本發(fā)明屬于植物培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種水藤菜組培快繁系統(tǒng)。
背景技術(shù)：
蕹菜又稱(chēng)空心菜、藤菜、竹葉菜，是旋花科番薯屬一年生或多年蔓生草本植物，因其梗中空而得名，原產(chǎn)中國(guó)華南、西南地區(qū)的沼澤地帶及東南亞地區(qū)，性喜溫暖濕潤(rùn)，耐炎熱，不耐霜凍，生長(zhǎng)速度快，采收期長(zhǎng)，病蟲(chóng)害少，產(chǎn)量高，是夏、秋季節(jié)重要的葉類(lèi)蔬菜。小葉水蕹菜具有葉片短小、節(jié)間短，莖桿粗壯，質(zhì)地脆嫩等特點(diǎn)。近年來(lái)，西南地區(qū)水蕹菜種植面積日益增加，且菜農(nóng)對(duì)水蕹菜的早春栽培獲得了較好的經(jīng)濟(jì)效益。由于水蕹菜在西南地區(qū)不能開(kāi)花或較少開(kāi)花，大多依靠種藤無(wú)性繁殖留種，從而易導(dǎo)致水蕹菜體內(nèi)病毒的侵染，抗逆境能力削弱，種藤存活率下降，產(chǎn)量及品質(zhì)降低。
傳統(tǒng)莖蔓扦插繁殖種苗具有以下缺點(diǎn)：保留老莖桿受氣候環(huán)境條件影響，種蔓成活率低，繁殖速度慢；栽培季節(jié)性強(qiáng)，扦插繁殖速度慢，緩苗時(shí)間較長(zhǎng)，推遲上市時(shí)間。長(zhǎng)期無(wú)性繁殖易受到交種病原苗的侵染，一些病毒在種苗上長(zhǎng)期存在和積累，導(dǎo)致種苗退化嚴(yán)重影響空心菜的產(chǎn)量和品質(zhì)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明為解決現(xiàn)有的傳統(tǒng)莖蔓扦插繁殖種苗保留老莖桿受氣候環(huán)境條件影響，種蔓成活率低，繁殖速度慢；栽培季節(jié)性強(qiáng)，扦插繁殖速度慢，緩苗時(shí)間較長(zhǎng)，推遲上市時(shí)間。長(zhǎng)期無(wú)性繁殖易受到交種病原苗的侵染，一些病毒在種苗上長(zhǎng)期存在和積累，導(dǎo)致種苗退化嚴(yán)重影響空心菜的產(chǎn)量和品質(zhì)的技術(shù)問(wèn)題而提供一種水藤菜組培快繁系統(tǒng)。
本發(fā)明為解決公知技術(shù)中存在的技術(shù)問(wèn)題所采取的技術(shù)方案是：
本發(fā)明提供的水藤菜組培快繁方法，所述水藤菜組培快繁方法包括以下步驟：
步驟一，選擇健康、無(wú)病害病含有節(jié)間的莖段1～2cm；
步驟二，田間取回的藤菜先用自來(lái)水清洗，再取帶有葉芽的莖段，進(jìn)行消毒處理；
步驟三，外植體滅菌：外植體用75％酒精浸10秒，0.2％升汞浸5～8分鐘，50倍84消毒液浸6～8分鐘；0.1％升汞浸5分鐘，50倍84消毒液，浸6～8分鐘；益培隆消毒液0.03％，浸10～20分鐘；
步驟四，外植體接種：每用一次消毒液后立即用無(wú)菌水清洗2～3次，然后在超凈工作臺(tái)上修剪莖段，每節(jié)代葉芽接入MS培養(yǎng)基中，每個(gè)培養(yǎng)皿接4～12個(gè)外植體；
步驟五，快繁和轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)，外植體在培養(yǎng)基中，20～30天長(zhǎng)成3～5cm，有3～4個(gè)葉片的小苗，除去污染瓶苗，在超凈工作臺(tái)中每苗在剪成2～3個(gè)帶葉片的節(jié)段，在轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基中；
步驟六，瓶苗繁殖2～3代再將小苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中，MS培養(yǎng)基除去生長(zhǎng)素和激動(dòng)素，另加0.5％的活性炭在上述環(huán)境中加強(qiáng)光照促進(jìn)壯苗生長(zhǎng)。
進(jìn)一步，無(wú)菌苗的子葉展開(kāi)后，剪去1/3的胚根，在插入新的培養(yǎng)基中培養(yǎng)；以上瓶苗在25～28度，每天光照12小時(shí)，光照強(qiáng)度3000到4000勒克斯的環(huán)境條件下進(jìn)行培養(yǎng)。
