一種硫化鉬?三氧化二鐵復合納米抑菌材料的制備與應用的制作方法
本發(fā)明涉及一種硫化鉬-三氧化二鐵復合納米材料的制備技術領域，還涉及抑菌的方法技術。
背景技術：
細菌廣泛存在于我們周圍的環(huán)境中。細菌感染已經(jīng)嚴重威脅到人們的身體健康。傳統(tǒng)的抗菌劑(如納米Ag，抗生素等)已廣泛用于殺死細菌，但其對環(huán)境存在潛在的危害且效率較低、成本較高，具有一定的局限性。所以，對環(huán)境友好的、低成本、高效的抗菌材料的研究和開發(fā)是很重要的。
近年來，半導體由于其無毒、無害以及優(yōu)異的抗菌性能受到關注。因此，探索利用此類材料研發(fā)出新型、高效、無毒、低廉的抗菌材料成為新的熱點。
三氧化二鐵是一種常見的鐵氧化物。硫化鉬是一種典型的二維材料，就有良好的導電性能，硫化鉬剝離后產生的二維納米片具有良好的彈性和柔性，可以作為載體。利用水熱合成法制備的硫化鉬-三氧化二鐵納米材料，經(jīng)試驗證明該納米材料的抗菌性能針對于革蘭氏陽菌，在一定的濃度范圍內具有很好的選擇性。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于，克服現(xiàn)有技術中存在的問題，提供一種新的抗菌劑，具體涉及硫化鉬-三氧化二鐵復合物制備方法及抑菌技術，此復合物具有優(yōu)良的抗菌性能，是一種新型的革蘭氏陽性抗菌劑。
實現(xiàn)本發(fā)明目的的技術解決方案是：
一種硫化鉬-三氧化二鐵復合納米抑菌材料的制備方法，包括如下步驟：
(1)將5～10mmol的七水合硫酸亞鐵溶解在10～30mL的去離子水中，配置成溶液I；
(2)將1.0～2.0mmol的氯酸鈉溶解在10～30mL的去離子水中，配置成溶液II；
(3)將溶液II逐滴加入溶液I，邊加入邊攪拌，配制成溶液III；
(4)將溶液III轉移至高壓反應釜中，高溫反應；
(5)待溶液冷卻后，收集沉淀分別用去離子水、無水乙醇清洗，然后烘干，即得納米三氧化二鐵；
(6)稱取二水鉬酸鈉、硫代乙酰胺以及步驟(5)的產物納米三氧化二鐵加入水中，并攪拌均勻，然后將溶液轉移至高壓反應釜中，高溫反應；
(7)對步驟(6)反應產物進行離心分離去除水分后，用乙醇和去離子水分別清洗數(shù)次，將清洗后的反應產物置于烘箱中烘干過夜，即得硫化鉬-三氧化二鐵復合物納米材料。
步驟(1)中，每5～10mmol的七水合硫酸亞鐵溶解在10～30mL的去離子水中；步驟(2)中，每1.0～2.0mmol的氯酸鈉溶解在10～30mL的去離子水中；所述七水合硫酸亞鐵與氯酸鈉按物質的量計，比例為(5～10)：(1.0～2.0)。
步驟(4)所述的反應溫度為160～200℃，反應時間為10～18小時；步驟(5)所述的乙醇和水的清洗次數(shù)為3～5次，烘箱溫度60～80℃，烘干時間為8～16小時。
步驟(6)所述二水鉬酸鈉和硫代乙酰胺按物質的量計，比例為(1～2)：(3～7)；每1～2mmol二水鉬酸鈉，對應的納米三氧化二鐵質量為20～190mg和60mL水，高壓反應時間為10～24小時，反應溫度為180～220℃。
步驟(7)所述的的離心速率為2000～6000轉/分，乙醇和水的清洗次數(shù)為3～6次，烘箱溫度60～80℃。
本發(fā)明還公開了利用上述硫化鉬-三氧化二鐵復合納米抑菌材料抑菌的方法，包括如下步驟：
a)取硫化鉬-三氧化二鐵復合物納米材料2～5mg于1～2mL試管中，加入無水乙醇消毒，然后離心去除酒精，加入滅菌水充分懸?。?/p>
b)稱取20～50g胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基攪拌溶于0.5～2.0L水中，即得到胰蛋白胨大豆肉湯，將胰蛋白胨大豆肉湯其均分成兩份；在其中一份胰蛋白胨大豆肉湯中加入5～10g瓊脂粉，即胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基；然后置于高壓滅菌鍋中滅菌；將滅菌的胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基制成平板以備用；
