一種半枝蓮組培種苗工廠化生產(chǎn)方法
【專利摘要】一種半枝蓮組培種苗工廠化生產(chǎn)方法，包括如下步驟：半枝蓮組培種苗繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)、生根煉苗同步化培養(yǎng)以及生根苗的移栽。采用本發(fā)明能夠在短時(shí)間內(nèi)提供移栽成活率達(dá)96%以上的半枝蓮組培種苗，滿足生產(chǎn)上的需要。
【專利說(shuō)明】一種半枝蓮組培種苗工廠化生產(chǎn)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種植物組培種苗工廠化生產(chǎn)方法，特別是一種半枝蓮組培種苗工廠化生產(chǎn)方法。
【背景技術(shù)】[0002]半枝蓮(Scutellaria barbate D.Don)為唇形科黃岑屬植物，別名并頭草、狹葉韓信草、赴山鞭、牙刷草、勺把草、蘭花草等，屬唇形科多年生野生藥用草本植物，全草入藥。其性味辛、苦、寒，歸肺、肝、腎經(jīng)，具有清熱解毒、散瘀止血、利尿消腫的功效。半枝蓮中含有多種化合物，黃酮類成分是其主要的活性成分，具有抗腫瘤、抗氧化、抗菌等多種藥理活性。
[0003]半枝蓮是治癌的首選藥物，在醫(yī)學(xué)方面的用量逐年增加，是國(guó)家中醫(yī)藥管理局近年重點(diǎn)推薦發(fā)展的63種緊缺中藥材之一。野生資源不斷減少頻臨滅絕，而家種半枝蓮受氣候和地理?xiàng)l件等多種因素的影響，產(chǎn)量很不穩(wěn)定，經(jīng)常有供不應(yīng)求的局面出現(xiàn)。鑒于半枝蓮的良好療效，為了更好地開發(fā)和利用中藥半枝蓮資源。因此通過(guò)本發(fā)明的生產(chǎn)工藝，可以短期內(nèi)提供大量?jī)?yōu)質(zhì)的半枝蓮種苗，減低生產(chǎn)成本，提高種苗質(zhì)量，從而提高種苗成活率及藥材產(chǎn)量。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明的目的是提供一種半枝蓮組培種苗工廠化生產(chǎn)方法，它能夠縮短生產(chǎn)周期，降低生產(chǎn)成本,提高種苗質(zhì)量,從而提高種苗成活率及藥材產(chǎn)量。
[0005]本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案達(dá)到上述目的:一種半枝蓮組培種苗工廠化生產(chǎn)方法，該方法的具體步驟和操作條件為:
[0006](I)繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng):繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)基為:MS+1.0~2.0mg/LBA+0.1 ~0.3mg/L KT+0.1 ~0.3mg/L IBA+0.1 ~0.5mg/L NAA,繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)方法為:將半枝蓮種子消毒后接種到MS+1.5mg/L BA+0.3mg/L KT+0.3mg/L IBA繁殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得叢生芽，將叢生芽切割成1.0~2.0cm的帶芽莖段，平鋪在繁殖復(fù)壯一體化固體培養(yǎng)基面上，然后將莖段的1/2壓入到培養(yǎng)基內(nèi)，接種完畢后轉(zhuǎn)入培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)15天，培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度23~27°C，光照強(qiáng)度15001uX，光照時(shí)間為8小時(shí)/天，然后再轉(zhuǎn)入散射自然光照下培養(yǎng)15天，培養(yǎng)溫度25~28°C，光照強(qiáng)度3500~45001ux，獲得植株健壯的叢生芽；
[0007](2)生根煉苗同步化培養(yǎng):生根煉苗同步化培養(yǎng)基為1/2MS+0.5~1.5mg/LNAA+0.1~0.3mg/L IBA+0.1~0.3mg/L IAA,生根煉苗同步化培養(yǎng)方法為:將繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)獲得的葉片展開、木質(zhì)化程度較高的健壯枝條剪下，接種到生根煉苗同步化培養(yǎng)基中，在室內(nèi)培養(yǎng)7天，新根開始萌發(fā)后轉(zhuǎn)入大棚內(nèi)，進(jìn)行生根煉苗同步化培養(yǎng)25天，獲得根系發(fā)達(dá)，適宜移栽的完整植株，其中室內(nèi)培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度23~27°C，光照強(qiáng)度15001UX，光照時(shí)間為10小時(shí)/天；大棚培養(yǎng)條件為溫度23~30°C，光照為自然光，大棚上部覆蓋一層遮陽(yáng)網(wǎng)，遮光度為20~35%，相對(duì)濕度為85~90% ；
