專利名稱：從大豆廢渣中制備多肽的技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物制品加工領(lǐng)域，尤其是涉及一種從大豆廢渣中制備多肽的技術(shù)。
背景技術(shù)：
我國(guó)大豆年產(chǎn)約1640萬(wàn)噸，占世界總產(chǎn)量的9％，居第三位。大豆作為一種重要的油料作物，其產(chǎn)量的80％以上用于油脂生產(chǎn)，這樣就產(chǎn)生了大量的變性豆粕。隨著科技的不斷進(jìn)步和人們對(duì)大豆?fàn)I養(yǎng)作用和保健功效的深入研究，大豆中多種微量成分與其生物活性的關(guān)系已受到人們的關(guān)注，其中從大豆中提取大豆異黃酮已成為大豆深加工領(lǐng)域一個(gè)重要方面，并已形成了相當(dāng)?shù)漠a(chǎn)業(yè)化規(guī)模。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，我國(guó)每年生產(chǎn)大豆異黃酮約150噸，約產(chǎn)生3萬(wàn)噸的豆粕渣。由于目前還沒(méi)有建立技術(shù)可靠、經(jīng)濟(jì)可行的回收利用、高值轉(zhuǎn)化的處理渠道，因此大量的豆粕渣主要用作飼料，只有少部分用于發(fā)酵食品生產(chǎn)。這不僅造成了資源的巨大的浪費(fèi)而且還會(huì)帶來(lái)大量的環(huán)境問(wèn)題。
大豆多肽具有易消化吸收、能迅速給機(jī)體提供能量、無(wú)蛋白變性、無(wú)豆腥味、無(wú)殘?jiān)?、分子量小、易溶于水、且在酸性條件下也不產(chǎn)生沉淀、溶液粘性小和受熱不凝固等特性，是一種比較理想的新型大豆深加工產(chǎn)品。而且最令人興奮的是大豆多肽是一種活性多肽，具有降低血清膽固醇、降血壓和促進(jìn)脂肪代謝等獨(dú)特的生理功能，在食品工業(yè)上作為功能因子具有十分廣泛的用途和較廣闊的開(kāi)發(fā)應(yīng)用前景。
具有生物活性功能是大豆多肽的重要特性，而大豆多肽的生物活性主要取決于其特定的立體結(jié)構(gòu)和構(gòu)象。一旦這些特定的立體結(jié)構(gòu)和構(gòu)象被破壞以后，多肽將失去活性?，F(xiàn)有的蛋白酶法制備大豆多肽工藝，水解蛋白質(zhì)原料的效率低下，而且所需時(shí)間長(zhǎng)；而常規(guī)的酸水解和堿水解法制備大豆多肽的工藝，雖然水解蛋白質(zhì)原料的效率高，但其固有的立體結(jié)構(gòu)和構(gòu)象在很大程度遭到嚴(yán)重的破壞，同時(shí)某些氨基酸可能會(huì)被分解，從而使產(chǎn)品失去生物活性；另外酸水解和堿水解工藝，還會(huì)帶來(lái)環(huán)境污染。
利用提取大豆異黃酮后的粕渣制備的大豆多肽，其產(chǎn)物是分子量不同的多肽的混合物，而不同分子結(jié)構(gòu)和分子大小的多肽，具有不同的生物活性和功能，其應(yīng)用也各不相同。若能利用現(xiàn)代分離手段，分離出不同級(jí)分的活性多肽，將其進(jìn)一步深加工，廣泛應(yīng)用于營(yíng)養(yǎng)保健、醫(yī)學(xué)醫(yī)藥品和美容護(hù)膚等領(lǐng)域，其社會(huì)效益、經(jīng)濟(jì)效益將會(huì)更加顯著。
