樺褐孔菌多糖作為魚類飼料添加劑的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種樺褐孔菌多糖作為凡納濱對蝦飼料添加劑的應(yīng)用，樺褐孔菌多糖在魚類基礎(chǔ)飼料中的添加量為l-20g/kg魚類基礎(chǔ)飼料。本發(fā)明采用樺褐孔菌多糖加入魚類飼料中，以代替抗生素藥物和疫苗的使用，不會(huì)產(chǎn)生抗藥性且使用成本低，能有效提高養(yǎng)殖魚類的生長性能、免疫力和抗氧化能力，拓寬了樺褐孔菌多糖的應(yīng)用范圍，為魚類飼料的開發(fā)提供了新途徑，促進(jìn)了魚類養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。
【專利說明】樺褐孔菌多糖作為魚類飼料添加劑的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域，特別涉及一種樺褐孔菌多糖作為海水和淡水養(yǎng)殖魚類 飼料添加劑的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 海洋魚類如石斑魚、大黃魚、大菱鲆(商品名多寶魚)為具有高經(jīng)濟(jì)價(jià)值的魚類。它 們的肉質(zhì)細(xì)嫩，味道鮮美，營養(yǎng)豐富，售價(jià)較高，在國內(nèi)外市場上久負(fù)盛名，供不應(yīng)求。近年 來，隨著魚類的規(guī)模化和集約化養(yǎng)殖的迅速發(fā)展，細(xì)菌和病毒感染導(dǎo)致的養(yǎng)殖病害爆發(fā)越 來越頻繁，病害一直是海洋魚類養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的制約因素，為控制疾病的發(fā)生，化學(xué)藥物和抗 生素等被大量使用，由此產(chǎn)生藥物殘留、水體正常微生物種群失調(diào)、耐藥性微生物增加、養(yǎng) 殖動(dòng)物內(nèi)臟機(jī)能損傷等一系列不良后果，而且有時(shí)抗生素處理失敗，其原因可能是每條魚 的口服抗生素劑量不同以及耐藥性導(dǎo)致的。疫苗雖然是有效的疾病預(yù)防替代物，但是疫苗 價(jià)格昂貴，而且是病原生物特異性的。因此，尋求抗生素藥物和疫苗的替代品就顯得尤為重 要。草魚是我國著名的"四大家魚"之一，是中國重要的養(yǎng) 殖經(jīng)濟(jì)魚類。但是在養(yǎng)殖過程中容易感染疾病，而且病害日益嚴(yán)重，而目前還沒有一個(gè)針對 草魚疾病的疫苗被批準(zhǔn)使用，為了預(yù)防疾病發(fā)生，研發(fā)有助草魚抗病的天然免疫增強(qiáng)劑迫 在眉睫。
[0003] 樣褐孔菌，又名白樣鸞，學(xué)名 歐洲人稱 之為"chaga"，是一種多孔菌科褐臥孔菌屬食藥用真菌。樺褐孔菌主要生長于白樺、銀樺、榆 樹、赤楊等活立木的樹皮下或砍伐后樹木的枯干上，形成不育的木腐菌，其菌核可以在砍伐 后的枯干上生存達(dá)6年之久。它主要分布于俄羅斯北部、北歐、中國黑龍江、吉林長白山、日 本北海道等北緯45-50°極寒地區(qū)。樺褐孔菌子實(shí)體一般呈瘤狀，直徑約25-40 cm，外表堅(jiān) 硬，有深的裂痕，較硬，干時(shí)脆，顏色呈黃褐色或更深。
[0004] 從16世紀(jì)以來，樺褐孔菌在俄羅斯、北歐一些國家被廣泛用于惡性腫瘤、糖尿病、 心血管疾病、肝病和艾滋病等疾病的治療。在俄羅斯，樺褐孔菌被廣泛用作日常保健品。日 本的研究人員則稱樺褐孔菌為一種"萬能藥"。在日本，樺褐孔菌的粉末狀沖劑經(jīng)常作為保 健茶來飲用。1955年莫斯科醫(yī)科院（The Medical Academy of Science in Moscow)宣布 將樺褐孔菌列為抗癌物質(zhì)，政府批準(zhǔn)樺褐孔菌可用于醫(yī)藥品開發(fā)。美國把樺褐孔菌列入"特 殊的天然物質(zhì)"。
