一種花臉香蘑菌絲體的人工培養(yǎng)方法及其培養(yǎng)基的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種花臉香蘑菌絲體的人工培養(yǎng)方法及其培養(yǎng)基，培養(yǎng)基配方組分按重量份為：松針30-50份、蛋白胨5-12份、酵母浸粉6-12份、葡萄糖2.5-10份、瓊脂15-20份；其人工培養(yǎng)方法為：將松針清洗放入水中煮沸20-30分鐘，過濾取汁；將松汁定容至1000ml，然后依次加入蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、瓊脂，煮沸混勻；將配制好的培養(yǎng)基分裝于試管中，蓋上膠塞，在120-130℃條件下滅菌20-30分鐘；后取出培養(yǎng)基，自然冷卻至20℃-30℃，制成斜面培養(yǎng)基，在無菌條件下，接入經(jīng)過純化的花臉香蘑菌種；將接好種的培養(yǎng)基置于恒溫培養(yǎng)箱里，20-30℃培養(yǎng)5-10天，直至菌絲長滿試管后冷藏，本發(fā)明操作簡單，縮短培養(yǎng)周期短，無污染無廢棄物，菌絲體產(chǎn)量高。
【專利說明】一種花臉香蘑菌絲體的人工培養(yǎng)方法及其培養(yǎng)基
[0001]【技術(shù)領(lǐng)域】:
本發(fā)明涉及一種花臉香蘑菌絲體的人工培養(yǎng)方法及其培養(yǎng)基，屬于屬于生藥學(xué)【技術(shù)領(lǐng)域】。
[0002]【背景技術(shù)】:
花臉香蘑屬于真菌界Fungi,擔(dān)子菌門Basidiomycota,傘菌綱Agaricomycetes、傘菌目Agaricales、口蘑科Tricholomataceae、香蘑屬Zepisia的大型真菌。其鮮嫩甜美，香味濃郁，口感極好，素有“一家食其味，十家聞其香”的美譽(yù)。在歐洲，花臉香蘑的受歡迎程度能夠與松茸和牛肝菌齊名，在法國被視為上等的食材，具有很高的食用價值。
[0003]此外，花臉香蘑不僅味道鮮美，而且含有許多人體必需的維生素和氨基酸以及豐富的蛋白質(zhì)，例如蘇氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺、絲氨酸、谷氨酸、纈氨酸、亮氨酸、天冬酰胺酸、天門冬氨酸和甘氨酸[8]。此外花臉香蘑的子實(shí)體還含有甘露醇、阿拉伯糖醇、葡萄糖、甘油、果糖和海藻糖，其中海藻糖的含量是最高的。
[0004]在藥用價值方面，據(jù)元朝的《日用草本》和清代黃官繡的《本草術(shù)經(jīng)》記載，長期食用花臉香蘑能夠有效地防止血管硬化，可以治療肝硬化、糖尿病、腎臟病、膽結(jié)石等。到目前為止，國外關(guān)于花臉香蘑的藥用價值的研究主要還是集中在它的抗氧化活性和抗菌活性兩方面上。花臉香蘑的子實(shí)體還含有豐富的維生素BI，能夠調(diào)節(jié)生物體正常的糖代謝，促進(jìn)神經(jīng)傳導(dǎo)，對預(yù)防腳氣有很好的效果?；樝隳⒆訉?shí)體的熱水提取物具有顯著的抗癌活性，其藥理試驗(yàn)證明花臉香蘑子實(shí)體提取物對小白鼠艾氏瘤和肉瘤S180的抑制率分別為100%和90%。而子實(shí)體煎煮的汁能夠幫助治療膿腫、砂眼和傷口。
[0005]近年來，花臉香蘑逐漸被世人所認(rèn)識了解，對它的市場需求不斷增加，從而導(dǎo)致野生資源逐年減少，很難再滿足市場的需求，對花臉香蘑進(jìn)行人工馴化栽培勢在必行，花臉香蘑菌絲體培養(yǎng)過程中生長速度慢，菌絲稀疏，不健壯，是制約花臉香蘑人工馴化栽培的一個技術(shù)難題。目前，香蘑類菌絲體的人工培養(yǎng)大都采用馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA );馬鈴薯綜合培養(yǎng)基(CPDA);麩皮葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(麩皮50-70 g、葡萄糖20 g、瓊脂18-20g);玉米粉綜合培養(yǎng)基(玉米粉20-30 g、葡萄糖20 g、磷酸二氫鉀2 g、硫酸鎂0.5 g、瓊脂18-20 g);堆肥浸出液培養(yǎng)基【堆肥(干)100 g、葡萄糖20 g、瓊脂18-20 g】等，這些培養(yǎng)基用于花臉香蘑菌絲培養(yǎng)過程中，生長速度慢，菌絲末端產(chǎn)生分支菌絲較多，稀疏。