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種從大豆廢渣中制備多肽的技術(shù)，以制備出具有不同生物功能的天然活性肽，最大限度地保證天然肽的活性，運(yùn)行成本低，生產(chǎn)效率高，而且有利于環(huán)境保護(hù)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是通過(guò)下述技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的將提取大豆異黃酮后的大豆廢渣100份、去離子水100～300份、多元復(fù)合蛋白酶0.2～1.0份攪拌均勻后，在pH＝5～7，溫度30～60℃下酶解反應(yīng)5～24小時(shí)；再調(diào)節(jié)酶解液的pH值為4.0～4.5，去除未水解的蛋白質(zhì)沉淀，得到大豆多肽混合液粗品。
在大豆多肽混合液粗品中加入多肽質(zhì)量的0.5％～1.5％倍活性炭，在30～40℃、pH＝2.0～4.0下攪拌10～30分鐘，過(guò)濾2～3次；濾液分別流經(jīng)H+型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和OH-型陰離子交換樹(shù)脂來(lái)脫除Na+和Cl-，得到大豆多肽混合液精品。
大豆多肽混合液精品通過(guò)0.22μm的微孔濾膜去除微粒；采用超低蛋白質(zhì)吸附膜和切向流超濾技術(shù)，將大豆多肽混合液進(jìn)行分級(jí)和濃縮，控制操作溫度在20～40℃，壓力0.1～0.25Mpa，pH＝5～7，超濾時(shí)間2～5小時(shí)；選擇截留上限為20kD，截留下限為1kD超濾膜，經(jīng)超濾后得到不同級(jí)分的大豆多肽濃縮液。
將上述大豆多肽混合液粗品或大豆多肽混合液精品或各級(jí)分的大豆多肽濃縮液分別在135℃溫度下進(jìn)行5秒的超高溫瞬間殺菌，然后真空濃縮，最后噴霧干燥即可得到粗品粉末大豆多肽或精品粉末大豆多肽或各種級(jí)分的粉末大豆多肽。
上述方案中，提取大豆異黃酮后的大豆廢渣經(jīng)預(yù)處理后再用于酶解反應(yīng)，預(yù)處理工藝為將提取大豆異黃酮后的大豆廢渣，在90℃下加熱5～20分鐘，立即降溫，進(jìn)行清洗、磨漿、粗濾。
上述方案中，將提取大豆異黃酮后的大豆廢渣100份、去離子水100～300份用酸或堿調(diào)節(jié)pH＝5～7，升溫至30～60℃，保溫?cái)嚢?0～30分鐘后，再加入多元復(fù)合蛋白酶進(jìn)行酶解反應(yīng)。
上述方案中，將提取大豆異黃酮后的大豆廢渣，在90℃下加熱10分鐘，立即降溫，進(jìn)行清洗、磨漿、粗濾處理；經(jīng)上述預(yù)處理的100份大豆廢渣和100～300份去離子水，加入生化反應(yīng)器中；用酸或堿調(diào)節(jié)pH＝5～7，升溫至30～50℃，保溫?cái)嚢?0～30分鐘；加入多元復(fù)合蛋白酶0.2～1.0份于生化反應(yīng)器中，攪拌均勻后，酶解反應(yīng)5～24小時(shí)；通過(guò)調(diào)節(jié)蛋白酶解液的pH值為4.0～4.5，去除未水解的蛋白質(zhì)沉淀；加入大豆蛋白酶解液中多肽質(zhì)量0.5％～1.5％倍活性炭，在30～40℃、pH＝2.0～4.0下攪拌10～30分鐘，過(guò)濾2～3次；將大豆蛋白酶解液分別流經(jīng)H+型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和OH-型陰離子交換樹(shù)脂來(lái)脫除Na+和Cl-；再通過(guò)0.22μm的微孔濾膜去除微粒；采用超低蛋白質(zhì)吸附膜和切向流超濾技術(shù)，將酶解后的多肽進(jìn)行分級(jí)和濃縮，控制操作溫度在20～40℃，壓力0.1～0.25Mpa，pH＝5～7，超濾時(shí)間2～5小時(shí)；選擇截留上限為20kD，截留下限為1kD超濾膜，經(jīng)超濾后得到不同級(jí)分的大豆多肽濃縮液；將得到的不同級(jí)分的大豆多肽濃縮液分別在135℃溫度下進(jìn)行5秒的超高溫瞬間殺菌，然后真空濃縮，最后噴霧干燥即可得到不同級(jí)分的成品粉末大豆多肽。