c)取-80℃下保存的大腸桿菌(革蘭氏陰性菌)及葡萄球菌(革蘭氏陽性菌)，分別在胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基平板上劃板，倒置活化培養(yǎng)過夜；然后挑取單克隆于含3～6mL胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基的試管中，在搖床上培養(yǎng)過夜，取0.5～1.5ml菌離心去除培養(yǎng)基，再用含5～15g氯化鈉的滅菌水將菌稀釋，即得大腸桿菌及葡萄球菌的試驗用菌；
d)取不同量步驟a)產物加入到2～8mL步驟c)的產物中，從而將步驟a)產物配制成10～100mg/L的工作濃度；隨后將這些溶液置于搖床處理；
e)將步驟d)的產物稀釋，再各取50～200ul均勻涂在胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基平板上，倒置培養(yǎng)過夜并計數(shù)；
f)計算細菌去除率或抑菌率＝(C0-C1)/C0×100％(C0菌液中不加材料處理后的CFU，C1菌液中加入材料處理后的CFU)
步驟a)所述的加入無水乙醇的體積為1～1.5毫升，消毒時間為5～20分鐘，加入滅菌水的體積為0.5～1.5毫升。
步驟b)所述的高壓滅菌的溫度為120～125℃，滅菌時間為10～30分鐘。
步驟c)所述的活化培養(yǎng)溫度為32～38℃，搖床培養(yǎng)溫度為32～38℃，轉速為150～220轉/分，稀釋后的濃度為0.5～1.0×107CFU/mL。
步驟d)所述處理時間0.5～2小時；處理時的溫度為32～38℃，轉速不低于150～220轉/分；步驟e)所述的稀釋后的濃度范圍為10-1～10-4，培養(yǎng)溫度為32～38℃。
相對于現(xiàn)有技術，本發(fā)明取得了以下有益效果：
①在硫化鉬合成體系中加入三氧化二鐵是為了調控硫化鉬的結構，促使硫化鉬復合物具有更大的比表面積和更好的分散性能，三氧化二鐵與硫化鉬的協(xié)同作用，能有效降低硫化鉬的帶隙寬度，從而確保所得復合物具有更好的抗菌性能以及光增強抗菌性能。
②先用乙醇清洗去除未反應的聚乙烯吡咯烷酮，再用去離子水清洗去除未反應的無機離子，可以獲得純凈的硫化鉬-三氧化二鐵復合物納米材料。
③加入無水乙醇的目的是去除硫化鉬-三氧化二鐵復合物納米材料中可能攜帶的細菌，保證后續(xù)抗菌實驗結果的準確性。
④本發(fā)明制得的硫化鉬-三氧化二鐵復合材料中鉬：鐵的摩爾比大約為1:(0.25～11)，具有優(yōu)異的對革蘭氏陽性菌的抗菌性能，且成本較低，用于針對革蘭氏陽性菌污染具有很高的去除率，具有較高的潛在工業(yè)應用價值。對于初始細菌濃度為0.5～1.0×107CFU/mL的水，按照7.5mg/L硫化鉬-三氧化二鐵，對葡萄球菌處理60分鐘后，細菌去除率可達90％以上。
本發(fā)明的硫化鉬-三氧化二鐵復合材料對革蘭氏陽性菌均具有良好的抑制效果，對革蘭氏陰性菌抑制效率不高，因此其抑菌特性具有選擇性，本發(fā)明的硫化鉬-三氧化二鐵復合材料對環(huán)境友好不會引發(fā)細菌的耐藥性等問題。
附圖說明
圖1為本發(fā)明實施例1的硫化鉬-三氧化二鐵復合物的XRD圖譜。
圖2是本發(fā)明中硫化鉬-三氧化二鐵在不同工作濃度在黑暗及光下對大腸桿菌的抑菌率。
圖3是本發(fā)明中硫化鉬-三氧化二鐵在不同工作濃度在黑暗及光下對葡萄球菌的抑菌率。
具體實施方式
下面結合附圖和具體實施方式對本發(fā)明作進一步詳細的說明，附圖僅提供參考與說明用，非用以限制本發(fā)明。
