本發(fā)明涉及一種魚的人工繁育方法，特別涉及一種岱衢族大黃魚的人工繁育方法。
背景技術(shù)：
大黃魚Pseudosciaena crocea屬鱸形目、石首魚科、黃魚屬，為近海集群暖溫性洄游魚類，主要分布于我國黃海南部、東海、南海等海域，是我國傳統(tǒng)的“四大海產(chǎn)魚類”之一，具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。20世紀(jì)70年代前，大黃魚在東海區(qū)最高年產(chǎn)量達(dá)2x105t，但由于過度捕撈，白然資源遭到嚴(yán)重破壞，產(chǎn)量急劇下降，到80年代末90年代初，大黃魚年產(chǎn)量僅2000t，遠(yuǎn)滿足不了市場需求。為保護(hù)大黃魚資源，福建自80年代起率先開展了大黃魚人工育苗研究，到90年代，福建、浙江、江蘇等地的人工育苗均取得成功，養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)逐漸發(fā)展起來。隨著大黃魚育苗、網(wǎng)箱養(yǎng)殖、增殖放流、活魚運(yùn)輸?shù)雀黜?xiàng)技術(shù)的日趨成熟與完善，業(yè)已成為海水養(yǎng)殖中的重要品種之一。岱衢族大黃魚因其主要分布于舟山漁場的岱衢洋而得名，具有生長速度快、適應(yīng)性強(qiáng)、個體大、體色及肉質(zhì)品味具佳等特點(diǎn)，深受消費(fèi)者青睞，其商品價(jià)值高，適宜在浙江沿海養(yǎng)殖。大黃魚也是浙江省海水養(yǎng)殖魚類中主導(dǎo)品種之一，2011年，我省已擁有育苗廠多家，網(wǎng)箱養(yǎng)殖6萬余箱，產(chǎn)量達(dá)5 000t，產(chǎn)值達(dá)13.8億元，占全國大黃魚總產(chǎn)值的30％。
目前，國內(nèi)外海水魚類的人工育苗主要使用輪蟲(Rotifer)、鹵蟲(Anemia)、橈足類(Copepod)等生物餌料。生物餌料在改善魚類苗種培育效果方面起到了重要作用，但其存在營養(yǎng)成分不均衡，易攜帶致病菌，供應(yīng)不穩(wěn)定等缺點(diǎn)。在傳統(tǒng)的大黃魚苗種繁育過程中通常需要使用大量的橈足類，但浙江海域受地理環(huán)境的制約，橈足類很難在自然海域中獲取，通常需要大量的在外地(江蘇、福建等地)購買，這直接導(dǎo)致了大黃魚育苗的不穩(wěn)定性及不確定性，極大的制約了我省大黃魚人工繁育的發(fā)展。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種岱衢族大黃魚的人工繁育方法，在大黃魚稚魚期通過設(shè)計(jì)的人工配合飼料與橈足類混合投喂，減少單純投喂橈足類存在的缺陷，提高大黃魚育苗的穩(wěn)定性，提高大黃魚稚魚的成活率，促進(jìn)大黃魚稚魚生長。
本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：
一種岱衢族大黃魚的人工繁育方法，包括親魚培育、催產(chǎn)、孵化及魚苗培育步驟，所述魚苗培育步驟包括以下階段：
(1)仔魚期：
仔魚孵出3天后開口，開始投喂經(jīng)小球藻及營養(yǎng)強(qiáng)化劑強(qiáng)化的輪蟲，密度為5～15個/mL，分早中晚3次投喂；
第8天開始加投經(jīng)營養(yǎng)強(qiáng)化劑強(qiáng)化的鹵蟲無節(jié)幼體，密度為0.5～1個/mL，分早中晚3次投喂；