上述方案中，多元復(fù)合蛋白酶為微生物蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、1398中性蛋白酶按同等比例混合。
上述方案中，微生物蛋白酶為從大豆發(fā)酵食品中分離出的微生物蛋白酶。
本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)(1)利用提取大豆異黃酮后的廢渣為原料來(lái)制備大豆多肽，使廢料得到了有效利用，并且整個(gè)過(guò)程對(duì)環(huán)境是友好的；(2)酶解反應(yīng)前，將預(yù)處理的豆粕在90℃下加熱10分鐘，既可防止大豆蛋白溶液黏度升高，又可大大提高其水解度；(3)從大豆發(fā)酵食品中分離出的微生物蛋白酶能夠有效地作用于大豆蛋白的高級(jí)結(jié)構(gòu)，因此該酶對(duì)大豆蛋白具有很好的酶解作用；(4)多酶協(xié)同作用，有效控制酶切反應(yīng)的位點(diǎn)，得到目標(biāo)產(chǎn)物；(5)多酶水解是在比較溫和的條件下進(jìn)行的，能夠確保存大豆多肽的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和最大程度的活性回收；
(6)針對(duì)大豆蛋白水解產(chǎn)物苦味的出現(xiàn)，在采用多酶協(xié)同水解的基礎(chǔ)上，配合活性炭吸附處理，使得大豆多肽口味得到明顯改善，色澤透明澄清；(7)采用離子交換樹(shù)脂法來(lái)脫除水解液中的Na+和Cl-，大大降低了鹽分含量，消除了水解液的咸味；(8)采用超低蛋白質(zhì)吸附膜和切向流超濾技術(shù)，無(wú)相變發(fā)生，無(wú)致熱源導(dǎo)入，不使用有機(jī)溶劑，不改變?nèi)芤簆H值和離子強(qiáng)度，這些都有利于大豆多肽活性的回收；(9)根據(jù)大豆多肽不同的用途，可自由地選擇超濾膜的截留分子量的參數(shù)，從而獲取相應(yīng)分子量范圍的產(chǎn)品；(10)生化反應(yīng)過(guò)程中所用的微生物蛋白酶和動(dòng)、植物蛋白酶安全可靠，因此其產(chǎn)品是綠色的。
本發(fā)明采用從大豆發(fā)酵食品中分離出的微生物蛋白酶結(jié)合動(dòng)植物蛋白酶處理提取大豆異黃酮后的廢渣，通過(guò)超濾技術(shù)分級(jí)制備出具有不同生物功能的天然活性肽，最大限度地保證了天然肽的活性，運(yùn)行成本低，生產(chǎn)效率高，而且有利于環(huán)境保護(hù)。產(chǎn)品具有良好的酸堿適應(yīng)性、熱穩(wěn)定性、較高濃度下的流動(dòng)性、高吸收性、非過(guò)敏性以及細(xì)胞的適應(yīng)性等一系列特征，可廣泛應(yīng)用于營(yíng)養(yǎng)保健，醫(yī)學(xué)醫(yī)藥品和美容護(hù)膚等領(lǐng)域，將產(chǎn)生顯著的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行具體的描述，但本發(fā)明不僅限于所述實(shí)施例。
實(shí)施例一將提取大豆異黃酮后的大豆廢渣，在90℃下加熱10分鐘，立即降溫，進(jìn)行清洗、磨漿分離、細(xì)磨、過(guò)濾等處理；將預(yù)處理過(guò)的豆粕渣100千克勻漿，與去離子水200千克混合，加入到生化反應(yīng)器中；用酸調(diào)節(jié)pH＝5，升溫至45℃，保溫?cái)嚢?0分鐘；加入由微生物蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、1398中性蛋白酶按同等比例混合而成的多元復(fù)合蛋白酶0.25千克于生化反應(yīng)器中，攪拌均勻后，酶解反應(yīng)12小時(shí)；通