專利名稱：：無菌盆景的制作方法無菌盆景的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種觀賞園藝盆景的制作方法，特別是將離體培養(yǎng)的無菌苗與裝飾材料置于無菌透明的容器內(nèi)，使無菌苗在與外界隔離的環(huán)境中生長或開花的無菌盆景的制作方法。
背景技術(shù)：
：無菌盆景是利用無菌植物和裝飾品在容器內(nèi)組成各種微型景觀的工藝品。它無需任何維護，具有高新穎性，美觀大方等優(yōu)點。是一種高雅的藝術(shù)品，具有很好的市場開發(fā)前景?，F(xiàn)有離體培養(yǎng)試管苗成功的品種很多，培養(yǎng)瓶內(nèi)開花的品種也有十幾種。其中有些品種在瓶內(nèi)開花時間短，有些品種開花率很低。有些品種試管花不具觀賞價值。所以，真正在瓶內(nèi)開花，花期長，開花率高，觀賞性強的品種極少。韓國的迷你玫瑰開花期也只有一個月左右。對于在無菌的容器內(nèi)制作盆景目前還未見報道。只見到在開放式的容器內(nèi)加入水晶泥等樹脂固形物，并將植物栽入其中，使其短時間存活。由于是開放式培養(yǎng)，必然會引起水分的蒸發(fā)，時間長就會發(fā)臭，導致根部爛死，所以還需口常管理，這也是水晶泥盆花難以在市場上推廣開的主要原因之一。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是制作無菌盆景，即把無菌苗與各種裝飾材料制作成各種各樣的無菌盆景，置無菌盆景于無菌透明的容器中，使無菌苗與外界隔離的環(huán)境中，通過特殊的培養(yǎng)基提供水分和養(yǎng)分，逐漸成長，甚至開花。本發(fā)明無菌盆景的制作方法，包括外植體消毒、培養(yǎng)基配制和盆景定植，具體包含以下步驟1、外植體消毒與植物組織培養(yǎng)常規(guī)消毒相同。將外植體經(jīng)洗衣粉表面清洗后，用75%酒精浸30秒，0.1%升滎浸泡5—20分鐘，無菌水清洗3—5次后接種。所述外植體如種子、葉芽、葉片……。2、培養(yǎng)基配制根據(jù)培養(yǎng)基配方，先稱取瓊脂粉、白糖，加入300毫升的蒸熘水中煮沸后，再如數(shù)加入配方中的其他成分；如果需要增加培養(yǎng)基的色彩，還可以添加各種食用色素，色素的使用總量不超過80mg/L;以上各種成分溶解混合后加蒸餾水至1000毫升，再用3%的NaOH或HC1調(diào)至pH5.8;然后，將培養(yǎng)基分裝到透明容器中封口。在l.lkg/cm高壓下滅菌20分鐘，冷卻凝固后備用。所述培養(yǎng)基中各種成份及用量如下序號成分名稱用量mg/L序號成分名稱用量mg/L1KN0350095015煙酸0.52歸0330050016鹽酸吡眵素0.53Mg(S0)47H2018537017鹽酸硫胺素0.14KH2P038517018肌醇1005CaCl2.2H2022044019廿氨酸26FeS047H2027.820白糖200007Na2-EDTA37.321瓊脂粉60008MnS(V■22.3226-芐基腺縹呤0.139ZnS04.7H208.623萘乙酸0.1310CoCl2.6H200.0252415%多效唑。.0151]CuS04.5H200.02525業(yè)精胺512腿oO"2H200.2513KI0.8314H3BO:!6.2以上化學試劑均為干燥固體物，化學純;mg/L表示1升培養(yǎng)基中所含藥品的毫克數(shù)。其中，6-芐基腺縹呤用INHCI溶解。萘乙酸用95%的酒精溶解。3、無菌培育將無菌苗及滅菌過的裝飾材料在無菌條件下接種到透明的容器中，然后封口。