[0005] 樺褐孔菌多糖是樺褐孔菌的重要藥理活性成分之一，樺褐孔菌多糖是一種新型的 真菌多糖，具有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化作用、抗炎癥及抗病毒等優(yōu)點(diǎn)，成為當(dāng)前免疫增強(qiáng)劑的研 究熱點(diǎn)。目前，樺褐孔菌多糖多應(yīng)用于體外及小鼠的抗氧化、免疫功能的研究中，作用效果 顯著。但樺褐孔菌多糖對于魚類是否合適，是否可以成為抗生素藥物和疫苗的替代品是個(gè) 未知數(shù)。如果樺褐孔菌多糖能夠提高魚類的免疫力和抗氧化能力，那么它在水產(chǎn)飼料添加 劑研究中具有廣闊的應(yīng)用前景。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0006] 本發(fā)明的目的在于提供一種樺褐孔菌多糖作為魚類飼料添加劑的應(yīng)用，采用樺褐 孔菌多糖加入魚類飼料中，以代替抗生素藥物和疫苗的使用，使用成本低，能有效提高養(yǎng)殖 魚類的生長性能、免疫力和抗氧化能力，拓寬了樺褐孔菌多糖的應(yīng)用范圍，為魚類飼料的開 發(fā)提供了新途徑。
[0007] 本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是： 一種樺褐孔菌多糖作為魚類飼料添加劑的應(yīng)用，樺褐孔菌多糖在魚類基礎(chǔ)飼料中的添 加量為l-20g/kg魚類基礎(chǔ)飼料。
[0008] 本發(fā)明首次將樺褐孔菌多糖作為添加劑應(yīng)用到魚類飼料中，以代替抗生素藥物和 疫苗的使用，不會(huì)產(chǎn)生抗藥性且使用成本低，發(fā)現(xiàn)能顯著提高魚類的增重率、特定生長率和 成活率，顯著降低飼料系數(shù)，并且顯著提高魚類血清溶菌酶、堿性磷酸酶和總抗氧化能力， 降低血清丙二醛含量。拓寬了樺褐孔菌多糖的應(yīng)用范圍，為魚類飼料的開發(fā)提供了新途徑。 本發(fā)明中，樺褐孔菌多糖的添加量低于lg/kg則無法明顯起到提高魚類的生長性能、免疫 力和抗氧化能力的效果；樺褐孔菌多糖的添加量高于20g/kg，則成本過高，且更進(jìn)一步提 高魚類的生長性能、免疫力和抗氧化能力的效果微弱，不利于應(yīng)用。
[0009] 本發(fā)明中的樺褐孔菌多糖可以是市售產(chǎn)品，優(yōu)選本發(fā)明自己制備的樺褐孔菌多 糖。
[0010] 作為優(yōu)選，樺褐孔菌多糖在魚類基礎(chǔ)飼料中的添加量為5-15g/kg魚類基礎(chǔ)飼料。 控制樺褐孔菌多糖在魚類基礎(chǔ)飼料中的添加量為5-15g/kg魚類基礎(chǔ)飼料，這樣應(yīng)用的效 果最佳。
[0011] 作為優(yōu)選，所述樺褐孔菌多糖由以下工藝制備獲得： (1)菌種活化：以樺褐孔菌為菌種，接種至斜面菌種培養(yǎng)基上培養(yǎng)，獲得活化菌種。
[0012] (2)液體菌種培養(yǎng)：將活化菌種轉(zhuǎn)入液體種子培養(yǎng)基中，搖床培養(yǎng)至對數(shù)期得液體 菌種。
[0013] (3)液體深層發(fā)酵：將液體菌種接入液體深層發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵培養(yǎng)，液體菌種 與液體深層發(fā)酵培養(yǎng)基的體積比為1:8-10,所述液體深層發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為：葡萄糖 30-32g/L，木質(zhì)纖維素 32-38g/L，蛋白胨 2-5g/L，KH2P04 l-2g/L，ZnS04.2H20 0.01-0. 02g/ L, K2HP04 0. 3-0. 5g/L, FeS04 · 7H20 0. 03-0. 07g/L, MgS04 · 7H20 0. 3-0. 6 g/L, CuS04 · 5H20 0· 01-0. 03 g/L，CoC12 0· 01 -0· 02g/L，MnS04 · H20 0· 06-0. 09 g/L，pH 值 6· 0-6· 5〇
