綠豆抗蚜性快速鑒定的方法與流程

本發(fā)明涉及作物抗性育種
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體地指一種綠豆抗蚜性快速鑒定的方法。
背景技術(shù)：
：豆蚜(AphiscraccivoraKoch)屬半翅目蚜科，別名苜蓿蚜、花生蚜，在全世界廣泛分布，寄主植物可達(dá)200種以上，主要有豇豆、菜豆、蠶豆、豌豆、綠豆、大豆、花生、苜蓿等，是豆科植物的重要害蟲。該蟲以刺吸式口器吸取嫩莖、幼芽、頂端嫩葉、心葉、花器及莢果處汁液。受害嚴(yán)重時，植株生長不良，葉片卷縮，影響開花結(jié)實。又因該蟲大量排泄“蜜露”，而引起煤污病，并可傳播植物病毒病40多種，嚴(yán)重影響作物產(chǎn)量和品質(zhì)。目前對于豆蚜的防治主要是化學(xué)藥劑防治。培育抗蟲品種是解決這一蟲害的有效途徑，而建立快速簡便的抗蚜性鑒定方法對抗蚜蟲育種具有重要的意義。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明目的在于針對綠豆抗蟲育種的特點和現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種綠豆抗蚜性快速鑒定的方法，該方法能在室內(nèi)重復(fù)、快速準(zhǔn)確鑒定綠豆資源對豆蚜的抗性。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的一種綠豆對蚜蟲抗性的快速鑒定方法，包括以下步驟：1)挑選顆粒飽滿，大小相似的綠豆種子進(jìn)行表面消毒，備用；2)將培養(yǎng)土裝袋后進(jìn)行高壓滅菌，滅菌后的有機(jī)培養(yǎng)土分裝到培養(yǎng)盤內(nèi)，將表面消毒后的綠豆種子點播到培養(yǎng)盤內(nèi)；光照黑暗交替下培養(yǎng)，并定期觀察綠豆苗生長情況；3)待綠豆長到兩葉一心期時，接種2-3頭無翅蚜蟲于正面葉片上；4)接種蚜蟲7d，采用計數(shù)法統(tǒng)計每株綠豆植株上的蚜蟲數(shù)量，求相同品種綠豆植株上蚜蟲數(shù)量的平均值，從而按以下分級標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行抗性評價，以每株的平均單株蚜量比值定級，共分5級：1)0級：平均綠豆單株蚜蟲量比值為0-0.25；2)1級：平均綠豆單株蚜量比值為0.26-0.50；3)2級：平均綠豆單株蚜量比值為0.51-0.90；4)3級：平均單株蚜量比值為0.91-1.25；5)4級：平均綠豆單株蚜量比值為＞1.25；經(jīng)上統(tǒng)計得知，0級屬于高抗蟲型，記以HR，1級屬于抗蟲型，記以R，2級屬于中抗蟲型，記以MR，3級屬于感蟲型，記以S，4級屬于高感蟲型，記以HS。進(jìn)一步地，所述步驟1)中，先用體積分?jǐn)?shù)為75％的酒精消毒2s，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)1％的NaClO溶液消毒3min，最后無菌水洗3次。再進(jìn)一步地，所述步驟2中，將培養(yǎng)土裝袋經(jīng)121℃，20min高壓滅菌。再進(jìn)一步地，所述步驟2中，培養(yǎng)環(huán)境的溫度為23±1℃。本發(fā)明的有益效果在于：1、本發(fā)明可在較短時間內(nèi)連續(xù)鑒定較大數(shù)量的綠豆苗，有利于大規(guī)模篩選綠豆抗豆蚜品種。2、本發(fā)明可以讓豆蚜在一個可控、密閉的環(huán)境中繁殖，保證了鑒定結(jié)果的重復(fù)性和可靠性。3、本發(fā)明可以直接觀察綠豆苗的感蟲情況。4、本發(fā)明能夠使綠豆保持正常生長，綠豆抗蚜蟲鑒定技術(shù)可以準(zhǔn)確統(tǒng)計蚜蟲的繁殖數(shù)量，鑒定區(qū)分綠豆品種的抗豆蚜性。