實施例1
本發(fā)明的一種硫化鉬-三氧化二鐵復合納米抑菌材料的制備與應用，依次包括如下步驟：
⑴將8mmol的FeSO4·7H2O溶解在15mL的去離子水中，配置成溶液I；
⑵將1.6mmol的NaClO3溶解在16mL的去離子水中，配置成溶液II；
⑶將溶液II逐滴加入溶液I，邊加入邊攪拌，配制成溶液III；
⑷將溶液III轉移至高壓反應釜中，在180℃下反應12小時；
⑸待溶液冷卻后，收集沉淀分別用去離子水、無水乙醇各洗三次，然后在60℃的烘箱中烘干10小時，從而得到納米Fe2O3；
⑹稱取1mmol二水鉬酸鈉，5mmol硫代乙酰胺以及0.5g步驟⑸的產物加入60mL水中并攪拌均勻，然后將溶液轉移至高壓反應釜中，200℃反應20小時；
⑺對步驟⑹反應產物進行離心分離去除水分后，用乙醇和去離子水分別清洗數(shù)次，將清洗后的反應產物置于烘箱中烘干過夜，即得硫化鉬-三氧化二鐵復合物納米材料；
⑻取步驟⑺的產物4mg于1.5mL試管中，加入1mL無水乙醇消毒10分鐘，然后離心去除酒精，加入1mL滅菌水充分懸?。?/p>
⑼稱取30g胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基攪拌溶于1000mL水中，即得到胰蛋白胨大豆肉湯，將胰蛋白胨大豆肉湯其均分成兩份。在其中一份胰蛋白胨大豆肉湯中加入7.5g瓊脂粉，即胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基，然后將他們置于高壓滅菌鍋中，121℃下滅菌15分鐘。將滅菌的胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基制成平板以備用。
⑽取-80℃下保存的大腸桿菌，在胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基平板上劃板，于37℃下倒置活化培養(yǎng)過夜。然后挑取單克隆于含5mL胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基的試管中，在37℃的搖床上以180rpm/min的轉速培養(yǎng)過夜，取1ml菌離心去除培養(yǎng)基，再用含8.5g NaCl的滅菌水將菌稀釋至1～0.5×107CFU/mL，從而制備得到大腸桿菌試驗用菌；
⑾取不同量步驟⑻產物加入到5mL步驟⑽的產物中，從而將步驟⑻產物配制成15mg/L的工作濃度。隨后將這些溶液置于37℃的搖床，以180rpm/min的轉速下處理2小時。
⑿將步驟⑾的產物稀釋成10-1、10-2、10-3、10-4，再各取100ul均勻涂在胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基平板上，在37℃下倒置培養(yǎng)過夜并計數(shù)。
⒀計算細菌去除率或抑菌率＝(C0-C1)/C0×100％(C0菌液中不加材料處理后的CFU，C1菌液中加入材料處理后的CFU)
抑菌率＝(C0-C1)/C0×100％＝12.1％
實施例2
本發(fā)明的一種硫化鉬-三氧化二鐵復合納米抑菌材料的制備與應用，依次包括如下步驟：
⑴將8mmol的FeSO4·7H2O溶解在15mL的去離子水中，配置成溶液I；
⑵將1.6mmol的NaClO3溶解在16mL的去離子水中，配置成溶液II；
⑶將溶液II逐滴加入溶液I，邊加入邊攪拌，配制成溶液III；
⑷將溶液III轉移至高壓反應釜中，在180℃下反應12小時；
⑸待溶液冷卻后，收集沉淀分別用去離子水、無水乙醇各洗三次，然后在60℃的烘箱中烘干10小時，從而得到納米Fe2O3；
⑹稱取1mmol二水鉬酸鈉，5mmol硫代乙酰胺以及0.5g步驟⑸的產物加入60mL水中并攪拌均勻，然后將溶液轉移至高壓反應釜中，200℃反應20小時；
