專利名稱：枸杞子乙醇提取物用于生物農(nóng)藥的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及枸杞子乙醇提取物的一種新用途，具體涉及枸杞子乙醇提取物在農(nóng)藥方面的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
棉鈴蟲(chóng)(Heliothis armigera)屬于鱗翅目夜蛾科,其寄主范圍廣,繁殖能力強(qiáng),是亞洲、大洋洲、非洲及歐洲各地危害棉花及其他作物的主要害蟲(chóng)之一，是世界性的農(nóng)作物害蟲(chóng)。自上個(gè)世紀(jì)90年代以來(lái)，棉鈴蟲(chóng)在我國(guó)黃河、長(zhǎng)江、遼河流域及新疆等主要棉產(chǎn)區(qū)大發(fā)生年頻率明顯增加，致棉花減產(chǎn)率高達(dá)35 50%，有些地區(qū)的部分田地甚至絕收。早疫病菌(Alternaria solani)是引發(fā)茄科植物早疫病的病原菌，主要為害西紅柿、馬鈴薯、辣椒、茄子等蔬菜。多在苗期發(fā)病，葉尖或頂芽產(chǎn)生暗褐色水潰狀病斑，引起腐 爛，手感滑溜，幼苗上部腐爛后，形成無(wú)頂苗，甚至爛到床土面，致使苗期就死亡，危害很大。為了防治病害，人們一方面通過(guò)選育抗病品種來(lái)增加抗性，一方面進(jìn)行化學(xué)防治。前者有一定的局限性，后者會(huì)帶來(lái)環(huán)境污染。因此開(kāi)發(fā)高效、低毒、低殘留的新型農(nóng)藥尤其是生物源農(nóng)藥越來(lái)越受到重視。枸杞子為爺科植物寧夏枸杞Lycium barb arum L.的干燥成熟果實(shí)，同屬植物L(fēng). Chinense Mill.的果實(shí)習(xí)稱“川枸杞”或“灃枸杞”，在少數(shù)地區(qū)作枸杞子使用，但品質(zhì)較次。枸杞子是一味傳統(tǒng)常用中藥，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品?！侗静菥V目》謂其補(bǔ)腎、潤(rùn)肺、生精、益氣。《圣惠方》載枸杞子酒補(bǔ)虛損、強(qiáng)筋骨、悅顏色、健身體。枸杞子性平、味甘，具有滋補(bǔ)肝腎，益精明目的功效。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，枸杞子具有抑菌(人體病原菌)、抗誘變、降血脂、降血糖、抗衰老、對(duì)鉛免疫毒性的拮抗作用、免疫調(diào)節(jié)作用。但未有其在農(nóng)藥方面的應(yīng)用。
發(fā)明內(nèi)容
為了開(kāi)發(fā)新的生物源農(nóng)藥，本發(fā)明提供了枸杞子乙醇提取物在農(nóng)藥方面的用途，主要涉及毒殺棉鈴蟲(chóng)(Heliothis armigera)及抗植物早疫病(Alternaria solani)。枸杞子乙醇提取物在應(yīng)用時(shí)，首先采用DMSO溶解制備成母液。應(yīng)用在抗早疫病病原菌時(shí)，將上述母液用O. 025%的吐溫20稀釋至枸杞子乙醇提取物的濃度為20PPM。應(yīng)用在毒殺棉鈴蟲(chóng)時(shí)，將上述母液用O. 025%的吐溫20稀釋至枸杞子乙醇提取物的濃度為60 μ g/cm2。本發(fā)明相比現(xiàn)有技術(shù)具有以下優(yōu)點(diǎn)利用枸杞子乙醇提取物作為殺蟲(chóng)、抗菌劑，能有效殺蟲(chóng)、抑制植物病原菌，其來(lái)源廣泛，對(duì)人畜無(wú)毒，不會(huì)產(chǎn)生化學(xué)農(nóng)藥使用過(guò)程中產(chǎn)生的“三R”，對(duì)環(huán)境的污染較小。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明枸杞子乙醇提取物在農(nóng)藥方面的應(yīng)用進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。供試樣品枸杞子藥材購(gòu)于南京藥業(yè)股份有限公司。實(shí)驗(yàn)儀器高速萬(wàn)能粉碎機(jī)；立式自動(dòng)壓力蒸汽滅菌器；搖床；超聲波震蕩儀；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；恒溫水浴鍋；電子天平；智能人工氣候箱；真空泵。提取方法枸杞子與(60 100% )乙醇I : 8 10(W/V)回流提取2小時(shí)后過(guò)濾，濾渣再用8倍量(60 100% )乙醇回流提取2小時(shí)后過(guò)濾，濾液合并，減壓濃縮，60°C