[0014] 液體深層發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化的配方為：葡萄糖30-32g/L，木質(zhì)纖維素32-38g/L，蛋 白胨 3g/L，KH2P04 lg/L，ZnS04 · 2H20 0· 01g/L，Κ2ΗΡ04 0· 4g/L，F(xiàn)eS04 · 7H20 0.05 g/L, MgS04 · 7H20 0· 5 g/L，CuS04 · 5H20 0· 02 g/L，CoCl2 0· 01 g/L，MnS04 · H20 0· 08 g/L，pH 值 6.0。
[0015] 液體深層發(fā)酵的工藝參數(shù)為：發(fā)酵溫度27-28°C，發(fā)酵罐空氣流量0. 5-1. Ovvm，發(fā) 酵罐內(nèi)部壓力〇· 1-0.25 kg/cm3,攪拌轉(zhuǎn)速70-150轉(zhuǎn)/分鐘，發(fā)酵周期12-14天。
[0016] (4)樺褐孔菌多糖提?。簭陌l(fā)酵產(chǎn)物中提取樺褐孔菌多糖。
[0017] 作為優(yōu)選，從發(fā)酵產(chǎn)物中提取樺褐孔菌多糖的具體步驟為：發(fā)酵產(chǎn)物過濾，得發(fā)酵 液，發(fā)酵液濃縮至原體積的20%-30%，加入4-6倍體積的無水乙醇，攪拌均勻后在0-4°C下靜 置過夜，離心分離去上清液，沉淀冷凍干燥后即得樺褐孔菌多糖。
[0018] 作為優(yōu)選，從發(fā)酵產(chǎn)物中提取樺褐孔菌多糖的具體步驟為： a、 發(fā)酵產(chǎn)物過濾，得菌絲體和發(fā)酵液，發(fā)酵液濃縮至原體積的20%-30%，加入4-6倍體 積的無水乙醇，攪拌均勻后在0-4°C下靜置過夜，離心分離去上清液，沉淀冷凍干燥后得樺 褐孔菌胞外多糖； b、 將菌絲體水洗后，菌絲體懸浮于蒸饋水（lg菌絲體20-30ml蒸饋水）中，超聲破壁， 121 土 1°C加熱1. 5-2h，冷卻后離心收集上清液，殘?jiān)鼞腋∮谡麴s水（lg殘?jiān)?0-30ml蒸餾 水)中，121 ± 1°C加熱3-4h，冷卻后離心收集上清液，合并上清液，濃縮至原體積的20%-30%， 加入4-6倍體積的95%-98%的乙醇，攪拌均勻后在0-4°C下靜置過夜沉淀，所得沉淀依次用 95%-98%的乙醇和丙酮洗滌后，冷凍干燥得樺褐孔菌胞內(nèi)多糖； c、 將a步的樺褐孔菌胞外多糖和b步的樺褐孔菌胞內(nèi)多糖混合均勻后即為樺褐孔菌多 糖。
[0019] 本發(fā)明自己制備的樺褐孔菌多糖，可以是從發(fā)酵液中提取的樺褐孔菌胞外多糖作 為樺褐孔菌多糖使用，更為優(yōu)選是從發(fā)酵液中提取的樺褐孔菌胞外多糖和從菌絲體中提取 的樺褐孔菌胞內(nèi)多糖的混合物作為樺褐孔菌多糖使用。樺褐孔菌胞外多糖和樺褐孔菌胞內(nèi) 多糖的混合物組成的樺褐孔菌多糖，其中的雜多糖含量更豐富，活性物質(zhì)更全面均衡，提高 魚類的生長性能、免疫力和抗氧化能力的效果更顯著。
[0020] 作為優(yōu)選，所述木質(zhì)纖維素選自農(nóng)作物秸桿、木屑、花生殼、甘蔗渣中的一種。
[0021] 作為優(yōu)選，所述斜面菌種培養(yǎng)基的配方為：麥芽浸膏40 g/100mL，蛋白胨4 g/100mL，瓊脂10 g/100mL，pH值為5.4-5.6 ;斜面菌種培養(yǎng)基上培養(yǎng)的參數(shù)為：溫度 27-28°C，培養(yǎng) 200-250 小時(shí)。
[0022] 作為優(yōu)選，所述液體種子培養(yǎng)基的配方為：葡萄糖5g/100mL，蛋白胨 0.5g/100mL，酵母浸膏 0.1g/100mL，KH2P04 0.1 g/100mL，MgS04 0.15 g/100mL，CaCl2 0.01 g/100mL ;液體菌種培養(yǎng)的參數(shù)為：溫度27-28°C，培養(yǎng)3. 5-4. 5d，搖床轉(zhuǎn)速80-140轉(zhuǎn)/分 鐘。