過(guò)調(diào)節(jié)蛋白酶解液的pH值為4，去除未水解的蛋白質(zhì)沉淀；在碳∶液＝1∶100，溫度40℃，pH＝4的條件下，加入活性炭，攪拌20分鐘，過(guò)濾2次；將大豆蛋白酶解液以10倍柱體積/h的流速分別流經(jīng)H+型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和OH-型陰離子交換樹(shù)脂來(lái)脫除Na+和Cl-；通過(guò)0.22μm的微孔濾膜去除微粒；然后使用超低蛋白質(zhì)吸附膜，控制操作壓力0.20Mpa，溫度30℃，pH＝6～6.5，采用切向流技術(shù)超濾2小時(shí)；選擇截留上限為20kD，截留下限為1kD超濾膜，經(jīng)超濾后得到20kD～1kD的活性蛋白質(zhì)濃縮液，依次超濾分別得到20kD～10kD、10kD～5kD、5kD～3kD、3kD～1kD和小于1kD的不同級(jí)分的活性大豆多肽混合濃縮液；將得到的不同級(jí)分的大豆多肽濃縮液分別在135℃溫度下進(jìn)行5秒的超高溫瞬間殺菌，然后真空濃縮，最后噴霧干燥即可得到不同級(jí)分的成品粉末大豆多肽。
實(shí)施例二將提取大豆異黃酮后的大豆廢渣100千克、去離子水100千克、由微生物蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、1398中性蛋白酶按同等比例混合而成的多元復(fù)合蛋白酶0.2千克攪拌均勻后，在pH＝5，溫度60℃下酶解反應(yīng)24小時(shí)；再調(diào)節(jié)酶解液的pH值為4，去除未水解的蛋白質(zhì)沉淀，得到大豆多肽混合液粗品。
在大豆多肽混合液粗品中加入多肽質(zhì)量的0.5％倍活性炭，在40℃、pH＝4.0下攪拌10分鐘，過(guò)濾2次；濾液分別流經(jīng)H+型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和OH-型陰離子交換樹(shù)脂來(lái)脫除Na+和Cl-，得到大豆多肽混合液精品。
大豆多肽混合液精品通過(guò)0.22μm的微孔濾膜去除微粒；采用超低蛋白質(zhì)吸附膜和切向流超濾技術(shù)，將大豆多肽混合液進(jìn)行分級(jí)和濃縮，控制操作溫度在20℃，壓力0.25Mpa，pH＝7，超濾時(shí)間2小時(shí)；選擇截留上限為20kD，截留下限為1kD超濾膜，依次超濾分別得到20kD～10kD、10kD～5kD、5kD～3kD、3kD～1kD和小于1kD的不同級(jí)分的活性大豆多肽濃縮液。
將各級(jí)分的大豆多肽濃縮液分別在135℃溫度下進(jìn)行5秒的超高溫瞬間殺菌，然后真空濃縮，最后噴霧干燥得到各種級(jí)分的粉末大豆多肽。
實(shí)施例三將提取大豆異黃酮后的大豆廢渣，在90℃下加熱5分鐘，立即降溫，進(jìn)行清洗、磨漿分離、細(xì)磨、過(guò)濾等處理；將預(yù)處理過(guò)的豆粕渣100千克勻漿，與去離子水300千克混合，加入到生化反應(yīng)器中；用堿調(diào)節(jié)pH＝7，升溫至60℃，保溫?cái)嚢?0分鐘；加入由微生物蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、1398中性蛋白酶按同等比例混合而成的多元復(fù)合蛋白酶1千克于生化反應(yīng)器中，攪拌均勻后，酶解反應(yīng)5小時(shí)；通過(guò)調(diào)節(jié)蛋白酶解液的pH值為4.5，去除未水解的蛋白質(zhì)沉淀；加入蛋白酶解液中多肽質(zhì)量的1.5％倍活性炭，在30℃、pH＝2.0下攪拌30分鐘，過(guò)濾3次；濾液以10倍柱體積/h的流速分別流經(jīng)H+型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