⑺對步驟⑹反應產物進行離心分離去除水分后，用乙醇和去離子水分別清洗數(shù)次，將清洗后的反應產物置于烘箱中烘干過夜，即得硫化鉬-三氧化二鐵復合物納米材料；
⑻取步驟⑺的產物4mg于1.5mL試管中，加入1mL無水乙醇消毒10分鐘，然后離心去除酒精，加入1mL滅菌水充分懸浮；
⑼稱取30g胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基攪拌溶于1000mL水中，即得到胰蛋白胨大豆肉湯，將胰蛋白胨大豆肉湯其均分成兩份。在其中一份胰蛋白胨大豆肉湯中加入7.5g瓊脂粉，即胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基，然后將他們置于高壓滅菌鍋中，121℃下滅菌15分鐘。將滅菌的胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基制成平板以備用。
⑽取-80℃下保存的大腸桿菌，在胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基平板上劃板，于37℃下倒置活化培養(yǎng)過夜。然后挑取單克隆于含5mL胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基的試管中，在37℃的搖床上以180rpm/min的轉速培養(yǎng)過夜，取1ml菌離心去除培養(yǎng)基，再用含8.5g NaCl的滅菌水將菌稀釋至1～0.5×107CFU/mL，從而制備得到大腸桿菌試驗用菌；
⑾取不同量步驟⑻產物加入到5mL步驟⑽的產物中，從而將步驟⑻產物配制成30mg/L的工作濃度。隨后將這些溶液置于37℃的搖床，以180rpm/min的轉速下處理2小時。
⑿將步驟⑾的產物稀釋成10-1、10-2、10-3、10-4，再各取100ul均勻涂在胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基平板上，在37℃下倒置培養(yǎng)過夜并計數(shù)。
⒀計算細菌去除率或抑菌率＝(C0-C1)/C0×100％(C0菌液中不加材料處理后的CFU，C1菌液中加入材料處理后的CFU)
抑菌率＝(C0-C1)/C0×100％＝15.7％
實施例3
本發(fā)明的一種硫化鉬-三氧化二鐵復合納米抑菌材料的制備與應用，依次包括如下步驟：
⑴將8mmol的FeSO4·7H2O溶解在15mL的去離子水中，配置成溶液I；
⑵將1.6mmol的NaClO3溶解在16mL的去離子水中，配置成溶液II；
⑶將溶液II逐滴加入溶液I，邊加入邊攪拌，配制成溶液III；
⑷將溶液III轉移至高壓反應釜中，在180℃下反應12小時；
⑸待溶液冷卻后，收集沉淀分別用去離子水、無水乙醇各洗三次，然后在60℃的烘箱中烘干10小時，從而得到納米Fe2O3；
⑹稱取1mmol二水鉬酸鈉，5mmol硫代乙酰胺以及0.5g步驟⑸的產物加入60mL水中并攪拌均勻，然后將溶液轉移至高壓反應釜中，200℃反應20小時；
⑺對步驟⑹反應產物進行離心分離去除水分后，用乙醇和去離子水分別清洗數(shù)次，將清洗后的反應產物置于烘箱中烘干過夜，即得硫化鉬-三氧化二鐵復合物納米材料；
⑻取步驟⑺的產物4mg于1.5mL試管中，加入1mL無水乙醇消毒10分鐘，然后離心去除酒精，加入1mL滅菌水充分懸浮；
⑼稱取30g胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基攪拌溶于1000mL水中，即得到胰蛋白胨大豆肉湯，將胰蛋白胨大豆肉湯其均分成兩份。在其中一份胰蛋白胨大豆肉湯中加入7.5g瓊脂粉，即胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基，然后將他們置于高壓滅菌鍋中，121℃下滅菌15分鐘。將滅菌的胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基制成平板以備用。