[0006]
【發(fā)明內(nèi)容】
:
本發(fā)明的目的在于克服上述已有技術(shù)的不足而提供一種操作簡單，縮短培養(yǎng)周期短，無污染無廢棄物，菌絲體產(chǎn)量高的花臉香蘑菌絲體的人工培養(yǎng)方法及其培養(yǎng)基。
[0007]本發(fā)明的目的可以通過如下措施來達(dá)到:一種用于培養(yǎng)花臉香蘑菌絲體的培養(yǎng)基，其特征在于其配方組分按重量份為:松針30-50份、蛋白胨5-12份、酵母浸粉6-12份、葡萄糖2.5-10份、瓊脂:15-20份。
[0008]為了進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，其配方組分按重量份為:松針36份、蛋白胨8份、酵母浸粉6份、葡萄糖4份、瓊脂:18份。
[0009]一種花臉香蘑菌絲體的人工培養(yǎng)方法，其特征在于具體工藝步驟為:(1) 松針前處理:
將收集到的松針進(jìn)行清洗,放入1000ml水中，煮沸20-30分鐘，過濾取汁；
(2)培養(yǎng)基制備:
將松汁定容至1000ml，然后依次加入蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、瓊脂，煮沸混勻，然后進(jìn)行分裝；
(3)培養(yǎng)基分裝，滅菌:
將配制好的培養(yǎng)基分裝于試管中，蓋上膠塞，在120-130°C條件下滅菌20-30分鐘；
(4)冷卻，接種:
滅完菌后取出培養(yǎng)基，自然冷卻至20°C _30°C，制成斜面培養(yǎng)基，在無菌條件下，接入經(jīng)過純化的花臉香蘑菌種；
(5)培養(yǎng):
將接好種的培養(yǎng)基置于恒溫培養(yǎng)箱里，20-30°C培養(yǎng)5-10天，直至菌絲長滿試管；
(6)菌種保藏:將培養(yǎng)好的菌種放于4°C的冰箱中進(jìn)行保藏。
[0010]本發(fā)明同已有技術(shù)相比可產(chǎn)生如下積極效果:花臉香蘑是一種珍稀、優(yōu)質(zhì)野生菌種，在野生狀態(tài)下，數(shù)量少，產(chǎn)量低、但其色澤優(yōu)美，氣味濃香，味道鮮嫩，營養(yǎng)價值和藥用價值極高，且價格昂貴。目前，適合花臉香蘑菌種優(yōu)良培養(yǎng)基研究甚少，本發(fā)明培養(yǎng)基所使用的原料無污染，不會產(chǎn)生任何垃圾，簡單實(shí)用，縮短培養(yǎng)周期，一般縮短4天左右，并且較其他培養(yǎng)基菌絲體長稠密、粗壯，呈淡紫色，生活力旺盛，可促使花臉香蘑菌絲體快速生長，為花臉香蘑實(shí)現(xiàn)大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)及醫(yī)藥事業(yè)的發(fā)展都具有非常重要的意義。
[0011]【具體實(shí)施方式】:
下面對本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】作詳細(xì)說明:
實(shí)施例1:
(1)松針前處理:
將收集到的30g松針進(jìn)行清洗，放入1000ml水中，煮沸20-30分鐘，過濾取汁；
(2)培養(yǎng)基制備:
將松汁定容至1000ml,然后依次加入5g蛋白胨、6g酵母浸粉、2.5g葡萄糖、15g瓊脂，煮沸混勻，然后進(jìn)行分裝；
(3)培養(yǎng)基分裝，滅菌:
將配制好的培養(yǎng)基分裝于試管中，蓋上膠塞，在120-130°C條件下滅菌20-30分鐘；
(4)冷卻，接種:
滅完菌后取出培養(yǎng)基，自然冷卻至20°C _30°C，制成斜面培養(yǎng)基，在無菌條件下，接入經(jīng)過純化的花臉香蘑菌種；
(5)培養(yǎng):
將接好種的培養(yǎng)基置于恒溫培養(yǎng)箱里，20-30°C培養(yǎng)5-10天，直至菌絲長滿試管；
(6)菌種保藏:將培養(yǎng)好的菌種放于4°C的冰箱中進(jìn)行保藏。
[0012]實(shí)施例2:
Cl)松針前處理:
將收集到的36g松針進(jìn)行清洗，放入1000ml水中，煮沸20-30分鐘，過濾取汁；
