1.煙草抗青枯病抗病性強弱的室內(nèi)苗期接種鑒定方法,其特征在于,包括以下步驟:
步驟一,在煙田種植待鑒定煙草品種、已知抗青枯病品種以及已知感青枯病品種;
步驟二,待煙苗長出真葉時,移栽至室內(nèi),待煙苗成活后,給每株煙苗灌青枯菌懸浮液,接種后置于溫度28-30℃,相對濕度為80%以上的環(huán)境中,誘導(dǎo)發(fā)??;
步驟三,檢測各品種抗青枯病的抗病性強弱。
2.如權(quán)利要求1所述的煙草抗青枯病抗病性強弱的室內(nèi)苗期接種鑒定方法,其特征在于:步驟一中還種植了當(dāng)?shù)乜骨嗫莶∑贩N、當(dāng)?shù)刂锌骨嗫莶∑贩N以及當(dāng)?shù)馗星嗫莶∑贩N。
3.如權(quán)利要求1或2所述的煙草抗青枯病抗病性強弱的室內(nèi)苗期接種鑒定方法,其特征在于:每株煙苗灌15-25mL的青枯菌懸浮液,每毫升青枯菌懸浮液中含有的細菌群落總數(shù)為2.5×108-3.5×108CFU/mL。
4.如權(quán)利要求1或2所述的煙草抗青枯病抗病性強弱的室內(nèi)苗期接種鑒定方法,其特征在于:步驟二中移栽至室內(nèi)的每個品種至少種植5株煙苗,設(shè)置至少3次重復(fù)。
5.如權(quán)利要求1或2所述的煙草抗青枯病抗病性強弱的室內(nèi)苗期接種鑒定方法,其特征在于:所述青枯菌懸浮液的制備方法如下:將4℃下保存于無菌水中的青枯菌,在肉汁培養(yǎng)基平板上劃線,28-30℃下培養(yǎng)22-26h,挑取典型菌落移置于肉汁斜面,27-29℃培養(yǎng)22-26h后移至肉汁斜面,繼續(xù)培養(yǎng)22-26h后用無菌水稀釋,至所需要的接菌濃度。
6.如權(quán)利要求1或2任一所述的煙草抗青枯病抗病性強弱的室內(nèi)苗期接種鑒定方法,其特征在于:步驟三中通過檢測各品種的發(fā)病率和/或病情指數(shù)和/或被害株率和/或有蚜(蟲)株率和/或蚜量指數(shù)和/或平均單株蚜量和/或百株蟲量和/或有卵株率檢測各品種抗青枯病的抗病性強弱。
7.如權(quán)利要求6所述的煙草抗青枯病抗病性強弱的室內(nèi)苗期接種鑒定方法,其特征在于:發(fā)病率=(發(fā)病株數(shù)/調(diào)查總株數(shù))*100%;病情指數(shù)=[Σ(各級病株或葉數(shù)*該病級值)/(調(diào)查總株數(shù)或葉數(shù)*最高級值)]*100;被害株率=(被害株數(shù)/調(diào)查總株數(shù))*100%;有蚜(蟲)株率=[有蚜(蟲)株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)]*100%;蚜量指數(shù)=[Σ(各級葉數(shù)*該級別值)/(調(diào)查總株數(shù)或葉數(shù)*最高級值)]*100;平均單株蚜量=總蚜量/總株數(shù);百株蟲量=(總蟲量/總株數(shù))*100;有卵株率=(有卵株數(shù)/調(diào)查總株數(shù))*100%;青枯病病害嚴重度分級為:0級:全株無??;1級:莖部偶有褪綠斑,或病側(cè)二分之一以下葉片凋萎;3級:莖部有黑色條斑,但不超過莖高二分之一,或病側(cè)二分之一至三分之二葉片凋萎;5級:莖部黑色條斑超過莖高二分之一,但未到達莖頂部,或病側(cè)三分之二以上葉片凋萎;7級:莖部黑色條斑到底莖頂部,或病株葉片全部凋萎;9級:病株基本枯死。
8.如權(quán)利要求6所述的煙草抗青枯病抗病性強弱的室內(nèi)苗期接種鑒定方法,其特征在于:步驟三中接種后7d、10d、15d、21d、30d進行調(diào)查,每次均調(diào)查各品種全部植株。