一種樹(shù)鼩行為學(xué)評(píng)價(jià)方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明是一種樹(shù)鼩行為學(xué)評(píng)價(jià)方法。該方法是由利用食物隱藏盒隱藏樹(shù)鼩食物的方法、實(shí)驗(yàn)用樹(shù)鼩的選擇與訓(xùn)練方法、學(xué)習(xí)記憶的評(píng)分方法組成。利用樹(shù)鼩視覺(jué)發(fā)達(dá)的特點(diǎn)，將樹(shù)鼩的食物隱藏于食物盒內(nèi)，通過(guò)顏色標(biāo)記，并且經(jīng)過(guò)訓(xùn)練，整個(gè)實(shí)驗(yàn)在無(wú)刺激影響因素的情況下進(jìn)行，通過(guò)實(shí)驗(yàn)前后多天的平均分進(jìn)行樹(shù)鼩行為變化的比較。本發(fā)明的方法能獲取更為科學(xué)、全面和客觀的評(píng)價(jià)結(jié)果。本發(fā)明使用材料低廉，制作簡(jiǎn)單；操作方便，評(píng)價(jià)方法科學(xué)。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種樹(shù)齣行為學(xué)評(píng)價(jià)方法
[0001]
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]本發(fā)明涉及一種樹(shù)駒行為學(xué)評(píng)價(jià)方法。
【背景技術(shù)】
[0003]目前，國(guó)內(nèi)外毒理學(xué)、精神和神經(jīng)藥理學(xué)等科學(xué)研究大多以實(shí)驗(yàn)用大小鼠(轉(zhuǎn)基因大小鼠)為主，其中行為學(xué)評(píng)價(jià)是一個(gè)重要的指標(biāo)。行為學(xué)研究主要以自主活動(dòng)度檢測(cè)、協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)的檢測(cè)、學(xué)習(xí)記憶能力的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。其具體方法有:曠場(chǎng)試驗(yàn)、足跡分析法、洞板試驗(yàn)、穿梭箱試驗(yàn)、Morris水迷宮、放射狀迷宮、Y型迷宮、T迷宮、Barnes迷宮實(shí)驗(yàn)、高架十字迷宮等十余種方法?，F(xiàn)有方法多數(shù)涉及到:食物剝奪；個(gè)體體質(zhì)差異大，未進(jìn)行動(dòng)物的一致性選擇；以及光、電、水等刺激因素，有悖于動(dòng)物倫理學(xué)等問(wèn)題，有的甚至還存在爭(zhēng)議。并且，所有方法都是將動(dòng)物移動(dòng)到固定的檢測(cè)系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行，無(wú)法解決的問(wèn)題是離開(kāi)籠具產(chǎn)生的應(yīng)激、訓(xùn)練耗時(shí)、繁瑣以及檢測(cè)系統(tǒng)內(nèi)余留動(dòng)物的氣味給檢測(cè)結(jié)果帶來(lái)影響。以至于大多數(shù)對(duì)嚙齒類(lèi)動(dòng)物進(jìn)行的認(rèn)知實(shí)驗(yàn)均伴隨混雜設(shè)計(jì)的應(yīng)激因素(Hodges, 1996;Mizumori et al., 1996; Kaneto, 1997)。
