專利名稱：圓齒野鴉椿莖段的組織培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于經(jīng)濟(jì)林的栽培方法，特別是涉及藥用、觀賞植物圓齒野鴉椿組織培養(yǎng)方法。
技術(shù)背景圓齒野鴉椿(^/""力A 10"/"http:// J^Wa)為省沽油科野鴉椿屬常綠小喬木，種子油可 制肥皂；樹皮可制栲膠；根、果性溫，味微苦。祛風(fēng)除濕，止血止痛，發(fā)表散寒。根治產(chǎn) 褥熱，趺打損傷；果治睪丸腫痛，子宮脫垂。圓齒野鴉椿具有觀花、觀葉和賞果的效果， 觀賞價值高。掛果時間長，從9月下旬外果皮變紅到翌年3月果實(shí)脫落，觀果時間長達(dá)半 年，紅色艷麗的瞢莢果給秋冬季節(jié)增添了許多喜慶色彩，使人陶醉。野鴉椿作為觀賞樹種， 應(yīng)用范圍廣，可群植、叢植于草坪，也可用于庭園，公園等地布景。但由于圓齒野鴉椿的 種子有深休眠的特點(diǎn)，從釆種到播種出苗跨度3年，而且出苗率低，要能獲得優(yōu)良的發(fā)芽 率，獲得更多的健壯苗。對種子進(jìn)行沙藏催芽；江西農(nóng)業(yè)大學(xué)等單位開展了播種繁育方法 研究，但其發(fā)芽率在65%左右，具備很好的實(shí)用前景，但仍然較低，沒能符合生產(chǎn)實(shí)際需要。 生產(chǎn)中，特別大規(guī)模藥用價值的開發(fā)時，更需要是能夠滿足大面積種植的優(yōu)良純化的組培 苗，因此急需要成熟的組織培養(yǎng)技術(shù)，但在專利公開以前沒有一個有關(guān)其組織培養(yǎng)的報道， 更沒有成功的實(shí)例。 發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種圓齒野鴉椿莖段的組織培養(yǎng)方法。 本發(fā)明的方法是以如下方式實(shí)現(xiàn)的1. 取材方法選取當(dāng)年萌發(fā)飽滿新芽、或帶芽飽滿的當(dāng)年生莖段，在距離帶芽節(jié)點(diǎn)1-2 厘米處剪取，去除多余的葉片和2/3葉柄；用洗衣粉漂洗干凈后，用自來水滴沖3-5小時；2. 培養(yǎng)基培養(yǎng)基的配制基本培養(yǎng)基為MS, Ag, Su， pH值為5.8,生長激素為BA、 IBA、 KT、 NAA、 IAA、 Zu，附加物為Ac等；培養(yǎng)基的厚度一般為lcm左右；誘導(dǎo)培養(yǎng)基—MS+BA ( 2mg/L ) +NAA (0. 3mg/L) +S u ( 20g/L ) +Ag ( 7g/L ) +Ac ( 2 ~ 2. 5g/L ) 誘導(dǎo)培養(yǎng)基—MS+ Zu( 2 ~ 5mg/L )+IAA (lmg/L) + NAA (0. 3mg/L) +Su( 39g/L )+ Ag( 0. 7g/L ) 生根培養(yǎng)基—1/2MS+IBA (0. 5mg/L) +Su (20g/L) +Ag (7g/L)3. 材料消毒處理先對材料進(jìn)行適當(dāng)?shù)男藜簦孟匆路矍逑床牧?，再將材料放入干凈的燒杯中用自來水沖洗30分鐘，把水新干置超凈工作臺備用，用75%的酒精蓋過材料，搖蕩，3-5秒鐘后去除酒精，加入0. 1%升汞(HgCl2)處理12分鐘，將汞液倒入廢汞瓶，用無菌水沖洗材料2-3次后，倒去無菌水即可進(jìn)行接種；4. 誘導(dǎo)培養(yǎng)取生長健壯的新芽切割成約0.5 ~ 1.5cm的莖段，削除新芽、表皮以及 殘留的芽外殼，保留2/3新芽幼嫩葉柄以保護(hù)腋芽，分別接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中；5. 培養(yǎng)條件光照時間12~16h/d光照強(qiáng)度1500-20001x溫度24°C±1。C6. 