[0023] 作為優(yōu)選，所述魚類具體為大黃魚、石斑魚、大菱鲆或草魚。
[0024] 作為優(yōu)選，包括樺褐孔菌多糖和魚類飼料基礎(chǔ)飼料，樺褐孔菌多糖用量為每千克 魚類飼料基礎(chǔ)飼料中添加5_15g。
[0025] 本發(fā)明的有益效果是：采用樺褐孔菌多糖加入魚類飼料中，以代替抗生素藥物和 疫苗的使用，不會(huì)產(chǎn)生抗藥性且使用成本低，能有效提高養(yǎng)殖魚類的生長性能、免疫力和抗 氧化能力，拓寬了樺褐孔菌多糖的應(yīng)用范圍，為魚類飼料的開發(fā)提供了新途徑，促進(jìn)了魚類 養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。
[0026]
【具體實(shí)施方式】
[0027] 下面通過具體實(shí)施例，對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的具體說明。
[0028] 本發(fā)明中，若非特指，所采用的原料和設(shè)備等均可從市場購得或是本領(lǐng)域常用的。 下述實(shí)施例中的方法，如無特別說明，均為本領(lǐng)域的常規(guī)方法。
[0029] 魚類基礎(chǔ)飼料為現(xiàn)有技術(shù)，可以是市售，也可以是現(xiàn)有文獻(xiàn)中公開的配方。
[0030] 實(shí)施例1 : 稱取大黃魚crocea)基礎(chǔ)飼料(配方見張春曉等，飼料中添加肽聚糖 對大黃魚生長和非特異性免疫力的影響，水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2008,32 (3)) 100kg，加入100g樺褐孔 菌多糖(市售，浙江方格藥業(yè)有限公司）或本發(fā)明自己制備的樺褐孔菌多糖，混合均勻后，然 后加水揉勻，用SLX-80型雙螺桿擠壓機(jī)制成直徑為2. 5mmX 8. 0mm的顆粒狀飼料，并在40°C 烘干至飼料水分含量為10 %左右。
[0031] 本發(fā)明自己制備的樺褐孔菌多糖的制備方法如下： (1)菌種活化：以樺褐孔菌(市售，購自徐州師范大學(xué)）為菌種，劃線接種至斜面菌種 培養(yǎng)基上27°C，培養(yǎng)250小時(shí)，獲得活化菌種；斜面菌種培養(yǎng)基的配方為：麥芽浸膏40 8/1001^，蛋白胨4 8/1001^，瓊脂10 8/1001^，？!1值為5.4-5.6。
[0032] (2)液體菌種培養(yǎng)：將活化菌種轉(zhuǎn)入液體種子培養(yǎng)基27°C，搖床上培養(yǎng)4. 5d至對 數(shù)期得液體菌種，搖床轉(zhuǎn)速80轉(zhuǎn)/分鐘。液體種子培養(yǎng)基的配方為：葡萄糖5g/100mL，蛋 白胨 0.5g/100mL，酵母浸膏 0.1g/100mL，KH2P04 0.1 g/100mL，MgS04 0.15 g/100mL，CaCl2 0.01 g/100mL。
[0033] (3)液體深層發(fā)酵：將液體菌種接入裝有液體深層發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中發(fā)酵培 養(yǎng)，液體菌種與液體深層發(fā)酵培養(yǎng)基的體積比為1:8,液體深層發(fā)酵的工藝參數(shù)為：發(fā)酵 溫度27°C，發(fā)酵罐空氣流量0. 5vvm，發(fā)酵罐內(nèi)部壓力0. 1 kg/cm3,攪拌轉(zhuǎn)速70轉(zhuǎn)/分鐘， 發(fā)酵周期14天；所述液體深層發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為：葡萄糖30g/L，玉米秸桿32g/L，蛋白 胨 2g/L，KH2P04 lg/L，ZnS04 · 2H20 0· 01g/L，Κ2ΗΡ04 0· 3g/L，F(xiàn)eS04 · 7H20 0.03 g/L, MgS04 · 7H20 0· 3 g/L，CuS04 · 5H20 0· 01 g/L，CoCl2 0· 01 g/L，MnS04 · H20 0· 06 g/L，pH 值6. 0 ;發(fā)酵終點(diǎn)確立的標(biāo)準(zhǔn)為還原糖含量低于2%，鏡檢發(fā)現(xiàn)菌絲體開始衰老。