所述封口材料，如保鮮膜、或封口膜、或可殺菌過濾空氣的材料，……；所述裝飾材料如假山、珊瑚；陶瓷做的塔、亭、小橋、小人物、各種動物；塑料做的橋、旗、各種人物……。假山、珊瑚和陶瓷做的裝飾材料用高溫高壓滅菌，塑料做的裝飾材料用化學消毒劑進行滅菌后使用。本發(fā)明技術(shù)具有如下有益效果1.本發(fā)明的培養(yǎng)基配方與MS培養(yǎng)基相比，它的N含量降低，P、K含量提高。有利于植物的花芽分化，促進開花(如表l所示)。6-芐基腺縹呤和萘乙酸是促進植物細胞分裂、分化。15%多效唑可以控制植株的大小和促進提早開花(如表2所示)。亞精胺是促進植物的花芽分化和開花。食用色素是增加培養(yǎng)基的美觀。表1不同培養(yǎng)基對羽狀雞冠花瓶內(nèi)開花的影響土肯養(yǎng)基接種芽數(shù)開花株數(shù)開花率(％)MS601016.71/2MS601321.7本發(fā)明培養(yǎng)基6054卯.0注使用本發(fā)明培養(yǎng)基與MS和1/2MS培養(yǎng)基相比，開花率都有明顯的提高，開花率達到90%。表2不同多效唑濃度對羽狀雞冠花瓶內(nèi)開花的影響*15%多效唑接種芽數(shù)開花株數(shù)開花率開花時平均株高(mg/L)(個)(株)(%)間(天)(cm)0604981.3482.70.5605388.3351.51605490.0301.32604880.0340.9*培養(yǎng)基為本發(fā)明培養(yǎng)基，除了多效唑不同外；開花時間是從播種到花蕾出現(xiàn)時間。試驗結(jié)果表明隨著多效唑的濃度升高，植株的高度明顯降低，開花的吋間卻有明顯地提前。對開花率來說，多效唑的最佳濃度為0.5mg/L和1.0mg/L，開花率都在88.0%以上。2.本發(fā)明的無菌盆景只需放在常溫環(huán)境和一般的散射光下，不會出現(xiàn)任何的病蟲害，平常無需任何維護，環(huán)保、衛(wèi)生、美觀。觀賞期在6個月以上。3.本發(fā)明的無菌盆景是在無菌、可控的環(huán)境下生產(chǎn)，不受自然條件的限制，周年可以生產(chǎn)。4.本發(fā)明的無菌盆景在無菌、透明的工藝瓶容器中吸收豐富的營養(yǎng)培養(yǎng)基，使其生長發(fā)育，甚至開花。人們在欣賞中可以觀察到植物的生根、萌芽、開花等。這可以作為中小學生的課外活動項目，讓他們認識植物，了解植物。5.本發(fā)明的無菌盆景與現(xiàn)在技術(shù)相比，最突出的一點就是將盆景藝術(shù)和景觀藝術(shù)縮小到無菌、透明的工藝瓶容器中，人們可以按照自己的構(gòu)思，制作出各種各樣的微型藝術(shù)品。這也為生物技術(shù)行業(yè)提供了一個更廣泛的應用空間。6.該技術(shù)科技含量高，市場前景好，便于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。圖l為觀葉植物無菌盆景，圖中的植物為紅籠草；圖2為一種混合無菌盆景，圖中的植物為合果芋、相思樹和雞冠花。具體實施例為了充分公開本發(fā)明無菌盆景的制作方法，以下結(jié)合實施例加以說明。例1:一種觀葉植物無菌盆景(所述觀葉植物如紅籠草、合果芋、有文心蘭、石斛蘭、花葉芋……)，其制作方法如下1、外植體消毒將植物的外植體(包括種子、葉芽、葉片等)經(jīng)洗衣粉表面清洗后，用75%酒精浸30秒，0.1%升汞浸泡5_20分鐘，無菌水清洗3—5次后接種；2、配制培養(yǎng)基根據(jù)配方，先稱取瓊脂粉、白糖，加入到300亳升的蒸餾水中煮沸后，再如數(shù)加入配方中的其他成分，另添加紅色食用色素3mg/L;以上各種成分溶解混合后加蒸餾水至1000毫升，再用3%的NaOH或1NHC1調(diào)pH至5.8后，將培養(yǎng)基分裝到透明容器中封口。