增殖培養(yǎng)將上述誘導(dǎo)培養(yǎng)、生長健壯的叢生芽切割開，分別接種在增殖培養(yǎng)基中；7. 誘導(dǎo)生根將繼代誘導(dǎo)培養(yǎng)出來的幼苗切取單株，帶有2-3片葉子，株高l-2cm， 轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基中；8. 小苗移栽當(dāng)試管苗長至3 4cm高，葉子有5 7片，根有3 5條，長度約2 ~ 3cm 時，就可進(jìn)行移栽；先把要移栽的苗搬移到培養(yǎng)室外，煉苗3~ 5天，以增強(qiáng)試管苗對室 外環(huán)境的適應(yīng)能力；然后打開瓶蓋鍛煉2~ 3天，再從培養(yǎng)瓶中取出，洗去根部培養(yǎng)基， 移入蛭石和腐殖土(l: 2)混合的基質(zhì)中，小苗移栽后放入室溫中，保濕遮陰。采用本發(fā)明方法進(jìn)行，莖段經(jīng)過培養(yǎng)，20 - 25天即可以萌發(fā)出生長健壯的新芽；再經(jīng) 過20 - 30天左右的擴(kuò)增，15 20天左右誘導(dǎo)生根后即可成苗、移栽，移栽成活率可達(dá)90 %以上；成活后的長勢良好、株形健壯挺拔，擴(kuò)繁系數(shù)在15倍以上。下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。具體實(shí)施例實(shí)施例1:取材方法選取當(dāng)年萌發(fā)飽滿新芽、或帶芽飽滿的當(dāng)年生莖段，在距離帶芽節(jié)點(diǎn)l-2 厘米處剪取，去除多余的葉片和2/3葉柄；用洗衣粉漂洗干凈后，用自來水滴沖3小時； 培養(yǎng)基培養(yǎng)基的配制基本培養(yǎng)基為MS, Ag, Su, pH值為5.8，生長激素為BA、 IBA、 KT、 NAA、 IAA、 Zu,附加物為Ac等；培養(yǎng)基的厚度一般為lcm左右；誘導(dǎo)培養(yǎng)基—MS+BA (2mg/L) +NAA (0. 3mg/L)+S u (20g/L) +Ag ( 7g/L ) +Ac (2. 5g/L) 誘導(dǎo)培養(yǎng)基—MS+ Zu ( 2mg/L ) +IAA (lmg/L) + NAA (0. 3mg/L) +Su ( 39g/L ) + Ag ( 0. 7g/L ) 生根培養(yǎng)基—1/2MS+IBA (0. 5mg/L) +Su (20g/L) +Ag ( 7g/L )材料消毒處理先對材料進(jìn)行適當(dāng)?shù)男藜?，用洗衣粉清洗材料，再將材料放入干凈?燒杯中用自來水沖洗30分鐘，把水新干置超凈工作臺備用，用75%的酒精蓋過材料，搖蕩， 5秒鐘后去除酒精，加入0. 1°/。升汞(HgCl2)處理12分鐘，將汞液倒入廢汞瓶，用無菌水 沖洗材料3次后，倒去無菌水即可進(jìn)行接種；誘導(dǎo)培養(yǎng)取生長健壯的新芽切割成約0.5cm的莖段，削除新芽、表皮以及殘留的芽 外殼，保留2/3新芽幼嫩葉柄以保護(hù)腋芽，分別接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中；培養(yǎng)條件光照時間15h/d光照強(qiáng)度1500-20001x溫度24。C±1°C增殖培養(yǎng)將上述誘導(dǎo)培養(yǎng)、生長健壯的叢生芽切割開，分別接種在增殖培養(yǎng)基中； 誘導(dǎo)生根將繼代誘導(dǎo)培養(yǎng)出來的幼苗切取單株，帶有2片葉子，株高1.5cm,轉(zhuǎn)移至 生根培養(yǎng)基中；小苗移栽當(dāng)試管苗長至化m高，葉子有5片，根有3條，長度約3cm時，就可進(jìn)行 移栽；先把要移栽的苗搬移到培養(yǎng)室外，煉苗3天，以增強(qiáng)試管苗對室外環(huán)境的適應(yīng)能力； 然后打開瓶蓋鍛煉2天，再從培養(yǎng)瓶中取出，洗去根部培養(yǎng)基，移入蛭石和腐殖土(l: 2) 混合的基質(zhì)中，小苗移栽后放入室溫中，保濕遮陰。