[0004]樹(shù)駒是一種小型哺乳動(dòng)物，是目前多數(shù)學(xué)者認(rèn)可的一種低等靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物。樹(shù)駒腦的k值(0.14)均大于鼠及兔的，而同貓的近似。k值的大小除能反映動(dòng)物腦的演化水平外，尚能反映動(dòng)物的智力水平。Liyesy (1970)指出:大鼠的k值為0.04，兔為0.07，貓為
0.13，在復(fù)雜的作業(yè)中， 兔比鼠強(qiáng)，貓比兔強(qiáng)。除大腦皮質(zhì)外，樹(shù)駒小腦發(fā)育也較好，Haines(1969)指出:樹(shù)駒小腦后葉的發(fā)育甚至比嬰猴(Galago)的還好，故運(yùn)動(dòng)靈活、行動(dòng)詭秘、長(zhǎng)期以捕食(偏好)會(huì)移動(dòng)的昆蟲(chóng)為主而非靜態(tài)的植物和水果。再加之晝夜節(jié)律與人類(lèi)一致。
[0005]樹(shù)駒作為神經(jīng)疾病研究模型無(wú)疑是一個(gè)好的選擇，但因行為學(xué)評(píng)價(jià)一直無(wú)一個(gè)好的方法。國(guó)內(nèi)數(shù)十篇樹(shù)駒腦損傷的文章中均未涉及行為學(xué)方面的實(shí)驗(yàn)研究。國(guó)內(nèi)有的研究人員用穿梭箱改進(jìn)的電刺激箱開(kāi)展行為學(xué)實(shí)驗(yàn)(最終放棄)；還有的通過(guò)樹(shù)駒游泳訓(xùn)練用水迷宮開(kāi)展行為學(xué)研究；其他實(shí)驗(yàn)同樣無(wú)法回避水、電、光的刺激，這些刺激因素足以讓樹(shù)鼠句產(chǎn)生強(qiáng)烈的應(yīng)激反應(yīng)，以至于在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)生不作為、不響應(yīng)的情況。國(guó)外開(kāi)展樹(shù)駒行為學(xué)實(shí)驗(yàn)的有:新物體認(rèn)識(shí)實(shí)驗(yàn)(Abbas Khani, 2012)洞板”式的應(yīng)激條件認(rèn)知能力實(shí)驗(yàn)(Frauke 0hl，1998)。同樣面臨新環(huán)境的應(yīng)激和氣味等因素對(duì)行為和記憶的影響?！岸窗濉痹囼?yàn)就無(wú)法解決食物氣味的問(wèn)題，由于氣味的存在，樹(shù)駒可以依靠嗅覺(jué)直接找到食物，而不是靠已習(xí)得的記憶完成任務(wù)。
[0006]總之，利用樹(shù)駒開(kāi)展精神和腦疾病研究，必須解決行為學(xué)評(píng)價(jià)的關(guān)鍵技術(shù)。利用所有動(dòng)物都有向往食物這一生物學(xué)特性，以食物誘導(dǎo)為基礎(chǔ)，以科學(xué)設(shè)計(jì)符合樹(shù)駒特點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)方法為重點(diǎn)。特進(jìn)行樹(shù)駒行為學(xué)評(píng)價(jià)方法的發(fā)明研究。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0007]本發(fā)明的目的是提供一種長(zhǎng)期以來(lái)國(guó)內(nèi)外一直迫切需要的有效的樹(shù)駒行為學(xué)評(píng)價(jià)方法。