在1.lkg/cm2高壓下滅菌20分鐘，冷卻凝固后備用。高壓滅菌時可同時將耐高溫高壓的裝飾材料高壓滅菌。所述培養(yǎng)基配方如下序號成分名稱用量mg/L序號成分名稱用量mg/L1認0395015煙酸0.52NH.,亂45016鹽酸吡眵素0.53Mg(S0h7HZ0丄8517鹽酸硫胺素0.148518肌醇1005CaCl2.2關(guān)22019甘氨酸26FeSO,,7貼27.820白糖200007NafEDTA37.321瓊脂粉60008MnSO"4H2022.3226-芐基腺縹呤0.19ZnSOi.7H208.623萘乙酸0.510CoCL.6貼0.0252415%多效唑0.0111C復5H200.02525亞精胺012NaMo04.2H200.2513KI0.8314H:iB0t6.23.無菌培育根據(jù)容器的形狀、大小，選擇與容器相適應的無菌苗，和裝飾材料。在凈化工作臺上根據(jù)對所要制作盆景的構(gòu)思定位，先將消毒后的裝飾材料在培養(yǎng)基高壓后還未完全凝固之前安放在構(gòu)思相對應位置的培養(yǎng)基上。培養(yǎng)基完全凝固后，將各種無菌苗接種到容器中相應位置的培養(yǎng)基上，最后用瓶蓋或保鮮薄將透明容器封口。如圖1所示，一種觀葉植物無菌盆景，在室溫和自然散射光下，就可以欣賞到植物的生長過程，觀賞期可以在6個月以上。例2:—種觀花植物無菌盆景的制作方法，包括以下步驟(所述觀花植物，如雞冠花、石竹、牽?；ā?步驟1與步驟3與實施例一類同，步驟2中配制培養(yǎng)基的方法如下根據(jù)培養(yǎng)基配方，先稱取瓊脂粉、白糖，加入到300毫升的蒸餾水中煮沸后，再如數(shù)加入配方中的其他成分；另添加擰檬黃食用色素60mg/L;以上各種成分溶解混合后加蒸餾水至1000毫升，再用3%的NaOH或1NHC1調(diào)PH至5.8后，將培養(yǎng)基分裝到透明容器中封口。在1.lkg/cm2高壓下滅菌20分鐘，冷卻凝固后備用。高壓滅菌時可同時將耐高溫高壓的裝飾材料高壓滅菌。所述培養(yǎng)基配方如下<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>例3:—種混合無菌盆景(所述混合無菌盆景，如圖2所示，以合果芋、相思樹和雞冠花的無菌苗混合接種的盆景)，制作方法包括以下步步驟1與步驟3與實施例一類同，步驟2中配制培養(yǎng)基的方法如下根據(jù)培養(yǎng)基配方，先稱取瓊脂粉、白糖，加入到300毫升的蒸餾水中煮沸后，再如數(shù)加入配方中的其他成分；另添加蘭色食用色素3mg/L，(或者不添加色素也可以)，以上各種成分溶解混合后加蒸餾水至1000毫升，再用3%的NaOH或1NHC1調(diào)pH至5.8后，將培養(yǎng)基分裝到透明容器中封口。在1.1kg/cn^高壓下滅菌20分鐘，冷卻凝固后備用。高壓滅菌時可同時將耐高溫高壓的裝飾材料高壓滅菌。所述培養(yǎng)基配方如下<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>權(quán)利要求1.一種無菌盆景的制作方法，包括外植體消毒、培養(yǎng)基配制和無菌培育，其特征在于A、所述培養(yǎng)基的配制方法，根據(jù)培養(yǎng)基配方，先稱取瓊脂粉、白糖，加入300毫升的蒸餾水中煮沸后，再如數(shù)加入配方中的其他成分；如果需要增加培養(yǎng)基的色彩，還可以另外添加各種食用色素，色素的使用總量不超過80mg/L；以上各種成分溶解混合后加蒸餾水至1000毫升，再用3％的NaOH或HCl調(diào)至pH5.8；然后，將培養(yǎng)基分裝到透明容器中封口。