權(quán)利要求
1. 圓齒野鴉椿莖段的組織培養(yǎng)方法，其特征是1)取材方法選取當(dāng)年萌發(fā)飽滿新芽、或帶芽飽滿的當(dāng)年生莖段，在距離帶芽節(jié)點(diǎn)1-2厘米處剪取，去除多余的葉片和2/3葉柄；用洗衣粉漂洗干凈后，用自來水滴沖3-5小時；2)培養(yǎng)基培養(yǎng)基的配制基本培養(yǎng)基為MS，Ag，Su，pH值為5.8，生長激素為BA、IBA、KT、NAA、IAA、Zu，附加物為Ac等；培養(yǎng)基的厚度一般為1cm左右；誘導(dǎo)培養(yǎng)基→MS+BA(2mg/L)+NAA(0.3mg/L)+Su(20g/L)+Ag(7g/L)+Ac(2～2.5g/L)誘導(dǎo)培養(yǎng)基→MS+Zu(2～5mg/L)+IAA(1mg/L)+NAA(0.3mg/L)+Su(39g/L)+Ag(0.7g/L)生根培養(yǎng)基→1/2MS+IBA(0.5mg/L)+Su(20g/L)+Ag(7g/L)3)材料消毒處理先對材料進(jìn)行適當(dāng)?shù)男藜?，用洗衣粉清洗材料，再將材料放入干凈的燒杯中用自來水沖洗30分鐘，把水瀝干置超凈工作臺備用，用75％的酒精蓋過材料，搖蕩，3-5秒鐘后去除酒精，加入0.1％升汞(HgCl2)處理12分鐘，將汞液倒入廢汞瓶，用無菌水沖洗材料2-3次后，倒去無菌水即可進(jìn)行接種；4)誘導(dǎo)培養(yǎng)取生長健壯的新芽切割成約0.5～1.5cm的莖段，削除新芽、表皮以及殘留的芽外殼，保留2/3新芽幼嫩葉柄以保護(hù)腋芽，分別接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中；5)培養(yǎng)條件光照時間12～16h/d光照強(qiáng)度1500-20001x溫度24℃±1℃6)增殖培養(yǎng)將上述誘導(dǎo)培養(yǎng)、生長健壯的叢生芽切割開，分別接種在增殖培養(yǎng)基中；7)誘導(dǎo)生根將繼代誘導(dǎo)培養(yǎng)出來的幼苗切取單株，帶有2-3片葉子，株高1-2cm，轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基中；8)小苗移栽當(dāng)試管苗長至3～4cm高，葉子有5～7片，根有3～5條，長度約2～3cm時，就可進(jìn)行移栽；先把要移栽的苗搬移到培養(yǎng)室外，煉苗3～5天，以增強(qiáng)試管苗對室外環(huán)境的適應(yīng)能力；然后打開瓶蓋鍛煉2～3天，再從培養(yǎng)瓶中取出，洗去根部培養(yǎng)基，移入蛭石和腐殖土(1∶2)混合的基質(zhì)中，小苗移栽后放入室溫中，保濕遮陰。
全文摘要
本發(fā)明屬于涉及一種圓齒野鴉椿莖段的組織培養(yǎng)方法，其選取當(dāng)年萌發(fā)飽滿新芽、或帶芽飽滿的當(dāng)年生莖段為外殖體，經(jīng)過誘導(dǎo)培養(yǎng)，20～25天即可以萌發(fā)出生長健壯的新芽；再經(jīng)過20～30天左右的擴(kuò)增培養(yǎng)，15～20天左右誘導(dǎo)生根培養(yǎng)后即可成苗、移栽，移栽成活率可達(dá)90％以上；成活后的長勢良好、株形健壯挺拔，擴(kuò)繁系數(shù)高。
文檔編號A01G31/00GK101263789SQ200810071010
公開日2008年9月17日 申請日期2008年5月8日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月8日
發(fā)明者何碧珠, 蔡麗娟, 邱萬翔, 鄒雙全 申請人:福建農(nóng)林大學(xué)