第11天起停喂輪蟲，主要投喂鹵蟲無節(jié)幼體：每隔6h投喂一次，24h投喂，密度為0.5～1個/mL；并開始加投撓足類：每隔4h投喂一次，24h投喂，每次均為飽食投喂；
第15天起停喂鹵蟲無節(jié)幼體，投喂撓足類：每隔2h投喂一次，24h投喂，每次均為飽食投喂；
(2)稚魚期：
第20天起開始進(jìn)行人工配合飼料與橈足類混合投喂，人工配合飼料與橈足類24h內(nèi)交替投喂，每3h交替投喂1次，每次均為飽食投喂，投喂直至出苗；
魚苗培育的培養(yǎng)條件為：保持連續(xù)充氣，使水中溶解氧維持在5mg/L以上；控制水溫22～24℃、鹽度22～24，pH7.9～8.3，培養(yǎng)期間全程封閉遮光并開燈，光照控制在1000～1200lx；小于15日齡魚苗，日換水量30％～50％，15日齡以上的魚苗，日換水量50％～100％。
本發(fā)明針對岱衢族大黃魚的生理生長特性，開發(fā)了岱衢族大黃魚的人工繁育方法，在親魚培育、催產(chǎn)、孵化及魚苗培育均進(jìn)行了探索，重點(diǎn)改進(jìn)了魚苗培育步驟，在大黃魚稚魚期通過設(shè)計(jì)的特定配方的人工配合飼料與橈足類混合投喂，可以大大減少喂橈足類的投喂量，從而降低育苗當(dāng)中對橈足類的依賴，提高大黃魚育苗的穩(wěn)定性，此外相對于單純投喂還能人工配合飼料、橈足類，還能提高大黃魚稚魚的成活率，促進(jìn)大黃魚稚魚生長。
人工配合飼料與橈足類24h內(nèi)交替投喂，每3h交替投喂1次即每隔3h投喂，一次投喂人工配合飼料那么下次投喂橈足類，依次交替。
作為優(yōu)選，仔魚期培養(yǎng)密度控制在4.0×104～6.0×104尾/m3。
作為優(yōu)選，稚魚期起始的培養(yǎng)密度控制在1.5×104～3.0×104尾/m3，當(dāng)魚體長度達(dá)到2.5cm以上時(shí)，培養(yǎng)密度控制在1.0×104～2.0×104尾/m3。
作為優(yōu)選，所述人工配合飼料按重量份計(jì)由以下原料組分混合制成：魚粉50份，玉米粉10-15份，蝦粉15-20份，發(fā)酵豆粕10-15份，蠅蛆粉10-15份，小球藻粉8-12份，馬齒莧粉3-5份，魚油1-3份，海帶多糖3-5份，氯化膽堿2-3份，磷酸二氫鈣2-4份，檸檬酸0.01-0.03份，月桂酸0.03-0.05份，麥芽糊精0.5-1份，羥甲基丙基纖維素3份，維生素預(yù)混料1份，礦物質(zhì)預(yù)混料0.5份。本發(fā)明的人工配合飼料專為大黃魚稚魚期設(shè)計(jì)，營養(yǎng)豐富，馬齒莧粉防止腸道疾病，改善腸道功能；海帶多糖提高免疫力；小球藻粉及蠅蛆粉營養(yǎng)豐富，強(qiáng)化營養(yǎng)；檸檬酸、月桂酸提供酸洗環(huán)境，改善胃部消化環(huán)境，同時(shí)檸檬酸能抑制革蘭氏陰性菌，而月桂酸能抑制革蘭氏陽性菌，抑菌效果好，范圍廣，能防止飼料腐敗，提高魚體抗病能力；麥芽糊精能防止飼料加工時(shí)結(jié)團(tuán)或快，使得飼料在水中溶解均勻；羥甲基丙基纖維素能使得飼料投喂后水化迅速，方便大黃魚稚魚進(jìn)食，提高營養(yǎng)攝入，減少對飼料的抵抗。
作為優(yōu)選，所述維生素預(yù)混料的載體為脫脂米糠，每千克維生素預(yù)混料中含有以下維生素成分：VA 10mg，VC 50mg，VD 5mg，VK 10mg，VB1 8mg，VB2 20mg，VB6 50mg，VB12 5mg，VE200mg泛酸鈣20mg，葉酸5mg，煙酰胺200mg，生物素8mg，肌醇250mg。