和OH-型陰離子交換樹(shù)脂來(lái)脫除Na+和Cl-；再將蛋白酶解液進(jìn)行適當(dāng)稀釋，通過(guò)0.22μm的微孔濾膜去除微粒；采用超低蛋白質(zhì)吸附膜和切向流超濾技術(shù)，將酶解后的多肽進(jìn)行分級(jí)和濃縮，控制操作溫度在40℃，壓力0.1Mpa，pH＝5，超濾時(shí)間5小時(shí)；選擇截留上限為20kD，截留下限為1kD超濾膜，依次超濾分別得到20kD～10kD、10kD～5kD、5kD～3kD、3kD～1kD和小于1kD的不同級(jí)分的活性大豆多肽濃縮液；將各級(jí)分的大豆多肽濃縮液分別在135℃溫度下進(jìn)行5秒的超高溫瞬間殺菌，然后真空濃縮，最后噴霧干燥得到各種級(jí)分的粉末大豆多肽。
實(shí)施例四將提取大豆異黃酮后的大豆廢渣，在90℃下加熱20分鐘，立即降溫，進(jìn)行清洗、磨漿分離、細(xì)磨、過(guò)濾等處理；將預(yù)處理過(guò)的豆粕渣100千克勻漿，與去離子水300千克混合，加入到生化反應(yīng)器中；用酸調(diào)節(jié)pH5，升溫至30℃，保溫?cái)嚢?0分鐘；加入由大豆發(fā)酵食品中分離出的微生物蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、1398中性蛋白酶按同等比例混合而成的多元復(fù)合蛋白酶0.5千克于生化反應(yīng)器中，攪拌均勻后，酶解反應(yīng)12小時(shí)；通過(guò)調(diào)節(jié)蛋白酶解液的pH值為4，去除未水解的蛋白質(zhì)沉淀；加入蛋白酶解液中多肽質(zhì)量的1％倍活性炭，在30℃、pH＝3.0下攪拌20分鐘，過(guò)濾3次；將蛋白酶解液以10倍柱體積/h的流速分別流經(jīng)H+型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和OH-型陰離子交換樹(shù)脂來(lái)脫除Na+和Cl-；再將蛋白酶解液進(jìn)行適當(dāng)稀釋，通過(guò)0.22μm的微孔濾膜去除微粒；采用超低蛋白質(zhì)吸附膜和切向流超濾技術(shù)，將酶解后的多肽進(jìn)行分級(jí)和濃縮，控制操作溫度在30℃，壓力0.2Mpa，pH＝5，超濾時(shí)間3小時(shí)；選擇截留上限為20kD，截留下限為1kD超濾膜，依次超濾分別得到20kD～10kD、10kD～5kD、5kD～3kD、3kD～1kD和小于1kD的不同級(jí)分的活性大豆多肽濃縮液；將各級(jí)分的大豆多肽濃縮液分別在135℃溫度下進(jìn)行5s的超高溫瞬間殺菌，然后真空濃縮，最后噴霧干燥得到各種級(jí)分的粉末大豆多肽。
實(shí)施例五將提取大豆異黃酮后的大豆廢渣，在90℃下加熱10分鐘，立即降溫，進(jìn)行清洗、磨漿分離、細(xì)磨、過(guò)濾等處理；將預(yù)處理過(guò)的豆粕渣100千克勻漿，與去離子水200千克混合，加入到生化反應(yīng)器中；用酸調(diào)節(jié)pH6，升溫至50℃，保溫?cái)嚢?0分鐘；加入由大豆發(fā)酵食品中分離出的微生物蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、1398中性蛋白酶按同等比例混合而成的多元復(fù)合蛋白酶0.4千克于生化反應(yīng)器中，攪拌均勻后，酶解反應(yīng)10小時(shí)；調(diào)節(jié)蛋白酶解液的pH值為4，去除未水解的蛋白質(zhì)沉淀，得到大豆多肽混合液粗品；將大豆多肽混合液粗品在135℃溫度下進(jìn)行5s的超高溫瞬間殺菌，然后真空濃縮，最后噴霧干燥得到粗品粉末大豆多肽。