下干燥，得褐色浸膏。母液配置取枸杞子乙醇提取物(褐色浸膏)用DMSO溶解，制備成濃度為IOmg/mL的母液。 測(cè)試溶液的配置使用時(shí)將母液用O. 025% Tween 20稀釋至適當(dāng)濃度。實(shí)施例一供試?yán)ハx(chóng)棉鈴蟲(chóng)(Heliothisarmigera)、小菜蛾(Plutella xylostella)和豆蟲(chóng)牙(Aphis craccivora)由湖北省農(nóng)科院提供。試驗(yàn)方法以小菜蛾和棉鈴蟲(chóng)為試蟲(chóng)時(shí)，卵用10%的甲醛溶液消毒15min，采用經(jīng)改進(jìn)的北京農(nóng)科院梁革梅的飼料配方，室內(nèi)人工飼養(yǎng)。飼養(yǎng)條件溫度25°C，相對(duì)濕度為75%-85%。將樣品稀釋至一定濃度后涂布于人工飼料表面。采用96孔細(xì)胞培養(yǎng)板進(jìn)行篩選。每孔加入300 μ L人工飼料和樣品稀釋液20 μ L，一周后檢查實(shí)驗(yàn)結(jié)果。初步篩選時(shí)樣品濃度為I. Omg/mL，復(fù)篩濃度根據(jù)初篩結(jié)果進(jìn)行調(diào)整。以豆蚜為試蟲(chóng)時(shí)采用浸泡法。初篩濃度為I. Omg/mL，直接將長(zhǎng)有豆蚜的豆苗浸泡在藥液中，一周后檢查結(jié)果。復(fù)篩濃度根據(jù)初篩結(jié)果進(jìn)行調(diào)整。試驗(yàn)結(jié)果枸杞子乙醇提取物在樣品最終濃度為60 μ g/cm2時(shí),對(duì)棉鈴蟲(chóng)有100%毒殺作用，對(duì)小菜蛾和豆蚜無(wú)毒殺作用。實(shí)施例二供試菌終極腐霉菌(Pythium ultimum)、灰霉菌(Botrytis cinerea)、小麥穎枯病原菌(Septoria nodorum)、早疫病病原菌(Alternaria Solani)、小麥赤霉病原菌(Fusarium culmorum)、立枯病原菌(Rhizoctonia solani)由湖北省農(nóng)科院提供。試驗(yàn)方法半固體培養(yǎng)基法。采用96孔細(xì)胞培養(yǎng)板進(jìn)行篩選。每孔加入90 μ L培養(yǎng)基和待測(cè)真菌的菌絲體或孢子的混合物，每孔加入藥液量為10 μ L。初篩在培養(yǎng)基中樣品終濃度分別為20ppm。復(fù)篩濃度根據(jù)初篩結(jié)果進(jìn)行調(diào)整。試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)表明，枸杞子乙醇提取物在樣品最終濃度為20ppm時(shí)對(duì)早疫病病原菌有較強(qiáng)的抑制作用，抑制率為77%。
權(quán)利要求
1.枸杞子乙醇提取物在農(nóng)藥方面的用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于所述枸杞子乙醇提取物用于毒殺棉鈴蟲(chóng)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于所述枸杞子乙醇提取物在應(yīng)用時(shí)，先采用DMSO溶解制備母液，使用前取所述母液用0. 025%的吐溫20稀釋至枸杞子乙醇提取物的應(yīng)用濃度為60 ii g/cm2。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于所述枸杞子乙醇提取物用于抑制植物早疫病病原菌，防治茄科植物早疫病。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用途，其特征在于所述枸杞子乙醇提取物在應(yīng)用時(shí)，先采用DMSO溶解制備母液，使用前取所述母液用0. 025%的吐溫20稀釋至枸杞子乙醇提取物的濃度為20ppm。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了枸杞子乙醇提取物在農(nóng)藥方面的用途，尤其涉及枸杞子乙醇提取物在毒殺棉鈴蟲(chóng)、抗植物早疫病方面的用途。本發(fā)明所述枸杞子乙醇提取物能有效毒殺棉鈴蟲(chóng)及抑制植物早疫病病原菌，擴(kuò)大了生物農(nóng)藥的選擇范圍。
文檔編號(hào)A01P3/00GK102960375SQ20121054993
公開(kāi)日2013年3月13日 申請(qǐng)日期2012年12月18日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月18日
發(fā)明者馬麗, 李維林, 王開(kāi)梅, 顧玉誠(chéng), 劉玲玲 申請(qǐng)人:江蘇省中國(guó)科學(xué)院植物研究所