作為優(yōu)選，所述礦物質(zhì)預(yù)混料的載體為沸石粉，每千克礦物質(zhì)預(yù)混料中含有以下礦物質(zhì)成分：硫酸銅5mg，硫酸錳20mg，氯化鈷50mg，亞硒酸鈉80mg，硫酸鎂500mg，硫酸亞鐵300mg，硫酸鋅300mg。
作為優(yōu)選，所述親魚培育步驟具體為：親魚為岱衢族大黃魚性成熟2-3齡魚，雌魚750g/尾以上、雄魚500g/尾以上；在室內(nèi)培育池中培育，雌、雄親魚配比為1.5:1～2:1，密度5-10尾/m2；在催產(chǎn)前1～2個月進(jìn)行強(qiáng)化促熟培育：水溫20～22℃，鹽度21～25，pH 7.8～8.3，光照500～1000lx，日投餌按魚體重的2％～5％進(jìn)行投喂，分上下午兩次投喂，吸污兩次，日換水量80％～100％。
作為優(yōu)選，所述催產(chǎn)步驟為：向親魚注射促黃體釋放激素類似物L(fēng)RH-A3，雌魚劑量為1～2μg/kg，雄魚劑量為0.5～1μg/kg；在水溫20～22℃條件下，催產(chǎn)效應(yīng)時(shí)間為36～48h。
作為優(yōu)選，所述孵化步驟為：親魚產(chǎn)卵后及時(shí)收集受精卵，孵化之前將好卵與壞卵分離，將收集的好卵置于育苗池中，控制水溫23℃，鹽度22～24，pH8.0～8.3、光照500～1000lx，經(jīng)24h左右即可孵化出膜。
作為優(yōu)選，好卵與壞卵的分辨方法為：讓受精卵在水中靜置15分鐘，上浮卵為好卵，沉底的為壞卵。
本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明能提高大黃魚育苗的穩(wěn)定性，提高大黃魚稚魚的成活率，促進(jìn)大黃魚稚魚生長。
具體實(shí)施方式
下面通過具體實(shí)施例，對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的具體說明。
本發(fā)明中，若非特指，所采用的原料和設(shè)備等均可從市場購得或是本領(lǐng)域常用的。下述實(shí)施例中的方法，如無特別說明，均為本領(lǐng)域的常規(guī)方法。
實(shí)施例：
一種岱衢族大黃魚的人工繁育方法，步驟如下：
1、親魚培育
親魚為寧波岱衢族大黃魚良種場購買的性成熟2-3齡魚，雌魚750g/尾以上、雄魚500g/尾以上。在室內(nèi)培育池中培育，雌、雄親魚配比為1.5:1～2:1，密度5-10尾/m2。在催產(chǎn)前1～2個月進(jìn)行強(qiáng)化促熟培育，水溫20～22℃，鹽度21～25，pH 7.8～8.3，光照500～1000lx，日投餌一般按魚體重的2％～5％進(jìn)行投喂，具體看攝食情況，分上下午兩次投喂，吸污兩次，日換水量80％～100％，保持水質(zhì)清新與溶氧充足。
2、催產(chǎn)
親魚經(jīng)過促熟培育后，發(fā)現(xiàn)80％的親魚色澤呈金黃色，腹部飽滿，時(shí)而發(fā)出叫聲，表示親魚即將產(chǎn)卵。挑選腹部膨大而柔軟的雌魚和輕壓魚腹即有精液流出的雄魚，用丁香酚麻醉后，從胸鰭基部注射促黃體釋放激素類似物L(fēng)RH-A3，雌魚劑量為1～2μg/kg，雄魚劑量減半。在水溫20～22℃條件下，催產(chǎn)效應(yīng)時(shí)間約為36～48h。
3、孵化
