專利名稱:南瓜組培工廠化種苗快速繁殖方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明屬于植物種苗的快速繁殖技術(shù)領(lǐng)域,專用于日本南瓜組培苗快速繁殖及田間栽培的技術(shù)。
南瓜(Cucurbiramoschata)為葫蘆科(Cucurbiraceae),一年生蔓性草本植物。做為瓜類蔬菜,因其適應(yīng)性強(qiáng)、產(chǎn)量高、用途廣泛,而在世界廣為栽培。1993年以來(lái),我國(guó)各地從日本和臺(tái)灣引進(jìn)特種南瓜進(jìn)行試種?!鞍鹘z”即為從日本引進(jìn)的優(yōu)質(zhì)南瓜雜交新品種。其主要特點(diǎn)為肉厚皮薄、質(zhì)地細(xì)膩、嫩而粉糯、營(yíng)養(yǎng)豐富,且有預(yù)防糖尿病、減肥美容的藥用價(jià)值,在國(guó)際市場(chǎng)上,艾西絲南瓜價(jià)格昂貴且供不應(yīng)求。1997年,日本市場(chǎng)上艾西絲南瓜速凍制品每噸價(jià)值1萬(wàn)2千美元,在國(guó)內(nèi),艾西絲南瓜也頗受各大賓館的歡迎,每年5至8月間上市,十分暢銷,其銷售價(jià)高出一般南瓜6倍多。發(fā)展艾西絲南瓜生產(chǎn)對(duì)提高我國(guó)外向型農(nóng)業(yè)水平,豐富城鄉(xiāng)蔬菜市場(chǎng)具有重要意義。
由于艾西絲為F1代雜交種,生產(chǎn)單位需要每年從日本進(jìn)口種子,而進(jìn)口種子價(jià)每粒為1元以上,且還存在貨源不穩(wěn)和質(zhì)量等問(wèn)題。
利用組織培養(yǎng)法是解決種苗繁殖的有效途徑。本發(fā)明的目的就是提供一種艾西絲南瓜種苗快速繁殖的方法,在短時(shí)間內(nèi)提供大量種苗,以代替進(jìn)口種子,滿足大規(guī)模生產(chǎn)的需要,本發(fā)明試管苗增殖系數(shù)為5以上,一年可繼代9次,在廠房面積為100m2的條件下,每一粒種子可年產(chǎn)試管苗200萬(wàn)株,株成本0.4元人民幣,且遺傳性狀穩(wěn)定,完全可以進(jìn)行商品化生產(chǎn)。田間試驗(yàn)結(jié)果表明,艾西絲南瓜試管苗結(jié)果早、產(chǎn)量高、種性不變。
以下詳細(xì)敘述本發(fā)明的主要內(nèi)容一種艾西絲南瓜種苗快速繁殖方法,包括無(wú)菌培養(yǎng)物的獲得、芽的分化與增殖、生根培養(yǎng)、馴化移栽等步驟,其特征在于芽的分化與增殖培養(yǎng)基為MS+0.25~2.0mg/L BA或MS+0.5~1.0mg/L BA+0.1~0.5mg/LIAA;誘導(dǎo)生根培養(yǎng)基為1/2MS+瓊脂0.6-0.7%+蔗糖2%或1/2MS+脫脂棉(少許)+蔗糖2%或1/2MS+0.05~0.1mg/L PP333+瓊脂0.6~0.7%+蔗糖2%(PP333為多效唑)。
本發(fā)明所提供的艾西絲南瓜種苗快速繁殖方法,其具體操作步驟如下1、無(wú)菌培養(yǎng)物的獲得將種子用自來(lái)水洗凈后于70%乙醇中浸泡3-5分鐘,再置于飽和漂粉精液中浸泡2小時(shí),然后用無(wú)菌水沖洗3次,在無(wú)菌條件下剖出種胚接種于1/2MS培養(yǎng)基中,10天左右,種子萌發(fā),獲得無(wú)菌芽苗。將無(wú)菌芽苗從子葉基部剪斷,帶子葉轉(zhuǎn)入MS+0.25mg/L BA(單位下同)的培養(yǎng)基中,約經(jīng)30天的培養(yǎng),可長(zhǎng)成10厘米左右,帶8-12片葉的健壯無(wú)菌苗。
