徑可為0.65mm，深度是4～6mm，使實驗操作更加省時、省力、省藥品，得到更加科學(xué)的實驗結(jié)果。同樣，實驗裝置可以是單獨的板狀結(jié)構(gòu)，使用時置于帶蓋的器皿中；也可以將帶蓋的器皿的底部制成實驗裝置的結(jié)構(gòu)形式。
具體操作方法是1.將載片板1高壓滅菌或用酒精浸泡0.5小時和紫外照射2小時后，做干烤處理；2.采用相同的方式處理玻片3；3.在超凈臺中，將玻片逐一地置入載片板的各凹槽2；完全放滿后，將載有玻片2的載片板1放入培養(yǎng)皿底部；4.常規(guī)加入培養(yǎng)細胞；達到預(yù)定狀態(tài)后，將爬片依次放到實驗裝置上，即支架6上的開口7中，整體浸入PBS中洗滌3次，在冷丙酮中固定20分鐘，充分晾干后，直接用于實驗?zāi)康幕蚣由w密封，-20℃保存待用；5.把細胞爬片逐一放入實驗裝置上，即實驗板8上的凹槽9中，凹槽9恰好將其細胞爬片容納，按常規(guī)實驗步驟進行檢測；6.實驗過程中操作臺加蓋，以防止液體蒸發(fā)；7.實驗后，在載玻片上以6～10個細胞爬片的密度依次封片；
8.鏡下觀察。
實施例2如圖3、4所示其它同實施例1，只是槽2是由硅膠平板與其上的凸環(huán)10所圍成，取片缺口5設(shè)置在凸環(huán)10上。
實施例3如圖5所示其它同實施例1，只是槽2有圓形和尺寸大的方形，可以在完全相同實驗體系除獲得圓形細胞爬片外，還可獲得尺寸大的方形爬片，對方形爬片則按常規(guī)的物理(如細胞刮除)或化學(xué)(如細胞裂解)方法收集細胞或其裂解產(chǎn)物于離心管中，進入DNA、RNA或蛋白質(zhì)樣本制備的程序。
權(quán)利要求
1.一種高密度陣列式細胞爬片培養(yǎng)裝置，其特征在于有載片板(1)，在載片板(1)上設(shè)有多個有序排列的槽(2)，槽(2)的深度是0.3～0.4mm，槽(2)內(nèi)置有與槽(2)底部形狀相吻合的玻片(3)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高密度陣列式細胞爬片培養(yǎng)裝置，其特征在于所述載片板(1)的上面兩側(cè)設(shè)有把手(4)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的高密度陣列式細胞爬片培養(yǎng)裝置，其特征在于所述的槽(2)為圓形和方形。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的高密度陣列式細胞爬片培養(yǎng)裝置，其特征在于在所述槽(2)的右側(cè)壁上設(shè)有取片缺口(5)。
5.一種高密度陣列式細胞爬片貯存裝置，其特征在于有支架(6)，支架(6)上設(shè)置有多個有序排列的用于放置圓形爬片的開口(7)，開口(7)的長度小于圓形玻片(3)的直徑，開口(7)的中間寬度大于兩端寬度，兩端寬度是0.15～0.18mm。
6.一種高密度陣列式細胞爬片實驗裝置，其特征在于有實驗板(8)，實驗板(8)上設(shè)置有多個有序排列的用于放置爬片的凹槽(9)，凹槽(9)的橫截面形狀與玻片(3)形狀相吻合，深度是4～6mm。
全文摘要
本發(fā)明公開一種高密度陣列式細胞爬片培養(yǎng)裝置、貯存裝置及實驗裝置，所述培養(yǎng)裝置有載片板(1)，在載片板(1)上設(shè)有有序排列的槽(2)，槽(2)的深度是0.3～0.4mm，槽(2)內(nèi)置有與槽(2)底部形狀相吻合的玻片(3)。貯存裝置有支架(6)，支架(6)上設(shè)置有多個有序排列的用于放置圓形爬片的開口(7)，開口(7)的長度小于圓形玻片(3)的直徑，開口(7)的中間寬度大于兩端寬度，兩端寬度是0.15～0.18mm。實驗裝置是有實驗板(8)，實驗板(8)上設(shè)置有多個有序排列的用于放置爬片的凹槽(9)，凹槽(9)的橫截面形狀與玻片(3)形狀相吻合，深度是4～6mm。具有使用方便、效率高、同一性好等優(yōu)點。
文檔編號C12M3/00GK1928063SQ20061004760
公開日2007年3月14日 申請日期2006年8月31日 優(yōu)先權(quán)日2006年8月31日
發(fā)明者李宏, 劉佳, 孔慶友, 孫媛, 文姝, 陳曉燕 申請人:李宏, 劉佳, 孔慶友, 孫媛, 文姝, 陳曉燕