[0008]樹(shù)駒是一種小型哺乳動(dòng)物，是目前多數(shù)學(xué)者認(rèn)可的一種低等靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物，由于其運(yùn)動(dòng)靈活性、行動(dòng)詭秘、長(zhǎng)期以捕食(偏好)會(huì)移動(dòng)的昆蟲(chóng)為主而非靜態(tài)的植物和水果。為了回避樹(shù)駒對(duì)環(huán)境變化敏感、應(yīng)激性強(qiáng)的問(wèn)題，行為學(xué)實(shí)驗(yàn)在原飼養(yǎng)籠內(nèi)完成，利用其視覺(jué)發(fā)達(dá)的特點(diǎn)，將樹(shù)駒的食物隱藏于食物盒內(nèi)，通過(guò)顏色標(biāo)記，并且經(jīng)過(guò)訓(xùn)練，整個(gè)實(shí)驗(yàn)在無(wú)刺激影響因素的情況下進(jìn)行。本發(fā)明的方法是由利用食物隱藏盒隱藏樹(shù)駒食物的方法、實(shí)驗(yàn)用樹(shù)駒的選擇與訓(xùn)練方法、學(xué)習(xí)記憶的評(píng)分方法組成，具體如下:
1)食物隱藏盒使用方法:
A、圓形食物隱藏盒的外直徑為2.5-3.5cm,厚度為2.5-3.5cm;食物存儲(chǔ)空間內(nèi)直徑為1.5-2.0cm,深度為 2-2.5cm ；
B、樹(shù)駒偏好的食物(不同飼養(yǎng)條件會(huì)形成不同的偏好，可以靈活確定)放于統(tǒng)一的食物隱藏盒內(nèi)，用紅色膠帶封閉標(biāo)記；
C、樹(shù)駒日常飼喂的顆粒飼料放于統(tǒng)一的食物隱藏盒內(nèi)，用綠色膠帶封閉標(biāo)記；
D、沒(méi)有食物的食物隱藏盒用黃色膠帶封閉標(biāo)記；
2)、實(shí)驗(yàn)用樹(shù)駒的選擇與訓(xùn)練:
A、先將一個(gè)空的食物隱藏盒放入樹(shù)駒籠內(nèi)，選擇I小時(shí)內(nèi)玩弄和啃咬食物隱藏盒的樹(shù)鼠句進(jìn)行食物獲取的學(xué)習(xí)訓(xùn)練；
B、樹(shù)駒不同顏色標(biāo)記的食物盒內(nèi)食物獲取的學(xué)習(xí)訓(xùn)練:訓(xùn)練期間推遲每天上午8點(diǎn)和下午5點(diǎn)添加飼料的時(shí)間，分別推遲到9點(diǎn)和下午6點(diǎn)，更好地反映每只樹(shù)駒一天的總體狀態(tài)；每次將3種顏色的4-6個(gè)食物盒同時(shí)放入實(shí)驗(yàn)樹(shù)駒籠內(nèi)，實(shí)驗(yàn)人員離開(kāi)前，開(kāi)啟電子記錄儀(或錄像機(jī))，每天兩次分別記錄樹(shù)駒在30至40分鐘內(nèi)尋找和獲取食物時(shí)間、以及在獲取食物之前啃咬黃色膠帶的食物隱藏盒次數(shù)；連續(xù)訓(xùn)練觀察和記錄3至6天；
C、根據(jù)影像記錄結(jié)果，按照本發(fā)明的“學(xué)習(xí)記憶的評(píng)分方法”進(jìn)行評(píng)分，最終選擇:實(shí)驗(yàn)前連續(xù)觀察3至6天的總平均分相差不超過(guò)3分的樹(shù)駒，用于正式實(shí)驗(yàn)，即學(xué)習(xí)行為一致性好的樹(shù)駒用于腦損傷或神經(jīng)藥物評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)；
3)學(xué)習(xí)記憶的評(píng)分方法:
A、找到紅色標(biāo)記的食物隱藏盒和獲取食物的計(jì)分為:30分+發(fā)現(xiàn)所用時(shí)間(分鐘)+5分+發(fā)現(xiàn)紅色食物隱藏盒后，用于吃完食物的時(shí)間(分鐘)；
B、找到綠色標(biāo)記的食物隱藏盒和獲取食物的計(jì)分為:20分+發(fā)現(xiàn)所用時(shí)間(分鐘)+5分+發(fā)現(xiàn)綠色食物隱藏盒后，用于吃完食物的時(shí)間(分鐘)；
C、啃咬黃色食物隱藏盒的計(jì)分為:-0.5分/次X在獲取食物之前的次數(shù)；