2、芽的分化與增殖將無(wú)菌苗切成1厘米左右?guī)б秆壳o段,接轉(zhuǎn)于MS+0.25~2.0mg/L BA或MS+0.5~1.0mg/L BA+0.1~0.5mg/LIAA的培養(yǎng)基中,一周后腋芽開(kāi)始萌動(dòng)并逐漸形成芽叢。獲得的芽叢可不斷切割繁殖,繼代周期25-30天,增殖系數(shù)不低于5。試驗(yàn)證明本步驟最佳培養(yǎng)基為MS+1.0mg/L BA+0.1~0.5mg/L IAA。
3、試管苗的復(fù)壯試管苗在反復(fù)繼代過(guò)程中,為改善種苗質(zhì)量,工藝上可酌情增加種苗復(fù)壯階段,其適合的培養(yǎng)基為MS+0.5~1.0mg/L BA+0.05~0.5mg/LPP333(PP333為多效唑),試驗(yàn)證明,本步驟的最佳培養(yǎng)基為MS+1.0mg/LBA+0.1~0.5mg/LPP333。
4、誘導(dǎo)生根將株高2.5厘米以上的健壯無(wú)根苗分別轉(zhuǎn)入以下培養(yǎng)基中,2周即可獲得完整植株。本步驟最佳培養(yǎng)基為1/2MS+0.1mg/LPP333。培養(yǎng)基 生根率根的特征1)1/2MS+瓊脂0.6-0.7%+蔗糖2%88% 發(fā)根條數(shù)較少,根細(xì)長(zhǎng)2)1/2MS+脫脂棉(少許)+蔗糖2% 92% 發(fā)根條數(shù)較多,主根粗壯,3)1/2MS+0.05-0.1mg/LPP333+0.6mg/L瓊脂 92% 根發(fā)達(dá),根毛多。0.7%+蔗糖2% 發(fā)根條數(shù)較多,根粗短5、上述艾西絲南瓜種苗快速繁殖各階段培養(yǎng)條件為溫度24℃±2℃,光照強(qiáng)度1500-2000lx,每日光照12小時(shí)。
6、馴化移栽將已生根的試管苗開(kāi)瓶,置于散射光下鍛煉一周,然后取出、洗凈培養(yǎng)基,移栽于上層細(xì)沙,中層腐殖土、下層粗沙的苗床或營(yíng)養(yǎng)缽中,以1/2MS營(yíng)養(yǎng)液澆透并保濕培養(yǎng)一周,試管苗即恢復(fù)生長(zhǎng),隨后逐漸降低濕度,20-30天即可定植于大田。成活率達(dá)90%以上。
7、試管苗的田間栽培試管苗定植大田后,為使其高產(chǎn)、質(zhì)優(yōu)的潛力得以充分發(fā)揮,栽培中還需配合以精細(xì)的田間管理技術(shù),其技術(shù)要點(diǎn)如下1)選地為創(chuàng)高產(chǎn),種植地以選土層深厚、有水澆條件的沙壤土為宜。
2)定植在我國(guó)煙臺(tái)地區(qū),艾西絲南瓜的播種期為4月下旬至5月上旬。為延長(zhǎng)生育期,提早開(kāi)花結(jié)瓜,增加產(chǎn)量,試管苗應(yīng)提前在4月上、中旬定植。
3)肥水管理春季與翻地同時(shí)每畝施撒5千公斤土雜肥。生育期再結(jié)合澆水每20天追施磷酸二銨一次(10公斤/畝)。定植前,應(yīng)灌底水一次;定植時(shí)再適量澆水;生育前期應(yīng)控制水分以促進(jìn)扎根;進(jìn)入抽蔓中期,需增加灌水次數(shù),原則上以保持地面不干為宜。
4)整蔓一般宜用三蔓整枝法,即留一根主蔓,二根側(cè)蔓。
5)授粉為提高座果率,需進(jìn)行人工授粉,授粉時(shí)間以上午8-9點(diǎn)為好。
6)摘心為保證商品瓜的質(zhì)量,對(duì)枝蔓應(yīng)及時(shí)摘心,一般主蔓留三個(gè)瓜,側(cè)蔓留一個(gè)瓜然后摘心。