進(jìn)一步，當(dāng)瓶苗生根后，應(yīng)作適應(yīng)性煉苗，把瓶苗放在準(zhǔn)備移栽的地方，1～2天后再逐步打開(kāi)瓶蓋；煉苗后瓶?jī)?nèi)注水取出小苗在放入0.5％的多菌靈溶液中，清洗根部的培養(yǎng)基，取出晾干后栽入基質(zhì)的穴盤(pán)中，同時(shí)澆透水，在保濕，保溫，通風(fēng)透光的環(huán)境中生長(zhǎng)經(jīng)過(guò)10～15天后移栽到大田。
本辦法嗎的另一目的在于提供一種所述水藤菜組培快繁方法的水藤菜組培快繁系統(tǒng)，所述水藤菜組培快繁系統(tǒng)包括：
高壓滅菌鍋：用于培養(yǎng)基、蒸餾水、和各種器具的滅菌消毒，高壓蒸汽滅菌時(shí)，控制的溫度、時(shí)間為121℃、20分鐘；
超凈工作臺(tái)：用于組織培養(yǎng)的無(wú)菌操作；
水浴鍋：用于加熱生化試劑時(shí)，溶解瓊脂、化學(xué)藥品；
燒杯：用于存放、溶解化學(xué)試劑，規(guī)格為50mL、100mL；
容量瓶：用于標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制，規(guī)格為100mL、1000mL；
量筒：用于量取溶液，規(guī)格為50mL、100mL；
刻度移液管：用于量取溶液，規(guī)格為1mL、5mL。
玻璃棒：用于化學(xué)試劑溶解攪拌；
組培瓶：用于植物外植體的無(wú)菌培養(yǎng)，由瓶體、瓶蓋、調(diào)節(jié)封蓋、透氣簾組成；
分析天平：用于稱(chēng)量化學(xué)試劑，稱(chēng)量精度為0.001克；
酒精燈：用于金屬接種工具的高溫滅菌；
鑷子：用于植物外植體的轉(zhuǎn)移、接種；
剪刀：用于剪取植物外植體材料和接種；
酸度計(jì)：用于植物組織培養(yǎng)基pH值的調(diào)整。
本發(fā)明具有的優(yōu)點(diǎn)和積極效果是：該水藤菜組培快繁系統(tǒng)以水蕹菜的嫩莖為試材，開(kāi)展水蕹菜組織培養(yǎng)無(wú)性系研究，旨在為早春大規(guī)模生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)水蕹菜種苗提供關(guān)鍵技術(shù)。
附圖說(shuō)明
圖1是本發(fā)明實(shí)施例提供的水藤菜組培快繁方法的流程圖。
具體實(shí)施方式
為能進(jìn)一步了解本發(fā)明的發(fā)明內(nèi)容、特點(diǎn)及功效，茲例舉以下實(shí)施例，并配合附圖詳細(xì)說(shuō)明如下。
下面對(duì)本發(fā)明的結(jié)構(gòu)作詳細(xì)的描述。
如圖1所示，本發(fā)明實(shí)施例提供的水藤菜組培快繁方法包括以下步驟：
S101：選擇健康、無(wú)病害病含有節(jié)間的莖段1～2cm；
S102：田間取回的藤菜先用自來(lái)水清洗，再取帶有葉芽的莖段，進(jìn)行消毒處理；
S103：外植體滅菌：外植體用75％酒精浸10秒，0.2％升汞浸5～8分鐘，50倍84消毒液浸6～8分鐘；0.1％升汞浸5分鐘，50倍84消毒液，浸6～8分鐘；益培隆消毒液0.03％，浸10～20分鐘；
S104：外植體接種：每用一次消毒液后立即用無(wú)菌水清洗2～3次，然后在超凈工作臺(tái)上修剪莖段，每節(jié)代葉芽接入MS培養(yǎng)基中，每個(gè)培養(yǎng)皿接4～12個(gè)外植體；
S105：快繁和轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)，外植體在培養(yǎng)基中，20～30天長(zhǎng)成3～5cm，有3～4個(gè)葉片的小苗，除去污染瓶苗，在超凈工作臺(tái)中每苗在剪成2～3個(gè)帶葉片的節(jié)段，在轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基中；
S106：瓶苗繁殖2～3代再將小苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中，MS培養(yǎng)基除去生長(zhǎng)素和激動(dòng)素，另加0.5％的活性炭在上述環(huán)境中加強(qiáng)光照促進(jìn)壯苗生長(zhǎng)。
本發(fā)明實(shí)施例提供的水藤菜組培快繁系統(tǒng)包括：