[0034] (4)樺褐孔菌多糖提?。喊l(fā)酵產(chǎn)物過濾，得發(fā)酵液，發(fā)酵液濃縮至原體積的20%，加 入4倍體積的無水乙醇，攪拌均勻后在0°C下靜置過夜，離心分離去上清液，沉淀冷凍干燥 后即得樺褐孔菌多糖。
[0035] 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù) 以大黃魚基礎(chǔ)飼料為空白對照飼料，在每千克大黃魚基礎(chǔ)飼料中添加 lg樺褐孔菌多 糖作為試驗(yàn)組的飼料。
[0036] 大黃魚放于海水網(wǎng)箱中暫養(yǎng)，并以基礎(chǔ)飼料飽食投喂，使之逐漸適應(yīng)實(shí)驗(yàn)飼料。暫 養(yǎng)2周后，選出體格健壯、規(guī)格一致（平均體質(zhì)量150g的大黃魚）進(jìn)行分組實(shí)驗(yàn)，每組3個(gè) 重復(fù)，每個(gè)重復(fù)25尾，每天投喂2次（05 :00和17 :30)，達(dá)飽足。實(shí)驗(yàn)期間海水水溫為23? 27°C，鹽度為29?33,溶解氧含量在7 mg/1以上。養(yǎng)殖周期為8周。
[0037] 飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，分別從每網(wǎng)箱隨機(jī)抽取6尾試驗(yàn)魚，以丁香酚麻醉，用無菌注射 器從尾靜脈取血，將其血液混合，置于滅菌的EP管中作為1個(gè)樣品組。一部分抗凝全血處 理后用于大黃魚白細(xì)胞吞噬活力的分析；另一部分不加抗凝劑的全血置于4°C冰箱中靜置 4 h，待其凝血后于4°C離心，分離血清和血細(xì)胞，備用于后續(xù)免疫指標(biāo)分析。結(jié)果見表1。
[0038] 表1樺褐孔菌多糖對大黃魚血清抗菌活力和非特異性免疫活性的影響
【權(quán)利要求】
1. 一種樺褐孔菌多糖作為魚類飼料添加劑的應(yīng)用，其特征在于：樺褐孔菌多糖在魚類 基礎(chǔ)飼料中的添加量為l-20g/kg魚類基礎(chǔ)飼料。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：樺褐孔菌多糖在魚類基礎(chǔ)飼料中的添加 量為5-15g/kg魚類基礎(chǔ)飼料。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于：所述樺褐孔菌多糖由以下工藝制備 獲得： (1) 菌種活化：以樺褐孔菌為菌種，接種至斜面菌種培養(yǎng)基上培養(yǎng)，獲得活化菌種； (2) 液體菌種培養(yǎng)：將活化菌種轉(zhuǎn)入液體種子培養(yǎng)基中，搖床培養(yǎng)至對數(shù)期得液體菌 種； (3) 液體深層發(fā)酵：將液體菌種接入液體深層發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵培養(yǎng)，液體菌種與液體 深層發(fā)酵培養(yǎng)基的體積比為1:8-10,所述液體深層發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為：葡萄糖30-32g/ L，木質(zhì)纖維素 32-38g/L，蛋白胨 2-5g/L，KH2P04 l-2g/L，ZnS04 · 2H20 0· 01-0. 02g/L， K2HP04 0· 3-0. 5g/L，F(xiàn)eS04 · 7H20 0· 03-0. 07g/L，MgS04 · 7H20 0· 3-0. 6 g/L，CuS04 · 5H20 0· 01-0. 