在1.1kg/cm高壓下滅菌20分鐘，冷卻凝固后備用；B、所述培養(yǎng)基中各種成份及用量如下序號成分名稱用量mg/L序號成分名稱用量mg/L1KNO3500～95015煙酸0.52NH4NO3300～50016鹽酸吡哆素0.53Mg(SO)47H2O185～37017鹽酸硫胺素0.14KH2PO385～17018肌醇1005CaCl2.2H2O220～44019甘氨酸26FeSO47H2O27.820白糖200007Na2-EDTA37.321瓊脂粉60008MnSO4.4H2O22.3226-芐基腺縹呤0.1～39ZnSO4.7H2O8.623萘乙酸0.1～310CoCl2.6H2O0.0252415％多效唑0.01～511CuSO4.5H2O0.02525亞精胺0～512NaMoO4.2H2O0.2513KI0.8314H3BO36.2C、所述無菌培育將無菌苗及滅菌過的裝飾材料在無菌條件下接種到透明的容器中，然后封口。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種無菌盆景的制作方法，其特征在于可以在培養(yǎng)基中添加各種食用色素。3、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種無菌盆景的制作方法，其特征在于所述培養(yǎng)基中各種成份及用量如下序號成分名稱用量mg/L序號成分名稱用量mg/L1跳50015煙酸0.52NH4N0330016鹽酸吡哆素0.53Mg(S0)47H2037017鹽酸硫胺素0.14KH2P0317018肌醇1005CaCI2.2貼22019甘氨酸26FeS047H2027.820白糖200007Na2-EDTA37.321瓊脂粉60008MnS04.4H2022.3226-節(jié)基腺縹呤0.19ZnS04.7H208.623萘乙酸110CoCL.6H2O0.0252415%多效唑311CuS04.5H200.02525亞精胺112NaMo04.2貼0.2513KI0.8314貼0:;6.24、根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種無菌盆景的制作方法，其特征在于色素的使用總量不超過80mg/L。5、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種無菌盆景的制作方法，其特征在于封口材料為保鮮膜、或封口膜、或可殺菌過濾空氣的材料。全文摘要一種無菌盆景的制作方法，涉及一種觀賞園藝盆景的制作方法，即把離體培養(yǎng)的無菌苗與裝飾材料置于無菌透明的容器內(nèi)，無菌苗在與外界隔離的環(huán)境中，通過特殊的培養(yǎng)基提供水分和養(yǎng)分，逐漸成長，甚至開花。無菌盆景只需放在常溫環(huán)境和一般的散射光下，即可在透明的工藝瓶容器中生長、發(fā)育。人們可以觀察到生根、萌芽、開花的全過程。無菌苗不會出現(xiàn)任何的病蟲害，平常無需任何維護，環(huán)保、衛(wèi)生、美觀；觀賞期在6個月以上。無菌盆景既是一種休閑消遣，也可以幫助中小學生認識植物，了解植物。文檔編號A01G31/00GK101278646SQ20081007113公開日2008年10月8日申請日期2008年5月26日優(yōu)先權(quán)日2008年5月26日發(fā)明者林慶良申請人:福建農(nóng)林大學