5、用本發(fā)明提供的方法鑒定綠豆品種的抗豆蚜性，能夠大量、快速、準(zhǔn)確的區(qū)分品種間抗豆蚜性間的差異，為抗蟲親本選擇提供依據(jù)，是選育抗豆蚜綠豆品種資源最經(jīng)濟(jì)有效的方法，進(jìn)而從根本上減少豆蚜對綠豆產(chǎn)量和質(zhì)量的損失。附圖說明圖1為豆蚜室內(nèi)飼養(yǎng)圖；圖2為供試豆蚜的準(zhǔn)備圖；圖3綠豆蚜蟲抗性鑒定圖。具體實施方式為了更好地解釋本發(fā)明，以下結(jié)合具體實施例進(jìn)一步闡明本發(fā)明的主要內(nèi)容，但本發(fā)明的內(nèi)容不僅僅局限于以下實施例。實施例1供試豆蚜的準(zhǔn)備1)豆蚜的室內(nèi)大量飼養(yǎng)：豆蚜為綠豆上田間采集，在本實驗室種植的蠶豆苗上繼代飼養(yǎng)，溫度為(23±1)℃，光照周期為16L:8D。2)供試豆蚜的準(zhǔn)備：采用改進(jìn)的葉子圓片法，在人工光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)供試若蚜。具體為：將新鮮的綠豆葉片用巴斯消毒液浸泡10min后放在含有瓊脂層(1.5％)的培養(yǎng)皿內(nèi)，挑選健康的成蚜置于葉片上，蓋上蓋子，并用封口膜封上以防止豆蚜爬出。24h后，將培養(yǎng)皿內(nèi)的成蚜取出。第4天后取4日齡若蚜進(jìn)行人工接蟲實驗。蚜蟲培養(yǎng)條件為：溫度為(23±1)℃，光照周期為16L:8D。實施例2室內(nèi)抗蟲性鑒定將各綠豆品種為實驗材料，待綠豆長到兩葉一心期時，接種2-3頭無翅蚜蟲于正面葉片。接蚜7d后，采用計數(shù)法統(tǒng)計每株綠豆植株上的蚜蟲數(shù)量，求得每20株相同品種蠶豆植株上蚜蟲數(shù)量的平均值，從而按以下分級標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行抗性評價，以每株的平均單株蚜量比值定級，共分5級：1)0級：平均綠豆單株蚜蟲量比值為0-0.25；2)1級：平均綠豆單株蚜量比值為0.26-0.50；3)2級：平均綠豆單株蚜量比值為0.51-0.90；4)3級：平均單株蚜量比值為0.91-1.25；5)4級：平均綠豆單株蚜量比值為＞1.25；經(jīng)上統(tǒng)計得知，0級屬于高抗蟲型，記以HR，1級屬于抗蟲型，記以R，2級屬于中抗蟲型，記以MR，3級屬于感蟲型，記以S，4級屬于高感蟲型，記以HS。實施例3綠豆資源抗性鑒定結(jié)果利用上述方法對生產(chǎn)上應(yīng)用的4綠豆品種開展抗豆蚜的鑒定評價，鑒定結(jié)果見表1。表1綠豆對豆蚜室內(nèi)抗性鑒定結(jié)果品種平均單株蚜量比值抗性程度冀綠2號0.4208R中綠3號0.5372MR中綠1號0.9094S濰綠05-081.6347HS由上表可知，供試各品種抗蚜性表現(xiàn)顯著的差異，證明應(yīng)用本發(fā)明提供的鑒定方法能夠快速、準(zhǔn)確地區(qū)分綠豆抗豆蚜品種和感豆蚜品種。由此可見，關(guān)于品種抗蚜性鑒定，利用室內(nèi)人工接蟲的方法，使材料感蟲。實驗結(jié)果表明，綠豆的抗蚜性存在差異，其中培養(yǎng)條件對感蟲程度有很大的影響。因此以后在對育種材料進(jìn)行抗蚜性鑒定時，應(yīng)控制溫度和濕度，提供具有實際育種意義的抗性評價。該方法可以用來快速地篩選出抗豆蚜的綠豆品種，為以后的綠豆生產(chǎn)上種子品系的選擇提供參考。其它未詳細(xì)說明的部分均為現(xiàn)有技術(shù)。盡管上述實施例對本發(fā)明做出了詳盡的描述，但它僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部實施例，人們還可以根據(jù)本實施例在不經(jīng)創(chuàng)造性前提下獲得其他實施例，這些實施例都屬于本發(fā)明保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁1 2 3