親魚產(chǎn)卵后及時(shí)收集受精卵，孵化之前應(yīng)將好卵與壞卵分離，即讓其在塑料桶水中靜置15分鐘，上浮卵一般為好卵，沉底的都是壞卵。將收集的好卵置于育苗池中，控制水溫23℃，鹽度22～24，pH8.0～8.3、光照500～1000lx，經(jīng)24h左右即可孵化出膜。
4、魚苗培育
4.1仔魚期：
仔魚孵出3天后開口，開始投喂經(jīng)小球藻及營養(yǎng)強(qiáng)化劑強(qiáng)化的輪蟲，密度為5～15個/mL，分早中晚3次投喂；
第8天開始加投經(jīng)營養(yǎng)強(qiáng)化劑強(qiáng)化的鹵蟲無節(jié)幼體，密度為0.5～1個/mL，分早中晚3次投喂；
第11天起停喂輪蟲，主要投喂鹵蟲無節(jié)幼體：每隔6h投喂一次，24h投喂，密度為0.5～1個/mL；并開始加投撓足類：每隔4h投喂一次，24h投喂，每次均為飽食投喂；
第15天起停喂鹵蟲無節(jié)幼體，投喂撓足類：每隔2h投喂一次，24h投喂，每次均為飽食投喂；
仔魚期培養(yǎng)密度控制在4.0×104～6.0×104尾/m3。
4.2稚魚期：
第20天起開始進(jìn)行人工配合飼料與橈足類混合投喂，人工配合飼料與橈足類24h內(nèi)交替投喂，每3h交替投喂1次，每次均為飽食投喂，投喂直至出苗；稚魚期起始的培養(yǎng)密度控制在1.5×104～3.0×104尾/m3，當(dāng)魚體長度達(dá)到2.5cm以上時(shí)，培養(yǎng)密度控制在1.0×104～2.0×104尾/m3。
4.3日常管理
保持連續(xù)充氣，使水中溶解氧維持在5mg/L以上；控制水溫22～24℃、鹽度22～24，pH7.9～8.3，育苗期間全程封閉遮光并開燈，光照控制在1000lx左右。仔魚培育早期每日往池中加水10～20cm，池水加滿后日換水1次，換水量視水質(zhì)情況而定，小于15日齡魚苗，日換水量30％～50％，15日齡以上的魚苗，日換水量50％～100％。換水前用吸污器除去池底殘餌、死苗、糞渣及雜物。經(jīng)常觀察魚苗的攝食情況，監(jiān)測理化因子，發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)處理。育苗生產(chǎn)過程中使用的海水為砂濾海水，加溫系統(tǒng)為鍋爐加溫。
本發(fā)明人工配合飼料配方1：按重量份計(jì)由以下原料組分混合制成：魚粉50份，玉米粉10份，蝦粉15份，發(fā)酵豆粕15份，蠅蛆粉15份，小球藻粉12份，馬齒莧粉3份，魚油3份，海帶多糖3份，氯化膽堿2份，磷酸二氫鈣4份，檸檬酸0.01份，月桂酸0.05份，麥芽糊精0.5份，羥甲基丙基纖維素3份，維生素預(yù)混料1份，礦物質(zhì)預(yù)混料0.5份。
本發(fā)明人工配合飼料配方2：按重量份計(jì)由以下原料組分混合制成：魚粉50份，玉米粉15份，蝦粉20份，發(fā)酵豆粕10份，蠅蛆粉10份，小球藻粉8份，馬齒莧粉5份，魚油1份，海帶多糖5份，氯化膽堿3份，磷酸二氫鈣2份，檸檬酸0.03份，月桂酸0.03份，麥芽糊精1份，羥甲基丙基纖維素3份，維生素預(yù)混料1份，礦物質(zhì)預(yù)混料0.5份。
本發(fā)明人工配合飼料配方3：按重量份計(jì)由以下原料組分混合制成：魚粉50份，玉米粉12份，蝦粉18份，發(fā)酵豆粕12份，蠅蛆粉12份，小球藻粉10份，馬齒莧粉4份，魚油2份，海帶多糖4份，氯化膽堿2.5份，磷酸二氫鈣3份，檸檬酸0.02份，月桂酸0.04份，麥芽糊精0.8份，羥甲基丙基纖維素3份，維生素預(yù)混料1份，礦物質(zhì)預(yù)混料0.5份。
