奇異核桃烏拉克組培苗瓶內(nèi)的生根方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種奇異核桃烏拉克組培苗瓶內(nèi)的生根方法，采用到繼代周期的健康奇異核桃烏拉克組培苗作為生根材料，將其經(jīng)過暗培養(yǎng)處理，然后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基進行光培養(yǎng)和暗培養(yǎng)交替進行的生根培養(yǎng)，20-24天后即可得出瓶種植的組培生根苗，其生根率達65-75％，大棚成活率達65％-85％。本發(fā)明所提供的奇異核桃烏拉克組培苗瓶內(nèi)的生根方法，不受季節(jié)等因素的影響，為其工廠化生產(chǎn)提供理論依據(jù)和技術(shù)支撐，并能高效、快速提供均一穩(wěn)定的種苗，加速良種推廣速度。本發(fā)明適用于奇異核桃烏拉克組培苗瓶內(nèi)的生根培育。
【專利說明】奇異核桃烏拉克組培苗瓶內(nèi)的生根方法
【技術(shù)領域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物培植領域，涉及一種植物生根方法，具體涉及一種奇異核桃烏拉 克組培苗瓶內(nèi)的生根方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 核桃是一種難于生根的經(jīng)濟林樹種，不同核桃品種生根特性有顯著差異。據(jù)美 國加州大學Gale McGranahan 2004年報道，在實驗室所采用的3個核桃主栽品種圣冷特 (Sunlan)、強特勒（Chandler)、維納（Vina)中，生根情況差異很大，生長勢強，樹姿直立的 品種圣冷特最易生根，生根率達到94% ;強特勒生根能力處于中水平，達到55% ;維納則是 最難生根的品種，生根率只有27%。該研究也證實核桃品種或基因型是決定核桃生試管苗 生根的關鍵因素。
[0003] "核桃試管苗生根的研究進展"李春燕等，《北方園藝》，2013(01) :190-193頁中公 開了核桃品種不同，基因型不同，其生根能力或生根潛能的表達也存在較大差異，表現(xiàn)在不 同樹種和品種個體間發(fā)生不定根的能力差異懸殊。
[0004] "IBA和暗處理對核桃組培苗生根的影響"李春燕等，《山西林業(yè)科技》，2011年12 月，第40卷第4期，30-31頁，以"金博香6號"核桃組培苗為試材，探討了 IBA濃度和暗處 理天數(shù)對核桃組培苗生根的影響，在其最佳條件下，生根率可達65. 56%。并且指出：不同 生長素對核桃生根誘導效果不同。不定根生產(chǎn)過程不僅取決于內(nèi)源生長素的含量，還涉及 到激素間的平衡。
[0005] "鐵核桃離體培養(yǎng)與快速繁殖"王沙沙等，《植物生理學報》，2014, 50 (4)，527-537 頁，公開了以優(yōu)良單株"納雍-1"的單芽莖段為外植體，建立了鐵核桃（Juglans sigillata) 離體培養(yǎng)與快速繁殖的體系，其最高生根率為71. 73%，
[0006] 而奇異核桃（Juglans hindsii XJ. regia)屬于胡桃科（Juglandales)胡桃屬 (Juglans)，系美國北加州黑核桃與核桃的雜交種，其中父本為核桃，母本為北加州黑核桃。 該樹種烏拉克Vlach是從奇異核桃中選出的優(yōu)良株系，是一個核桃站木品種，于2010年經(jīng) 國內(nèi)著名核桃專家奚聲珂教授從美國加州引進，其具有明顯的雜種優(yōu)勢，明顯優(yōu)于現(xiàn)有的 核桃砧木，生長勢好，具有抗線蟲、疫霉屬病菌，根瘤菌，蜜環(huán)菌等引起的病害。適生范圍廣， 能在pH > 5的土上正常生長，pH = 9的鈣質(zhì)土上正常生長。該品種具有一定的抗寒性，適 宜生長在雨潤豐富地區(qū)，雨量> 500mm的區(qū)域均能正常生長。由于其長勢旺，特別適合作為 早實核桃的砧木，增強樹勢。用其做砧木，一般6年即可達初盛果期。同時，該樹種為落葉 硬闊喬木，生長勢強，樹干通直，是城鎮(zhèn)綠化和農(nóng)田林綠化的優(yōu)良材料，與黑核桃相比，其材 質(zhì)略淺，介于黑核桃與核桃之間，可作為硬闊材使用，目前國內(nèi)此類木材多屬進口。
[0007] "奇異核桃快繁技術(shù)研究"裘曉梅等，《內(nèi)蒙古林業(yè)科技》，第39卷，第2期，52-54 頁，公開了以奇異核桃?guī)б秆壳o段為外植體進行試管繁殖，腋芽萌生培養(yǎng)基和分化、繼代 培養(yǎng)均為DKW+IBA 1.0mg/L。使用"二步法"誘導生根效果較好，最適誘導生根培養(yǎng)基為 DKW+IBA 2. 5mg/L，生根培養(yǎng)基為無植物激素的DKW，生根率可達到65%。由于奇異核桃屬 于雜交種，每一顆種子培養(yǎng)的出的奇異核桃苗均屬于不同的基因型。