實(shí)施例六在實(shí)施例五制備的大豆多肽混合液粗品中加入多肽質(zhì)量1％倍活性炭，在30℃、pH＝3.0下攪拌20分鐘，過(guò)濾2次；濾液分別流經(jīng)H+型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和OH-型陰離子交換樹(shù)脂來(lái)脫除Na+和Cl-，得到大豆多肽混合液精品；將大豆多肽混合液精品在135℃溫度下進(jìn)行5s的超高溫瞬間殺菌，然后真空濃縮，最后噴霧干燥即可得到精品粉末大豆多肽。
權(quán)利要求
1.一種從大豆廢渣中制備多肽的技術(shù)，其特征在于將提取大豆異黃酮后的大豆廢渣100份、去離子水100～300份、多元復(fù)合蛋白酶0.2～1.0份攪拌均勻后，在pH＝5～7，溫度30～60℃下酶解反應(yīng)5～24小時(shí)；再調(diào)節(jié)酶解液的pH值為4.0～4.5，去除未水解的蛋白質(zhì)沉淀，得到大豆多肽混合液粗品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從大豆廢渣中制備多肽的技術(shù)，其特征在于在大豆多肽混合液粗品中加入多肽質(zhì)量的0.5％～1.5％倍活性炭，在30～40℃、pH＝2.0～4.0下攪拌10～30分鐘，過(guò)濾2～3次；濾液分別流經(jīng)H+型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和OH-型陰離子交換樹(shù)脂來(lái)脫除Na+和Cl-，得到大豆多肽混合液精品。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的從大豆廢渣中制備多肽的技術(shù)，其特征在于大豆多肽混合液精品通過(guò)0.22μm的微孔濾膜去除微粒；采用超低蛋白質(zhì)吸附膜和切向流超濾技術(shù)，將大豆多肽混合液進(jìn)行分級(jí)和濃縮，控制操作溫度在20～40℃，壓力0.1～0.25Mpa，pH＝5～7，超濾時(shí)間2～5小時(shí)；選擇截留上限為20kD，截留下限為1kD超濾膜，經(jīng)超濾后得到不同級(jí)分的大豆多肽濃縮液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2、3所述的從大豆廢渣中制備多肽的技術(shù)，其特征在于將大豆多肽混合液粗品或大豆多肽混合液精品或各級(jí)分的大豆多肽濃縮液分別在135℃溫度下進(jìn)行5秒的超高溫瞬間殺菌，然后真空濃縮，最后噴霧干燥即可得到粗品粉末大豆多肽或精品粉末大豆多肽或各種級(jí)分的粉末大豆多肽。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從大豆廢渣中制備多肽的技術(shù)，其特征在于提取大豆異黃酮后的大豆廢渣經(jīng)預(yù)處理后再用于酶解反應(yīng)，預(yù)處理工藝為將提取大豆異黃酮后的大豆廢渣，在90℃下加熱5～20分鐘，立即降溫，進(jìn)行清洗、磨漿、粗濾。
6.根據(jù)權(quán)利要求1、5所述的從大豆廢渣中制備多肽的技術(shù)，其特征在于將提取大豆異黃酮后的大豆廢渣100份、去離子水100～300份用酸或堿調(diào)節(jié)pH＝5～7，升溫至30～60℃，保溫?cái)嚢?0～30分鐘后，再加入多元復(fù)合蛋白酶進(jìn)行酶解反應(yīng)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1、2、3所述的從大豆廢渣中制備多肽的技術(shù)，其特征在于將提取大豆異黃酮后的大豆廢渣，在90℃下加熱10分鐘，立即降溫，進(jìn)行清洗、磨漿、粗濾處理；經(jīng)上述預(yù)處理的100份大豆廢渣和100～300份去離子水，加入生化反應(yīng)器中；用酸或堿調(diào)