⑽取-80℃下保存的大腸桿菌，在胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基平板上劃板，于37℃下倒置活化培養(yǎng)過夜。然后挑取單克隆于含5mL胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基的試管中，在37℃的搖床上以180rpm/min的轉速培養(yǎng)過夜，取1ml菌離心去除培養(yǎng)基，再用含8.5g NaCl的滅菌水將菌稀釋至1～0.5×107CFU/mL，從而制備得到大腸桿菌試驗用菌；
⑾取不同量步驟⑻產物加入到5mL步驟⑽的產物中，從而將步驟⑻產物配制成60mg/L的工作濃度。隨后將這些溶液置于37℃的搖床，以180rpm/min的轉速下處理2小時。
⑿將步驟⑾的產物稀釋成10-1、10-2、10-3、10-4，再各取100ul均勻涂在胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基平板上，在37℃下倒置培養(yǎng)過夜并計數(shù)。
⒀計算細菌去除率或抑菌率＝(C0-C1)/C0×100％(C0菌液中不加材料處理后的CFU，C1菌液中加入材料處理后的CFU)
抑菌率＝(C0-C1)/C0×100％＝22.6％
實施例4
本發(fā)明的一種硫化鉬-三氧化二鐵復合納米抑菌材料的制備與應用，依次包括如下步驟：
⑴將8mmol的FeSO4·7H2O溶解在15mL的去離子水中，配置成溶液I；
⑵將1.6mmol的NaClO3溶解在16mL的去離子水中，配置成溶液II；
⑶將溶液II逐滴加入溶液I，邊加入邊攪拌，配制成溶液III；
⑷將溶液III轉移至高壓反應釜中，在180℃下反應12小時；
⑸待溶液冷卻后，收集沉淀分別用去離子水、無水乙醇各洗三次，然后在60℃的烘箱中烘干10小時，從而得到納米Fe2O3；
⑹稱取1mmol二水鉬酸鈉，5mmol硫代乙酰胺以及0.5g步驟⑸的產物加入60mL水中并攪拌均勻，然后將溶液轉移至高壓反應釜中，200℃反應20小時；
⑺對步驟⑹反應產物進行離心分離去除水分后，用乙醇和去離子水分別清洗數(shù)次，將清洗后的反應產物置于烘箱中烘干過夜，即得硫化鉬-三氧化二鐵復合物納米材料；
⑻取步驟⑺的產物4mg于1.5mL試管中，加入1mL無水乙醇消毒10分鐘，然后離心去除酒精，加入1mL滅菌水充分懸??；
⑼稱取30g胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基攪拌溶于1000mL水中，即得到胰蛋白胨大豆肉湯，將胰蛋白胨大豆肉湯其均分成兩份。在其中一份胰蛋白胨大豆肉湯中加入7.5g瓊脂粉，即胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基，然后將他們置于高壓滅菌鍋中，121℃下滅菌15分鐘。將滅菌的胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基制成平板以備用。
⑽取-80℃下保存的葡萄球菌，在胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基平板上劃板，于37℃下倒置活化培養(yǎng)過夜。然后挑取單克隆于含5mL胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基的試管中，在37℃的搖床上以180rpm/min的轉速培養(yǎng)過夜，取1ml菌離心去除培養(yǎng)基，再用含8.5g NaCl的滅菌水將菌稀釋至1～0.5×107CFU/mL，從而制備得到大腸桿菌試驗用菌；