[0008] 而目前國內(nèi)市場上奇異核桃均為接穗，株系來源混亂，尚無無性系植根苗。奇異核 桃（vlach)枝條扦插生根率低，植物組織培養(yǎng)作為無性繁殖方式，成為將該優(yōu)良無性系進 行繁殖的必然方式，但由于其生根難的問題，目前尚未形成產(chǎn)業(yè)化。目前苗木市場上核桃砧 木品種繁多，良莠不齊，且多為種子播種而得，后代存在性狀分離的問題，優(yōu)良性狀難以穩(wěn) 定遺傳，現(xiàn)有研究中雖有核桃組培快繁的報道，但由于其難生根，無法形成工廠化生產(chǎn)。因 此，研究一種奇異核桃（vlach)的生根方法，并將其推廣將極大提高林業(yè)產(chǎn)業(yè)的經(jīng)濟效益， 具有重要的意義。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0009] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題，是提供一種奇異核桃烏拉克組培苗瓶內(nèi)的生根方法， 該生根方法，不受季節(jié)等因素的影響，為其工廠化生產(chǎn)提供理論依據(jù)和技術(shù)支撐，并能高 效、快速提供均一穩(wěn)定的種苗，加速良種推廣速度，并且生根率可達到65-75 %，大棚成活率 達 65-85%。
[0010] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：
[0011] 一種奇異核桃烏拉克組培苗瓶內(nèi)的生根方法，它包括以下步驟：
[0012] (1)選取植株高度為2-5cm、繼代周期為18-23天、葉色為綠色或墨綠色的奇異核 桃組培苗作為生根材料，切除基部葉片、腋芽至基部留出1-2厘米的莖段，得到生根材料a ;
[0013] (2)將生根材料a中的小苗基部插入生根I培養(yǎng)基中進行暗培養(yǎng)，暗培養(yǎng)時間為 48-72小時，溫度為20-28°C，得到生根材料b ;
[0014] (3)將生根材料b轉(zhuǎn)入生根II培養(yǎng)基中，光照和暗培養(yǎng)交替進行，光照培養(yǎng)條件為 13小時光照，光照強度2000-3000勒克斯，溫度為23-27°C ;暗培養(yǎng)條件為暗培養(yǎng)11小時， 溫度為19_23°C，得到生根材料c ;其中，生根II培養(yǎng)基是體積比為1:1的營養(yǎng)液：基質(zhì)；
[0015] (4)將生根材料C培養(yǎng)20-24天，制得奇異核桃烏拉克組培生根苗。
[0016] 作為本發(fā)明的一種限定，所述步驟（2)中的生根I培養(yǎng)基為：以1/4-1份核桃專用 培養(yǎng)基DKW為基礎培養(yǎng)基，添加4-16mg/L吲哚丁酸IBA、30-60g/L蔗糖和4-8g/L瓊脂，pH 為 5. 5-6. 0。
[0017] 作為本發(fā)明的另一種限定，所述步驟（3)中的營養(yǎng)液為以1/4-1份核桃專用培養(yǎng) 基DKW為基礎培養(yǎng)基，添加0? 01-0. 03mg/L吲哚丁酸IBA和20-50g/L蔗糖，pH為5. 5-6. 0 ;
[0018] 本發(fā)明還有一種限定，所述基質(zhì)為蛭石或體積比為1:1的草炭：珍珠巖或體積比 為1:1:1的蛭石：草炭：珍珠巖中的一種。
[0019] 本發(fā)明所提供的生根方法所對應的生根效果是鑒于生根方法中所涉及所有技術(shù) 參數(shù)組合后的效果，單獨采用其中的一種或幾種均不能夠達到相應的技術(shù)效果，將其中的 一種或幾種技術(shù)參數(shù)經(jīng)過簡單替換后也不能達到相應的技術(shù)效果。
[0020] 由于采用了上述的技術(shù)方案，本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，所取得的技術(shù)進步在于：
[0021] 本發(fā)明采用奇異核桃烏拉克組培苗瓶內(nèi)的生根方法，是植物組織培養(yǎng)進入工廠化 生產(chǎn)不可或缺的一步。其中，將到繼代周期的健康奇異核桃烏拉克組培苗作為生根材料，將 其經(jīng)過暗培養(yǎng)處理，然后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基光培養(yǎng)和暗培養(yǎng)交替進行生根培養(yǎng)，20-24天后即 可得出瓶種植的組培生根苗，其生根率達65-75%，大棚成活率達65-85%。本發(fā)明所提供 的奇異核桃烏拉克組培苗瓶內(nèi)的生根方法，不受季節(jié)等因素的影響，為其工廠化生產(chǎn)提供 理論依據(jù)和技術(shù)支撐，并能高效、快速提供均一穩(wěn)定的種苗，加速良種推廣速度。
[0022] 本發(fā)明適用于奇異核桃烏拉克組培苗瓶內(nèi)的生根培育。