(2)培養(yǎng)基制備:將松汁定容至1000ml,然后依次加入8g蛋白胨、6g酵母浸粉、4g葡萄糖、18g瓊脂,煮沸混勻，然后進(jìn)行分裝；
(3)培養(yǎng)基分裝，滅菌:
將配制好的培養(yǎng)基分裝于試管中，蓋上膠塞，在120-130°C條件下滅菌20-30分鐘；
(4)冷卻，接種:
滅完菌后取出培養(yǎng)基，自然冷卻至20°C _30°C，制成斜面培養(yǎng)基，在無菌條件下，接入經(jīng)過純化的花臉香蘑菌種；
(5)培養(yǎng):
將接好種的培養(yǎng)基置于恒溫培養(yǎng)箱里，20-30°C培養(yǎng)5-10天，直至菌絲長滿試管；
(6)菌種保藏:將培養(yǎng)好的菌種放于4°C的冰箱中進(jìn)行保藏。
[0013]實(shí)施例3:
Cl)松針前處理:
將收集到的50g松針進(jìn)行清洗，放入1000ml水中，煮沸20-30分鐘，過濾取汁；
(2)培養(yǎng)基制備:
將松汁定容至1000ml，然后依次加入12g蛋白胨、12g酵母浸粉、IOg葡萄糖、20g瓊脂，煮沸混勻，然后進(jìn)行分裝；
(3)培養(yǎng)基分裝，滅菌:
將配制好的培養(yǎng)基分裝于試管中，蓋上膠塞，在120-130°C條件下滅菌20-30分鐘；
(4)冷卻，接種:
滅完菌后取出培養(yǎng)基，自然冷卻至20°C _30°C，制成斜面培養(yǎng)基，在無菌條件下，接入經(jīng)過純化的花臉香蘑菌種；
(5)培養(yǎng):
將接好種的培養(yǎng)基置于恒溫培養(yǎng)箱里，20-30°C培養(yǎng)5-10天，直至菌絲長滿試管；
(6)菌種保藏:將培養(yǎng)好的菌種放于4°C的冰箱中進(jìn)行保藏。
[0014] 以上的實(shí)施例僅僅是對本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式進(jìn)行描述，并非對本發(fā)明的范圍進(jìn)行限定，在不脫離本發(fā)明設(shè)計精神的前提下，本領(lǐng)域普通工程技術(shù)人員對本發(fā)明的技術(shù)方案作出的各種變形和改進(jìn)，均應(yīng)落入本發(fā)明的權(quán)利要求書確定的保護(hù)范圍內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種用于培養(yǎng)花臉香蘑菌絲體的培養(yǎng)基，其特征在于其配方組分按重量份為:松針30-50份、蛋白胨5-12份、酵母浸粉6-12份、葡萄糖2.5-10份、瓊脂:15-20份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于培養(yǎng)花臉香蘑菌絲體的培養(yǎng)基，其特征在于其配方組分按重量份為:松針36份、蛋白胨8份、酵母浸粉6份、葡萄糖4份、瓊脂:18份。
3.一種花臉香蘑菌絲體的人工培養(yǎng)方法，其特征在于具體工藝步驟為: (1)松針前處理: 將收集到的松針進(jìn)行清洗,放入1000ml水中，煮沸20-30分鐘，過濾取汁； (2)培養(yǎng)基制備: 將松汁定容至1000ml，然后依次加入蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、瓊脂，煮沸混勻，然后進(jìn)行分裝； (3)培養(yǎng)基分裝，滅菌: 將配制好的培養(yǎng)基分裝于試管中，蓋上膠塞，在120-130°C條件下滅菌20-30分鐘； (4)冷卻，接種: 滅完菌后取出培養(yǎng)基，自然冷卻至20°C -30°C，制成斜面培養(yǎng)基，在無菌條件下，接入經(jīng)過純化的花臉香蘑菌種； (5)培養(yǎng): 將接好種的培養(yǎng)基置于恒溫培養(yǎng)箱里，20-30°C培養(yǎng)5-10天，直至菌絲長滿試管； (6)菌種保藏:將培養(yǎng)好的菌種放于4°C的冰箱中進(jìn)行保藏。
【文檔編號】A01G1/04GK103947454SQ201410192113
【公開日】2014年7月30日 申請日期:2014年5月8日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月8日
【發(fā)明者】劉宇, 王建瑞, 姜德凱, 圖力古爾, 程顯好, 董洪新 申請人:魯東大學(xué)