D、以上A、B、C、3項(xiàng)上下午兩次分值之和的平均值為當(dāng)天的評(píng)分；通過(guò)實(shí)驗(yàn)前后多天的平均分進(jìn)行樹(shù)駒行為變化的比較；
本評(píng)分辦法可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要連續(xù)進(jìn)行多天，獲取更為科學(xué)、全面和客觀的評(píng)價(jià)結(jié)果。
[0009]本發(fā)明是利用食物盒內(nèi)加入食物誘導(dǎo)樹(shù)駒學(xué)習(xí)記憶的方法，通過(guò)對(duì)樹(shù)駒發(fā)現(xiàn)食物和食物獲取過(guò)程動(dòng)作協(xié)調(diào)性兩方面的能力進(jìn)行評(píng)價(jià)。其特點(diǎn)是:食物隱藏盒用膠帶密封，并且為一次性使用，回避了氣味對(duì)記憶行為的影響；利用記錄儀記錄，樹(shù)駒在日常居住的飼養(yǎng)籠內(nèi)開(kāi)展學(xué)習(xí)記憶的行為學(xué)評(píng)價(jià)，同時(shí)食物盒體積小，不受樹(shù)駒籠具大小的影響，解決樹(shù)鼠句應(yīng)激強(qiáng)的問(wèn)題；選擇一致性好的樹(shù)駒進(jìn)行行為學(xué)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)，食物隱藏盒可以靈活增減，即評(píng)價(jià)難度可以調(diào)整，評(píng)分辦法除了評(píng)價(jià)記憶，同時(shí)還有行為協(xié)調(diào)能力的評(píng)價(jià)；行為學(xué)評(píng)價(jià)采取一天兩次和靈活的連續(xù)多天進(jìn)行評(píng)價(jià)，能獲取更為科學(xué)、全面和客觀的評(píng)價(jià)結(jié)果。該發(fā)明使用材料低廉，制作簡(jiǎn)單；操作方便；評(píng)價(jià)方法科學(xué)。
【具體實(shí)施方式】
[0010]實(shí)施例1:
1)食物隱藏盒使用方法:
根據(jù)樹(shù)駒牙齒比較細(xì)小，啃咬力量較嚙齒類(lèi)動(dòng)物差的特點(diǎn)，食物盒制作材料的選擇不能太硬，保證樹(shù)駒發(fā)現(xiàn)食物盒后取食不太難；同時(shí)要有一定密度和硬度，保證盒內(nèi)食物氣味不外逸，防止樹(shù)駒憑借嗅覺(jué)直接找到食物。經(jīng)過(guò)反復(fù)試驗(yàn)，最終選擇密度為:0.94—
0.98g / cm3白色塑料泡沫制作的食物盒。圓形食物盒的外直徑為2.5-3.5cm，厚度為
2.5-3.5cm;食物存儲(chǔ)空間內(nèi)直徑為1.5-2.0cm,深度為2_2.5cm ;樹(shù)駒偏好的食物放于統(tǒng)一的塑料泡沫盒內(nèi)，用紅色膠帶封閉標(biāo)記；樹(shù)駒日常飼喂的顆粒飼料放于統(tǒng)一的塑料泡沫盒內(nèi)，用綠色膠帶封閉標(biāo)記；沒(méi)有食物的塑料泡沫盒，用黃色膠帶封閉標(biāo)記；
2)實(shí)驗(yàn)用樹(shù)駒的選擇與訓(xùn)練:
A、首先，將一個(gè)空的塑料泡沫食物盒放入樹(shù)駒籠內(nèi)，選擇I小時(shí)內(nèi)玩弄和啃咬泡沫食物盒的樹(shù)駒進(jìn)行顏色和食物的學(xué)習(xí)訓(xùn)練；
B、樹(shù)駒不同顏色標(biāo)記的 食物盒內(nèi)食物獲取的學(xué)習(xí)訓(xùn)練:訓(xùn)練將每天上午8點(diǎn)和下午5點(diǎn)添加飼料的時(shí)間，分別推遲到9點(diǎn)和下午6點(diǎn)加入I個(gè)紅色、I個(gè)綠色以及2個(gè)黃色標(biāo)記的食物盒，實(shí)驗(yàn)人員離開(kāi)前開(kāi)啟電子記錄儀(或錄像機(jī))，每天兩次分別記錄樹(shù)駒在30至40分鐘內(nèi)尋找和獲取食物時(shí)間、以及在獲取食物之前啃咬黃色膠帶的食物盒次數(shù)；連續(xù)訓(xùn)練觀察記錄3天；