⑾取不同量步驟⑻產物加入到5mL步驟⑽的產物中，從而將步驟⑻產物配制成15mg/L的工作濃度。隨后將這些溶液置于37℃的搖床，以180rpm/min的轉速下處理1小時。
⑿將步驟⑾的產物稀釋成10-1、10-2、10-3、10-4，再各取100ul均勻涂在胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基平板上，在37℃下倒置培養(yǎng)過夜并計數(shù)。
⒀計算細菌去除率或抑菌率＝(C0-C1)/C0×100％(C0菌液中不加材料處理后的CFU，C1菌液中加入材料處理后的CFU)
抑菌率＝(C0-C1)/C0×100％＝99.1％
實施例5
本發(fā)明的一種硫化鉬-三氧化二鐵復合納米抑菌材料的制備與應用，依次包括如下步驟：
⑴將8mmol的FeSO4·7H2O溶解在15mL的去離子水中，配置成溶液I；
⑵將1.6mmol的NaClO3溶解在16mL的去離子水中，配置成溶液II；
⑶將溶液II逐滴加入溶液I，邊加入邊攪拌，配制成溶液III；
⑷將溶液III轉移至高壓反應釜中，在180℃下反應12小時；
⑸待溶液冷卻后，收集沉淀分別用去離子水、無水乙醇各洗三次，然后在60℃的烘箱中烘干10小時，從而得到納米Fe2O3；
⑹稱取1mmol二水鉬酸鈉，5mmol硫代乙酰胺以及0.5g步驟⑸的產物加入60mL水中并攪拌均勻，然后將溶液轉移至高壓反應釜中，200℃反應20小時；
⑺對步驟⑹反應產物進行離心分離去除水分后，用乙醇和去離子水分別清洗數(shù)次，將清洗后的反應產物置于烘箱中烘干過夜，即得硫化鉬-三氧化二鐵復合物納米材料；
⑻取步驟⑺的產物4mg于1.5mL試管中，加入1mL無水乙醇消毒10分鐘，然后離心去除酒精，加入1mL滅菌水充分懸?。?/p>
⑼稱取30g胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基攪拌溶于1000mL水中，即得到胰蛋白胨大豆肉湯，將胰蛋白胨大豆肉湯其均分成兩份。在其中一份胰蛋白胨大豆肉湯中加入7.5g瓊脂粉，即胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基，然后將他們置于高壓滅菌鍋中，121℃下滅菌15分鐘。將滅菌的胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基制成平板以備用。
⑽取-80℃下保存的葡萄球菌，在胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基平板上劃板，于37℃下倒置活化培養(yǎng)過夜。然后挑取單克隆于含5mL胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基的試管中，在37℃的搖床上以180rpm/min的轉速培養(yǎng)過夜，取1ml菌離心去除培養(yǎng)基，再用含8.5g NaCl的滅菌水將菌稀釋至1～0.5×107CFU/mL，從而制備得到大腸桿菌試驗用菌；
⑾取不同量步驟⑻產物加入到5mL步驟⑽的產物中，從而將步驟⑻產物配制成30mg/L的工作濃度。隨后將這些溶液置于37℃的搖床，以180rpm/min的轉速下處理1小時。
⑿將步驟⑾的產物稀釋成10-1、10-2、10-3、10-4，再各取100ul均勻涂在胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基平板上，在37℃下倒置培養(yǎng)過夜并計數(shù)。
⒀計算細菌去除率或抑菌率＝(C0-C1)/C0×100％(C0菌液中不加材料處理后的CFU，C1菌液中加入材料處理后的CFU)
抑菌率＝(C0-C1)/C0×100％＝99.5％