所述維生素預(yù)混料的載體為脫脂米糠，每千克維生素預(yù)混料中含有以下維生素成分：VA 10mg，VC 50mg，VD 5mg，VK 10mg，VB1 8mg，VB2 20mg，VB6 50mg，VB12 5mg，VE 200mg泛酸鈣20mg，葉酸5mg，煙酰胺200mg，生物素8mg，肌醇250mg。所述礦物質(zhì)預(yù)混料的載體為沸石粉，每千克礦物質(zhì)預(yù)混料中含有以下礦物質(zhì)成分：硫酸銅5mg，硫酸錳20mg，氯化鈷50mg，亞硒酸鈉80mg，硫酸鎂500mg，硫酸亞鐵300mg，硫酸鋅300mg。
2、試驗(yàn)
2.1材料與方法
2.1.1實(shí)驗(yàn)用魚
實(shí)驗(yàn)魚為2015年3月人工繁育苗種，選取體質(zhì)健壯、規(guī)格一致的稚魚用于實(shí)驗(yàn)，體長8mm左右，體重7mg左右。
2.1.2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理
實(shí)驗(yàn)于2015年5月至2015年7月在浙江省海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室西軒基地進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)周期為8周。實(shí)驗(yàn)用養(yǎng)殖容器為有效容積200L(直徑70cm，高70cm)的圓形塑料缸。設(shè)置3個飼料組，其中配合飼料組、冰鮮橈足類組為24h內(nèi)每隔3h投喂1次；另1組混合組為配合飼料與冰鮮橈足類24h內(nèi)交替投喂，每3h交替投喂1次，每次均為飽食投喂。每組3個平行，每個平行組放置大黃魚稚魚300ind。實(shí)驗(yàn)期間水溫24.8～25.2℃，鹽度26～27，pH 7.8～8.1，自然光照，連續(xù)24h充氣，保持水中溶解氧含量5.0mg/L以上。每天吸污2次，100％換水1次。實(shí)驗(yàn)所用配合飼料為本發(fā)明上述配合飼料，所用橈足類為購買的冰鮮餌料。
2.1.3樣品采集與測定
實(shí)驗(yàn)結(jié)束后停飼24h，每缸隨機(jī)取30ind魚測量體質(zhì)量、體長。采用以下公式計(jì)算生長參數(shù)：
成活率(survival ratio，SR，％)＝終末魚數(shù)量/初始魚數(shù)量×100％；
日均增長量(average daily length growth，DLG，mm·d-1)＝(終末魚體長-初始魚體長)/飼養(yǎng)天數(shù)
相對增長率(relative growth rate of body length，RGRL，％)＝(終末魚體長-初始魚體長)/初始魚體長×100％
瞬時(shí)增長率(Instantaneous growth rate，IGR，％)＝(ln終末魚體長-ln初始魚體長)/飼養(yǎng)天數(shù)×100％
特定增長率(specific growth rate，SGR，％)＝(ln終末平均體質(zhì)量-ln初始平均體質(zhì)量)/飼養(yǎng)天數(shù)×100％
絕對增長率(absolute growth rate，AGR，mg·d-1)＝(終末平均體質(zhì)量-初始平均體質(zhì)量)/飼養(yǎng)天數(shù)
每缸隨機(jī)取18ind魚采用組織搗碎機(jī)進(jìn)行勻漿作為全魚樣本，每6ind分別用于測定常規(guī)營養(yǎng)成分、氨基酸及脂肪酸組成，全魚樣品于-20℃保存待用。