03 g/L，CoC12 0· 01 -0· 02g/L，MnS04 · H20 0· 06-0. 09 g/L，pH 值 6. 0-6. 5 ; 液體深層發(fā)酵的工藝參數(shù)為：發(fā)酵溫度27-28°C，發(fā)酵罐空氣流量0. 5-1. Ovvm，發(fā)酵罐 內(nèi)部壓力〇· 1-0. 25 kg/cm3,攪拌轉(zhuǎn)速70-150轉(zhuǎn)/分鐘，發(fā)酵周期12-14天； (4) 樺褐孔菌多糖提?。簭陌l(fā)酵產(chǎn)物中提取樺褐孔菌多糖。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于：從發(fā)酵產(chǎn)物中提取樺褐孔菌多糖的具體 步驟為：發(fā)酵產(chǎn)物過濾，得發(fā)酵液，發(fā)酵液濃縮至原體積的20%-30%，加入4-6倍體積的無水 乙醇，攪拌均勻后在0-4°C下靜置過夜，離心分離去上清液，沉淀冷凍干燥后即得樺褐孔菌 多糖。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于：從發(fā)酵產(chǎn)物中提取樺褐孔菌多糖的具體 步驟為： a、 發(fā)酵產(chǎn)物過濾，得菌絲體和發(fā)酵液，發(fā)酵液濃縮至原體積的20%-30%，加入4-6倍體 積的無水乙醇，攪拌均勻后在0-4°C下靜置過夜，離心分離去上清液，沉淀冷凍干燥后得樺 褐孔菌胞外多糖； b、 將菌絲體水洗后，菌絲體懸浮于蒸餾水中，超聲破壁，121 ± 1 °C加熱1. 5-2h，冷卻后 離心收集上清液，殘?jiān)鼞腋∮谡麴s水中，121 ± 1°C加熱3-4h，冷卻后離心收集上清液，合并 上清液，濃縮至原體積的20%-30%，加入4-6倍體積的95%-98%的乙醇，攪拌均勻后在0-4°C 下靜置過夜沉淀，所得沉淀依次用95%-98%的乙醇和丙酮洗滌后，冷凍干燥得樺褐孔菌胞 內(nèi)多糖； c、 將a步的樺褐孔菌胞外多糖和b步的樺褐孔菌胞內(nèi)多糖混合均勻后即為樺褐孔菌多 糖。
6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于：所述木質(zhì)纖維素選自農(nóng)作物秸桿、木屑、 花生殼、甘蔗渣中的一種。
7. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于：所述斜面菌種培養(yǎng)基的配方為：麥芽浸膏 40 g/100mL，蛋白胨4 g/100mL，瓊脂10 g/100mL，pH值為5. 4-5. 6;斜面菌種培養(yǎng)基上培養(yǎng) 的參數(shù)為：溫度27-28°C，培養(yǎng)200-250小時(shí)。
8. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于：所述液體種子培養(yǎng)基的配方為：葡萄糖 5g/100mL，蛋白胨 0.5g/100mL，酵母浸膏 0.1g/100mL，KH2P04 0.1 g/100mL，MgS04 0.15 g/100mL，CaCl2 0. 01 g/100mL;液體菌種培養(yǎng)的參數(shù)為：溫度27-28°C，培養(yǎng)3. 5-4. 5d，搖床 轉(zhuǎn)速80-140轉(zhuǎn)/分鐘。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于：所述魚類具體為大黃魚、石斑魚、大 菱鲆或草魚。
10. -種添加有樺褐孔菌多糖的魚類飼料，其特征在于：包括樺褐孔菌多糖和魚類飼 料基礎(chǔ)飼料，樺褐孔菌多糖用量為每千克魚類飼料基礎(chǔ)飼料中添加5-15g。
【文檔編號(hào)】A23K1/16GK104206776SQ201310206283
【公開日】2014年12月17日 申請日期:2013年5月29日 優(yōu)先權(quán)日:2013年5月29日
【發(fā)明者】徐向群 申請人:徐向群