8、為降低工廠化生產(chǎn)成本,本方法也可采用散射日光(小于5000lx)代替燈光;食用白糖代替蔗糖;自來(lái)水代替蒸餾水,普通果醬瓶代替錐形瓶;脫脂棉代表瓊脂做培養(yǎng)基支持物(誘導(dǎo)生根階段)。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比,具有如下優(yōu)點(diǎn)1、本發(fā)明提供了一條新的艾西絲南瓜種苗生產(chǎn)方法,解決了國(guó)內(nèi)艾西絲南瓜生產(chǎn)種源完全依賴進(jìn)口的問(wèn)題。
2、本發(fā)明繁殖艾西絲南瓜試管苗較之生產(chǎn)雜交種子,不受季節(jié)、地域限制,其生產(chǎn)程序簡(jiǎn)便,繁殖速度快,生產(chǎn)成本低。一粒種子可年繼代9代,生產(chǎn)試管苗200萬(wàn)株,成本較進(jìn)口種子降低60%左右。
3、田間生產(chǎn)性狀及細(xì)胞學(xué)檢查表明艾西絲南瓜試管苗的遺傳特性穩(wěn)定,可以用于商品化生產(chǎn)。
4、艾西絲南瓜試管苗與進(jìn)口種子相比,生長(zhǎng)更為強(qiáng)旺,結(jié)果期提前7天,平均增產(chǎn)20-30%,經(jīng)濟(jì)效益十分可觀。
實(shí)施例1、取進(jìn)口艾西絲種子用自來(lái)水洗凈后于70%乙醇中浸泡3-5分鐘,再置于飽和漂粉精液中浸泡2小時(shí),然后用無(wú)菌水沖洗3次,在無(wú)菌條件下剖出種胚接種于1/2MS培養(yǎng)基中,10天后種子萌發(fā),獲得無(wú)菌芽苗。將無(wú)菌芽苗從子葉基部剪斷,帶子葉轉(zhuǎn)入MS+0.25mg/L BA(單位下同)的培養(yǎng)基中,約經(jīng)30天的培養(yǎng),可長(zhǎng)成10厘米左右,帶8-12片葉的健壯無(wú)菌苗。
2、芽的分化與增殖將無(wú)菌苗切成1厘米左右?guī)б秆壳o段,接轉(zhuǎn)于MS+1.0mg/L BA+0.5mg/L IAA的培養(yǎng)基中,一周后腋芽開(kāi)始萌動(dòng)并逐漸形成芽叢。獲得的芽叢可不斷切割繁殖,繼代周期30天3、誘導(dǎo)生根將株高2.5厘米以上的健壯無(wú)根苗轉(zhuǎn)入1/2MS+0.1mg/LPP333培養(yǎng)基中,2周即可獲得完整植株。
4、上述艾西絲南瓜種苗快速繁殖各階段培養(yǎng)條件為溫度24℃,光照強(qiáng)度1800lx,每日光照12小時(shí)。
5、馴化移栽將已生根的試管苗開(kāi)瓶,置于散射光下鍛煉一周,然后取出、洗凈培養(yǎng)基,移栽于上層細(xì)沙,中層腐殖土、下層粗沙的苗床或營(yíng)養(yǎng)缽中,以1/2MS營(yíng)養(yǎng)液澆透并保濕培養(yǎng)一周,試管苗即恢復(fù)生長(zhǎng),隨后逐漸降低濕度,25天即可定植于大田。成活率達(dá)90%以上。
6、試管苗的田間栽培試管苗定植大田后,為使其高產(chǎn)、質(zhì)優(yōu)的潛力得以充分發(fā)揮,栽培中還需配合以精細(xì)的田間管理技術(shù),其技術(shù)要點(diǎn)如下1)選地為創(chuàng)高產(chǎn),種植地以選土層深厚、有水澆條件的沙壤土為宜。
2)定植在我國(guó)煙臺(tái)地區(qū),艾西絲南瓜的播種期為4月下旬。為延長(zhǎng)生育期,提早開(kāi)花結(jié)瓜,增加產(chǎn)量,試管苗應(yīng)提前在4月上旬定植。
3)肥水管理春季與翻地同時(shí)每畝施撒5千公斤土雜肥。生育期再結(jié)合澆水每20天追施磷酸二銨一次(10公斤/畝)。定植前,灌底水一次;定植時(shí)再適量澆水;生育前期應(yīng)控制水分以促進(jìn)扎根;進(jìn)入抽蔓中期,需增加灌水次數(shù),原則上以保持地面不干為宜。