水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分采用國標(biāo)方法(GB/T 6435-1986、GB/T6432-1994、GB/T 6433-1994、GB/T6438-1992)測定。
氨基酸的測定采用酸水解法，取樣品0.5g，用6mol/L的鹽酸于110℃下水解22h過濾定容至50mL，取0.5mL真空干燥制作成樣品，使用氨基酸自動分析儀(121MB，USA)測定樣品氨基酸組成。
2.1.4數(shù)據(jù)處理
實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)表示。所有數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行Independent samples T-Test和One-way ANOVA分析，當(dāng)P<0.05時(shí)為顯著差異。
2.2結(jié)果
2.2.1配合飼料與橈足類對大黃魚稚魚生長性能的影響
配合飼料與橈足類對大黃魚稚魚生長性能的影響見表1。結(jié)果顯示，混合組大黃魚稚魚成活率、絕對增長率最高，且與橈足類及配合飼料組均呈顯著性差異(P＜0.05)?；旌辖M日均增長量、相對增長率、瞬時(shí)增長率、特定增長率大于配合飼料組，但無顯著性差異(P＞0.05)；橈足類組稚魚各項(xiàng)生長參數(shù)與混合組、配合飼料組相比均最低，且呈顯著性差異(P＜0.05)。
表1配合飼料與橈足類對大黃魚稚魚生長性能的影響
注：同一行不同字母表示具有顯著差異(P＜0.05)。
2.2.2配合飼料與橈足類對大黃魚稚魚一般營養(yǎng)成分的影響
配合飼料與橈足類對大黃魚稚魚一般營養(yǎng)成分的影響見表2。結(jié)果顯示，橈足類組、混合組及配合飼料組大黃魚稚魚(干重)粗蛋白、粗脂肪、灰分含量接近，相互間無顯著性差異(P＞0.05)。
表2配合飼料與橈足類對大黃魚稚魚一般營養(yǎng)成分的影響(干重)
2.2.3配合飼料與橈足類對大黃魚稚魚氨基酸組成的影響
配合飼料魚橈足類對大黃魚稚魚全魚氨基酸組成的影響見表3。結(jié)果顯示，橈足類組大黃魚稚魚脯氨酸、甘氨酸、胱氨酸、蛋氨酸、酪氨酸、精氨酸含量較高，但與其它兩組無顯著性差異(P＞0.05)?；旌辖M稚魚天冬氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、組氨酸含量較高，但與其它兩組無顯著性差異(P＞0.05)。配合飼料組稚魚各氨基酸含量較低，但與其它兩組無顯著性差異(P＞0.05)。混合組必需氨基酸與總氨基酸含量均最高，配合飼料組最低，但三飼料組之間無顯著性差異(P＞0.05)。
表3配合飼料與橈足類對大黃魚稚魚氨基酸組成的影響
注:ΣEAA為必需氨基酸總和，包括精氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、纈氨酸.ΣTAA為氨基酸總和。
2.3結(jié)論
配合飼料雖然營養(yǎng)成分豐富，較橈足類有一定優(yōu)勢，但在大黃魚稚魚培育期間完全使用配合飼料不能取得最為理想的培育效果，而橈足類與配合飼料混合使用可以提高大黃魚稚魚的成活率，促進(jìn)大黃魚稚魚生長。
以上所述的實(shí)施例只是本發(fā)明的一種較佳的方案，并非對本發(fā)明作任何形式上的限制，在不超出權(quán)利要求所記載的技術(shù)方案的前提下還有其它的變體及改型。