[0023] 本發(fā)明下面將結(jié)合具體實施例作進一步詳細說明。
【具體實施方式】
[0024] 實施例1 一種奇異核桃烏拉克組培苗瓶內(nèi)的生根方法
[0025] -種奇異核桃烏拉克組培苗瓶內(nèi)的生根方法，它包括以下步驟：
[0026] (1)選取植株高度為3cm、繼代周期為20天、葉色為綠色或墨綠色的奇異核桃組培 苗（來自于中國林科院奚聲珂教授實驗室）作為生根材料，切除基部葉片、腋芽至基部留出 1厘米的莖段，得到生根材料a ;
[0027] (2)將生根材料a中的小苗基部插入生根I培養(yǎng)基中進行暗培養(yǎng)，暗培養(yǎng)時間為 36小時，溫度為24°C，得到生根材料b ;
[0028] 其中，生根I培養(yǎng)基為：以1份核桃專用培養(yǎng)基DKW為基礎培養(yǎng)基，添加8mg/L吲 哚丁酸IBA、50g/L蔗糖和6g/L瓊脂，pH為5. 5。
[0029] (3)將生根材料b轉(zhuǎn)入生根II培養(yǎng)基中，光照和暗培養(yǎng)交替進行，光照培養(yǎng)條件 為13小時光照，光照強度2500勒克斯，溫度為25°C ;暗培養(yǎng)條件為暗培養(yǎng)11小時，溫度為 21 °C，得到生根材料c ;其中，生根II培養(yǎng)基是體積比為1:1的營養(yǎng)液：基質(zhì)；
[0030] 其中，營養(yǎng)液為以1/4-1份核桃專用培養(yǎng)基DKW為基礎培養(yǎng)基，添加0. 01mg/L吲 哚丁酸IBA和30g/L蔗糖，pH為5. 5 ;
[0031] 所述基質(zhì)為蛭石或體積比為1:1的草炭：珍珠巖或體積比為1:1:1的蛭石：草炭： 珍珠巖中的一種。
[0032] (4)將生根材料c培養(yǎng)24天，制得奇異核桃烏拉克組培生根苗，生根率為75%，大 棚生長率為85%。
[0033] 實施例2-6奇異核桃烏拉克組培苗瓶內(nèi)的生根方法
[0034] 實施例2-6分別為一種奇異核桃烏拉克組培苗瓶內(nèi)的生根方法，其與實施例1相 似，不同之處僅在于方法中所涉及的技術(shù)參數(shù)不同，具體參見下表：
[0035]
【權(quán)利要求】
1. 一種奇異核桃烏拉克組培苗瓶內(nèi)的生根方法，其特征在于它包括以下步驟： (1) 選取植株高度為2-5cm、繼代周期為18-23天、葉色為綠色或墨綠色的奇異核桃組 培苗作為生根材料，切除基部葉片、腋芽至基部留出1-2厘米的莖段，得到生根材料a ; (2) 將生根材料a中的小苗基部插入生根I培養(yǎng)基中進行暗培養(yǎng)，暗培養(yǎng)時間為48-72 小時，溫度為20-28°C，得到生根材料b ; (3) 將生根材料b轉(zhuǎn)入生根II培養(yǎng)基中，光照和暗培養(yǎng)交替進行，光照培養(yǎng)條件為13小 時光照，光照強度2000-3000勒克斯，溫度為23-27°C ;暗培養(yǎng)條件為暗培養(yǎng)11小時，溫度 為19-23°C，得到生根材料c ;其中，生根II培養(yǎng)基是體積比為1:1的營養(yǎng)液：基質(zhì)； (4) 將生根材料c培養(yǎng)20-24天，制得奇異核桃烏拉克組培生根苗。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的奇異核桃烏拉克組培苗瓶內(nèi)的生根方法，其特征在于所述步 驟⑵中的生根I培養(yǎng)基為：以1/4-1份核桃專用培養(yǎng)基DKW為基礎培養(yǎng)基，添加4-16mg/ L 吲哚丁酸 IBA、30-60g/L 蔗糖和 4-8g/L 瓊脂，pH 為 5. 5-6. 0。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的奇異核桃烏拉克組培苗瓶內(nèi)的生根方法，其特征在于：所述 步驟（3)中的營養(yǎng)液為以1/4-1份核桃專用培養(yǎng)基DKW為基礎培養(yǎng)基，添加0. 01-0. 03mg/ L 吲哚丁酸 IBA 和 20-50g/L 蔗糖，pH 為 5. 5-6. 0。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的奇異核桃烏拉克組培苗瓶內(nèi)的生根方法，其特征在于：所述 基質(zhì)為蛭石或體積比為1:1的草炭：珍珠巖或體積比為1:1:1的蛭石：草炭：珍珠巖中的一 種。
【文檔編號】A01H4/00GK104381132SQ201410606374
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2014年10月31日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月31日
【發(fā)明者】陳麗閩, 奚聲珂, 林大為, 張承妹, 董舉文 申請人:上海杉一植物科技有限公司