[0008](3)生根苗的移栽:在大棚形成完整的植株后，將生根苗的瓶蓋打開，取出生根苗，洗凈根部殘留培養(yǎng)基，移栽至平整精耕的育苗床上，育苗要求相對(duì)濕度為90~95%，溫度25~30°C，遮光度60~75% ;或移栽至育苗大棚，大棚內(nèi)濕度為90~95%，溫度25~30°C，遮光度60~75%。
[0009]其中，MS為MS基本培養(yǎng)基，BA為6_芐基腺嘌呤，IAA為吲哚乙酸，NAA為萘乙酸，KT為激動(dòng)素，IBA為吲哚丁酸。
[0010]本發(fā)明的突出優(yōu)點(diǎn)在于:
[0011](I)通過(guò)生物技術(shù)對(duì)半枝蓮進(jìn)行組織培養(yǎng)快速繁殖，在短時(shí)間內(nèi)培育出大量可供大田栽培的半枝蓮幼苗，顯著提高了半枝蓮種苗的繁殖系數(shù)和種苗質(zhì)量，實(shí)現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)，滿足生產(chǎn)上的需要。
[0012](2)通過(guò)繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)、生根煉苗同步化培養(yǎng)兩步培養(yǎng)法進(jìn)行半枝蓮組培苗的工廠化生產(chǎn)，縮短了培養(yǎng)時(shí)間，減少培養(yǎng)步驟，降低了培養(yǎng)成本，提高了半枝蓮組培種苗的生產(chǎn)效率。
[0013](3)在繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得的無(wú)菌枝條健康粗壯、無(wú)化現(xiàn)象，展葉良好，木質(zhì)化程度較高，接種到生根培養(yǎng)基上生根情況良好，生根率在97%以上，移栽育苗大棚后成活率在96%以上。
【具體實(shí)施方式】
[0014]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)一步說(shuō)明。
[0015]實(shí)施例1
[0016]一種半枝蓮組培種苗工廠化生產(chǎn)方法，包括以下步驟:
[0017](I)繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng):繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)基為:MS+1.0mg/L BA+0.lmg/LKT+0.lmg/L IBA+0.lmg/L NAA。繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)方法為:將半枝蓮種子消毒后接種到MS+1.5mg/L BA+0.3mg/L KT+0.3mg/L IBA繁殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得叢生芽，將叢生芽切割成1.0~2.0cm的帶芽莖段，平鋪在繁殖復(fù)壯一體化固體培養(yǎng)基面上，將莖段的1/2壓入到培養(yǎng)基內(nèi)，使其能夠充分吸收培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)。接種完畢后轉(zhuǎn)入培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)15天，培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度23~27°C，光照強(qiáng)度15001uX，光照時(shí)間為8小時(shí)/天。然后再轉(zhuǎn)入散射自然光照下培養(yǎng)15天，培養(yǎng)溫度25~28°C，光照強(qiáng)度3500~45001ux。獲得植株健壯的叢生芽；
[0018](2)生根煉苗同步化培養(yǎng):生根煉苗同步化培養(yǎng)基為MS+0.5mg/L NAA+0.lmg/LIBA+0.lmg/L IAA。生根煉苗同步化培養(yǎng)方法為:將繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)獲得的葉片展開、木質(zhì)化程度較高的健壯枝條剪下，接種到生根煉苗同步化培養(yǎng)基中，在室內(nèi)培養(yǎng)7天，新根開始萌發(fā)后轉(zhuǎn)入大棚，進(jìn)行生根煉苗同步化培養(yǎng)25天，獲得根系發(fā)達(dá)，適宜移栽的完整植株。其中室內(nèi)培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度23~27°C，光照強(qiáng)度15001UX，光照時(shí)間為10小時(shí)/天；大棚培養(yǎng)條件為溫度23~30°C，光照為自然光，大棚上部覆蓋一層遮陽(yáng)網(wǎng)，遮光度為20~30%，相對(duì)濕度為85~90% ；