高壓滅菌鍋：用于培養(yǎng)基、蒸餾水、和各種器具的滅菌消毒，高壓蒸汽滅菌時(shí)，控制的溫度、時(shí)間為121℃、20分鐘。
超凈工作臺(tái)：用于組織培養(yǎng)的無(wú)菌操作。
水浴鍋：用于加熱生化試劑時(shí)，溶解瓊脂、化學(xué)藥品等。
燒杯：用于存放、溶解化學(xué)試劑等，規(guī)格為50mL、100mL。
容量瓶：用于標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制，規(guī)格為100mL、1000mL。
量筒：用于量取一定體積的溶液，規(guī)格為50mL、100mL。
刻度移液管：用于量取一定體積的溶液，規(guī)格為1mL、5mL。
玻璃棒：用于化學(xué)試劑溶解攪拌。
組培瓶：用于植物外植體的無(wú)菌培養(yǎng)，由瓶體、瓶蓋、調(diào)節(jié)封蓋、透氣簾組成。
分析天平：用于稱(chēng)量化學(xué)試劑，稱(chēng)量精度為0.001克。
酒精燈：用于金屬接種工具的高溫滅菌。
鑷子：用于植物外植體的轉(zhuǎn)移、接種。
剪刀：用于剪取植物外植體材料和接種。
酸度計(jì)：用于植物組織培養(yǎng)基pH值的調(diào)整。
本發(fā)明實(shí)施例提供的水藤菜組培快繁方法包括以下步驟：
1、試驗(yàn)材料選?。哼x擇健康、無(wú)病害病含有節(jié)間的莖段1～2cm。
2、預(yù)處理：田間取回的藤菜先用自來(lái)水清洗，再取帶有葉芽的莖段，進(jìn)行消毒處理。
3、外植體滅菌：外植體用75％酒精浸10秒，0.2％升汞浸5～8分鐘，50倍“84”消毒液浸6～8分鐘。0.1％升汞浸5分鐘，50倍“84”消毒液，浸6～8分鐘。●益培隆消毒液0.03％(浸10～20分鐘)。
4、外植體接種：每用一次消毒液后立即用無(wú)菌水清洗2～3次，然后在超凈工作臺(tái)上修剪莖段，每節(jié)代葉芽接入MS培養(yǎng)基中(6BA0.5，NAA0.2)，每個(gè)培養(yǎng)皿接4～12個(gè)外植體。
5、快繁和轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)
外植體在培養(yǎng)基中，20～30天長(zhǎng)成3～5cm，有3～4個(gè)葉片的小苗，除去污染瓶苗，在超凈工作臺(tái)中每苗在剪成2～3個(gè)帶葉片的節(jié)段，在轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基中(ms培養(yǎng)基除去NAA)。
無(wú)菌苗的子葉展開(kāi)后，剪去1/3的胚根，在插入新的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。以上瓶苗在25～28度，每天光照12小時(shí)，光照強(qiáng)度3000到4000勒克斯的環(huán)境條件下進(jìn)行培養(yǎng)。
6、生根煉苗及移栽。
瓶苗擴(kuò)繁到一定數(shù)量后(最好繁殖2～3代)再將小苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中(MS培養(yǎng)基除去生長(zhǎng)素和激動(dòng)素，另加0.5％的活性炭在上述環(huán)境中加強(qiáng)光照促進(jìn)壯苗生長(zhǎng)。
當(dāng)瓶苗生根后，應(yīng)作適應(yīng)性煉苗，把瓶苗放在準(zhǔn)備移栽的地方，1～2天后再逐步打開(kāi)瓶蓋。煉苗后瓶?jī)?nèi)注水取出小苗在放入0.5％的多菌靈溶液中，仔細(xì)清洗根部的培養(yǎng)基，取出晾干后栽入基質(zhì)的穴盤(pán)中，同時(shí)澆透水，在保濕，保溫，通風(fēng)透光的環(huán)境中生長(zhǎng)經(jīng)過(guò)10～15天后移栽到大田。
以上所述僅是對(duì)本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并非對(duì)本發(fā)明作任何形式上的限制，凡是依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對(duì)以上實(shí)施例所做的任何簡(jiǎn)單修改，等同變化與修飾，均屬于本發(fā)明技術(shù)方案的范圍內(nèi)。