節(jié)pH＝5～7，升溫至30～50℃，保溫?cái)嚢?0～30分鐘；加入多元復(fù)合蛋白酶0.2～1.0份于生化反應(yīng)器中，攪拌均勻后，酶解反應(yīng)5～24小時(shí)；通過(guò)調(diào)節(jié)蛋白酶解液的pH值為4.0～4.5，去除未水解的蛋白質(zhì)沉淀；加入大豆蛋白酶解液中多肽質(zhì)量0.5％～1.5％倍活性炭，在30～40℃、pH＝2.0～4.0下攪拌10～30分鐘，過(guò)濾2～3次；將大豆蛋白酶解液分別流經(jīng)H+型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和OH-型陰離子交換樹(shù)脂來(lái)脫除Na+和Cl-；再通過(guò)0.22μm的微孔濾膜去除微粒；采用超低蛋白質(zhì)吸附膜和切向流超濾技術(shù)，將酶解后的多肽進(jìn)行分級(jí)和濃縮，控制操作溫度在20～40℃，壓力0.1～0.25Mpa，pH＝5～7，超濾時(shí)間2～5小時(shí)；選擇截留上限為20kD，截留下限為1kD超濾膜，經(jīng)超濾后得到不同級(jí)分的大豆多肽濃縮液；將得到的不同級(jí)分的大豆多肽濃縮液分別在135℃溫度下進(jìn)行5秒的超高溫瞬間殺菌，然后真空濃縮，最后噴霧干燥即可得到不同級(jí)分的成品粉末大豆多肽。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從大豆廢渣中制備多肽的技術(shù)，其特征在于多元復(fù)合蛋白酶為微生物蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、1398中性蛋白酶按同等比例混合。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的從大豆廢渣中制備多肽的技術(shù)，其特征在于多元復(fù)合蛋白酶為微生物蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、1398中性蛋白酶按同等比例混合。
10.根據(jù)權(quán)利要求8、9所述的從大豆廢渣中制備多肽的技術(shù)，其特征在于微生物蛋白酶為從大豆發(fā)酵食品中分離出的微生物蛋白酶。
全文摘要
本發(fā)明是一種從大豆廢渣中制備多肽的技術(shù)，將預(yù)處理過(guò)的提取大豆異黃酮后的大豆廢渣100份、去離子水100～300份、多元復(fù)合蛋白酶0.2～1.0份攪拌均勻后，在pH＝5～7，溫度40～60℃下酶解反應(yīng)5～24小時(shí)；再調(diào)節(jié)酶解液的pH值為4.0～4.5，去除未水解的蛋白質(zhì)沉淀，用活性炭脫苦脫色，再以色譜法脫鹽，采用超低蛋白質(zhì)吸附膜和切向流超濾技術(shù)進(jìn)行分級(jí)和濃縮，得到不同分級(jí)水平分子量和結(jié)構(gòu)、具有不同生物功能的天然活性肽。本發(fā)明運(yùn)行成本低，生產(chǎn)效率高，有利于環(huán)境保護(hù)，產(chǎn)品具有良好的酸堿適應(yīng)性、熱穩(wěn)定性、流動(dòng)性、高吸收性、非過(guò)敏性、細(xì)胞的適應(yīng)性等，可廣泛應(yīng)用于營(yíng)養(yǎng)保健，醫(yī)學(xué)醫(yī)藥品和美容護(hù)膚等領(lǐng)域。
文檔編號(hào)C12P21/00GK1534098SQ0311758
公開(kāi)日2004年10月6日 申請(qǐng)日期2003年4月1日 優(yōu)先權(quán)日2003年4月1日
發(fā)明者謝君, 梁洪波, 徐寧, 尹華清, 陳建國(guó), 謝 君 申請(qǐng)人:成都辰農(nóng)綠色產(chǎn)業(yè)有限公司, 謝君