[0019](3)生根苗的移栽:在大棚形成完整的植株后，將生根苗的瓶蓋打開，取出40瓶生根苗，每瓶15株,共600株,洗凈根部殘留培養(yǎng)基后統(tǒng)計(jì)生根植株為586株,生根率為
97.7%。將586株生根苗移栽至育苗大棚，大棚內(nèi)濕度為90~95%，溫度25~30°C，遮光度60~75%。30天后統(tǒng)計(jì)成活植株為564株，成活率為96.2%。[0020]實(shí)施例2
[0021]一種半枝蓮組培種苗工廠化生產(chǎn)方法，包括以下步驟:
[0022](I)繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng):繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)基為:MS+1.5mg/L BA+0.2mg/LKT+0.2mg/L IBA+0.2mg/L NAA。繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)方法為:將半枝蓮種子消毒后接種到MS+1.5mg/L BA+0.3mg/L KT+0.3mg/L IBA繁殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得叢生芽，將叢生芽切割成1.0~2.0cm的帶芽莖段，平鋪在繁殖復(fù)壯一體化固體培養(yǎng)基面上，將莖段的1/2壓入到培養(yǎng)基內(nèi)，使其能夠充分吸收培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)。接種完畢后轉(zhuǎn)入培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)15天，培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度23~27°C，光照強(qiáng)度15001uX，光照時(shí)間為8小時(shí)/天。然后再轉(zhuǎn)入散射自然光照下培養(yǎng)15天，培養(yǎng)溫度25~28°C，光照強(qiáng)度3500~45001ux，獲得植株健壯的叢生芽；
[0023](2)生根煉苗同步化培養(yǎng):生根煉苗同步化培養(yǎng)基為MS+1.0mg/L NAA+0.2mg/LIBA+0.2mg/L IAA。生根煉苗同步化培養(yǎng)方法為:將繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)獲得的葉片展開、木質(zhì)化程度較高的健壯枝條剪下，接種到生根煉苗同步化培養(yǎng)基中，在室內(nèi)培養(yǎng)7天，新根開始萌發(fā)后轉(zhuǎn)入大棚，進(jìn)行生根煉苗同步化培養(yǎng)25天，獲得根系發(fā)達(dá)，適宜移栽的完整植株。其中室內(nèi)培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度23~27°C，光照強(qiáng)度15001UX，光照時(shí)間為10小時(shí)/天；大棚培養(yǎng)條件為溫度23~30°C，光照為自然光，大棚上部覆蓋一層遮陽(yáng)網(wǎng)，遮光度為20~30%，相對(duì)濕度為85~90% ；
[0024](3)生根苗的移栽:在大棚形成完整的植株后，將生根苗的瓶蓋打開，取出40瓶生根苗，每瓶15株,共600株,洗凈根部殘留培養(yǎng)基后統(tǒng)計(jì)生根植株為590株,生根率為98.3%。將590株生根苗移栽至育苗大棚，大棚內(nèi)濕度為90~95%，溫度25~30°C，遮光度60~75%5。30天后統(tǒng)計(jì)成活植株為572 株，成活率為96.9%。
[0025]實(shí)施例3
[0026]一種半枝蓮組培種苗工廠化生產(chǎn)方法，包括以下步驟:
[0027](I)繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng):繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)基為:MS+1.8mg/LBA+0.3mg/LKT+0.3mg/L IBA+0.3mg/L NAA。繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)方法為:將半枝蓮種子消毒后接種到MS+1.5mg/L BA+0.3mg/L KT+0.3mg/L IBA繁殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得叢生芽，將叢生芽切割成1.0~2.0cm的帶芽莖段，平鋪在繁殖復(fù)壯一體化固體培養(yǎng)基面上，將莖段的1/2壓入到培養(yǎng)基內(nèi)，使其能夠充分吸收培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)。接種完畢后轉(zhuǎn)入培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)15天，培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度23~27°C，光照強(qiáng)度15001uX，光照時(shí)間為8小時(shí)/天。然后再轉(zhuǎn)入散射自然光照下培養(yǎng)15天，培養(yǎng)溫度25~28°C，光照強(qiáng)度3500~45001ux，獲得植株健壯的叢生芽；
[0028](2)生根煉苗同步化培養(yǎng):生根煉苗同步化培養(yǎng)基為MS+1.0mg/L NAA+0.3mg/LIBA+0.3mg/L IAA。生根煉苗同步化培養(yǎng)方法為:將繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)獲得的葉片展開、木質(zhì)化程度較高的健壯枝條剪下，接種到生根煉苗同步化培養(yǎng)基中，在室內(nèi)培養(yǎng)7天，新根開始萌發(fā)后轉(zhuǎn)入大棚，進(jìn)行生根煉苗同步化培養(yǎng)25天，獲得根系發(fā)達(dá)，適宜移栽的完整植株。其中室內(nèi)培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度23~27°C，光照強(qiáng)度15001UX，光照時(shí)間為10小時(shí)/天；大棚培養(yǎng)條件為溫度23~30°C，光照為自然光，大棚上部覆蓋一層遮陽(yáng)網(wǎng)，遮光度為20~30%，相對(duì)濕度為85~90% ；
[0029](3)生根苗的移栽:在大棚形成完整的植株后，將生根苗的瓶蓋打開，取出40瓶生根苗，每瓶15株,共600株,洗凈根部殘留培養(yǎng)基后統(tǒng)計(jì)生根植株為588株,生根率為
98.0%。將588株生根苗移栽至育苗大棚，大棚內(nèi)濕度為90~95%，溫度25~30°C，遮光度60~75%。30天后統(tǒng)計(jì)成活植株為568株，成活率為96.6%。
[0030]實(shí)施例4
[0031]一種半枝蓮組培種苗工廠化生產(chǎn)方法，包括以下步驟:
[0032](I)繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng):繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)基為:MS+2.0mg/L BA+0.3mg/LKT+0.3mg/L IBA+0.5mg/LNAA。繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)方法為:將半枝蓮種子消毒后接種到MS+1.5mg/L BA+0.3mg/L KT+0.3mg/L IBA繁殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得叢生芽，將叢生芽切割成1.0~2.0cm的帶芽莖段，平鋪在繁殖復(fù)壯一體化固體培養(yǎng)基面上，將莖段的1/2壓入到培養(yǎng)基內(nèi)，使其能夠充分吸收培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)。接種完畢后轉(zhuǎn)入培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)15天，培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度23~27°C，光照強(qiáng)度15001uX，光照時(shí)間為8小時(shí)/天。然后再轉(zhuǎn)入散射自然光照下培養(yǎng)15天，培養(yǎng)溫度25~28°C，光照強(qiáng)度約為3500~45001ux，獲得植株健壯的叢生芽；