C、根據(jù)影像記錄結(jié)果，嚴(yán)格按照本發(fā)明的“學(xué)習(xí)記憶的評(píng)分方法”進(jìn)行評(píng)分，最終選擇:連續(xù)觀察3天的總平均分相差不超過(guò)3分的樹(shù)駒，用于正式實(shí)驗(yàn)，即用于腦損傷或神經(jīng)藥物評(píng)價(jià)。
[0011]3)學(xué)習(xí)記憶的評(píng)分方法:
實(shí)驗(yàn)統(tǒng)一在每天上午9點(diǎn)和下午6點(diǎn)分別進(jìn)行兩次實(shí)驗(yàn)，更好地反映每只樹(shù)駒一天的總體狀態(tài)。每次將3種顏色的4個(gè)食物盒，其中紅色和綠色各I個(gè)，黃色2個(gè)，同時(shí)放入實(shí)驗(yàn)樹(shù)鼠句籠內(nèi)，實(shí)驗(yàn)人員及時(shí)離開(kāi)實(shí)驗(yàn)房間，開(kāi)啟電子記錄儀(或錄像機(jī))記錄30至40分鐘后，恢復(fù)樹(shù)駒正常的飼養(yǎng)管理工作，根據(jù)記錄儀的結(jié)果，按照本發(fā)明的評(píng)分辦法，對(duì)每一只樹(shù)鼠句進(jìn)行評(píng)分。
[0012]具體評(píng)分辦法如下:
A、找到紅色標(biāo)記的塑料泡沫食物盒和獲取食物的計(jì)分為:30分+發(fā)現(xiàn)所用時(shí)間(分鐘)+ 5分+發(fā)現(xiàn)紅色食物盒后，用于吃完食物的時(shí)間(分鐘)；
B、找到綠色標(biāo)記的塑料泡沫食物盒和獲取食物的計(jì)分為:20分+發(fā)現(xiàn)所用時(shí)間(分鐘)+ 5分+發(fā)現(xiàn)綠色食物盒后，用于吃完食物的時(shí)間(分鐘)；
C、啃咬黃色標(biāo)記食物盒的計(jì)分為:-0.5分/次X在獲取食物之前啃咬黃色標(biāo)記食物盒的次數(shù)；D、以上3項(xiàng)上下午分值之和的平均值為當(dāng)天的評(píng)分，實(shí)驗(yàn)前后均以3天的平均分進(jìn)行比較。
[0013]實(shí)例2:
樹(shù)駒偏好食物隱藏盒的顏色可以改變?yōu)榫G色或其他顏色進(jìn)行標(biāo)記，如藍(lán)色、黑色等；
將塑料泡沫食物隱藏盒增加為6個(gè)，即:紅色和綠色各I個(gè)，黃色4個(gè)，增加樹(shù)駒選擇難
度； 評(píng)分辦法中，實(shí)驗(yàn)前后均以6天的平均分進(jìn)行比較。
[0014]其余方法均與實(shí)施例1相同。
【權(quán)利要求】
1.一種樹(shù)駒行為學(xué)評(píng)價(jià)方法，其特征在于:該方法是由食物盒隱藏樹(shù)駒食物的方法、實(shí)驗(yàn)用樹(shù)駒的選擇與訓(xùn)練方法、學(xué)習(xí)記憶的評(píng)分方法組成，具體如下: 1)食物隱藏盒使用方法: A、圓形食物隱藏盒的外直徑為2.5-3.5cm,厚度為2.5-3.5cm;食物存儲(chǔ)空間內(nèi)直徑為1.5-2.0cm,深度為 2-2.5cm ； B、將樹(shù)駒偏好的食物放于統(tǒng)一的食物隱藏盒內(nèi)，用紅色膠帶封閉標(biāo)記； C、將樹(shù)駒日常飼喂的顆粒飼料放于統(tǒng)一的食物隱藏盒內(nèi)，用綠色膠帶封閉標(biāo)記； D、沒(méi)有食物的食物隱藏盒用黃色膠帶封閉標(biāo)記； 2)、實(shí)驗(yàn)用樹(shù)駒的選擇與訓(xùn)練: A、先將一個(gè)空的食物隱藏盒放入樹(shù)駒籠內(nèi)，選擇I小時(shí)內(nèi)玩弄和啃咬食物隱藏盒的樹(shù)鼠句進(jìn)行食物獲取的學(xué)習(xí)訓(xùn)練； B、樹(shù)駒不同顏色標(biāo)記的食物盒內(nèi)食物獲取的學(xué)習(xí)訓(xùn)練:訓(xùn)練期間推遲每天上午8點(diǎn)和下午5點(diǎn)添加飼料的時(shí)間，分別推遲到9點(diǎn)和下午6點(diǎn)，更好地反映每只樹(shù)駒一天的總體狀態(tài)；每次將3種顏色的4-6個(gè)食物隱藏盒同時(shí)放入實(shí)驗(yàn)樹(shù)駒籠內(nèi)，實(shí)驗(yàn)人員離開(kāi)前，開(kāi)啟電子記錄儀或錄像機(jī)，每天兩次分別記錄樹(shù)駒在30至40分鐘內(nèi)尋找和獲取食物時(shí)間、以及在獲取食物之前啃咬黃色膠帶的食物隱藏盒次數(shù)；連續(xù)訓(xùn)練觀察和記錄3至6天； C、根據(jù)影像記錄結(jié)果，按照本發(fā)明的“學(xué)習(xí)記憶的評(píng)分方法”進(jìn)行評(píng)分，最終選擇:實(shí)驗(yàn)前連續(xù)觀察3至6天的總平均分相差不超過(guò)3分的樹(shù)駒，用于正式實(shí)驗(yàn)，即學(xué)習(xí)行為一致性好的樹(shù)駒用于腦損傷或神經(jīng)藥物評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)； 3)學(xué)習(xí)記憶的評(píng)分方法: A、找到紅色標(biāo)記的食物隱藏盒和獲取食物的計(jì)分為:30分+發(fā)現(xiàn)所用時(shí)間，分鐘+5分+發(fā)現(xiàn)紅色食物隱藏盒后用于吃完食物的時(shí)間，分鐘； B、找到綠色標(biāo)記的食物隱藏盒和獲取食物的計(jì)分為:20分+發(fā)現(xiàn)食物隱藏盒所用時(shí)間，分鐘+ 5分+發(fā)現(xiàn)綠色食物隱藏盒后用于吃完食物的時(shí)間，分鐘； C、啃咬黃色食物隱藏盒的計(jì)分為:-0.5分/次X在獲取食物之前的次數(shù)； D、以上A、B、C、3項(xiàng)上下午兩次分值之和的平均值為當(dāng)天的評(píng)分；通過(guò)實(shí)驗(yàn)前后多天的平均分進(jìn)行樹(shù)駒行為變化的比較。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的樹(shù)駒行為學(xué)評(píng)價(jià)方法，其特征在于:食物隱藏盒選擇密度為:0.94—0.98g / cm3塑料泡沫制作。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的樹(shù)駒行為學(xué)評(píng)價(jià)方法，其特征在于:用三種不同膠帶紙封閉標(biāo)記食物隱藏盒為I個(gè)紅色、I個(gè)綠色、2-4個(gè)黃色。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的樹(shù)駒行為學(xué)評(píng)價(jià)方法，其特征在于:樹(shù)駒偏好食物隱藏盒的顏色包括藍(lán)色、黑色、 綠色。
【文檔編號(hào)】A01K67/02GK103598144SQ201310644407
【公開(kāi)日】2014年2月26日 申請(qǐng)日期:2013年12月5日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月5日
【發(fā)明者】鄭紅, 李進(jìn)濤, 角建林, 何保麗, 李波, 王麗梅 申請(qǐng)人:昆明醫(yī)科大學(xué)