實施例6
本發(fā)明的一種硫化鉬-三氧化二鐵復合納米抑菌材料的制備與應用，依次包括如下步驟：
⑴將8mmol的FeSO4·7H2O溶解在15mL的去離子水中，配置成溶液I；
⑵將1.6mmol的NaClO3溶解在16mL的去離子水中，配置成溶液II；
⑶將溶液II逐滴加入溶液I，邊加入邊攪拌，配制成溶液III；
⑷將溶液III轉移至高壓反應釜中，在180℃下反應12小時；
⑸待溶液冷卻后，收集沉淀分別用去離子水、無水乙醇各洗三次，然后在60℃的烘箱中烘干10小時，從而得到納米Fe2O3；
⑹稱取1mmol二水鉬酸鈉，5mmol硫代乙酰胺以及0.5g步驟⑸的產物加入60mL水中并攪拌均勻，然后將溶液轉移至高壓反應釜中，200℃反應20小時；
⑺對步驟⑹反應產物進行離心分離去除水分后，用乙醇和去離子水分別清洗數(shù)次，將清洗后的反應產物置于烘箱中烘干過夜，即得硫化鉬-三氧化二鐵復合物納米材料；
⑻取步驟⑺的產物4mg于1.5mL試管中，加入1mL無水乙醇消毒10分鐘，然后離心去除酒精，加入1mL滅菌水充分懸??；
⑼稱取30g胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基攪拌溶于1000mL水中，即得到胰蛋白胨大豆肉湯，將胰蛋白胨大豆肉湯其均分成兩份。在其中一份胰蛋白胨大豆肉湯中加入7.5g瓊脂粉，即胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基，然后將他們置于高壓滅菌鍋中，121℃下滅菌15分鐘。將滅菌的胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基制成平板以備用。
⑽取-80℃下保存的葡萄球菌，在胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基平板上劃板，于37℃下倒置活化培養(yǎng)過夜。然后挑取單克隆于含5mL胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基的試管中，在37℃的搖床上以180rpm/min的轉速培養(yǎng)過夜，取1ml菌離心去除培養(yǎng)基，再用含8.5g NaCl的滅菌水將菌稀釋至1～0.5×107CFU/mL，從而制備得到大腸桿菌試驗用菌；
⑾取不同量步驟⑻產物加入到5mL步驟⑽的產物中，從而將步驟⑻產物配制成60mg/L的工作濃度。隨后將這些溶液置于37℃的搖床，以180rpm/min的轉速下處理1小時。
⑿將步驟⑾的產物稀釋成10-1、10-2、10-3、10-4，再各取100ul均勻涂在胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基平板上，在37℃下倒置培養(yǎng)過夜并計數(shù)。
⒀計算細菌去除率或抑菌率＝(C0-C1)/C0×100％(C0菌液中不加材料處理后的CFU，C1菌液中加入材料處理后的CFU)
抑菌率＝(C0-C1)/C0×100％＝99.9％
對實施例1～6的數(shù)據(jù)匯總如下表，并且根據(jù)實施例1～3的數(shù)據(jù)繪制成圖2，根據(jù)實施例4～6的數(shù)據(jù)繪制成圖3。
以上所述僅為本發(fā)明之較佳可行實施例而已，非因此局限本發(fā)明的專利保護范圍。除上述實施例外，本發(fā)明還可以有其他實施方式，例如可以將各成分的質量和體積等比例放大若干倍。凡采用等同替換或等效變換形成的技術方案，均落在本發(fā)明要求的保護范圍內。本發(fā)明未經(jīng)描述的技術特征可以通過或采用現(xiàn)有技術實現(xiàn)，在此不再贅述。
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