4)整蔓一般宜用三蔓整枝法,即留一根主蔓,二根側(cè)蔓。
5)授粉為提高座果率,需進(jìn)行人工授粉,授粉時(shí)間以上午8-9點(diǎn)為好。
6)摘心為保證商品瓜的質(zhì)量,對(duì)枝蔓應(yīng)及時(shí)摘心,一般主蔓留三個(gè)瓜,側(cè)蔓留一個(gè)瓜然后摘心。
7、為降低工廠化生產(chǎn)成本,上述方法也可采用散射日光(小于5000lx)代替燈光;食用白糖代替蔗糖;自來(lái)水代替蒸餾水,普通果醬瓶代替錐形瓶;脫脂棉代表瓊脂做培養(yǎng)基支持物(誘導(dǎo)生根階段)。
權(quán)利要求
1.一種艾西絲南瓜種苗快速繁殖方法,包括無(wú)菌培養(yǎng)物的獲得、芽的分化與增殖、生根培養(yǎng)、馴化移栽等步驟,其特征在于芽的分化與增殖培養(yǎng)基為MS+0.25~2.0mg/L BA或MS+0.5~1.0mg/L BA+0.1~0.5mg/L IAA;生根培養(yǎng)基為1/2MS+瓊脂0.6-0.7%+蔗糖2%或1/2MS+脫脂棉(少許)+蔗糖2%或1/2MS+0.05~0.1mg/L PP333+瓊脂0.6~.0.7%+蔗糖2%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于無(wú)菌培養(yǎng)物是采取以下方法獲得的將艾西絲南瓜雜交種,經(jīng)70%酒精輔以飽和漂粉精液表面滅菌后于無(wú)菌條件下剖出種胚接種于1/2MS培養(yǎng)基中,種子萌芽后,從子葉基部剪斷,帶子葉轉(zhuǎn)入MS+0.25mg/L BA的培養(yǎng)基中,經(jīng)30天的培養(yǎng),可長(zhǎng)成約10厘米高、帶8-12片葉的健壯無(wú)菌苗。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于在芽的分化與增殖、生根培養(yǎng)階段之間可對(duì)試管苗復(fù)壯,其培養(yǎng)基為MS+0.5~1.0mg/L BA+0.05~0.1mg/LPP333。
4.根據(jù)根據(jù)權(quán)利要求1所述方法,其特征在于無(wú)菌培養(yǎng)物的獲得、芽的分化與增殖、生根培養(yǎng)階段的培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度24℃±2℃,光照強(qiáng)度1500~2000lx,每日光照12小時(shí)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述艾西絲南瓜種苗快速繁殖技術(shù),其特征在于可采用散射日光(小于5000lx)代替燈光;食用白糖代替蔗糖;自來(lái)水代替蒸餾水,普通果醬瓶代替錐形瓶;脫脂棉代表瓊脂做培養(yǎng)基支持物。
全文摘要
本發(fā)明屬于植物種苗的快速繁殖技術(shù)領(lǐng)域,專用于日本南瓜組培苗快速繁殖及田間栽培的技術(shù)。本發(fā)明包括無(wú)菌培養(yǎng)物的獲得、芽的分化與增殖、生根培養(yǎng)、馴化移栽等步驟。利用本發(fā)明的技術(shù)可在短時(shí)間內(nèi)提供大量種苗,以代替進(jìn)口種子,滿足大規(guī)模生產(chǎn)的需要。
文檔編號(hào)A01H4/00GK1227709SQ9910037
公開(kāi)日1999年9月8日 申請(qǐng)日期1999年1月26日 優(yōu)先權(quán)日1999年1月26日
發(fā)明者趙建萍, 畢可華, 柏新付, 蔣小滿 申請(qǐng)人:煙臺(tái)師范學(xué)院