[0033](2)生根煉苗同步化培養(yǎng):生根煉苗同步化培養(yǎng)基為MS+1.5mg/LNAA+0.3mg/LIBA+0.3mg/L IAA。生根煉苗同步化培養(yǎng)方法為:將繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)獲得的葉片展開、木質(zhì)化程度較高的健壯枝條剪下，接種到生根煉苗同步化培養(yǎng)基中，在室內(nèi)培養(yǎng)7天，新根開始萌發(fā)后轉(zhuǎn)入大棚，進(jìn)行生根煉苗同步化培養(yǎng)25天，獲得根系發(fā)達(dá)，適宜移栽的完整植株。其中室內(nèi)培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度23~27°C，光照強(qiáng)度15001UX，光照時(shí)間為10小時(shí)/天；大棚培養(yǎng)條件為溫度23~30°C，光照為自然光，大棚上部覆蓋一層遮陽(yáng)網(wǎng)，遮光度為20~30%，相對(duì)濕度為85~90% ；
[0034](3)生根苗的移栽:在大棚形成完整的植株后，將生根苗的瓶蓋打開，取出40瓶生根苗，每瓶15株,共600株,洗凈根部殘留培養(yǎng)基后統(tǒng)計(jì)生根植株為585株,生根率為97.5%。將585株生根植株移栽至育苗大棚，大棚內(nèi)濕度為90~95%，溫度25~30°C，遮光度60~75%。30天后統(tǒng)計(jì)成活植株為564株，成活率為96.4%。
【權(quán)利要求】
1.一種半枝蓮組培種苗工廠化生產(chǎn)方法，其特征在于:該方法的具體步驟和操作條件為: (1)繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng):繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)基為:MS+1.0~2.0mg/L BA+0.1~0.3mg/L KT+0.1~0.3mg/L IBA+0.1~0.5mg/L NAA，繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)方法為:將半枝蓮種子消毒后接種到MS+1.5mg/L BA+0.3mg/L KT+0.3mg/L IBA繁殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得叢生芽，將叢生芽切割成1.0~2.0cm的帶芽莖段，平鋪在繁殖復(fù)壯一體化固體培養(yǎng)基面上，然后將莖段的1/2壓入到培養(yǎng)基內(nèi)，接種完畢后轉(zhuǎn)入培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)15天，培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度23~27°C，光照強(qiáng)度15001uX，光照時(shí)間為8小時(shí)/天，然后再轉(zhuǎn)入散射自然光照下培養(yǎng)15天，培養(yǎng)溫度25~28°C，光照強(qiáng)度3500~45001ux，獲得植株健壯的叢生芽； (2)生根煉苗同步化培養(yǎng):生根煉苗同步化培養(yǎng)基為1/2MS+0.5~1.5mg/L NAA+0.1~0.3mg/L IBA+0.1~0.3mg/L IAA，生根煉苗同步化培養(yǎng)方法為:將繁殖復(fù)壯一體化培養(yǎng)獲得的葉片展開、木質(zhì)化程度較高的健壯枝條剪下，接種到生根煉苗同步化培養(yǎng)基中，在室內(nèi)培養(yǎng)7天，新根開始萌發(fā)后轉(zhuǎn)入大棚內(nèi)，進(jìn)行生根煉苗同步化培養(yǎng)25天，獲得根系發(fā)達(dá)，適宜移栽的完整植株，其中室內(nèi)培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度23~27°C，光照強(qiáng)度1500lux，光照時(shí)間為10小時(shí)/天；大棚培養(yǎng)條件為溫度23~30°C，光照為自然光，大棚上部覆蓋一層遮陽(yáng)網(wǎng)，遮光度為20~35%，相對(duì)濕度為85~90% ； (3)生根苗的移栽:在大棚形成完整的植株后，將生根苗的瓶蓋打開，取出生根苗，洗凈根部殘留培養(yǎng)基，移栽至平整精耕的育苗床上，育苗要求相對(duì)濕度為90~95%，溫度25~30°C，遮光度60~75%，或移栽至育苗大棚，大棚內(nèi)濕度為90~95%，溫度25~30°C，遮光度60~75%。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK103518626SQ201310537346
【公開日】2014年1月22日 申請(qǐng)日期:2013年11月4日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月4日
【發(fā)明者】李林軒, 韋坤華, 繆劍華, 李翠, 韋瑩 申請(qǐng)人:廣西壯族自治區(qū)藥用植物園